Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng cận lâm sàng và đột biến gen scn5a ở bệnh nhân hội chứng brugada

Bộ GIẢO ĐỤC ĐÀO TẠO Bộ Y TÉ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI DẠNG DUY PHƯƠNG NGHIÊN củu ĐẶC ĐIÉM LÂM SÀNG, CẶN LÂM SÀNG VÀ ĐỘT BIẾN GEN SCN5A Ỏ BỆNH NHÂN HỘI CHÚNG BRƯGADA LUẬN ÁN TIẾN Sỉ Y HỌC HÀ NỘI - 2023 TWiliwwmiir Bộ GIÁO DỤC DÀO TẠO Bộ Y TẺ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI DẠNG DUY PHƯƠNG NGHIÊN cúu ĐẶC ĐIẼM LÂM SÀNG, CẬN LÂM SÀNG VÀ ĐỘT BIẾN GEN SCN5A Ở BỆNH NHÂN HỘI CHỨNG BRUGADA Chuyên ngành : Nội khoa Mà sổ : 9720107 LUẬN ÁN TIÉN SÌ Y HỌC Người hướng dần khoa học: GS.TS.BS ĐỊ DỖN LỢI GS.TS.BS TRÀN HUY THỊNH HÀ NỘI-2023 TWiliwwmiir LỜI CÁM ƠN Trước het, tơi xin bày to lịng tri ơn sâu sấc tới GS.TS.BS.ĐỒ Doãn Lợi vả PGS.TS.BS.Trần Huy Thịnh, nhùng người thầy, người hướng dần khoa học đà tận tinh giúp đờ động viên suốt trinh học tập trực tiếp hướng dần thực nghiên cửu gỏp ý sứa chữa luận án Tôi xin bây to lông biết ơn sâu sắc tới PGS.TS.BS Trần Vân Khánh Phó Giám Đốc Trung tâm Nghiên cứu Gen-Protcin, Trường Đại học Y I Nội lã người đà tận tình truyền đạt kiến thức, kinh nghiệm, đồng thời tạo điều kiện thuận lợi cho tòi trinh thực để tài Luận án lien sỳ đà nhận hồ trợ kinh phi từ đề tài cấp "Nghiên cừu phát đột biền gen SCN5A SCNtOA gây hội chửng Brugada hang Ảỹ thuật sinh học phàn tư' PGS.TS Trần Vân Khánh chu nhiệm đề tài Tơi xin bày to lịng biot ơn chân thành đến nhùng thầy cô dồng nghiệp, người dà tạo điều kiện, giúp dờ quã trinh thực luận án: - Ban Giâm Hiệu Phông Đảo tạo Sau Đại Học cúa Trưởng Đại học Y Hà Nội: - PGS.TS.BS.Phạm Mạnh Hùng Trương Bộ môn Nội Tim mạch, Viện trường Viện Tim mạch Việt Nam.Trường phòng Tim mạch ('an thiệp Bệnh viện Bạch Mai thầy Bộ Nội Tim mạch, Trường Dại học Y Hà Nội; - PGS.TS.BS Đỗ Quang Huân, nguyên Giám dồc Viện Tim TP Hỗ Chi Minh, toàn thê bác sỷ diều dường cua Khoa Thông tim can thiệp cùa bệnh viện; - PGS.TS.BS.HỒ Thượng Dùng Phó Giám dốc Bệnh viện Thống Nhất (TP HỒ Chi Minh); - TS.BS.Trương Quang Khanh Trướng Khoa Nhịp Tim Bệnh Viện Thống Nhất (TP Hồ Chi Minh), cúng toàn thê bác sỳ, điều dường Khoa; TWiliwwmiir - TS.BS Tôn Thất Minh Giám dốc Bệnh viện Tim Tâm Đức (TP Hồ Chi Minh); - BS.CKI Đỗ Ván Bìm Dan, Phó Giảm dóc Trưởng khoa Diện Sinh Lỷ vã Loạn Nhịp Tim Bệnh viện Tim Tâm Đức (TP Hồ Chi Minh), toàn thê bác sỹ, diều dưỡng cua Khoa: - GS.TS Nguyễn Quang Tuấn, nguycn Chu tịch danh dự Hội tim mạch học can thiệp Việt nam nguyên Giảm dốc Bệnh viện Bạch Mai: - TS.BS Phạm Như Hùng Tông thư ký Hội Tim mạch can thiệp Việt Nam Phó Giảm đốc Bệnh viện Tim Hà Nội; - Toàn the dong nghiệp, cãc nghiên ciru viên cua Trung Tàm nghiên cứu Gcn-Protcin, Trưởng Dại học Y Hà Nội; Xin dược gưi lời cám ơn đến bệnh nhân gia dinh họ dà giúp tơi có dược sổ liệu luận án Xin cam ơn bạn bè dồng nghiệp dã giúp dỡ trinh học tập Cuối cùng, xin ghi nhớ công ơn sinh thành, nuôi dường tinh ycu thương cùa bố mẹ bổ mẹ vợ tỏi úng hộ động viên cùa vợ tòi, hai em gia dinh, người dã bên chỗ dựa vững de tơi n tâm hục tập hồn thành luận án Hà Nội thảng 01 năm 2023 Đặng Duy Phương TWiliwwmiir LỜI CAM DOAN Tỏi Đặng Duy Phương, nghiên cứu sinh khoá 35 chuyên ngành Nội tim mạch Trưởng Đại hục Y Hả Nội xin cam đoan: I Đây luận án bán thân lôi trực tiếp thực hướng dản cua GS.TS.BS Dỗ Doãn Lọi GS.TS.BS Trần Huy Thịnh Công trinh nghiên cửu không trũng lặp vởi nghiên cứu khác dà dược công bổ Việt Nam Các sổ liệu thông tin nghiên cứu chinh xác trung thực khách quan, dã xác nhận chap nhận cua sờ nơi nghiên cứu cho phcp lấy so liệu Hờ Nội ngày 20 tháng 01 năm 2023 Dặng Duy Phương TWiliwwmiir MỤC LỤC DẠT VÁN DÈ CHƯƠNG 1: TÒNG QUAN’ 1.1 TỐNG QUAN VÈ HỘI CHỦNG BRƯGADA .3 I I I Sơ lược điện hoạt dộng mãng tế bào tim 1.1.2 Chấn đoán phân loại hội chứng Bnigada 1.1.3 Các đặc điếm dịch tề 10 1.1.4 Sinh bệnh học 11 1.1.6 Điều trị 23 1.2 ĐỘT BIÊN GEN SCV5J TRONG HỘI CHỦNG BRƯGADA 24 1.2.1 Rỗi loạn di truyền hội chửng Brugada 24 1.2.2 Vai trò cua dột biến gcn SC.VÁ4 hội chứng Bnigada 29 1.3 NGIIIÊN CỬU ĐỘT BI ÉN GEN SCN.U TRONG IIỢI C1IÚNG BRƯGADA TRẼN THẾ GIÓI VÀ TẠI VIỆT NAM 37 CHƯƠNG 2: ĐÓI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHẤP NGHIÊN củư 43 2.1 ĐỔI TƯỢNG NGHIÊN cửu 43 2.1.1 Tiêu chuẩn chọn màu 43 2.1.2 Tiêu chuẩn loại trử 43 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN cửu 44 2.2.1 Thiết kế nghiên cửu 44 2.2.2 Cờ mầu 44 2.2.3 Các bước tiến hành nghiên cứu 44 2.2.4 Các kỳ thuật áp dụng nghiên cứu 49 2.3 ĐỊA ĐIỂM TIÊN HẢNH NGHIÊN cửu 54 2.4 PHƯƠNG PHÁP XỮLÝ SỔ LIỆU 54 2.5 DỤNG Cư TRANG THIẾT BỊ HÓA CHÁT NGHIÊN củư .55 2.5.1 Đụng cụ, thiết bị nghiên cứu dặc điềm lâm sàng cận lãm sàng 55 TWiliwwmiir 2.5.2 2.6 Thiết bị hóa chắt xét nghiệm đột biến gen 55 VÀN ĐẺ ĐẠO ĐỬC TRONG NGHIÊN củv 56 CHƯƠNG 3: KÉT QUÁ 59 3.1 ĐẠC ĐIỂM CHUNG CÙA MÀU NGHIÊN cúv 59 3.2 ĐẠC ĐIẺM LÀM SÀNG VÀ CẬN LÀM SÀNG 60 3.2.1 Đặc điểm lâm sàng 60 3.2.2 Đặc diem cận làm sàng 64 3.3 KÉT QUA XÁC DỊNII ĐỘT BIÉN GEN 5C.V.SJ VÀ MÓI LIÊN QUAN GIỬA ĐẠC ĐI ÉM LÂM SÀNG CẬN LÂM SÀNG VỚI TÌNH TRẠNG DỘT BI ÉN GEN SCV5J TRẼN BỆNH NI LÃN HỘI CHÚNG BRUGADA 68 3.3.1 Kết quà xác định dột biến gen SCN5A 68 3.3.2 Trường họp bệnh nhân hội chứng Brugada mang dồng thời hai dột biến gen SCN5A 80 3.3.3 Kết xác định dột biến gen SCN5A thành vicn gia dinh người mang đột biển gen SCN5A 83 3.3.4 Sự kliác biệt đặc điểm lâm sàng vã tinh trạng dột biển gen 89 3.3.5 Sự kỉiãc biệt giừa dặc điểm cận lãm sàng tinh trạng đột biến gen 90 3.3.6 Mỗi liên quan dặc diêm lâm sáng, cận lãm sàng tinh trạng có dột biến gen 91 CHƯƠNG 4: BÀN LUẬN 93 4.1 ĐẶC DIÊM LÀM SÀNG VẢ CẠN LÂM SÀNG CÚA HỘI CHÚNG BRUGAĐA 93 4.1.1 Độc diêm nhân trắc cua mẫu nghiên cúu 93 4.1.2 Đặc diêm lâm sàng cua mẫu nghiên cứu 94 4.1.3 Đặc diêm cận lâm sàng cùa mầu nghiên cún 99 TWiliwwmiir 4.2 ĐỘT BIẾN GEN SCV?J VÁ MÓI LIÊN QUAN GIỪA ĐỘT BI ÉN GEN SCNjA VỚI CÁC DẠC DI EM CƯA BỆNH Nì ÙN HỌI CHÚNG BRUGADA 106 4.2.1 Ti lộ đột biến gen 106 4.2.2 Vị trí phân loại 108 4.2.3 TĨI111 sinh bệnh cua đột biến gen 112 4.2.4 Khao sát phá hệ cua người bệnh mang đột biến gen SC.V.SJ 117 1.2.5 So sánh khác biệt nhóm có đột biến nhỏm khơng đột bicn gen SCN5A 120 4.2.6 Mối liên quan giừa diện cua đột bicn gen SCN5A số đặc diêm cùa bệnh nhân Bnigada 124 4.3 HẠN CHẼ CỦA DÈ TÀI .126 KÉT LUẬN 129 KI ÉN NGHỊ 130 DÓNG GÓP MỚI CỦA LUẬN ÁN 131 DANH MỤC CÁC CĨNG TRÌNH NGHIÊN cứu DÃ DƯỢC CƠNG BƠ CĨ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN PHỤ LỤC TWiliwwmiir DANH MỤC CIIỮVIÉT TẪT VÀ ĐÓI CH1ÉU THUẬT NGỪ ANH - VIỆT ACMG : The American College of Medical Genetics and Genomics BrS : Brugada syndrome Hội chứng Brugada ddNTP : dideoxynucleotide DNA : Deoxynucleotide Acid ECG : Electrocardiogram Điện tàm dỗ EDTA : Ediylencdianunctetraacetic Acid EPS : Electrophysiologic study Kháo sát điện sinh lý HGMD : The Human Gene Database Hệ thống dừ liệu gen người HR : Hazard ratio Ti so nguy co ICD : Automatic Implantable Cardioverter Defibrillator Thiel bị phá rung tự động kb : kilobases kDa : kilo Dalton KTC : Khoáng in cậy MAF : Minor allele frequency Tần suất alen gặp NCB1 : National Center for Biotechnology Information Trung tâm Thõng tin Cóng nghệ sinh học Quốc gia NOS : Next Generation Sequencing Giai trinh lự thề hệ TWiliwwmiir OR : Odds ratio Ti số chênh PCR : Polymerase Chain Reaction Phan ứng khuếch đại chuỗi RR : Relative risk ratio Ti so nguy lương đói SCN5A : Sodium channel voltage gated, type V alpha subunit Gen mà hóa bán dơn vị alpha cua kênh natri tim SNP : Single Nucleotide Polymorphism Bien thè đa hĩnh đơn nucleotit TP.HCM : Thảnh phố Hỗ Chi Minh ƯTR : Untranslated region Vùng không dịch mà vus : Variant of Unknown clinical Significant Bien the chưa xác định ý nghĩa lâm sàng WES : Whole Exome Sequencing Giãi trinh tự tồn vùng gcn mà hóa TWiliwwmiir Mục đích nghiên cứu - Xác định ty lệ dạng dột biền trẽn gen SC.V5.4 nguyên nhân gây hội chứng Brugada cua bệnh nhân - Dưa quy trinh xác định xảc dạng dột bicn gen SCN5A phù hợp với điều kiện kỳ thuật bệnh nhân mắc hội chứng Brugada Việt Nam - Việc khao sát mối tương quan cảc đột biến gen SCN5A dồng thời với triệu chứng lâm sàng, cận lâm sàng giúp đánh giá liên quan kiêu dột biển gcn kiêu hình cùa bộnh Việc xác định dược đột biển gen SC.V5.4 trẽn bệnh nhân giúp ich việc truy tim diện đột biến nhùng người có huyết thống với bệnh nhân, từ dó giúp người mang gcn dột biến có the dược chi định biện pháp dự phòng đột tư hiệu qua - Việc xác định dưực dột biến trcn gcn SCN5A cho nhiều người gia dinh giúp xảy dựng dược pha hộ di truyền gcn gây bệnh cua gia dinh dó từ dó giúp tinh tốn tỳ lệ di truyền cho the hệ sau Tiêu chuán lựa chọn doi tượng vào nghiên cứu Các bộnh nhân dền khám khoa Tim mạch bệnh viện tụi TP.UỒ Chi Minh vã Hà Nội đà dược chân doán xác định hội chửng Brugada theo tiêu chuẩn chấn doán cùa Hội Nhịp Tim Châu Âu Đổng ý tham gia nghiên cứu Tiêu chân loại trừ khói nghiên cứu: - Bệnh nhân cỏ triệu chứng dược xác định bệnh lỷ khác có đặc diem điện tâm dồ tương tự hội chửng Brugada như: nhồi máu tim dau ngực dơ eo that mạch vành, bệnh tim dãn nơ sổ linh trạng rỗi loạn nhịp khác - Không xác định đirợc dột biến gcn SCN5A chất lượng màu Các bước tiến hành nghiên cứu 4.1 Khao sát dặc diêm lâm sàng cận lâm sàng cua bệnh nhân hội chứng Brugada - Bác sỳ lâm sàng chuyên khoa tim mạch lụa chọn bệnh nhân dà dược chân đoản xãc định hội chửng Brugada TWiliwwmiir - Xảy dựng bệnh án thống kẽ tiền sư triệu chứng lâm sàng vã cận lâm sàng cua cãc nhóm bệnh nhản 4.2 Xác dịnh dột hiển gcn SCXSA bịnh nhân dược chân đoản hội chửng ỉìrugada - Thu thập 3-4cc mẫu máu tình mạch tồn phần cua bệnh nhãn người nhã bệnh nhân, máu dưực chồng đỏng EDTA DNA gcn dược tách chiết vả dược khuếch dại giái trinh lự trực tiếp dè phát dột biến Thời gian cho kết qua khoáng tuần - Kết qua lõng hợp đè đưa II lệ dột biển gen SCV5.4 bệnh nhân hội chứng Brugada Việt Nam mơ ta vị trí đột biền 4.3 Mô tủ mồi tương quan dột bien gen SCX5A triệu chứng lâm sàng, cận lâm sàng cùa hội chứng Hrugada ■ Thống kê ty lộ % loại dột biền gen SCN5A khãc nhau, tương ứng với triệu chững lâm sảng cận lâm sàng Đưa nhận dinh ban dầu liên quan kicu gcn kiêu hĩnh - Lựa chọn số gia đinh mang đột biền SCN5A tiêu biều, xây dựng phá hộ cho hội chứng Brugada gcn Thời gian nghiên cứu: Từ tháng 01 2017 đến thảng 04 2022 6.1 ựi ích cùa việc tham gia vào nghiên cứu Bệnh nhân dược thõng bão kết xác định đột biển gen SCN5A Những bệnh nhãn cô dột biên gcn cỏ ihê dược lãm xét nghiệm tương tự dê lim dột biến cho người cỏ huyết thống; dõng thời dược bác sĩ tư vần biện pháp điều tri dự phòng dột tứ Chi phi xét nghiệm dược hồ trự từ nguồn kinh phi cùa quỳ nghiên cứu khoa học Vấn dề bồi thường có rui ro xảy Việc sứ dụng mẫu máu tình mạch tồn phần de chan dốn xác định dột biến gcn khơng có rủi ro nên nghiên cứu không dật vắn dề bồi thường TWiliwwmiir Bão mật thong tin nghiên cứu Trừ luật pháp yêu cầu, ten cùa bệnh nhân sè không dược tiết lộ khói nghicn cứu Ten cua bệnh nhân SC chi dược cung cap cho người quan sau dây: Bác sỳ nhân vicn nghiên cửu hội dồng xét duyệt dạo dức nghiên cứu tra viên cua quan y te chức nâng Mọi thông tin đột biền gcn cua bệnh nhãn (nếu cỡ) sê chi dược thõng báo den bác sỳ diều trị trục tiếp bệnh nhản 10 Hổ sơ nghiên cứu Hồ sơ bệnh án cua bệnh nhân quan lý Bệnh viện phối hợp tham gia nghiên cữu theo quy trinh cua Bệnh viện Ket qua xét nghiệm dột biến gcn cua bệnh nhân lưu giừ Trung tâm Nghiên cứu Gen Protein Trường Dại học Y Hà Nội theo chề dộ bao mật cua Trung tâm dạng vân ban vả đỉa CD Có the nhận dạng dược chu the pháp luật quan chức nãng có thâm quyền yêu cầu 11 Người dế liên hệ cỏ câu hòi: ThS.BS.Đặng Duy Phương, Viện Tim TP.HCM, số điện thoại: 0989014311 Họ tên chữ ký cua Nhà nghiên cứư ĐẶNG DUY PHƯƠNG TWiliwwmiir PHỤ LỤC ĐƠN TÌNH NGUYỆN THAM GIA NGHIÊN cứu dụng cho dồi tượng lình nguyện tham gia nghiên cữu cần phai hi mật danh tinh) TÒI, Xác nhận ràng - l ỏi dâ dọc thông tin dưa cho dề tải: Nghiên cứu dặc điểm lâm sàng, cận lâm sảng đột biến gen SCN5A ứ bệnh nhân hội chửng Brugada tòi dược cán nghiên cứu giai thích vê nghiên cứu thú tục đăng kỷ tinh nguyện tham gia vào nghiên cữu - Tơi dã có thời gian vã hội dược cân nhăc tham gia vảo nghiên cửu - Tỏi hiếu tơi có quyền tiếp cận với dừ liệu mã người có trách nhiệm mơ ta tờ thông tin - Tỏi hicu rang có rút khoi nghiên cứu vảo bầt thơi diem não vi lý gi Tôi dỏng ý bảc sỳ chàm sóc sức khoe chinh sê thòng báo việc lòi tham gia (rong nghiên cứu Đánh dấu vào thích hợp (quyết định nảy sè không anh hướng kha nàng bạn tham gia vào nghicn cứu): Có Khơng Tơi dồng ý tham gia nghiên cứu Ký tên cùa người tham gia Ngày / thảng / năm Nếu cần * Ghi rò họ lèn vã chừ ký cua người làm chững Ghi rỏ họ tên chừ ký cua người hướng dẫn TWiliwwmiir Ngày ì tháng / nám Ngây / tháng/ năm PHỤ LỤC BỌ Y 11 llỉl OXG DẠI HỌC X II X NỌI Sò < ỤNGIIOA XX 11(11 < III NGIll.v XII rv\M Dộc lập I I,r llạnlipliuc 7X IIDDDDHYIIN ll.t X W'I IV < 'hưp ilimio />/>X< Sil thÌMs -'ứMỈOr CHÍ 'XG NII XX ự Ún Cân chừng nhận thõng qua hoai dộng cua Hột dồng Dao dừc trường Dại học V lla Nội m3 số IRB0A (R367H) Hình Ket qua giãi trinh tự Sanger đột biên c 1100G>A (R.367II) exon gen SCV.5J TWiliwwmiir Jr C.I712G C.1712G>C(S571T) CGGACCAGTGCCCAG CGGACCACT GCCCAG R T A s Q R Người binh thường T A T Q Bệnh nhản Br 102 Hĩnh anh trinh tụ nuclcotit vị tri 1712 trẽn cxon 12 gen SC.V5J: người binh thưởng guanin (G) bị thay thề bời cystcin (C) người mắc hội chứng Brugada, làm axil amin vị tri 571 serin (S) bi biền đỏi thành thrcontn (T) tạo thành đột biến C.I712G>C (S57IT) Hình Ket qua giãi trinh tự Sanger dột biến c 1712G>C (S571T) ỡ exon 12 gen SCN5A _ r C.1975OT(R659\V) C.1975C GGAGCACGGCAGCGG G A R Q GGAGCATGGCAGCGG R G A w Q R M M Aa/ỳx ,A\m Aâ.M A Bệnh nhân Brio Người binh thưởng Hình anh trinh tự nucleotit vị tri 1975 cxon 13 gen SC.V5.4: người binh thưởng cytosin tụo thành đột biển c.2236G>A (E746K) Hình Kết giải trinh lự Sangcr dột biến C.2236G>A (E746K) cxon 14 gen SC.V.5J C.2678G C.2678G>A(R893H) ị ATCTTCCGCATCCTC I F R I L I I ATCTTCC^CATCCTC Người bình thường F H I L Bệnh nhản Br75 Hĩnh anh trinh tự nuclcotit vị tri 2678 trẽn exon 16 gen SCN5A- người binh thường lã guanin (G) bj thay the bvi adcnin (A) người mấc hội chửng Brugada làm axit amin vị tri 893 argimn (R) bị biến đỗi thành histidin (H) tạo thành dột biến C.2678G>A (R893H) Hình Kct qua giái trinh tự Sangcr đột bicn C.2678G>A (R893H) ỡcxon 16 gcnSCVJJ ná)r C.2893C c.2893OT(R965C) CTGGCCCGCATCCAG cTGGCC^GCATCCAG LARIQ LACIQ Người binh thưởng Bệnh nhãn Br93 Hỉnh anh trình tụ nuclcotit vị trì 2893 trẽn cxon 17 gcn 5C.V5.Í: người hình thường lã cytosin (C) bi thay thề thymin (T) người mắc hội chửng Brugada lãm axit amin vi trì 965 lã arginin (R) bị biến đòi thành cystcin (C) tạo thành đột bicn C.2893OT (R965C) Hình Kct qua giãi trinh tự Sangcr đột biến C.2893OT (R965C) cxon 17 gen SCN5A C.3578G>A (R1193Q) I C.3578 í TGGTGGCGGTTGCGC w w R L R TGGTGGCRGTTGCGC w w X L R X'itKri talk Ikưửlg Bi»k nkái BrỉO Hình anh trinh tự nucleotit vj tri 3578 trẽn cxon 20 gen SC.V5J: người bình thường lã guanm (G) bị thay thề bới adcnin (A) người mẳc hội chứng Bnigada làm axil amin vị tri 1193 lã arginin (R) bi biến đôi thành Glutamine (Q) tạo (hãnh dột bicn c 357SG -A (R1193Q) Hình 10 Kết giai trinh lự Sanger đột bien C.3578G>A (RI 193Ọ)ớexon20 gen SC.V.5J TWiliwwmiir C.4171 C.417ỈG>A (GỈ391R) I I TTGACCGGAGAATTG L T L E G TTGACCAGAGAATTG L R T E L Bịab ahia BrOJ NgvM blab tbirửai Hình anh trình tự nuclcotil vị tri 4171 trẽn cxon 24 gen SCXX-Í: người binh thường guanin (G) bi thay the ben adcnin (A) người mắc hội chứng Bntgada lâm axit amin vị tri 1391 lã glycin (G) bị biến đối thảnh arginin (R) tạo thành đột biến C.417!G>A (G1391R) Hình 11 Kct giai trinh tự Sanger đột biền C.4171G>A (G1391R) exon 24 gen SCN5A c.4531C>T(R151IW) I C.4531C ị ATCCC ACGGCCCC TG' I p R ATCCCATGGCCCCTG I L p p w p L Bệnh nhân Br38 Người bình thường Hình anh trinh tự nuclcotit vị tri 4531 cxon 26 gen SCV5.1; người binh thường lã cytosin (C) bị thay thề bới ihymin o người mắc hội chủng Brugada lãm axit amin vị trí 965 lã arginin (R) bi biến dôi thành tryptophan (W) tạo thảnh dột bicn C.4531OT (R15UW) ỈỈÌIIỈI 12 Kct giai trình tự Sanger đột biến C.453 1OT (R15I1W) cxon 26 gen SCN5A nu atí HỊC1W íiỊr C.5389A>T(I1797F) C.5389A TATGAGATCTGGGAG YEIWE TATGAGTTCTGGGAG YEFWE Người bình thưởng Bệnh nhân BrlO8 Hình anh trinh lự nuclcotit vị tri 53X9 trẽn cxon 28 gcn SCV5.4: ngưòi binh thường adcnin (A) bi thay the bơi thymin (T) người mắc hội chứng Đrugada, làm a.xit amin vi tri 1797 isoleucm (I) bị biển đói thành phcnylalanin (F) tạo thánh đột biến C.5389OT (I1797F) IIĨI1I1 13 Ket qua giai trình tự Sanger đột biến C.5389OT (Il797E) exon 28 gen SCN5A c.5484C>T(A1828A) Ế C.5484C ị CGTATCGCCAAGCCC R I A K p CGTATCGCTAAGCCC R I A K p Mv'MAv'ftvvt Người binh thường Bệnh nhản Br84 Hĩnh anh trinh tụ nuclcotit vị tri 54X4 cxon 28 gen SC.V.Í4: người binh thường cytosm (C) bi thay the bói thymin người mảc hội chứng Brugađa làm axit amm vị tri IX2X alanin (A) vàn dược bao tổn tinh trang thoái hoá mà tao thảnh đột biến c 5484C -T (A1S2SA) Hình 14 Ket qua giai trinh tự Sanger đột biến C.5484OT (A 1828A) cxon 28 gen SC.V.5J TWiliwwmiir C.5693G>A(R1898H) C.5693G ị cTCCGGCGCAAGCAC L R R CTCCGGCACAAGCAC’ H K L R H K H MA AWW /y Người binh thường Bệnh nhân Br68 Hình anh trinh tụ nucleotit vị tri 5693 cxon 28 gen SC.V5J: người binh thưởng guanin bị biến dối thành histidin (H) tạo thành đột biến C.5693G>A (RIS98H) lỉìnli 15 Kết qua giai trinh tự Sanger đột bicn C.5693G>A (RI898H)ớcxon 28 genSCNẦ.4 rur atí HỊC1W *ỉ}t PHỤ LỤC DANH SÁCH MÒI KHUECH DẠI GEN SCN5A STT MỜI MỊI XI (5*-3*) Mồi ir^ưực (5' - 3'1 SCN5AE1 GCCGCTGAGCCTGCGCCCAGT GG.AA.ẤGTTGGGCGGCGGCAG SCN5AE2 CTGGAGCCTCTCTGCAAATGGTGT CCTCTTCCCCCTCTGCTCCATTGA ỉ SCN5AE3 GTCTTAGGACCAGCAGGG.XATCAGC SCN5AE4 CTCTCCTCCTCCTCCCACCTCACC CCCTGTITATTGTCTGGTAGCACTGG SCN5A-E5 CCACGTAAGGAACCTGGAGAACCTG GAẤGCCAG.A^AGAGAGGGGTGGTCT ■7 SCN5A-E6 SCN5A-E7 CCCTGGGCTATCCACAGCACT fcfcTCTGTCTTCCCCACCC GTGGGGAAGACAGAGAGAGAGTCAC ẤCẤTTCGAAGGGCCrrCTGG GTAAGTTCCTGGGCCTGGACACAAG s SCN5AE8 AAGCCCAGGAGAAGCCTCCCTTATT CTGTCTGGGTCTCTGGGGGATCAG SCN5A-E9 GGCACAGCCAGAGTTGCCTGAAG 10 SCN5A-E10 TCACTGAGCTGTGGGGCATAAACTG CTCCAGAAGCTGTCTCCTCTGTGCT TGATCCCTTCTCCCTCAGAAGCAAG 11 SCN5A-EI1 CTTGGAAATGCCATAACCCAGAAGG CCCCACCTATAGGCACCTACAGTCA 12 SCN5AE12 GGTGTGCAAGTCCACTTACTGATAGGG GTGACTGTACAGGGGCCTAGCATGA 13 14 SCN5A-EI3 AGTTTAGCTGAGGCCAGTGGCACAA CCAGCACACAGTAGGTGCTCAACAA SCN5A-E14 ACCTTCATCCTATCCCTGTGGCATC GGGACAGTGTGGGGATGTCTAAAGC ỉỉ SCN5A-E15 TGTCACCTAGCAGCCCTGTCATCTC GTGCAGGATCCCTTCTTCCTTACCC 16 SCN5A-E16 c ACAGCAAGAGTC AAGAGGCAGGTG GTGATGACCTCAGATTGGGTTGTGC 17 SCN5A-EI7 GGAATAGGTGTCAGTGCCCTCC.AẤG GGATGGACGGATGGGTAGATGGATT 18 19 SCN5AEI8 GATTCAAGCCTCGGAGCTGTTTGTC CCTTCTACCCCTACCCACTGCCAAG SCN5A-EI9 AGATGCATGGGCAGGGTCTGAAAC AAATGCAGGCATGCACCTCTCAC 20 SCN5A-E20 GGAGCCCTAAGCTCCTGCAGACTC TGGGCAGATATCT.XAGGCAGGGTGT 21 SCN5A.E21 CACCCCCATCATCGTAGCTCTTTCT CTCTGCCCCAGTTTCTGACCTGACT 22 SCN5A-E22 GGCAACAGAGCAAGACTGTCTCAAA CTTCTCTTCCTCTGAGCCTGGGAAC 23 SCN5AE23 GAAGGCCTACTGTCTGTCCCCAACA ATCAGAAGCACAGGGAGGGGTCCT 24 SCN5A-E24 GCAGCCAGGGAGTTCATTCTTTCTT CTTTGGGCACTGTGATCCTCCTATG 25 SCN5AE25 TGTCCAGACCAGAGCCCTAAGAAGC AGATGCAGACACTGATTCCCTGGTG 26 SCN5A-E26 CCACAGAATGGACACCCCTAGACAG ATTCCAGCAGGAGCAAGAAGAGGAC SCN5AE27 AGAGAAAGCCAGGAGGTGGTCAATC CTCTACGAGGCTGGGACCTCTCTTC 28 SCN5AE2S GGGCTTTGGGCTCACTAGAGGGTAG 29 SCN5A-E29a TOCACAGTGATGCTGGCTGGAA GGGTTGTACATGGCATTCAGCAGAG GAAGAGGCACAGCATGCTGTTGG 50 SCN5A-E29b ■AẰGTGGGAGGCTGGCATCGAC _ GTGCTCTCCTCCGTGGCCACGC _ 31 SCN5A.E29C GAGCCCAGCCGTGGGCATCCT GTCCCCACTCACCATGGGCAG 32 SCN5A-E29d CCAACCAGATA.ẤGCCTCATCAACA CCGCCTGCTGACGGAAGAGGA 33 SCN5A-E29C TGCTGCAACGCTCTTTGAAGCAT AAAGGCTGCTTTTCAGTGTGTCCT 34 SCN5A-E29Í GGACCGTGAGTCCATCGTGTGA AGCCCATTCACAACATATACAGTCT 35 SCN5A-E29g C.AACTTCATCCCAGCTGCTGAGG CTCCCAGCATCTCAGGTCAAGTG 36 SCN5A-E29H ĩ ICAC TGCCCAGGGGTC GAAIG CCAGGCCACTCTCCTCĨGGAAG 37 SCN5A-E291 TCACTCTGGCCCCCTATTGTCT GGTCCAGAGAGCCCTGGGAGAT 'S SC N A ỉ '91 GAAGTTCACCAGCCCTGAGCCAT TAGGATTGTCAGCAGCTGAAG 39 40 SCN5A-E29m SCN5AE29O CTAGTCCAATCACCCCCAGGA TTTCTTCTTGTCACCCCAGTT ATGGGTTGGGTCTGGGGTTGC GT.AAGCCATTTATTGGTTTGT TWiliwwmiir TWiliwwmiir