(Luận Văn) Nghiên Cứu Tinh Chế Hoạt Chất Ức Chế Enzyme Α Glucosidase Từ Đậu Đen Lên Men Bằng Chủng Aspergillus Oryzae

ĐạI HọC THáI NGUYÊN TRƯờNG ĐạI HọC NÔNG LÂM ph¹m dung lu an n va p ie gh tn to Tên đề tài: Nghiªn cøu tinh chÕ ho¹t chÊt øc chÕ enzyme α - glucosidase tõ ®Ëu ®en lªn men b»ng chđng Aspergillus oryzae d oa nl w khóa luận TốT NGHIệP đại học nv a lu an : Chính quy ll fu Hệ đào tạo m oi Chuyên ngành : Công nghệ Thực phẩm nh : CNSH - CNTP at Khoa z : 2010 - 2014 z Kho¸ häc gm @ l.c om an Lu Thái Nguyên, 2014 n va ac th si ĐạI HọC THáI NGUYÊN TRƯờNG ĐạI HọC NÔNG LÂM ph¹m dung Tên đề tài: lu an Nghiên cứu tinh chế hoạt chất ức chế enzyme - glucosidase từ n va đậu đen lên men chñng Aspergillus oryzae p ie gh tn to khãa luËn TốT NGHIệP đại học d oa nl w : Chính quy Chuyên ngành : Công nghệ Thực phẩm Khoa : CNSH - CNTP Líp : 42 - CNTP nv a lu Hệ đào tạo an fu : 2010 - 2014 ll Khoá học m oi Giảng viên hớng dẫn : ThS Nguyễn Đức Tiến at nh 2.ThS Trần ThÞ Lý z z gm @ l.c om an Lu Thái Nguyên, 2014 n va ac th si lu an n va p ie gh tn to LỜI CẢM ƠN Có kết nghiên cứu này, tơi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến: ThS Nguyễn Đức Tiến - Trưởng Bộ môn Nghiên cứu phụ phẩm môi trường Nông nghiệp - Viện Cơ điện Nông nghiệp Công nghệ Sau thu hoạch, người trực tiếp hướng dẫn, bảo, giúp đỡ, động viên, khuyến khích tơi nhiệt tình chu đáo lúc khó khăn, truyền cho tơi kiến thức kinh nghiệm q báu để tơi hồn thành đề tài tốt nghiệp ThS Trần Thị Lý - Giảng viên Bộ môn Công nghệ thực phẩm Công nghệ sinh học Công nghệ thực phẩm trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên giúp đỡ, hỗ trợ phương diện nghiên cứu, kiến thức có góp ý sâu sắc thời gian thực đề tài Tôi xin gửi lời yêu thương chân thành đến bố mẹ, anh chị bên cạnh ủng hộ động viên suốt trình thời gian học tập thực đề tài Tôi chân thành cảm ơn bạn bè động viên, giúp đỡ tôi, chia sẻ tạo điều kiện thuận lợi cho tơi suốt q trình học tập hồn thành đề tài tốt nghiệp Một lần tơi xin chân thành cảm ơn tất giúp đỡ quý báu d oa nl w nv a lu an Hà Nội, ngày tháng năm 2014 Sinh viên ll fu oi m at nh z z Phạm Thanh Dung gm @ l.c om an Lu n va ac th si DANH MỤC CÁC BẢNG Trang Bảng 2.1 Thành phần chất dinh dưỡng đậu đen Bảng 4.1 Ảnh hưởng nồng độ ethanol đến hiệu tinh chế hoạt chất ức chế ezyme α-glucosidase phần kết tủa thu 31 Bảng 4.2 Ảnh hưởng tỷ lệ dung môi đến tinh chế hoạt chất ức chế enzyme α-glucosidase 33 Bảng 4.3 Ảnh hưởng nhiệt độ đến hiệu tinh chế hoạt chất ức chế enzyme α-glucosidase 34 lu an Bảng 4.4 Khoảng biến đổi yếu tố 36 n va Bảng 4.5 Bảng thiết kế ma trận 37 p ie gh tn to Bảng 4.7 Ảnh hưởng nhiệt độ cô chân không đến chất lượng dịch cô thời gian cô 42 Bảng 4.8 Ảnh hưởng áp suất cô chân không đến thời gian cô đặc dịch w đậu đến lên men 43 d oa nl Bảng 4.9 Ảnh hưởng túi Kraft lọ thủy tinh đến chất lượng bảo quản a lu chế phẩm sau tháng bảo quản 44 nv Bảng 4.10 Đánh giá chất lượng sản phẩm hoạt chất AGIs 45 an ll fu oi m at nh z z gm @ l.c om an Lu n va ac th si (Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae DANH MC CC HèNH lu an n va p ie gh tn to Trang Hình 2.1 Aspergillus oryzae (Hệ sợi) Hình 2.2 Aspergillus oryzae (Cơ quan sinh sản vơ tính) Hình 2.3 Một số sản phẩm chứa hoạt chất AGIs thể giới Hình 2.4 Cấu tạo enzyme α-glucosidase Hình 2.5 Cấu trúc khơng gian enzyme α-glucosidase Hình 2.6 Sơ đồ ảnh hưởng chất AGIs đến trình trao đổi đường thể 10 Hình 4.1 Đồ thị ảnh hưởng nồng độ ethanol đến hiệu tinh chế hoạt chất ức chế ezyme α-glucosidase phần kết tủa thu 31 Hình 4.2 Đồ thị ảnh hưởng nồng độ ethanol đến hiệu tinh chế hoạt chất ức chế ezyme α-glucosidase phần dịch lỏng thu 32 Hình 4.3 Đồ thị ảnh hưởng tỷ lệ dung môi đến tinh chế hoạt chất ức chế enzyme α-glucosidase 33 Hình 4.4 Đồ thị ảnh hưởng nhiệt độ đến hiệu tinh chế hoạt chất ức chế enzyme α-glucosidase 35 Hình 4.5 Phân tích phương sai ANOVA mơ hình tối ưu tinh chế dung môi hữu 38 Hình 4.6 Phương trình hồi quy mơ tả ảnh hưởng yếu tố tới tinh chế hoạt chất AGIs chủng A.oryaze 38 Hình 4.7 Tương tác nhiệt độ với nồng độ tới khả sinh hoạt chất AGIs 39 Hình 4.8 Tương tác nồng độ với tỷ lệ dung môi tới khả sinh hoạt chất AGIs 40 Hình 4.9 Tương tác tỷ lệ dung môi với nhiệt độ tới khả sinh hoạt chất AGIs 41 Hình 4.10 Phương trình hàm kỳ vọng 42 Hình 4.11 Ảnh hưởng áp suất cô chân không đến thời gian cô đặc dịch đậu đến lên men 43 Hình 4.12 Sơ đồ quy trình trích ly tinh chế hoạt chất AGIs từ đậu đen lên men 46 d oa nl w nv a lu an ll fu oi m at nh z z gm @ l.c om an Lu n va ac th (Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae si (Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae DANH MC T, CM T VIẾT TẮT Ức chế enzyme α-glucosidase TPCN Thực phẩm chức A.oryzae Aspergillus oryzae ĐTĐ Đái tháo đường IC50 Nồng độ ức chế 50% mẫu CT Công thức HPLC Sắc khí lỏng cao áp VADS Hiệp hội thực phẩm chức Việt Nam lu AGIs an n va p ie gh tn to d oa nl w nv a lu an ll fu oi m at nh z z gm @ l.c om an Lu n va ac th (Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae si (Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae MC LC Trang PHN MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích PHẦN TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Đậu đen lên men 2.1.1 Đậu đen lu 2.1.2 Chủng nấm mốc Aspergillus oryzae (A.oryzae) an n va 2.1.3 Một số ứng dụng hoạt chất AGIs từ đậu lên men giới 2.2 Hoạt chất ức chế enzyme α-glucosidase (AGIs) p ie gh tn to 2.2.1 Giới thiệu enzyme α-glucosidase 2.2.2 Giới thiệu hoạt chất AGIs w 2.3 Trích ly hoạt chất AGIs từ đậu đen lên men 11 d oa nl 2.3.1 Cơ sở trình trích ly 11 2.3.2 Phương pháp trích ly hoạt chất AGIs 13 nv a lu 2.4 Tinh chế hoạt chất AGIs từ đậu đen lên men 14 an 2.4.1 Cơ sở trình tinh chế AGIs từ đậu đen lên men 14 ll fu 2.4.2 Các phương pháp tinh chế 14 m oi 2.5 Phương pháp thu nhận AGIs 16 at nh 2.5.1 Phương pháp cô đặc 16 z 2.5.2 Phương pháp sấy 17 z gm @ 2.6 Các loại bao bì dùng để bảo quản 18 2.7 Tình hình nghiên cứu hợp chất AGIs nước 20 l.c 2.7.1 Tình hình nghiên cứu hợp chất AGIs giới 20 om 2.7.2 Tình hình nghiên cứu nước 21 an Lu n va ac th (Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae si (Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae PHN I TNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 23 3.1 Đối tượng nghiên cứu 23 3.2 Địa điểm thời gian nghiên cứu 23 3.3 Hoá chất thiết bị sử dụng 23 3.4 Nội dung nghiên cứu 23 3.4.1 Nghiên cứu ảnh hưởng trình kết tủa ethanol đến hiệu tinh chế hoạt chất AGIs 23 lu 3.4.2 Nghiên cứu ảnh hưởng q trình đặc đến thu nhận hoạt chất AGIs 24 an 3.4.3 Nghiên cứu ảnh hưởng trình lọc gel đến hiệu tinh chế hoạt n va chất AGIs 24 p ie gh tn to 3.4.4 Nghiên cứu ảnh hưởng bao bì bảo quản đến chất lượng sản phẩm 24 3.4.5 Đánh giá chất lượng sản phẩm đưa quy trinh tinh chế hoạt chất w AGIs 24 d oa nl 3.5 Phương pháp nghiên cứu 24 3.5.1 Phương pháp bố trí thí nghiệm 24 nv a lu 3.5.2 Phương pháp phân tích tiêu hóa lý 28 an 3.5.3 Quy trinh tinh chế sơ hoạt chất AGIs 30 ll fu 3.5.4 Phương pháp sử lý số liệu 30 oi m PHẦN KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 31 at nh 4.1 Nghiên cứu ảnh hưởng trình kết tủa ethanol đến hiệu tinh z chế hoạt chất AGIs từ đậu đen lên men 31 z 4.1.1 Lựa chọn nồng độ ethanol đến hiệu tinh chế hoạt chất AGIs từ đậu @ gm đen lên men 31 l.c 4.1.2 Lựa chọn tỷ lệ dung môi đến hiệu tinh chế hoạt chất AGIs từ dịch om trích ly đậu đen lên men 33 an Lu n va ac th (Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae si (Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae 4.1.3 Lựa chọn nhiệt độ đến hiệu tinh chế hoạt chất AGIs từ dịch trích ly đậu đen lên men 34 4.1.4 Tối ưu hóa nhiệt độ, nồng độ, tỷ lệ dung môi, đến hiệu tinh chế hoạt chất AGIs 35 4.2 Nghiên cứu ảnh hưởng q trình đặc đến thu nhận hoạt chất AGIs 42 4.2.1 Nghiên cứu ảnh hưởng nhiệt độ cô đặc đến thu nhận hoạt chất AGIs 42 4.2.2 Xác định áp suất chân khơng cho q trình dịch 43 lu 4.3 Nghiên cứu tinh chế hoạt chất ức chế hoạt chất AGIs phương pháp an lọc gel 44 n va 4.4 Nghiên cứu bao bì bảo quản chế phẩm AGIs 44 p ie gh tn to 4.5 Đánh giá chất lượng sản phẩm đưa quy trinh tinh chế AGIs từ đậu đen lên men 45 w PHẦN KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 48 d oa nl 5.1 Kết luận 48 5.2 Kiến nghị 48 nv a lu TÀI LIỆU THAM KHẢO 49 an ll fu oi m at nh z z gm @ l.c om an Lu n va ac th (Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae si (Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae PHẦN MỞ ĐẦU lu an n va p ie gh tn to 1.1 Đặt vấn đề Chất ức chế enzyme α-glucosidase (AGIs) nhóm phổ biến ứng dụng giúp ổn định đường huyết cho người tiểu đường, thừa cân béo phì Chất AGIs có chức ngăn tạo thành monosaccharide từ disaccharide, làm cho trình tổng hợp insulin diễn dễ dàng hạn chế hấp thụ monosaccharide Chất AGIs tổng hợp đường hóa học tự nhiên từ thực vật, động vật vi sinh vật Chất AGIs tổng hợp theo đường hóa học thường gây số tác dụng phụ rối loạn chức gan chứng đau dày Tuy nhiên chất AGIs từ đậu đỗ lên men Aspergillus oryzae (A.oryzae) có độ an tồn cao, khơng có tác dụng phụ thể sống Hiện có nhiều cơng trình nghiên cứu tạo sản phẩm thực phẩm thương mại có hiệu chức hỗ trợ ổn định đường huyết, phòng chống tiểu đường, thừa cân béo phì Tác Giả Nguyễn Đức Tiến Trưởng môn Nghiên cứu phụ phẩm môi trường Nông nghiệp - Viện Cơ Điện Nông Nghiệp Công nghệ sau thu hoạch nghiên cứu ‘‘Tuyển chọn chủng nấm mốc có khả sinh tổng hợp hoạt chất ức chế enzyme α-glucosidase thử nghiệm sản xuất thực phẩm chức năng’’ Đã nghiên cứu trích ly hoạt chất ức chế AGIs từ đậu đen lên men thu hàm lượng AGIs 86,8%, IC50 5,4mg/ml Nếu dừng lại trích ly hoạt chất thu lẫn nhiều tạp chất khác Việc tinh chế hoạt chất AGIs cần thiết Từ lý tiên hành đề tài nghiên cứu “Nghiên cứu tinh d oa nl w nv a lu an ll fu oi m at nh chế hoạt chất ức chế enzyme α-glucosidase từ đậu đen lên men chủng Aspergillus oryzae” 1.2 Mục đích Nghiên cứu tinh chế hoạt chất ức chế enzyme α-glucosidase từ đậu đen lên men chủng Aspergillus oryzae z z gm @ l.c 1.3 Yêu cầu - Nghiên cứu ảnh hưởng trình kết tủa ethanol đến hiệu tinh chế hoạt chất AGIs om an Lu n va ac th (Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae si (Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae 46 u en lờn men X lý nguyờn liu ( nghiền nhỏ, xử lý sóng siêu âm 10 phút) Trích ly Ethanol 50%, nhiệt độ 800C, thời gian 50 phút lu Sản phẩm cô đặc (thu đươc hoạt chất AGIs 86,8%, IC50 5,4 mg/ml an n va p ie gh tn to Kết tủa dung môi hữu (Ethanol 90,60; tỷ lệ dung môi 31/80g/ml, Nhiệt độ 29,50C) w d oa nl Cô đặc ( nhiệt độ 800C, áp suất 0,8atm, thời gian 30 phút) nv a lu Phương pháp sắc ký lọc gel (gel sephadex G-25) an Tinh chế hoạt chất AGIs ll fu oi m at nh Lựa chọn bao bì bảo quản (bao bì túi Kraft) z z gm @ Chế phẩm AGIs l.c om Hình 4.12 Sơ đồ quy trình trích ly tinh chế hoạt chất AGIs từ đậu đen lên men an Lu n va ac th (Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae si (Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae 47 lu an n va p ie gh tn to Thuyết minh quy trình trích ly tinh chế hoạt chất AGIs từ đậu đen lên men: Xử lý nguyên liệu - Mục đích: Phá vỡ cấu trúc tế bào, giúp q trình trích ly hoạt chất AGIs đạt hiệu cao - Đậu đen lên men nghiền nhỏ, sử lý qua sóng siêu âm 10 phút Trích ly hoạt chất AGIs từ đậu đen lên men - Mục đích: Q trình trích ly để tạo dịch trích ly thơ có chứa hoạt chất AGIs, để phục vụ cho trình tinh chế - Trích ly Ethanol 500 với tỷ lệ ngun liệu/dung mơi 1/6.Nhiệt độ trích ly 800C thời gian 50 phút Ta thu dịch trích ly tiến hành cô loại bớt dung môi thuận lợi cho qua trình tinh chế sau Kết tủa dung mơi hữu - Mục đích: Để loại bỏ bớt số chất nằm dịch trích ly AGIs - Dịch sau cô tiến hành kết tủa dung môi hữu ethanol 90,60; tỷ lệ dung môi 31/80g/ml để lắng qua đêm (12h) nhiệt độ 250C Cơ đặc - Mục đích: Loại bỏ bớt dung môi để thuận lợi cho trình tinh chế - Dịch sau tinh chế phương pháp kết tủa dung môi hữu tiến hành cô để loại bỏ dung môi Cô nhiệt độ 800C thời gian 30 phút áp suất - 0,8atm Phương pháp sắc ký lọc gel - Mục đích: Loại bỏ tạp chất có dịch kết tủa dung môi ethanol để thu hoạt chất AGIs tinh khiết - Dịch sau tinh chế phương pháp kết tủa ethanol, tiến hành lọc gel sử dụng gel xephadex G-25 Dịch thu tiến hành chạy sắc ký lỏng cao áp (HPLC) Lựa chọn bao bì bảo quản chế phẩm AGIs - Mục đích: Để kéo dài thời gian bảo quản hoạt chất - Tiến hành bảo quản chế phẩm tháng lựa chọn bao bì túi Kraft để bảo quản chế phẩm AGIs d oa nl w nv a lu an ll fu oi m at nh z z gm @ l.c om an Lu n va ac th (Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae si (Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae 48 PHẦN KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ lu an n va p ie gh tn to 5.1 Kết luận Trong thời gian nghiên cứu bám sát mục tiêu đề tài thực đầy đủ nội dung nghiên cứu đưa có số kết luận sau: - Nghiên cứu tinh ethanol 90,60 cho kết cao Tỷ lệ dung môi 31/80m/ml cho hiệu tinh chế cao Tinh chế nhiệt độ 29,50C tối ưu - Nghiên cứu cô nhiệt độ 800C áp suất -0,8atm cho hoạt chất cao thời gian ngắn - Nghiên cứu sắc ký qua gel sephadex G25 tinh hoạt chất AGIs có IC50 3,2mg/ml - Nghiên cứu bao bì Kraft để bảo quản chế phẩm cho hiệu cao d oa nl w 5.2 Kiến nghị Trong khuân khổ khóa luận tốt nghiệp, đề tài có số kết để hoàn thiện kết nghiên cứu, chúng tơi có số đề nghị sau: - Nghiên cứu xác định trọng lượng phân tử hoạt chất AGIs - Nghiên cứu hồn thiện quy trình chế biến bột thực phẩm chức chứa hoạt chất AGIs từ đậu đen lên men tạo chế phẩm - Tạo sản phẩm có giá trị cao, ứng dụng vào thực tế để ngăn ngừa nguy chữa trị bệnh tiểu đường béo phì nước, đồng thời suất sang nước khu vực giới nv a lu an ll fu oi m at nh z z gm @ l.c om an Lu n va ac th (Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae si (Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae 49 lu TI LIU THAM KHO TI LIU THAM KHẢO TIẾNG VIỆT Đặng Hồng Ánh cộng sự, 2007 Nghiên cứu công nghệ sản xuất bột dâu tằm giàu 1-deoxynojirimicin (DNJ) ứng dụng số sản phẩm đồ uống chức cho người bệnh tiểu đường Báo cáo khoa học Lê Văn Nhương, Quản Văn Thịnh 1968, Kỹ thuật sản xuất tương nước chấm NXB Khoa học Hà Nội Lê Văn Việt Mẫn, Lại Mai Hương 2006, Thí nghiệm vi sinh vật học thực phẩm, NXB Đại học Quốc gia thành phố Hồ Chí Minh an n va p ie gh tn to TÀI LIỆU THAM KHẢO TIẾNG ANH Fujita H, Yamagami, T Absence of mutagenicity, genotoxicity, and subchronic oral toxicity of touchi extract International Journal of Toxicology 2007, 26:465-473 Akio, K., Tomoyuki, K., Kunihiko, K 1991, Inhibitory activity of ovomacroglobulin for pepsin and rennin, J.Agric Food Chem., 39 (1), pp 41 – 43 Application for the approval of touchi extract under regulation (EC) No 258/97 of the european parliament and of the council of 27 january 1997 concerning novel foods and novel food ingredients.CBC Co., Ltd July 3, 2008 Dong Wang, Li-jun Wang, Feng-xue Zhu, Ji-ye Zhu, 2008 In vitro and in vivo studies on the antioxidant activities of the aqueous extracts of Douchi (a traditional Chinese salt-fermented soybean food) Food Chemistry 107, 1421–1428 Young Min, K., Hyeog – Jin, S., Kyoung, S M., Joon, K K., Jong – Gwan, K., Hyoung – Sik, C, Soon, K A and Chung, I H 2002, Novel α – glucosidase inhibitors, CKD – 711 by Streptomyces sp CK – 4416” The Journal of antibiotics 55 (5), pp 462 – 466 European Patent Application, EP1 025 851 A1 Fujita Hiroyukia, Yamagami Tomohidea, Ohshima Kazunorib, 2001 Efficacy and safety of Touchi Extract, an α-glucosidase inhibitor d oa nl w nv a lu an ll fu oi m at nh z z gm @ l.c om an Lu n va ac th (Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae si (Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae 50 lu an n va p ie gh tn to derived from fermented soybeans, in non-insulin-dependent diabetic mellitus Journal of Nutritional Biochemistry 12, 351–356 10 Hiroyuki Fujitaa, Tomohide Yamagamia, Kazunori Ohshima, (2003) Long-term ingestion of Touchi-extract, an - glucosidase inhibitor, by borderline and mild type-2 diabetic subjects is safe and significantly reduces blood glucose levels Nutrition Research 23, 713–722 11 Hiroyuki Fujitaa,T, Tomohide Yamagamia, Kazunori Ohshima, (2005) Effect of Touchi extract on blood lipids in hypertriglyceridemic subjects and Sprague-Dawley rats Nutrition Research 25, 681–692 12 Jing Chen, Yong-Qiang Cheng, Kohji Yamaki, Li-Te Li, 2007 Anti-αglucosidase activity of Chinese traditionally fermented soybean (douchi) Food Chemistry 103, 1091–1096 13 Kameda, Y., Asano, N., Yoshikawa, M., Takeuchi, M., Yamaguchi, T., Matsui, K., Horri, S and Fukase, H 1984, Valiolamine, a new α glucosidase inhibiting aminococyclitol produced by Streptomyces hygroscopicus J Antibiot 37, pp 1301 - 1307 European Patent Application, EP1 025 851 A1 14 Kawabata, Jun, (2000) Alpha- glucosidase inhibitor Patent No EP1 025 801 A1 15 Kawabata, Takanori Kasai, Hiroyuki Fujita, 2001 Extract of touchi containing an α-glucosidase inhibitor Patent No US 6,299,911 B1, date of Patent: Oct,9, 2001 16 Kwon, O S., Park, S H., Yun, B S., Pyun, Y R., Kim, C.J 2000 Cyclo (Dehydroala - L - Leu) an α – glucosidase inhibitor from Penicillium sp F70614, The journal of antibiotics 53 (9), pp 954 - 958 17 Lotong N, 1985 Microbiology of fermented foods Elsevier, New York, pp 237–270 18 Min-Gu Kang1, Sung-Hun Yi2 and Jong - Soo Lee1, 2013 Production and Characterization of a New α-Glucosidase Inhibitory Peptide fromAspergillus oryzae N159 - d oa nl w nv a lu an ll fu oi m at nh z z gm @ l.c om an Lu n va ac th (Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae si (Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae 51 19 Nilubon Jong-Anurakkun, Megh Raj Bhandari, Jun Kawabata, 2007.α- lu an n va p ie gh tn to Glucosidase inhibitors from Devil tree (Alstonia scholaris) Food Chemistry 103, 1319 –1323 20 Nilubon Jong-Anurakkun, Megh Raj Bhandari, Jun Kawabata, 2007.αGlucosidase inhibitors from Devil tree (Alstonia scholaris) Food Chemistry 103, 1319 –1323 21 Schimidt, D D., Fromer, W., Muller, L., Junge, B., Wingender, W., and Truscheit, E 1977, “Alpha - glucosidase inhibitor, new complex oligosaccharides of microbial origin”, Naturwissenshaften 64, pp 535 – 536 22 Shin-ichi Sugiyama, 1984 Selection of micro-organisms for use in the fermentation of soy sauce Food Microbiology, 1, 339 - 347 23 Toshiyuki, K., Kiyotaka, N., Horoyuki, K., Yoshihiro, K., Yuko, G., Kenji, Y , Shigeru, O., Shinichi, O and Teruo, M 2007.Food-Grade Mulberry Powder Enriched with 1-Deoxynojirimycin Suppresses the Elevation of Postprandial Blood Glucose in Humans J Agric Fodd Chem 55,5869-5874 24 Young in, K., Hyeog - Jin, S., Kyoung, S M., Joon, K K., Jong - Gwan, K., Hyoung – Sik, C., Soon, K A and Chung, I H 2002, Novel α – glucosidase inhibitors., CKD – 711 by Streptomyces sp CK - 4416 The Journal of antibiotics 55 (5), pp 462 – 466 25 Yun-Ping Zhu, Li-Jun Yin, Yong - Qiang Cheng, Kohji Yamaki, 2008 Effects of sources of carbon and nitrogen on production of α glucosidase inhibitor by a newly isolated strain of Bacillus subtilis B2 Food Chemistry 109, 737 – 742 d oa nl w nv a lu an ll fu oi m at nh z z gm @ l.c om an Lu n va ac th (Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae si (Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae PH LC 1: HèNH NH lu an va n Nguyên liệu đậu đen Đậu đen p ie gh tn to lên men d oa nl w nv a lu an ll fu oi m at nh z z gm @ l.c om Lu Dịch trích ly sau lọc Kết tủa dung môi hưu an n va ac th (Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae si (Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae lu an n va p ie gh tn to Nồi cô đặc chân không Dịch sau cô đăc d oa nl w nv a lu an ll fu oi m at nh z z gm @ l.c om an Lu Thiết bị cô đặc chân không n va ac th (Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae si (Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae lu an n va p ie gh tn to PHỤ LỤC XỬ LÝ SỐ LIỆU BALANCED ANOVA FOR VARIATE HT FILE 12 3/ 6/14 1: PAGE Anh huong cua nong dung moi ethanol den hieu qua tinh che hoat chat AGIs VARIATE V002 HT LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ==================================================== ========================= ND$ 38.8716 12.9572 ****** 0.000 * RESIDUAL 817998E-01 102250E-01 -* TOTAL (CORRECTED) 11 38.9534 3.54122 -TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE 12 3/ 6/14 1: PAGE Anh huong cua nong dung moi ethanol den hieu qua tinh che hoat chat AGIs MEANS FOR EFFECT ND$ d oa nl w nv a lu an ll fu oi m at nh z z gm @ l.c om an Lu n va ac th (Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae si (Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae -ND$ NOS HT 80 86.9000 85 88.2000 90 91.0000 95 91.0600 lu an n va p ie gh tn to SE(N= 3) 0.583809E-01 5%LSD 8DF 0.190374 -ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE 12 3/ 6/14 1: - :PAGE Anh huong cua nong dung moi ethanol den hieu qua tinh che hoat chat AGIs F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |ND$ | (N= 12) -SD/MEAN | | NO BASED ON BASED ON % | | OBS TOTAL SS RESID SS | | HT 12 89.290 1.8818 0.10112 0.1 0.0000 BALANCED ANOVA FOR VARIATE HT FILE 12345 3/ 6/14 1: - d oa nl w nv a lu an ll fu oi m at nh z z gm @ l.c om an Lu n va ac th (Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae si (Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae lu an n va p ie gh tn to PAGE Anh huong cua ty le dung moi den hieu qua tinh che hoat chat AGIs VARIATE V002 HT LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ==================================================== ========================= TLDM$ 469.999 117.500 ****** 0.000 * RESIDUAL 10 230893E-01 230893E-02 -* TOTAL (CORRECTED) 14 470.022 33.5730 -TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE 12345 3/ 6/14 1: PAGE Anh huong cua ty le dung moi den hieu qua tinh che hoat chat AGIs MEANS FOR EFFECT TLDM$ -TLDM$ NOS HT CT1 78.3000 CT2 81.4000 CT3 91.1200 CT4 91.0000 CT5 91.1767 d oa nl w nv a lu an ll fu oi m at nh z z gm @ l.c om an Lu n va ac th (Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae si (Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae lu an n va p ie gh tn to SE(N= 3) 0.277425E-01 5%LSD 10DF 0.874175E-01 -ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE 12345 3/ 6/14 1: PAGE Anh huong cua ty le dung moi den hieu qua tinh che hoat chat AGIs F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |TLDM$ | (N= 15) SD/MEAN | | NO BASED ON BASED ON % | | OBS TOTAL SS RESID SS | | HT 15 86.599 n 5.7942 0.48051E-01 0.1 0.0000 BALANCED ANOVA FOR VARIATE HT FILE 1234 3/ 6/14 1: - d oa nl w nv a lu an ll fu oi m at nh z z gm @ l.c om an Lu n va ac th (Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae si (Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae lu an n va p ie gh tn to PAGE Anh huong cua nhiet den hieu qua tinh che hoat chat AGIs VARIATE V002 HT LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ==================================================== ========================= ND$ 170.005 85.0026 ****** 0.000 * RESIDUAL 106138E-01 176897E-02 -* TOTAL (CORRECTED) 170.016 21.2520 -TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE 1234 3/ 6/14 1: PAGE Anh huong cua nhiet den hieu qua tinh che hoat chat AGIs MEANS FOR EFFECT ND$ d oa nl w nv a lu an ll fu oi m at nh z HT l.c om an Lu 3) 6DF 85.3000 91.1200 80.4900 0.242828E-01 0.839982E-01 gm 3 @ NOS z ND$ 25 50 SE(N= 5%LSD n va ac th (Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae si (Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae lu an n va p ie gh tn to -ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE 1234 3/ 6/14 1: PAGE Anh huong cua nhiet den hieu qua tinh che hoat chat AGIs F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |ND$ | (N=9) SD/MEAN | | NO BASED ON BASED ON % | | OBS TOTAL SS RESID SS | | HT 85.637 4.6100 0.42059E-01 0.0 0.0000 d oa nl w nv a lu BALANCED ANOVA FOR VARIATE HT FILE NDC1 15/ 6/14 0:42 PAGE 1anh huong cua nhiet co VARIATE V002 HT LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ==================================================== ========================= ND$ 82.3114 13.7186 ****** 0.000 * RESIDUAL 14 479908E-02 342792E-03 an ll fu oi m at nh z z gm @ l.c om an Lu n va ac th (Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae si (Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae (Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae(Luỏưn.vn).nghiên.cỏằâu.tinh.chỏ.hoỏĂt.chỏƠt.ỏằâc.chỏ.enzyme.ẻ.glucosidase.tỏằô.ỏưu.en.lên.men.bỏng.chỏằĐng.aspergillus.oryzae