Việc áp dụng những kỹ thuật mới có độ nhậy và độ đặc hiệu cao như kỹ thuật Realtime PCR là việc làm rất cần thiết nhằm phát hiện bệnh sớm cho bệnh nhân giúp bác sĩ lâm sàng điều trị kịp thời, cắt đứt sớm nguồn lây ra cộng đồng.
TỔNG QUAN
Bệnh Chlamydia trachomatis
Năm 1907, Halberstacdter và Von Prowacek phát hiện và mô tả những hạt vùi trong tế bào kết mạc bệnh nhân đau mắt hột.
Năm 1910, Linder mô tả thể vùi trong tử cung ở người mẹ của trẻ bị đau mắt hột và của người vợ mà người chồng bị viêm niệu đạo không do lậu Các tác giả này đặt tên chúng là Chlamydozoa.
Năm 1938, C trachomatis mới được phân lập đầu tiên từ túi phôi của trứng đã thụ tinh.
Về tên gọi, năm 1945 Moskowsky gọi các vật thể này là Mygagawanlla Chlamydozoom mắt và sinh dục Đến năm 1970, hội nghị quốc tế về mắt hột ở Mỹ mới thống nhất gọi nhóm vi sinh vật này là Chlamydia theo nghĩa tiếng latinh là “áo choàng” 10
1.1.2 Tình hình nhiễm C trachomatis trên thế giới
Tỷ lệ nhiễm C trachomatis trong trong các bệnh lây truyền qua đường tình dục (Sexualy transmitted diseases: STD) có xu hướng ngày càng gia tăng trong những năm gần đây Trên thế giới đã có rất nhiều những nghiên cứu về tình hình nhiễm C trachomatis Theo nghiên cứu của Steenbeek A và cộng sự tỷ lệ nhiễm C trachomatis ở phụ nữ độ tuổi 15 – 65 là 13% 4 Một số quốc gia châu Âu, chẩn đoán C trachomatis từ 7 ca/ 100.000 dân tại Slovenia đến 585 ca/100.000 dân tại Iceland 7 Đối tượng mại dâm được đặc biệt chú ý vì đây là đối tượng có nguy cơ cao do tình trạng quan hệ tình dục không an toàn và có nhiều bạn tình Việc phát hiện bệnh và điều trị ở nhóm đối tượng này sẽ rất khó khăn Theo nghiên cứu của Horas Wong và cộng sự năm 2015 trên phụ nữ bán dâm tại Hồng Kong phát hiện tỷ lệ dương tính với C trachomatis sinh dục là 10,6% 11 Ở Trung Quốc, nghiên cứu trên 3.099 phụ nữ bán dâm của Chen XS cho thấy tỷ lệ nhiễm C trachomatis là 17,3% 12
Qua các nghiên cứu có thể thấy, nhiễm C trachomatis chủ yếu ở đối tượng trong độ tuổi còn trẻ vì đây là nhóm đối tượng có hoạt động tình dục mạnh đồng thời chiếm tỷ lệ dân số cao Nghiên cứu của Achchhe L Patel trên
593 phụ nữ từ 18 – 60 tuổi tại Ấn Độ, tỷ lệ dương tính với C trachomatis là
23%, trong đó nhóm tuổi từ 26 – 33 chiếm tỷ lệ cao nhất (khoảng 25%) 13 Tại Srilanka năm 2012, trong số 168 phụ nữ tham gia khám STDs, tỷ lệ nhiễm là 8,3% và 35,7% trong số đó dương tính với C trachomatis mà không có triệu chứng 14
Tình hình nhiễm C trachomatis ở phụ nữ có thai cũng được quan tâm nhiều vì nếu không được phát hiện sớm và điều trị kịp thời có thể gây ra những biến chứng nghiêm trọng và gây nhiễm khuẩn ở trẻ sơ sinh Theo dõi trên 400 phụ nữ mang thai tại Papua newGuinea, phát hiện tỷ lệ nhiễm C. tracomatis là 11,1% 15 Nghiên cứu của Alfarrai tại Ả rập cho thấy, trong số
100 bệnh nhân vô sinh, tỷ lệ nhiễm C trachomatis là 8,0% 16
Hình 1.1 Tỷ lệ nhiễm Chlamydia trachomatis ở một số nước Châu Âu 17
Theo European Centre for Disease Prevention and Control (ECDC) năm
2009, tỷ lệ dương tính C trachomatis ở một số nước Châu Âu thay đổi từ năm 1998 đến năm 2007 Ở Thụy Điển và Phần Lan, nơi những nghiên cứu được tiến hành từ đầu những năm 90, tỷ lệ này giảm ở đầu những năm 90 (tương tự với tỷ lệ các bệnh lây truyền qua đường tình dục khác ở Châu Âu) do sự thay đổi thói quen sinh hoạt tình dục và mối lo từ hiểm họa AIDS Tỷ lệ này tăng lên từ năm 1995 Tại Anh và Đan Mạch, tỷ lệ này tăng dần theo mỗi năm, nguyên nhân có thể do không được nghiên cứu từ đầu những năm 90, sử dụng các chẩn đoán có độ nhạy cao hơn, đối tượng nghiên cứu nằm trong các nhóm có nguy cơ cao 18
Theo một nghiên cứu về tỷ lệ nhiễm vi khuẩn này tại Châu Âu cho thấy: Tại Phần Lan (1980) lệ dương tính C trachomatis là 6% 19 Thụy Điểntheo nghiên cứu Svenssonet (1994) đã chỉ ra độ tuổi 16 đến 20 năm (trung bình 18 tuổi) mắc bệnh chính và được xét nghiệm ELISA cho tỷ lệ dương tính
C.trachomatis là 2% trong nhóm A và 6% trong nhóm B 20 Tại Anh theo
100.000 nghiên cứu của Smithet (1991) tỷ lệ dương tính C trachomatis là 12% 21 ; Thompson và Wallace (năm1994) tỷ lệ dương tính C trachomatis chung là 1.7% 22 ; nghiên cứu Hopwood và Mallinson (năm 1999) là 3.9% 23 ; nghiên cứu Kirkwoodet (năm 1999) tiến hành xét nghiệm bằng kỹ thuật PCR cho kết quả dương tính C trachomatis tổng thể là 6.2% 24
Sự phổ biến của C trachomatis phụ nữ không có triệu chứng ở Châu Âu dao động từ 1.7 đến 17% tùy thuộc vào bối cảnh và quốc gia Tỷ lệ dương tính C trachomatis là 6% ở phụ nữ sử dụng biện pháp tránh thai và 4% với đối tượng phụ nữ xét nghiệm dịch phết cổ tử cung 25
James B Mahony và cộng sự (1992) nghiên cứu tỷ lệ dương tính C. trachomatis ở nam giới ở những địa điểm được lựa chọn tại Hoa Kỳ tỷ lệ dương tính trung bình tổng thể là 5.1% Mức cao nhất được quan sát thấy ở nam giới thử nghiệm tại các cơ sở giam giữ trẻ vị thành niên (7.9%) và người lớn (6.8%), ở người da đen (6.7%), 15-19 tuổi (6.1%) và 20-24 tuổi (6.5%).
Tỷ lệ nhiễm C trachomatis trên nam giới cao ở những địa điểm nhất định 18 Theo các công trình nghiên cứu của Gaydos CA, Svensson LO, tần suất nhiễm C trachomatis cao gặp ở đối tượng trẻ dưới 25 tuổi, có lẽ do nam nữ thanh niên các nước Châu Âu thường có quan hệ tình dục tự do ngoài hôn nhân, vì vậy họ dễ mắc các bệnh lây truyền qua đường tình dục trong đó có nhiễm C. trachomatis Tỷ lệ nhiễm vi khuẩn này ở người lớn tại Nam Thái Bình Dương là
73%, Papua New Guinea là 20%, Nhật Bản 7%, Senegan 7% 27
Một nghiên cứu của Achchhe L Patel và cộng sự 13 trường đại học y khoaIndiana, Ấn Độ sử dụng các phương pháp phát hiện vi khuẩn C trachomatis như Roche Amplicor test, DFA và PCR Trong suốt quá trình nghiên cứu(2003–2009), tỷ lệ bệnh nhân nhiễm C trachomatis dao động từ 24.0% đến30.0% Các phụ nữ hành nghề mại dâm ở Surat, Ấn Độ, có tỷ lệ dương tính
(xét nghiệm bằng PACE2 test) là 8.5%, trong khi ở Ahmedabad, tỷ lệ này tăng gấp đôi Tỷ lệ bệnh nhân nhiễm C trachomatis trong quần thể nghiên cứu ở thủ đô của Ấn Độ chỉ chiếm 4.0% mặc dù tỷ lệ mắc bệnh lây truyền qua đường tình dục là 36.5% Tỷ lệ này tương tự với các nghiên cứu trên bệnh nhân ở Azerbaijan 3.1% và Bangladesh 3.4% Tỷ lệ nhiễm cao được đề cập ở Manila 23.3%, Cebu, Philippines 37.0% và 14.0% ở Nicaragoa 13
1.1.3 Tình hình nhiễm C trachomatis tại Việt Nam
Những năm gần đây, tỷ lệ nhiễm C trachomatis ngày càng gia tăng 28 , 29 Với sự phát triển của công nghệ và khoa học, sự tiến bộ, hiện đại của các kỹ thuật chẩn đoán C trachomatis giúp bệnh nhân được phát hiện chính xác và có phương hướng xử trí kịp thời 30 , 31
Vi khuẩn Chlamydia trachomatis
1.2.1 Đặc điểm sinh học, hình thể, cấu trúc
Chlamydia trachomatis thuộc chi Chlamydia, họ Chlamydiaceae, BộChlamydiales, lớp Chlamydiae, ngành Chlamydiae, giới vi khuẩn 3,4
Về hình thái cấu trúc và các loại kháng nguyên C trachomatis vừa giống virus vừa giống vi khuẩn Khi quan sát dưới kính hiển vi quang học, vi khuẩn có hình cầu hoặc hình bầu dục, đứng riêng rẽ hoặc thành từng đôi, có khi xếp thành chuỗi ngắn hoặc thành từng đám trong hoặc ngoài tế bào Kích thước khỏc nhau khoảng 0,1 – 0,2àm là vi khuẩn Gram õm cú màng là lipopolisaccharide Đặc điểm giống virus do chúng không có khả năng phát triển trên các môi trường nuôi cấy vi khuẩn do vậy vi khuẩn này phải ký sinh nội bào bắt buộc, không có khả năng sống sót bên ngoài tế bào
Cấu trúc của C trachomatis giống như các vi khuẩn khác ở đặc điểm: có chất nguyên sinh, màng nguyên sinh và vách Thành phần hóa học có glucid, lipid, protid và có đồng thời cả 2 loại acid nucleic (DNA và RNA) Vách không có lớp peptidoglycan nên chúng không chịu tác động của kháng sinh nhóm β – lactam, chỉ bao gồm lớp màng liposaccarid, các protein chủ đạo (MOMP) và các protein giàu cystein (CRP) ở lớp ngoài là những cấu trúc chính quyết định tính kháng nguyên của C trachomatis Chúng có điểm khác với những vi khuẩn khác là không có khả năng tạo ra ATP bằng hiện tượng oxy hóa do hệ thống enzyme phân hủy glucose và enzyme tham gia chu trình Kreb không hoàn chỉnh, vì vậy chúng phải bắt buộc ký sinh bắt buộc trong tế bào sống, lệ thuộc vào hệ thống năng lượng của tế bào vật chủ.
C trachomatis có các loại kháng nguyên:
Kháng nguyên chi (genus): là loại kháng nguyên chung của nhiều loàiChlamydia khác nhau, có bản chất là glycolipid, chịu nhiệt, được dùng trong phản ứng kết hợp bổ thể gắn liền với thân.
Kháng nguyên loài: bản chất là protein không chịu nhiệt Kháng thể tương ứng hiện nay được dùng để chẩn đoán loài, tức là xác định sự có mặt của kháng thể kháng C trachomatis, đây là một phản ứng đặc hiệu.
Ngoài ra còn có các kháng nguyên đặc trưng cho từng typ và có bản chất là protein.
Hệ gen của C trachomatis gồm phân tử DNA dài 1.042.519 nucleotide với 894 trình tự mã hóa cho protein.
Hình 1.2 Cấu trúc hệ gen của vi khuẩn Chlamydia trachomatis 40
C trachomatis chứa 7 đến 10 bản sao của plasmid có kích thước 7.5 kb.
Trình tự nucleotide của plasmid là trình tự bảo thủ cao (có dưới 1% nucleotide thay thế), chứa 8 khung đọc mở (Open Reading Frame) mã hoá các gen và các kháng nguyên Mặc dù chức năng của plasmid còn chưa xác định hết nhưng trình tự nucleotide và sự có mặt của plasmid trong tế bào chứng tỏ nó có vai trò quan trọng đối với vi khuẩn C trachomatis.
Có 3 loài trong chi Chlamydia gồm:
Chlamydia psittasci: gây bệnh sốt vẹt
Chlamydia trachomatis: gây viêm niệu đạo âm đạo, viêm kết mạc, viêm cổ tử cung
Chlamydia pneumoniae: gây viêm phổi
Bằng phương pháp miễn dịch huỳnh quang người ta chia C trachomatis thành 15 loại:
- L1, L2, L3: gây bệnh hột xoài (Nicolai – favre) (bệnh lympho hạt, một loại bệnh viêm hạch bạch huyết hoa liễu ở bẹn).
- D, E, F, G, H, I, J, K gây viêm niệu đạo, âm đạo, cổ tử cung, viêm kết mạc, viêm vòi trứng, viêm mào tinh hoàn, viêm phổi sơ sinh, viêm trực tràng.
Chu kỳ phát triển của C trachomatis trong bào tương tế bào kéo dài 48-
72 giờ Vòng đời của C trachomatis gồm 2 giai đoạn: Thể cơ bản và thể lưới.
- Thể cơ bản (Elementary body- EB) là những tế bào tròn có đường kính khoảng 0.3m, nhân đậm Thể này xâm nhập vào các tế bào theo kiểu thực bào.
- Thể lưới (Reticulate Body- RB): Sau khi xâm nhập vào tế bào C. trachomatis chuyển hóa nhờ tế bào và tạo thành thể lưới (đường kính 1m), sinh sản theo hình thức phân đôi kiểu trực phân khoảng 2-3 giờ một lần Sau đó thể lưới lại chuyển thành thể cơ bản và giải phóng khỏi tế bào thông qua hình thức ngoại tiết bào (exocytosis) Thông thường mỗi thể lưới giải phóng 100-1000 thể cơ bản rồi tiếp tục xâm nhập vào các tế bào mới.
Hình 1.3 Chu kỳ vòng đời của vi khuẩn C trachomatis
1.2.2 Sức đề kháng, khả năng gây bệnh
Vi khuẩn C trachomatis rất yếu, dễ bị tiêu diệt bởi nhiệt độ, bị tiêu diệt ở nhiệt độ 60 o C trong 10 phút, tia cực tím, cồn, ete Glycerin cũng không bảo tồn được chúng mà chỉ nhiệt độ đông lạnh mới có khả năng tồn tại, vi khuẩn sống được hàng năm ở nhiệt độ - 50 o C đến - 70 o C C trachomatis là vi khuẩn ký sinh nội bào bắt buộc, không có khả năng sống sót ngoài tế bào nên đường truyền chủ yếu là đường tình dục hoặc lây từ mẹ sang con khi người mẹ mang thai bị nhiễm C trachomatis.
C trachomatis có khả năng gây nên 2 bệnh chính ở người: Bệnh nhiễm trùng sinh dục tiết niệu và bệnh mắt hột, trong đó bệnh sinh dục tiết niệu do nhiều tupe (D, E, F, G, H, I, J và K) gây ra, tăng nhanh số lượng người mắc.
Trẻ sơ sinh có thể bị mắc bệnh viêm kết mạc hoặc viêm phổi do C. trachomatis nếu bị lây từ mẹ. Ở phụ nữ
Có tới 75% phụ nữ không có biểu hiện triệu chứng lâm sàng và triệu chứng nếu có cũng không điển hình 29 , nên việc chẩn đoán và sàng lọc nhiễm
C trachomatis đơn thuần dựa vào triệu chứng lâm sàng hoàn toàn không khả thi Cho đến khi có biểu hiện viêm vùng chậu hoặc khi bệnh nhân khám vô sinh phát hiện có tổn thương ống dẫn trứng thì C trachomatis đã gây biến chứng khó phục hồi Vì vậy cần thiết phải có những phương pháp chẩn đoán chính xác và phù hợp giúp phát hiện C trachomatis nhằm ngăn chặn những hậu quả mà nó gây ra. Ở nữ giới, vi khuẩn C trachomatis có thể gây viêm âm đạo, cổ tử cung và niệu đạo Các biến chứng thường gặp ở bệnh nhân nhiễm C trachomatis mạn tính bao gồm:
- Tắc vòi trứng ở phụ nữ: Một trong những nguyên nhân gây tắc vòi trứng là do viễm nhiễm ở vòi trứng, buồng trứng, dây chằng quanh tử cung vòi trứng do C trachomatis.
- Chửa ngoài tử cung: Nguyên nhân viêm nhiễm vòi trứng do C. trachomatis khiến phôi thai tắc ngay tại điểm hẹp Phôi thai lớn dần lên, đến một mức nào đó sẽ phá vỡ các mạch máu nơi nó đậu lại trên vòi trứng, gây chảy máu dữ dội trong ổ bụng, có thể làm thai phụ tử vong nhanh chóng.Nhiều thống kê cho thấy có tới 9% phụ nữ nhiễm C trachomatis bị chửa ngoài tử cung.
- Viêm vùng chậu: Phần lớn, viêm vùng chậu do vi khuẩn lậu và C. trachomatis gây ra Viêm vùng chậu là một bệnh thầm lặng, nhiều tác giả thống kê cho thấy có tới 40% phụ nữ nhiễm C trachomatis bị viêm nhiễm vùng tiểu khung, trong số đó có 20% bị vô sinh làm ảnh hưởng không nhỏ tới chất lượng cuộc sống 42,43
- C trachomatis có thể kết hợp cùng với HPV (Human papilloma virus) – một virus gây u nhú có khả năng đưa đến ung thư cổ tử cung. Ở nam giới Ở nam giới triệu chứng lâm sàng của nhiễm C trachomatis biểu hiện đầu tiên là viêm niệu đạo có mủ mà giới chuyên khoa gọi là viêm niệu đạo không do lậu, sau đó có thể dẫn đến viêm mào tinh hoàn Tại túi tinh, vi khuẩn gây độc cho tinh trùng, làm giảm số lượng tinh trùng, đời sống tinh trùng ngắn lại, chất lượng giảm xuống Đây chính là lý do gây vô sinh nam. Tuy nhiên,vì C trachomatis lây qua đường tình dục nên nam giới nhiễm bệnh nếu không được phát hiện và điều trị sẽ là nguồn tái nhiễm cho bạn tình. Ngoài ra, một số nghiên cứu còn cho thấy C trachomatis ở nam giới có khả năng bám vào tinh trùng và theo tinh trùng đi qua cổ tử cung lên ống dẫn trứng, giúp phát tán C trachomatis trong vòi trứng của phụ nữ.
1.2.3 Các xét nghiệm chẩn đoán vi khuẩn Chlamydia trachomatis
- Phương pháp nhuộm đơn bằng Giemsa bệnh phẩm và soi kính hiển vi.
Là kỹ thuật có ưu điểm là đơn giản, thực hiện nhanh, và tiến hành được số lượng lớn số mẫu Tuy nhiên kỹ thuật này ít được thực hiện trong chẩn đoán
C trachomatis vì độ nhạy và độ đặc hiệu không cao.
- Phương pháp nhuộm đơn bằng Iod Kỹ thuật này ít được thực hiện trong chẩn đoán C trachomatis vì độ nhạy và độ đặc hiệu không cao.
Nuôi cấy phân lập có độ đặc hiệu gần 100% và độ nhạy từ 70 – 80% chính vì vậy nuôi cấy được coi là tiêu chuẩn vàng để chẩn đoán nhiễm C. trachomatis Tuy nhiên việc lấy, bảo quản và vận chuyển bệnh phẩm rất khó khăn Labo để thực hiện việc nuôi cấy ít, giá thành đắt cho nên việc nuôi cấy ngày nay ít được thực hiện. Để phát hiện C trachomatis, người ta có thể dùng biện pháp nuôi cấy để chờ vi khuẩn gia tăng số lượng C trachomatis không phát triển ngoài tế bào sống được nên không thể nuôi cấy theo phương pháp thường dùng mà phải tiến hành nuôi cấy trên các tế bào như McCoy hoặc Hela 229, tế bào nhau thai Đối với bệnh mắt hột, người ta lấy nang bằng cách nạo các nang rồi cấy vào các tế bào nhau thai người để phát hiện các hạt vùi trong nguyên sinh chất của tế bào. Đối với bệnh viêm sinh dục - tiết niệu: lấy mủ chất tiết niệu đạo (nam giới); chất tiết cổ tử cung, âm đạo (nữ giới) nuôi cấy trong môi trường có chứa tế bào McCoy hoặc Hela 229 ở 37 0 C- 5% CO2 Quan sát tính chất xâm nhiễm sau 48 giờ nuôi cấy và phát hiện C trachomatis bằng kỹ thuật miễn dịch huỳnh quang: ủ với kháng thể đánh dấu huỳnh quang đặc hiệu cho kháng nguyên vỏ lipopolysaccharide (LPS) hoặc protein màng (major outer mtôi brane protein- MOMP).
ĐỐI TƯỢNG, VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
Đối tượng
Là 269 bệnh nhân có hội chứng tiết dịch niệu đạo, âm đạo đến khám tại bệnh viện Da liễu Trung Ương được bác sĩ khám nghi ngờ nhiễm C. trachomatis và chỉ định làm xét nghiệm realtime PCR từ tháng 07/2019 đến
- Tiêu chuẩn lựa chọn nghiên cứu:
+ Bệnh nhân đồng ý tham gia nghiên cứu
+ Đã có quan hệ tình dục
+ Bệnh nhân có hội chứng tiết dịch niệu đạo, âm đạo.
+ Bệnh nhân đang trong thời kỳ kinh nguyệt, bị rong kinh.
+ Bệnh nhân đang điều trị kháng sinh
Vật liệu
2.2.1 Vật liệu dùng cho xét nghiệm test nhanh bao gồm:
-Bộ KIT thử chẩn đoán C trachomatis của hãng SD BIOLINE
25 thanh thử SD BIOLINE Chlamydia trong túi nhôm có gói hút ẩm Thuốc thử A (1 x 10ml/lọ): Dung dịch tách chiết
Thuốc thử B (1 x 20ml/lọ) Dung dịch trung hòa
50 tăm bông vô trùng và 25 tube đựng mẫu
25 ống nhỏ giọt 300 àl dựng một lần
25 ống nhỏ giọt 600 àl dựng một lần
-Bàn khám phụ khoa để lấy mẫu bệnh phẩm
-Mỏ vịt (cỡ to, vừa, nhỏ)
-Hộp vận chuyển bệnh phẩm
-Giấy trả kết quả xét nghiệm
-Sổ lưu kết quả xét nghiệm
-Dung dịch sát khuẩn tay nhanh
-Dung dịch nước rửa tay
-Khay và giá đựng mẫu bệnh phẩm
-Bàn thực hiện kỹ thuật xét nghiệm.
2.2.2 Trang thiết bị, vật liệu dùng cho kỹ thuật tách chiết DNA và chạy realtime PCR
-Máy realtime PCR và hệ thống máy tính
-Máy ly tâm dùng cho tube 0,2 ml
-Hệ thống máy móc để tiến hành kỹ thuật tách chiết DNA
-Máy ly tâm tốc độ 13000 vòng/ phút dùng cho tube 1,5ml, máy vortex, máy ủ nhiệt khô
-Tủ thao tác vô trùng
-Micropipettes từ 5 àl đến 1000 àl
Hóa chất vật tư tiêu hao:
-Găng không có bột tale
-Hộp vận chuyển bệnh phẩm
-Bộ hóa chất sinh phẩm dùng cho kỹ thuật tách chiết DNA bằng phương pháp tủa (VA.A92-002A – 50TEST/ BỘ - Hãng Việt Á) bảo quản tối, nhiệt độ 2 – 8 o C bao gồm:
- Bộ sinh phẩm sử dụng cho phản ứng realtime PCR:
CH/NGN rPCR Mix: 2 x 25 phản ứng (-20 0 C)
- Bộ mẫu đối chứng (-20 0 C) gồm có:
DNA chứng dương, chứng âm có thể dùng cho bước tách chiết PCR, mỗi lần dựng 5 àl.
-Khấu hao sinh phẩm dùng cho chạy chứng, kiểm tra chất lượng.
-Ống Ependoff 1,7 ml vô trùng
-Đầu côn 1ml có lọc
-Sổ lưu kết quả xét nghiệm
-Dung dịch nước rửa tay
-Cồn sát khuẩn tay nhanh
Phương pháp
Nghiên cứu mô tả cắt ngang và chọn mẫu thuận tiện.
Bệnh nhân đến khám STIs
Khoa xét nghiệm Vi sinh
Tư vấn, lấy thông tin
Các biến số trong nghiên cứu
Phiên giải kết quả Xác định tỷ lệ nhiễm
2.3.2 Kỹ thuật lấy thu thập mẫu bệnh phẩm
Những bệnh nhân được lựa chọn tham gia nghiên cứu đều được thăm khám bởi bác sĩ Da liễu để xác định tình trạng viêm niệu đạo, âm đạo, cổ tử cung trước khi lấy mẫu Mỗi bệnh nhân sẽ được lấy đồng thời 2 mẫu, bởi 2 que tăm bông, 1 mẫu sẽ được phân tích bằng phương pháp realtime PCR, mẫu còn lại được dùng cho sắc ký miễn dịch Đối với bệnh nhân nam: Dùng tăm bông đưa sâu vào trong niệu đạo 2cm, xoay tăm bông và miết vào thành niệu đạo từ 15-30 giây, kéo tăm bông ra mẫu được giữ trong tuýp eppendorf 1,5ml có chứa 0,5 ml dung dịch ED5 bảo quản ở 4 o C và đưa về phòng thí nghiệm trong vòng 2- 3 giờ và thực hiện phản ứng realtime PCR trong vòng 24 giờ. Đối với bệnh nhân là nữ: Dùng tăm bông tiếp theo đưa sâu vào ống cổ tử cung 2 cm, xoay tăm bông và miết tăm bông vào thành ống cổ tử cung từ 15 đến 30 giây Khi kéo tăm bông ra không chạm vào vách âm đạo Mẫu phết cổ tử cung được giữ trong tuýp eppendorf 1,5ml có chứa 0,5 ml dung dịch ED5 bảo quản ở 4 o C và đưa về phòng thí nghiệm trong vòng 2- 3 giờ và thực hiện phản ứng realtime PCR trong vòng 24 giờ.
Tại phòng thí nghiệm, bệnh phẩm được bảo quản ở -20 o C.
2.3.3 Kỹ thuật xét nghiệm bằng phương pháp sắc ký miễn dịch
- Đưa tất cả các thành phần của Kit thử và mẫu về nhiệt độ phòng trước khi tiến hành xét nghiệm
- Dựng ống nhỏ giọt 300àl hỳt thuốc thử A tới vạch sau đú nhỏ vào tube đựng mẫu
- Cho tăm bông có chứa mẫu bệnh phẩm vào ống đựng thuốc thử A (300 àl /ống) Dựng ngún tay cỏi và ngún trỏ giữ đỏy ống và xoay tăm bụng 10 lần.
- Đợi trong vòng 2 phút Dùng ngón tay cái và ngón trỏ giữ đáy ống và xoay tăm bông 10 lần.
- Giữ ống nhỏ giọt 600 àl thẳng đứng, hỳt thuốc thử B tới vạch sau đú nhỏ vào tube.
- Lấy hết phần dịch ra khỏi tăm bông bằng cách ấn chặt tăm bông vào phần giữa ống nghiệm Bỏ tăm bông ra khỏi ống.
- Đưa tất cả các thành phần của Kít thử và mẫu về nhiệt độ phòng trước khi tiến hành xét nghiệm
- Lấy thanh thử ra khỏi túi đựng, đặt lên khay inox phẳng và khô ráo
- Lắp nắp ống nhỏ giọt vào tube mẫu và nhỏ 4 – 5 giọt (khoảng 110 àl) mẫu tách chiết từ ống đựng mẫu vào giếng mẫu trên thanh thử
- Khi xét nghiệm bắt đầu, sẽ nhìn thấy màu đỏ tím di chuyển qua màng dọc theo thanh thử
- Đọc kết quả sau 15 phút Một vài trường hợp dương tính có thể cho kết quả sớm hơn.
Chú ý: Thời gian đọc kết quả như trên khi nhiệt độ phòng vào khoảng
15 - 30 o C Nếu nhiệt độ phòng dưới 15 o C thì thời gian đọc kết quả sẽ lâu hơnCác thuốc thử, thanh thử và mẫu phải để ở nhiệt độ phòng trước khi làm xét nghiệm
1- Kết quả âm tính: Trên cửa sổ kết quả chỉ xuất hiện 1 vạch màu đỏ tím:
“C” cho biết kết quả âm tính Kết quả âm tính có nghĩa là trong mẫu thử không có sự hiện diện của kháng nguyên C trachomatis.
2- Kết quả dương tính: Trên cửa sổ kết quả xuất hiện 2 vạch màu đỏ tím:
“C” và “T”, không phân biệt vạch nào xuất hiện trước tức là kết quả dương tính Kết quả dương tính nghĩa là trong mẫu thử có chứa kháng nguyên C. trachomatis.
3- Kết quả không có giá trị: Nếu vạch màu không xuất hiện hoặc chỉ xuất hiện 1 vạch “T” trên cửa sổ kết quả sau khi xét nghiệm, kết quả được xác định là không có giá trị Hướng dẫn quy trình xét nghiệm không được tuân thủ chặt chẽ hoặc test thử bị hỏng Mẫu cần phải xét nghiệm lại với thanh thử khác.
Những sai sót và xử trí:
-Dịch nhày ở niệu đạo nam giới và cổ tử cung nữ giới cần được lau sạch để tránh cho kết quả dương tính giả
-Bệnh phẩm để trong ống nghiệm khô có thể bảo quản trong tủ lạnh
2 – 8 o C không quá 72 giờ, không được để ngăn đá.
Hình 2.1 Quy trình kỹ thuật của phương pháp Test nhanh của hãng SD
2.3.4 Quy trình kỹ thuật xử lý và tách chiết DNA, chạy realtime PCR
- Lấy 500 àl bệnh phẩm cho vào tuýp eppendorf 1.5 ml, bổ sung 500 àl dung dịch TTE, vortex, ly tâm 13.000 vòng/ phút trong 3 phút, loại bỏ dịch nổi, giữ lại khoảng 200 àl dịch đỏy.
- Bổ sung 500 àl dung dịch PBS, vortex, ly tõm 13.000 vũng/ phỳt trong
3 phỳt, loại bỏ dịch nổi, giữ lại khoảng 200 àl dịch đỏy.
Votex mẫu/ nghiền mẫu rồi hút bào
200àl mẫu thờm vào tube
Hỳt 900 àl dung dịch1 vào tube
Votex ngắn rồi để yên 10 phút
Ly tâm 13000 vòng/ phút trong 10 phút àl mẫu thờm vào tube
Thờm 200 àl dung dịch 2, votex ngắn (xoỏy thật chặt nắp lọ dung dịch 2)
Hỳt 600 àl dung dịch 3 vào tube 1,5ml mới, hỳt 600 àl dịch nổi thêm vào tube
(lắc thật kỹ lọ dung dịch 3 trước khi hút, hút 10 lần lại phải nhắc lại)
(tuyệt đối không được hút màng Protein)
Trộn đều bằng lộn ngược xuôi, không votex, để yên 10 phút
(bước này có thể để vài giờ ở nhiệt độ âm)
(tuyệt đối không được hút màng Protein)
Ly tâm 13000 vòng/ phút trong 10 phút
(nếu để ở nhiệt độ âm thì trộn đều trước khi ly tâm)
Loại bỏ dịch nổi, thu cặn màu xanh (hoặc hồng)
Thờm 900 àl dung dịch 4, khụng trộn
Ly tâm 13000 vòng/phút trong 5 phút
Loại bỏ dịch nổi, thu cặn, để khô ở 60 oC trong 10-15 phút
Thực hiện phản ứng realtime PCR
-Thực hiện bước này với các tube PCR mix được giữ trong khay lạnh hoặc đá đang tan
-Chỉ lấy đủ số tube PCR mix cần thiết, cất PCR mix lại ngay rồi mới thực hiện các bước tiếp theo.
-Trước và sau khi đặt phản ứng PCR phải ly tâm nhẹ (spin down) tube để tất cả dung dịch nằm dưới đáy tube.
-Do máy realtime PCR đọc từ đáy của tube: viết ký hiệu mẫu trên nắp hoặc trên thân phần gần sát nắp
-Cho 5 àl chứng (+), chứng (-) hoặc dung dịch DNA tỏch chiết vào từng tube CHT rPCR Mix Phải kiểm tra chắc chắn phần dịch trong tip phải được cho hết vào tube Thực hiện mẫu nào chỉ mở nắp tube tương ứng Thực hiện xong đóng thật kỹ nắp tube ngay để tránh nguy cơ ngoại nhiễm Xong, đặt các tube vào máy realtime PCR (nhớ ly tâm).
-Bật máy realtime PCR, nhất là đèn của đầu đọc realtime ít nhất là 15 phút trước khi chạy chương trình Bật máy tính và chờ cho máy khởi động xong, gọi chương trình realtime PCR lên Phải kiểm tra chắc chắn máy realtime PCR và máy tính đã kết nối với nhau Chọn chức năng chờ cho đến khi “Heat lid” đạt 105 o C thì chương trình luân nhiệt mới bắt đầu.
-Cài đặt vị trí mẫu “Plate setup” trên phần mềm đúng với vị trí mẫu đã đặt trên máy realtime PCR.
-Với mẫu: chọn loại mẫu là “Unknown” Đặt tên và số tương ứng với ký hiệu của mẫu
-Với chứng dương và âm: Để kiểm tra nên chọn loại mẫu là
“Unknown”, không nên chọn “PTC – Possitive Control” và “NTC – Negative Control” Đặt tên “Chứng dương”, “Chứng âm” tương ứng.
-Chọn màu “TEXAS RED” và “HEX” cho mẫu, chứng dương và chứng âm.
-Màu “TEXAS RED” phát hiện trình tự mục tiêu CHT Màu “HEX” phát hiện trình tự chứng nội
-Cài đặt chương trình “Protocol” cho máy realtime PCR hoạt động: 1 chu kỳ 95 o C– 5 phút; 40 chu kỳ: 95 o C – 15 giây, 60 o C – 1 phút (chọn đọc kết quả vào bước này).
-Lưu file dữ liệu vào máy tính Nên chọn lưu ở phân vùng ổ cứng không cài hệ điều hành.
-Cho máy realtime PCR chạy chương trình.
-Sau khi kết thúc quá trình realtime PCR, chuyển sang chế độ
“Analysis” để phân tích kết quả Tùy loại máy, có thể phân tích đồ thị ở dạng
“Linear” hoặc dạng “Log” hoặc cả hai
-Phân tích chứng dương và âm: Chỉ chọn giếng chứng dương và âm,chọn màu TEXAS RED, rồi đến màu HEX Thí nghiệm đạt yêu cầu và tiếp tục các bước phân tích kết quả nếu: Chứng dương có đường biểu diễn tín hiệu huỳnh quang màu TEXAS RED tuyến tính vượt quá tín hiệu nền (đường biểu diễn dương tính) và đường biểu diễn tín hiệu huỳnh quang màu HEX dương tính hoặc thẳng và không vượt quá tín hiệu nền (đường biểu diễn âm tính),chứng âm có đường biểu diễn tin hiệu huỳnh quang âm tính với màu TEXASRED còn đường biểu diễn tín hiệu huỳnh quang màu HEX dương tính Những trường hợp khác: “xác định sự cố - nguyên nhân – khắc phục” hoặc liên hệ với nhà cung cấp.
-Phân tích mẫu: chọn màu TEXAS RED ứng với CHT Có thể phân tích đồ thị ở chế độ đã xử lý hoặc chế độ dữ liệu thô Nên chọn từng mẫu và phân tích ở chế độ dữ liệu thô để có kết quả chính xác nhất Mẫu có đường biểu diễn dương tính rõ ràng và bắt đầu từ chu kỳ 36 trở về trước ứng với tác nhân nào, kết luận “mẫu dương tính” với tác nhân đó Mẫu có đường biểu diễn dương tính rõ ràng và bắt đầu từ sau chu kỳ 36 ứng với tác nhân nào, kết luận
“mẫu dương tính dưới ngưỡng phát hiện” với tác nhân đó Mẫu có đường biểu diễn dương tính không rõ ràng và bắt đầu từ sau chu kỳ 36 với tác nhân nào, kết luận: “mẫu nghi ngờ” với tác nhân đó và đề nghị lấy lại mẫu để thực hiện xét nghiệm Mẫu có đường biểu diễn âm tính với tất cả tác nhân, kết luận
“Không tìm thấy vi khuẩn trong mẫu” Những trường hợp khác: xác địnhsự cố - nguyên nhân – khắc phục Những mẫu dương tính chỉ cần chọn màu TEXAS RED để phân tích, không cần quan tâm đến chứng nội, chứng nội có thể dương hoặc âm Những mẫu âm tính, chứng nội phải dương tính thì mới kết luận mẫu âm tính thực sự.
-In đồ thị kết quả: Chọn chứng âm, chứng nội và mẫu cần in đồ thị.
Thời gian và địa điểm
Nghiên cứu được tiến hành từ tháng 07/2019 đến tháng 30/10/2020. Địa điểm nghiên cứu: Bệnh viện Da Liễu Trung Ương.
Nghiên cứu được thực hiện trên những bệnh nhân đến khám các bệnh STIs có hội chứng tiết dịch niệu đạo, âm đạo tại bệnh viện Da liễu Trung Ương Bệnh nhân được các bác sĩ Da liễu khám và chỉ định làm xét nghiệm chẩn đoán C trachomatis Kỹ thuật xét nghiệm Test nhanh được thực hiện tại labo khoa xét nghiệm Vi Sinh – Nấm – Ký sinh trùng, kỹ thuật tách chiết DNA và xét nghiệm realtime PCR được thực hiện tại labo sinh học phân tử khoa Xét nghiệm Huyết học, Sinh hóa, Miễn dịch và Giải phẫu bệnh.
Đạo đức nghiên cứu
-Nghiên cứu chỉ được thực hiện sau khi được Hội đồng y đức trường Đại học Y Hà Nội và Bệnh viện Da liễu Trung ương thông qua và cho phép tiến hành.
-Các thông tin của bệnh nhân được tuyệt đối giữ bí mật bằng cách định mã số.
-Nghiên cứu này chỉ phục vụ cho bệnh nhân, ngoài ra không sử dụng vào bất kỳ mục đích gì khác.
Biến số chỉ số
-Đặc điểm chung: Giới tính, tuổi, trình độ học vấn, nghề nghiệp, địa dư.
-Tỷ lệ nhiễm C trachomatis, kết quả test nhanh (âm tính, dương tính),kết quả realtime PCR.
Xử lý và phân tích số liệu
-Số liệu được nhập và phân tích bằng SPSS 20.0
-χ2 Test và Fisher-test: χ2 test kiểm định sự khác biệt khi so sánh hai tỷ lệ giữa hai nhóm nghiên cứu trong cùng một thời điểm hoặc so sánh hai tỷ lệ tại thời điểm khác nhau trong cùng một nhóm nghiên cứu Trong trường hợp giá trị kỳ vọng của một số phân nhóm nhỏ (dưới 5), kiểm định chính xác Fisher được sử dụng để so sánh
-Kiểm định Student-t và kiểm định Mann-Whitney: Kiểm định sự khác biệt khi so sánh hai giá trị trung bình giữa hai nhóm nghiên cứu trong cùng một thời điểm hoặc giữa hai giá trị trung bình tại hai điểm khác nhau trong cùng một nhóm nghiên cứu.
-Các yếu tố liên quan đến tỷ lệ nhiễm C trachomatis được xác định bằng mô hình hồi quy đa biến
2.8 Sai số và cách khắc phục
+ Sai số trong quá trinh thu thập mẫu bệnh phẩm và thông tin bệnh nhân. + Sai số do quá trình bảo quản và vận chuyển mẫu bệnh phẩm.
+ Sai số do quy trình thực hiện kỹ thuật và phân tích kết quả, chạy chuẩn và vận hành máy
+ Sai số trong quá trình nhập liệu
Cách khắc phục sai số:
+ Tập huấn và thống nhất về các quy trình chuẩn từ khâu lấy mẫu bệnh phẩm, dán mã code, vận chuyển bảo quản mẫu, các quy trình tách chiết và xử lý mẫu.
+ Giám sát chặt chẽ trong quá trình thu thập và nhập số liệu.
CHƯƠNG 3 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU
Tổng số có 269 bệnh nhân tham gia vào nghiên cứu, kết quả nghiên cứu được trình bày như sau:
Tỷ lệ nhiễm C trachomatis
Bảng 3.1 Tỷ lệ phát hiện C trachomatis của hai kỹ thuật
TEST Số lượng (n) Tỷ lệ (%)
Test realtime PCR Âm tính 237 88,10
- Tỷ lệ test nhanh dương tính là 20,82%, âm tính chiếm 79,18%.
- Tỷ lệ test realtime PCR dương tính là 11,90%, âm tính chiếm 88,10%.
Thông tin chung về đối tượng nghiên cứu
Bảng 3.2 Thông tin chung về đối tượng nghiên cứu
TT Thông tin chung n Tỷ lệ %
Tuổi thấp nhất: 17; tuổi cao nhất 73;
Tự do/ nội trợ/ buôn bán 94 34,94
Nhận xét: Tuổi trung bình của ĐTNC là 31,87 ± 0,62, tuổi thấp nhất là 17 tuổi cao nhất là 73 Nhóm ĐTNC từ 20 - 29 tuổi chiếm tỷ lệ cao nhất 50,56% và nhóm dưới 19 tuổi chiếm tỷ lệ thấp nhất 2,97% Về trình độ học vấn, có 69,14% ĐTNC có trình độ là trung học phổ thông hoặc trung cấp nghề, chỉ 2,60% có trình độ sau đại học Về nơi ở: có 52,04% ĐTNC sống ở thành thị và 47,96% sống ở nông thôn.
Thông tin về giới của đối tượng nghiên cứu
Biểu đồ 3.1 Giới của đối tượng nghiên cứu Nhận xét: Nam giới chiếm tỷ lệ 64,32% và nữ giới chiếm 35,68%; tỷ lệ nam/ nữ chiếm 1,8 lần.
Thông tin chung về tình trạng hôn nhân và QHTD
Bảng 3.3 Thông tin chung về tình trạng hôn nhân và QHTD
TT Thông tin về bệnh n Tỷ lệ %
1 Tình trạng hôn nhân Độc thân 69 25,65
Gái mại dâm 17 6,32 Đồng giới 3 1,12
Số lượng bạn tình 6 tháng gần đây
Nhận xét: Trong 269 bệnh nhân có 200 người đã kết hôn (74,35%) và chỉ có
69 người chưa kết hôn (25,65%) Đa phần có QHTD với bạn tình (49,44%) và với vợ/chồng (43,12%), chỉ có 3 người (1,12%) báo cáo họ có quan hệ đồng giới Có 69,52% trường hợp có QHTD với 1 người trong vòng 6 tháng gần đây, 5,58% trường hợp có QHTD với 3 người và 4,46% có QHTD với trên 3 người Về đường QHTD: có 61,34% có đường quan hệ sinh dục-sinh dục,33,09% có đường quan hệ sinh dục-miệng và chỉ có 1,86% có quan hệ đường sinh dục - hậu môn
Tỷ lệ sử dụng bao cao su của đối tượng nghiên cứu
Biểu đồ 3.2 Tỷ lệ sử dụng bao cao su của đối tượng nghiên cứuNhận xét: Tỷ lệ có dùng bao cao suchiếm tỷ lệ thấp chỉ có 35,32%.
Đặc điểm lâm sàng và tỷ lệ nhiễm C trachomatis
Bảng 3.4 Đặc điểm lâm sàng của bệnh nhân nhiễm C trachomatis
T Thông tin về bệnh N Tỷ lệ
Kiểm tra SK/XN CLS 36 13,38
Hội chứng tiết dịch niệu đạo 106 39,41
Tiếp xúc và phơi nhiễm các bệnh LTQĐTD 10 3,72
2 Tính chất mủ âm đạo- niệu đạo Đục/lỏng 111 41,26
3 Số lượng BC/1 vi trường âm tính 112 41,64 dưới 5 115 42,75
Nhận xét: Có 106 bệnh nhân được chẩn đoán có hội chứng tiết dịch niệu đạo chiếm tỷ lệ cao nhất (39,41%), 10 bệnh nhân có tiếp xúc và phơi nhiễm với bệnh LTQĐTD chiếm tỷ lệ thấp nhất (3,72%) 41,26% các bệnh nhân này có dịch âm đạo/niệu đạo đục/lỏng và 58,74% có dịch âm đạo/niệu đạo trong /nhầy Về số lượng BC/1 vi trường trên 10 BC chiếm tỷ lệ thấp nhất (5,95%), từ 5 đến 10 BC chiếm tỷ lệ 9,67%, đa phần số lượng BC dưới 5 (42,75%) và âm tính (41,64%).
Phân tích một số yếu tố liên quan đến C trachomatis
Bảng 3.5 Mối liên quan giữa các yếu tố cá nhân và C trachomatis
Các yếu tố C trachomatis OR
(0,51 - 3,01) 0,41 CĐ/ ĐH/ Sau ĐH 7 (8,8) 61 (91,2) 1 0 Địa dư Thành thị 23 (16,4) 117 (83,6) 2,62
Nhận xét: Khi phân tích mối liên quan giữa một số yếu tố cá nhân với
C.trachomatis, chúng tôi không tìm thấy mối liên quan với các yếu tố tuổi, giới, trình độ học vấn và nghề nghiệp (p>0,05) Về địa dư: ĐTNC sống ở thành thị nhiễm C trachomatis cao gấp 2,62 lần so với ĐTNC sống ở nông thôn (p=0,013; 95%CI: 1,48-9,81)
Bảng 3.6 Mối liên quan giữa tính chất bệnh với C trachomatis
Các yếu tố C trachomatis OR
Tính chất dịch âm đạo/ niệu đạo Đục/lỏng 21 (21,2) 78 (78,8) 3,89
Trong/ nhầy hoặc không có 11 (6,5) 159 (93,5) 1
Sử dụng bao cao su
Nhận xét: Phân tích mối liên quan giữa tính chất bệnh với C. trachomatis cho thấy: khi nhiễm liên quan giữa tính chất bệnh với C. trachomatis thì dịch âm đạo/niệu đạo đục/lỏng cao gấp 3,89 lần so với tính chất dịch trong nhầy (p=0,000; 95%CI: 1,79-8,47) Số lượng bạch cầu/1 vi trường ≥ 5 ở bệnh nhân nhiễm liên quan giữa tính chất bệnh với C trachomatis cao gấp 23,87 lần so với bệnh nhân có số lượng BC< 5 (p=0,000; 95%CI: 9,93-57,54); không sử dụng BCS khi QHTD bị nhiễm C trachomatis cao gấp 4,01 lần so với có sử dụng BCS khi QHTD (p=0,002; 95%CI: 1,49-10,78)
Bảng 3.7 Mối liên quan giữa các yếu tố quan hệ tình dục và tình trạng hôn nhân với C trachomatis
Các yếu tố C trachomatis OR
Tình trạng hôn nhân Độc thân 8 (11,6) 61 (88,4) 1
QHTD Đồng giới/ gai mại dâm 12 (60,0) 8 (40,0) 17,16
Số lượng bạn tình trong 6 tháng gần đây
Từ 2 bạn tình trở lên 23 (30,7) 52 (69,3) 9,09
Không có hoặc 1 bạn tình
Sinh dục- miệng/ sinh dục - hậu môn/khác
Nhận xét: Khi phân tích mối liên quan giữa các yếu tố quan hệ tình dục và tình trạng hôn nhân với C trachomatis chúng tôi ghi nhận các yếu tố tiền sử QHTD, số lượng bạn tình trong 6 tháng gần đây và sử dụng BCS khi QHTD có mối liên quan với nhiễm C trachomatis cụ thể như sau: ĐTNC có tiền sử QHTD với gái mại dâm và đồng giới nhiễm C trachomatis cao gấp 17,16 lần so với ĐTNC có quan hệ với vợ/chồng/bạn tình (p=0,000; 95%CI: 6,29- 46,90); ĐTNC có từ 2 bạn tình trở lên bị nhiễm C trachomatis cao gấp 9,092 lần so với ĐTNC chỉ có 1 bạn tình/ không có bạn tình.
BÀN LUẬN
Tỷ lệ nhiễm C trachomatis ở bệnh nhân có hội chứng tiết dịch niệu đạo, âm đạo đến khám tại Bệnh viện Da liễu Trung ương
Xét nghiệm Test nhanh là phương pháp sử dụng kháng thể đặc hiệu kháng lại lipopolysacchride (LPS) của vi khuẩn C trachomatis để phát hiện sự có mặt của C trachomatis có trong bệnh phẩm Là phương pháp có độ nhạy không cao, đạt khoảng 60 – 85% Tuy nhiên độ đặc hiệu có thể đạt 99%. Ưu điểm của phương pháp là quy trình kỹ thuật đơn giản, cho kết quả nhanh, có thể sàng lọc được số lượng lớn mẫu bệnh phẩm Kết quả trong nghiên cứu của chúng tôi, tỷ lệ test nhanh dương tính là 20,82%, tương tự nghiên cứu của Trần Thị Nga cho tỷ lệ test nhanh dương tính là 13,36% 51 Nghiên cứu của chúng tôi có tỷ lệ dương tính với test nhanh khá cao, cao hơn so với nghiên cứu của Phạm Thúy Ngọc 9,03% 48 hay của Olivia Peuchant là 1,6% 53 nhưng lại thấp hơn so với kết quả của Ninh Văn Minh và Nguyễn Thị Tuyết năm 2013 phát hiện nhiễm C trachomatis là 33,3% bằng kỹ thuật test nhanh
36 ; chúng tôi cho rằng nguyên nhân kết quả nghiên cứu của chúng tôi khác so với các nghiên cứu ở nước ngoài có thể do đặc điểm của từng nước, từng khu vực Chẳng hạn, Pháp là một nước rất phát triển ở khu vực châu Âu, việc giáo dục sức khỏe tình dục được tiến hành từ sớm và liên tục Các kỹ thuật xét nghiệm hiện đại, điều kiện vệ sinh tốt hơn, lối sống lành mạnh, an toàn Một phần nguyên nhân là do cỡ mẫu các nghiên cứu khác lớn hơn cỡ mẫu của chúng tôi rất nhiều (nghiên cứu ở Pháp là 1445 bệnh nhân) Cũng có thể là do thời gian sử dụng kháng sinh trong các nghiên cứu khác nhau.Trong nghiên cứu của chúng tôi, tiêu chuẩn loại trừ là bệnh nhân đang điều trị kháng sinh, còn trong các nghiên cứu của Olivia Peuchant thời gian dừng sử dụng kháng sinh không phải là 2 ngày Một phần nguyên nhân có thể do việc sử dụng test nhanh trong các nghiên cứu khác nhau Trong test nhanh, có thể gây ra dương tính giả do phản ứng chéo hoặc âm tính giả do lấy không đủ mẫu (không đủ tế bào) Test nhanh chỉ mang ý nghĩa đánh giá chứ không đi sâu vào đánh giá độ nhạy và độ đặc hiệu của test nhanh Việc triển khai test nhanh để khuyến cáo cho các cơ sở y tế không đủ điều kiện thực hiện các phương pháp chẩn đoán tốt hơn 53
Xét nghiệm realtime PCR là kỹ thuật sinh học phân tử đã được ứng dụng rộng rãi trong y học để phát hiện sự tồn tại của các vi sinh vật trong các mẫu bệnh phẩm, độ nhạy trên 90%, độ đặc hiệu tương đương với nuôi cấy tế bào
10 Kỹ thuật realtime PCR có ưu điểm là có thể áp dụng ở những nơi không có khả năng nuôi cấy, xét nghiệm không đòi hỏi vi khuẩn còn sống, thời gian xét nghiệm ngắn (trong 1 ngày) Kết quả trong nghiên cứu của chúng tôi, tỷ lệ test nhanh dương tính là 11,90% tất cả bệnh nhân test realtime PCR có kết quả dương tính thì làm test nhanh đều cho kết quả đồng thời dương tính, tỷ lệ dương tính qua kỹ thuật realtime PCR này thấp hơn so với nghiên cứu của Trần Hậu Khang là 16,21% 31 ; nghiên cứu của Nguyễn Thị Thanh Hà là 51,3% 35 sự khác biệt về tỷ lệ nhiễm C trachomatis khác nhau giữa các nghiên cứu cũng là điều dễ hiểu vì những đối tượng càng gần với các yếu tố nguy cơ thì sẽ có tỷ lệ nhiễm C trachomatis cao, nguyên cứu của chúng tôi và Trần Hậu Khang là những nghiên cứu mà đối tượng nghiên cứu rộng hơn, cả nam và nữ có hội chứng tiết dịch (niệu đạo, âm đạo) nên sẽ có tỷ lệ nhiễm
C trachomatis dương tính thấp hơn nghiên cứu của Nguyễn Thị Thanh Hà khi đối tượng nghiên cứu khu trú là đối tượng đến khám phụ khoa; hay nghiên cứu của Achchhe L Patel và cộng sự trên 593 phụ nữ đế khám phụ khoa tại bệnh viện Hindu Rao ở Delhi Ấn Độ cho thấy tỷ lệ dương tính với test PCR là 23,0% tỷ lệ này cao hơn nhiều so với nghiên cứu của chúng tôi do đối tượng đến với nghiên cứu của Achchhe L Patel là những phụ nữ mắc bệnh viêm nhiễm phụ khoa nặng, có thể do rào cản văn hóa Đạo Hồi nên khi có vấn đề nặng về phụ khoa thì đối tượng ở đây mới đi khám bệnh; ngoài ra tác giả cũng sử dụng bộ kit của Multi Well Plate (MWP) bộ kit này có độ nhạy cao và có thể phát hiện DNA C trachomatis thấp tới 10 fg Các độ nhạy phân giải của PCR nội bộ là 94,5% so với 88,0% của xét nghiệm DFA Độ đặc hiệu cao (98,4%) và độ nhạy (97,1%) 13 Trong khi đó có sử dụng bao cao su khi quan hệ tình dục chỉ có 35,32% thấp hơn nghiên cứu của Nguyễn Thị Thanh Hà là71,21% 32 Việc sử dụng bao cao su khi quan hệ tình dục ngoài việc phòng tránh nguy cơ mang thai ngoài ý muốn, còn có tác dụng tác các bệnh lây nhiễm qua đường tình dục, trong nghiên cứu của chúng tôi quan hệ không chung thủy lên đến 27,88% và có đến 64,68% không sự dụng bao cao su; đây cũng là một trong những thách thức cho các nhà truyền thông giáo dục sức khỏe, vì đa phần đối tượng không sự dụng bao cao su là do sở thích, dù biết tác hại của việc quan hệ không an toàn mà không sử dụng biện pháp phòng tránh an toàn Chính vì vậy cần tuyên truyền và có những hình thức tuyên truyền tác động mạnh mẽ hơn đến đối tượng đích như gái mại dâm phải thực hiện quan hệ tình dục mua bán bắt buộc sử dụng bao cao su.
Thông tin chung về đối tượng nghiên cứu
Độ tuổi trung bình của ĐTNC là 31,87 ± 0,62, tuổi thấp nhất là 17, tuổi cao nhất là 73 Nhóm ĐTNC từ 20 - 29 tuổi chiếm tỷ lệ cao nhất 50,56% và nhóm dưới 19 tuổi chiếm tỷ lệ thấp nhất 2,97%; tỷ lệ này thấp hơn nghiên cứu của Trần Hậu Khang và cộng sự nghiên cứu trên 555 bệnh nhân tại bệnh viện
Da liễu Trung ương cho thấy tỷ lệ bệnh nhân trên 25 tuổi chiếm 77,56% 31 , nghiên cứu của Phạm Thúy Ngọc độ tuổi từ 20 – 30 chiếm 62,96%, 21,30% bệnh nhân từ 31 – 40 tuổi và chỉ còn 3,24% bệnh nhân trên 40 tuổi 48 ; hay nghiên cứu của Sandra Dudareva-Vizule và cộng sự cũng đã chỉ ra tỷ lệ xét nghiệm dương tính với C trachomatis thường mắc cao hơn ở những phụ nữ và nam giới dưới 25 tuổi 49 , James B Mahony và cộng sự (1992) nghiên cứu tỷ lệ dương tính C trachomatis ở nam giới ở những địa điểm được lựa chọn tại Hoa Kỳ tỷ lệ mắc cao nhất được quan sát thấy ở nam giới thử nghiệm tại các cơ sở giam giữ trẻ vị thành niên (7,9%) và người lớn (6,8%), ở người da đen (6,7%), 15-19 tuổi (6,1%) và 20-24 tuổi (6,5%) 18 ; sự khác biệt về độ tuổi của các nghiên cứu phần lớn do ở Việt Nam độ tuổi quan hệ tình dục có thể thấp hơn so với nghiên cứu của Sandra Dudareva-Vizule tại Đức, việc quan hệ tình dục và quan hệ không an toàn một phần dẫn đến việc mắc bệnh 49 Trình độ học vấn chủ yếu là tốt nghiệp THPT học trung cấp, nghề chiếm 69,14%, 22,68% học cao đẳng, đại học và 2,60% bệnh nhân học sau đại học, tỷ lệ này cao hơn rất nhiều so với nghiên cứu Nguyễn Thị Thanh Hà 30,05% trình độ THPT 32 , sự khác biệt có thể do địa điểm và thời gian nghiên cứu của tác giả và chúng tôi ở 2 vùng miền khác nhau; trình độ học vấn cao giúp các bệnh nhân có thể tiếp cận được với những kiến thức về nhiễm Chlamydia trachomatis khi được các nhân viên y tế phỏng vấn và trao đổi, bệnh nhân có thể tìm hiểu các thông tin liên quan đến bệnh lý đồng thời cũng thuận tiện cho nhân viên y tế tư vấn về bệnh tật
Nơi ở, tỷ lệ ở nông thôn chiếm tỷ lệ 47,96% và thành thị chiếm 52,04% tỷ lệ về địa dư ở thành thị và nông thôn tương đương nhau, có thể thấy do nghiên cứu thực hiện tại bệnh viện tuyến trung ương lại là thành phố trực thuộc trung ương nên sẽ có rất nhiều đối tượng đến khám, bên cạnh đó các vùng nông thôn lân cận, rất gần Hà Nội và lựa chọn bệnh viện điều trị. Nghiên cứu của Trần Nguyễn Thị Hòa (2011) nghiên cứu tại bệnh viện Đại học Y Thái Bình kết luận nông thôn cao hơn thành phố và tỷ lệ dương tính ở nông thôn là 37,8% và Nguyễn Thị Thanh Hà (2012) tỷ lệ nông thôn, ngoại thành là 66,32% 32 , 33 Tỷ lệ thành thị trong nghiên cứu của chúng tôi là 52,0% cao hơn nông thông do nghiên cứu được thực hiện ở Hà Nội là một trong những thành phố lớn nhất cả nước nên việc các đối tượng ở thành thị tiếp cận với dịch vụ y tế và truyền thông sẽ cao hơn nông thôn, các đối tượng ở thành phố sẽ quan tâm, chăm sóc sức khỏe hơn.
Nghề nghiệp trong nghiên cứu của chúng tôi chia làm 02 nhóm lớn, nhóm công nhân, nông dân chiếm 37,17% và nhóm nội trợ, buôn bán, tự do chiếm 34,94%; tỷ lệ học sinh chỉ có 6,69% và công chức chiếm 5,95%; sự khác biệt giữa các nhóm có thể do, nhóm lao động tự do và công nhân đi làm xa nhà nên có thể phát sinh quan hệ tình dục ngoài luồng, dễ nhiễm các mặt bệnh tình dục; trong khi đó học sinh, sinh viên thì độ tuổi thấp nên tỷ lệ có quan hệ tình dục sẽ thấp hơn các đối tượng còn lại nên ít mắc bệnh hơn Đối tượng cán bộ nhân viên nhà nước, có kiến thức và quan hệ tình dục sẽ an toàn,bảo vệ bản thân hơn So với nghiên cứu của Lê Đức Tâm (2017), 28,32% là nội trợ; kế đó là buôn bán 21,95%, nông dân chiếm 16,24%, cán bộ viên chức chiếm 12,28%, làm nghề tự do chiếm 17,79% (nhóm nghề nghiệp không ổn định), phụ nữ là công nhân chiếm tỷ lệ thấp (3,42%), qua đó, nghề nghiệp của đối tượng đa dạng, đủ các thành phần nhưng nhiều nhất vẫn là nội trợ, buôn bán và nghề nông, là những nghề phù hợp với địa điểm nghiên cứu của Đồng bằng sông Cửu Long 50 ; hay nghiên cứu của Wong H.T.H thì tỷ lệ học sinh sinh viên chiếm lên đến 35% 11 , có thể nghiên cứu của tác giả thực hiện tại Hông Kong một đất nước phát hiên nên việc quan hệ tình dục sớm trong độ tuổi đi học tăng cao so với nghiên cứu của chúng tôi.
Biểu đồ 3.2 cho thấy có 64,32% là nam giới, nữ giới chiếm 35,68%; tỷ lệ nam/nữ chiếm 1,75/1; tỷ lệ giới trong nghiên cứu của chúng tôi tương tự nghiên cứu của Trần Hậu Khanglà 63,06% 31 , giới nam trong nghiên cứu của chúng tôi cao hơn nghiên cứu của Trần Thị Nga (2018) với nam giới chiếm52,36% 51 ; sự khác biệt về tỷ lệ của hai giới có thể do ở nữ giới có nhiều nguyên nhân gây tiết dịch âm đạo, trong khi đó ở nam giới tiết dịch niệu đạo,đái khó, dấu hiệu viêm mào tinh hoàn và viêm tiền liệt tuyến chủ yếu liên quan đến C trachomatis.
Thông tin chung về tình trạng hôn nhân và QHTD
Bệnh Chlamydia là một bệnh lây truyền qua đường tình dục phổ biến ở nước ta và nhiều nước trên thế giới do vi khuẩn Chlamydia trachomatis gây nên 1, 2 C trachomatis không được tìm thấy trong tự nhiên chỉ được tìm thấy trong nội tế bào của con người C trachomatis lây truyền chủ yếu qua đường quan hệ tình dục không an toàn như đường âm đạo, hậu môn và đường miệng; chính vì vậy việc đánh giá trình trạng hôn nhân và quan hệ tình dục của đối tượng nghiên cứu sẽ giúp chúng ta có cái nhìn tổng quát về tỷ lệ mắc bệnh và sẽ có phương pháp điều trị thích hợp cho từng nhóm đối tượng Trong nghiên cứu của chúng tối tình trạng hôn nhân của chúng tôi chủ yếu các bệnh nhân đến khám đã kết hôn chiếm 74,35% tương đương nghiên cứu của Phạm ĐăngBảng là 70,09% 52 , quan hệ tình dục làm tăng nguy cơ tiết dịch ở nam và nữ giới, chính vì vậy tỷ lệ bệnh nhân đã kết hôn đến khám có tỷ lệ lớn So với nghiên cứu của Wong H.T.H về việc sàng lọc và phát hiện Chlamydia trachomatis ở những phụ nữ lao động ở Hồng Kong cho thấy 21,21% độc thân, 40,0% đã kết hôn, 33,5% góa chồng, ly dị, ly thân 11 ; trong nghiên cứu của chúng tôi cũng như của tác giả Phạm Đăng Bảng đều không có đối tượng góa, ly dị, ly thân có tỷ lệ cách biệt so với nghiên cứu của Wong, sự khác biệt này có thể do sự phát triển của hai đất nước khác nhau, quan điểm về hôn nhân cũng khác nhau
Chủ yếu các đối tượng đang quan hệ với bạn tình hoặc vợ/chồng chiếm tỷ lệ lần lượt là 49,44% và 43,12%; các tỷ lệ về quan hệ đồng giới hay gái mại dâm thấp Số lượng bạn tình trên 1 người chiếm tỷ lệ 27,88% cao hơn rất nhiều so với nghiên cứu của Nguyễn Thị Thanh Hà là 8,86% 32 , nghiên cứu của Lê Đức Tâm là 11,11% 50 , việc quan hệ tình dục không chung thủy làm tăng nguy cơ lây nhiễm các bệnh qua đường tình dục, trong đó có đến 6,3% bệnh nhân quan hệ với gái mại dâm và 1,1% bệnh nhân quan hệ đồng giới. Việc quan hệ với gái mại dâm hoặc quan hệ đồng giới không sự dụng các biện pháp an toàn càng làm tăng nguy cơ lây nhiễm các bệnh qua đường tình dục.
Quan hệ đường sinh dục – miệng chiếm đến 33,09%, sinh dục – hậu môn cũng có đến 1,86%.
Đặc điểm lâm sàng và tỷ lệ nhiễm C trachomatis
Bệnh do C trachomatis gây nên các triệu chứng lâm sàng không điển hình dễ nhầm với bệnh do các tác nhân gây bệnh khác như: viêm niệu đạo, âm đạo do lậu cầu, Trichomonas vaginalis, nấm Candida albican và các vi khuẩn khác như U urealyticum, M genitalium, HSV Dựa vào các đặc điểm lâm sàng từ đó có các chẩn đoán phù hợp để tìm ra nguyên nhân mắc bệnh Tỷ lệ bệnh nhân đến vì hội chứng tiết dịch niệu đạo chiếm tỷ lệ lớn nhất 39,41% tiếp đến là viêm niệu đạo mạn chiếm 18,22% tỷ lệ này thấp với nghiên cứu của Trần Hậu Khang viêm niệu đạo 56,21% 31 Có 13,38% bệnh nhân được phát hiện do kiểm tra sức khỏe, hoặc thực hiện các kết quả xét nghiệm cận lâm sàng, cho thấy việc việc các bệnh nhân chủ động đi khám sức khỏe ngày càng lớn Có 3,72% các đối tượng đi khám do tiếp xúc hoặc phơi nhiễm với các bệnh LTQĐTD phù hợp với tỷ lệ bệnh nhân đã từng quan hệ với gái mại dâm là 6,32% 19,70% được phát hiện là do các chẩn đoán khác do trước quá trình đi khám bệnh nhân cũng đã có hội chứng về viêm tiết dịch Sự khác biệt của hai nghiên cứu phần lớn do nghiên cứu của tác giả lựa chọn đối tượng đích là đã bị viêm niệu đạo đến khám và điều trị; trong khi đó nghiên cứu của chúng tôi nam giới đến khám và điều trị có rất nhiều lý do, có đến 8,77% các đối tượng được phát hiện ra do đi khám sức khỏe định kỳ, hoặc do xét nghiệm nước tiểu Tính chất mủ của âm đạo/niệu đạo chủ yếu là trong và nhầy chiếm 58,74% thấp hơn nghiên cứu của nghiên cứu của Trần Hậu Khang là 65,79%
31, tỷ lệ này có thể do các hội chứng đi khám và phát hiện bệnh của chúng tôi chỉ có 39,41% là tiết dịch niệu đạo và 5,58% là viêm mào tinh là những bệnh cấp tính nên tính chất mủ cũng mới, chỉ mới bị nhầy và trong; tỷ lệ bệnh nhân vị viêm niệu đạo, âm đạo mạn có thể dẫn đến tỷ lệ tính chất mủ đục và lỏng chiếm 41,26%.
Số lượng bạch cầu/1 vi trường: dưới 5 có 42,75% và có đến 41,64% là âm tính; tỷ lệ này cao hơn so với nghiên cứu của Phạm Thúy Ngọc tỷ lệ bạch cầu dưới 5 là 23,61% và bạch cầu âm tính là 5,09% 48 , thấp hơn nghiên cứu của Trần Thị Nga chỉ số bạch cầu trên 10 chiếm tỷ lệ cao nhất là 30,32%, thấp nhất là 20,47% ở bệnh nhân có chỉ số bạch cầu âm tính Ở nhóm bệnh nhân có chỉ số bạch cầu ≤5 và trên 5 chiếm tỷ lệ 28,74 % và 20,47% 51 Giải thích kết quả này, chúng tôi cho rằng, bệnh nhân nhuộm soi dịch tiết có chỉ số bạch cầu trên 10 là những bệnh nhân viêm nhiễm cấp tính, dịch tiết ra nhiều gây ngứa ngáy, khó chịu ảnh hưởng đến chất lượng cuộc sống nên bệnh nhân nên đã đi khám Những bệnh nhân nhuộm soi dịch tiết không thấy bạch cầu, hoặc thấy ít bạch cầu trên một vi trường là bệnh nhân viêm nhiễm mạn tính, nên có thể đã sử dụng thuốc tự điều trị nên số lượng bạch cầu giảm hoặc không có.
Tỷ lệ bạch cầu trên 10 BC/1 vi trường chiếm 5,95%.
Phân tích một số yếu tố liên quan đến C trachomatis
Tỷ lệ bệnh nhân ≤ 30 tuổi có tỷ lệ dương tính 13,9% với C trachomatis cao hơn những bệnh nhân lớn hơn 30 tuổi là 10,4%, tuy nhiên sự khác biệt không có ý nghĩa thống kê Theo nghiên cứu của Trần Thị Hòa trong số bệnh nhân dương tính, nhóm dưới 25 tuổi có tỷ lệ nhiễm vi khuẩn C Trachomatis cao nhất, chiếm 40.6% 33 , nghiên cứu của Trần Hậu Khang tỷ lệ nhiễm
C.trachomatis ở nhóm tuổi dưới 25 là 28,3% cao hơn có ý nghĩa thống kê so với nhóm tuổi trên 25 là 5% (p < 0,01) 31 , hay nghiên cứu của Wong H.T.H cho thấy độ tuổi giữa các nhóm phụ nữ làm nghề trong vũ trường hoặc làm dịch vụ massage có sự khác biệt với ý nghĩa thống kê p < 0,001 11 Tuổi là yếu tố nguy cơ chính quan trọng, tần suất tăng cao ở nhóm tuổi hoạt động tình dục đặc biệt trên nhóm tuổi vị thành niên do yếu tố giải phẩu học dễ tổn thương niêm mạc cổ tử cung khi giao hợp làm tăng khả năng lây nhiễm bệnh lây truyền qua đường tình dục Nam giới có tỷ lệ dương tính chiếm 12,7% cao hơn nữ giới 10,4% tuy nhiên sự khác biệt này không có ý nghĩa thống kê, trong khi đó nghiên cứu của Trần Hậu Khang tỷ lệ nhiễm C trachomatis của nam giới cũng cao hơn so với nữ giới là 19,7% so với 10,2% Sự khác biệt này là có ý nghĩa thống kê (p < 0,01) 31 , lý giải cho kết quá này chúng tôi cho rằng do nam giới có lối sống sinh hoạt khác với nữ giới và có số lượng bạn tình nhiều hơn mà đây là bệnh lây truyền qua đường tình dục nên nam giới có khả năng nhiễm cao hơn nữ giới Đặc biệt với cuộc sống ngày càng phát triển như hiện nay thì vấn đề quan hệ tình dục bừa bãi ngày càng nhiều, đây cũng chính là nguyên do các BLTQDTD ngày càng gia tăng Mặt khác do tâm lý người phụ nữ thường rất ngại khi đi khám phụ khoa chính vì vậy số lượng người đi khám thấp hơn nên khả năng phát hiện bệnh cũng thấp hơn so với nam giới Đặc biệt đối với người phụ nữ Á Đông thì điều này càng được biểu hiện rõ Trình độ học vấn ≤ THPT có tỷ lệ dương tính là 12,4% thấp hơn những bệnh nhân có trình độ học vấn > THPT là 8,8%; có thể thấy bệnh nhân càng có học thức lớn sẽ càng dự phòng được bệnh tật và có hiểu biết hơn về những vấn đề BLTQDTD Tuy nhiên không tìm thấy sự khác có ý nghĩa thống kê ở hai nhóm Những BN có nghề nghiệp là cán bộ viên chức và học sinh có tỷ lệ dương tính 5,9% thấp hơn so với những nhóm nghề còn lại chiếm 12,8% Những BN sống ở thành thị có tỷ lệ dương tính chiếm 16,4% cao hơn rất nhiều so với những bệnh nhân sống ở nông thông chiếm 6,9%, sự khác biệt này có ý nghĩa thống kê với p < 0,05 ĐTNC sống ở thành thị nhiễm
C trachomatis cao gấp 2,62 lần so với ĐTNC sống ở nông thôn (p=0,013;
95%CI: 1,48-9,81) Kết quả này tương đương với nghiên cứu của Phạm Văn Đức, những BN sống ở thành thị có tỷ lệC trachomatis cao gấp 1,31 lần so với ĐTNC sống ở nông thôn (p=0,004; 95%CI: 1,21-1,42) 28 Trong nghiên cứu của chúng tôi nhận thấy sống tại thành phố có mối liên quan với tỷ lệ C. trachomatis, có lẽ lối sống thành thị thay đổi, BN giao tiếp rộng và quan hệ tình dục được chấp nhận dễ dàng và sớm hơn nông thôn.
Mối liên quan về các yếu tố quan hệ tình dục và tình trạng hôn nhân đối với C trachomatis cho thấy tình trạng hôn nhân và đường QHTD không có mối liên quan đến tỷ lệ mắc C trachomatis, kết quả này khác với nghiên cứu của Trần Hậu Khang khi nhóm bệnh nhân độc thân, tỷ lệ PCR CT dương tính cao hơn hẳn nhóm bệnh nhân có gia đình là 25,8% so với 12,3% Sự khác biệt này có nghĩa thống kê (p < 0,01) 31 Các yếu tố tiền sử QHTD, số lượng bạn tình trong 6 tháng gần đây và sử dụng BCS khi QHTD có mối liên quan với tỷ lệ nhiễm C trachomatis cụ thể như sau: ĐTNC có tiền sử QHTD với gái mại dâm và đồng giới nhiễm C trachomatis cao gấp 17,18 lần so với ĐTNC có quan hệ với vợ/chồng/bạn tình (p=0,000; 95%CI: 6,290-46,900); ĐTNC có từ
2 bạn tình trở lên bị nhiễm C trachomatis cao gấp 9,09 lần so với ĐTNC chỉ có 1 bạn tình/ không có bạn tình; không sử dụng BCS khi QHTD bị nhiễm C. trachomatis cao gấp 4,01 lần so với có sử dụng BCS khi QHTD (p=0,002;
95%CI: 1,49-10,78) Tương đương với nghiên cứu của Phạm Văn Đức số trường hợp nhiễm khi sử dụng thường xuyên bao cao su 1/13(7,7%) so với sử dụng không thường xuyên 2/93(2,2%) và không bao giờ sử dụng bao cao su trong quan hệ là 13/97(13,4%) Kiểm định chích xác Fisher thấy có mối liên quan giữa viêm cổ tử cung do C trachomatis với việc không sử dụng hay không dùng thường xuyên bao cao su trong quan hệ với (p=0,01) 39 Tuy nhiên nghiên cứu của Lâm Bình Diễm lại có kết quả việc sự dụng BCS không có mối liên quan đến tỷ lệ nhiễm C trachomatis 54 Thực tế việc sự dụng BCS không những có tác dụng phòng tránh thai còn có tác dụng phòng tránh các bệnh lây nhiễm qua QHTD
Phân tích mối liên quan giữa tính chất bệnh với C trachomatis cho thấy:khi nhiễm liên quan giữa tính chất bệnh với C trachomatis thì dịch âm đạo/niệu đạo đục/lỏng cao gấp 3,89 lần so với tính chất dịch trong nhầy (p=0,000; 95%CI: 1,79-8,47) Số lượng bạch cầu/1 vi trường ≥ 5 ở bệnh nhân nhiễm liên quan giữa tính chất bệnh vớiC trachomatis cao gấp 23,87 lần so với bệnh nhân có số lượng BC< 5 (p=0,000; 95% CI: 9,93-57,54) Kết quả này tương đương với nghiên cứu của Phạm Đăng Bảng tính chất dịch tiết đục ở bệnh nhân nam có tỷ lệ nhiễm C trachomatis 27,9% cao hơn những bệnh nhân có tính chất dịch trong, có sự khác biệt có ý nghĩa thống kê về tỷ lệ nhiễm C trachomatis với p < 0,05 52
Mô hình hồi quy đa biến
Kết quả phân tích đa biến trong mô hình cho thấy các yếu tố tiền sử quan hệ tình dục, số lượng bạn tình, sử dụng bao cao su, tính chất dịch âm đạo- niệu đạo và số lượng bạch cầu/1 vi trường có liên quan chặt chẽ với C. trachomatis.
Quan hệ tình dục đồng giới/gái mại dâm nhiễm C trachomatis cao gấp 36,67 lần so với QHTD với vợ/chồng/bạn tình/không có QHTD (95%CI: 3,71- 362,19, p= 0,002) Quan hệ tình dục với từ hai bạn tình trở lên nhiễm C. trachomatis cao gấp 5,92 lần so với QHTD với 1 bạn tình/không có bạn tình
(95%CI: 1,76 – 19,98, p= 0,004) Không sử dụng BCS khi QHTD nhiễm C. trachomatis cao gấp 5,03 lần so với có sử dụng BCS khi QHTD (95%CI: 1,27
- 20,01, p= 0,022) Dịch âm đạo/niệu đạo đục - lỏng ở bệnh nhân nhiễm C. trachomatis cao gấp 4,82 lần so với dịch trong - nhầy (95%CI: 1,38 - 16,80, p= 0,014) Số lượng bạch cầu/1 vi trường ≥ 5 ở bệnh nhân nhiễm C. trachomatis cao gấp 20,12 lần so với số lượng bạch cầu/1 vi trường < 5
