Đánh giá hiệu quả điều trị của tế bào gốc trung mô và thuốc plenastem trên mô hình chuột tổn thương gan do tắc ống dẫn mật

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC MỞ THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH ∞0∞ NGUYỄN MINH THƯ ĐÁNH GIÁ HIỆU QUÂ ĐIỀU TRỊ CỦA TẾ BÀO GỐC TRUNG MÔ VÀ THUỐC PLENASTEM® TRÊN MƠ HÌNH CHUỘT TỔN THƯƠNG GAN Tai Lieu Chat Luong DO TẮC ỐNG DẪN MẬT LUẬN VĂN THẠC SĨ CƠNG NGHỆ SINH HỌC TP HỒ CHÍ MINH, NĂM 2021 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC MỞ THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH ∞0∞ NGUYỄN MINH THƯ ĐÁNH GIÁ HIỆU QUÂ ĐIỀU TRỊ CỦA TẾ BÀO GỐC TRUNG MƠ VÀ THUỐC PLENASTEM® TRÊN MƠ HÌNH CHUỘT TỔN THƯƠNG GAN DO TẮC ỐNG DẪN MẬT Chuyên ngành: Công nghệ sinh học Mã số chuyên ngành: 42 02 01 LUẬN VĂN THẠC SĨ CÔNG NGHỆ SINH HỌC Giảng viên hướng dẫn : PGS.TS TRƯƠNG HÂI NHUNG TP HỒ CHÍ MINH, NĂM 2021 TRƯỜNG ĐẠI HỌC MỞ THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH KHOA ĐÀO TẠO SAU ĐẠI HỌC CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨAVIỆT NAM Độc lập – Tự – Hạnh phúc GIẤY XÁC NHẬN Tôi tên : NGUYỄN MINH THƯ Ngày sinh: 02/01/1984 Nơi sinh: TP.HCM Chuyên ngành: Công nghệ sinh học Mã học viên : 18884202010006 Tơi đồng ý cung cấp tồn văn thơng tin khóa luận tốt nghiệp hợp lệ quyền cho Thư viện trường đại học Mở Thành phố Hồ Chí Minh Thư viện trường đại học Mở Thành phố Hồ Chí Minh kết nối tồn văn thơng tin khóa luận tốt nghiệp vào hệ thống thơng tin khoa học Sở Khoa học Công nghệ Thành phố Hồ Chí Minh Ký tên (Ghi rõ họ tên) CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập – Tự – Hạnh phúc Ý KIẾN CHO PHÉP BẢO VỆ LUẬN VĂN THẠC SĨ CỦA GIẢNG VIÊN HƯỚNG DẪN Giảng viên hướng dẫn: PGS.TS Trương Hải Nhung Học viên thực hiện: Nguyễn Minh Thư Lớp: MBIO018A Ngày sinh: 02-01-1984 Nơi sinh: TP.HCM Tên đề tài: Đánh giá hiệu điều trị tế bào gốc trung mô thuốc Plenastem® mơ hình chuột tổn thương gan tắc ống dẫn mật Ý kiến giáo viên hướng dẫn việc cho phép học viên Nguyễn Minh Thư bảo vệ luận văn trước Hội đồng: Về nội dung & đánh giá thực nhiệm vụ nghiên cứu đề tài: Bệnh lý tổn thương gan nói chung hay hẹp đường mật nói riêng tạo gánh nặng bệnh tật nhiều quốc gia Các phương pháp điều trị chủ yếu tập trung vào điều trị triệu chứng bệnh, kết cục bệnh nhân xơ gan tiến triển ung thư gan Bệnh nhân bệnh gan giai đoạn cần ghép gan để kéo dài thời gian sống, nguồn mơ gan hiến tạng khơng đáp ứng đủ nhu cầu ghép Nghiên cứu tìm kiếm phương pháp điều trị khác giúp kéo dài thời gian sống cho bệnh nhân hẹp đường mật cấp thiết Tế bào gốc đề xuất giải pháp tiềm cho điều trị bệnh lý thối hố tế bào nói chung bệnh lý gan nói riêng Đề tài hoàn thành mục tiêu nội dung đặt góp phần trả lời câu hỏi nghiên cứu: “Đánh giá hiệu điều trị tế bào gốc trung mơ thuốc Plenastem® mơ hình chuột tổn thương gan tắc ống dẫn mật” Về phương pháp nghiên cứu độ tin cậy số liệu: Mơ hình bệnh lý tắc mật chuột mơ hình kinh điển ứng dụng nhiều nên có độ tin cậy cao Các phương pháp đánh giá nghiên cứu tiếp cận đầy đủ từ cấp độ: tế bào (flow cytometry, thu nhận tế bào từ gan, mơ (HE, IHC) thể (sinh lý, sinh hố) Các số liệu ghi nhận trung thực có xử lý thống kê Về kết khoa học luận văn Luận văn đạt kết sau: - Áp dụng quy trình phẫu thuật gây tạo chuột tổn thương gan tắc mật - Đánh giá hiệu điều trị USB-MSC mơ hình chuột BDL Kết nghiên cứu UCB-MSC liều 5x105 tb/con hiệu điều trị tốt - Chưa thể đánh giá hiệu việc kết hợp tế bào gốc trung mô từ cuống rốn người (5x105 tb/con) với thuốc Plenastem® (184mg/kg) lúc mơ hình chuột Swiss BDL tỷ lệ tử vong cao kết hợp tế bào Plenastem® Về kết thực tiễn luận văn: Kết nghiên cứu luận văn đóng góp cho ứng dụng điều trị bệnh lý gan nói chung bệnh lý hẹp đường mật nói riêng Liệu pháp tế bào gốc trung mơ từ dây rốn có tính an toồn hiệu mơ hình chuột tổn thương gan tắc mật Từ kết nghiên cứu không mở tiềm ứng dụng liệu pháp tế bào gốc trung mô từ dây rốn điều trị bệnh lý ống mật Ý kiến kết luận (mức độ đáp ứng yêu cầu LVThS: Luận văn đáp ứng yêu cầu luận văn thạc sĩ phép bảo vệ luận văn trước hội đồng Thành phố Hồ Chí Minh, ngày 25 tháng 04 năm 2021 Người nhận xét PGS.TS Trương Hải Nhung LỜI CAM ĐOAN Tôi cam đoan luận văn “Đánh giá hiệu điều trị tế bào gốc trung mơ thuốc Plenastem® mơ hình chuột tổn thương gan tắc ống dẫn mật” nghiên cứu tơi Ngoại trừ tài liệu tham khảo trích dẫn luận văn này, tơi cam đoan toàn phần hay phần nhỏ luận văn chưa công bố sử dụng để nhận cấp nơi khác Không có nghiên cứu người khác sử dụng luận văn mà khơng trích dẫn theo quy định Luận văn chưa nộp để nhận cấp trường đại học sở đào tạo khác TP Hồ Chí Minh, Năm 2021 Nguyễn Minh Thư LỜI CÁM ƠN Đầu tiên xin gửi lời cảm ơn chân thành đến PTN Nghiên cứu & Ứng dụng Tế bào gốc Quỹ Phát triển khoa học công nghệ Quốc gia (NAFOSTED) mã số 108.05-2017.30 hỗ trợ kinh phí thực đề tài: “Đánh giá hiệu điều trị tế bào gốc trung mô thuốc Plenastem® mơ hình chuột tổn thương gan tắc ống dẫn mật.” Tôi xin chân thành cảm ơn PGS TS Trương Hải Nhung, người tận tình truyền đạt cho kiến thức cần thiết hết lịng hướng dẫn, hỗ trợ tơi suốt q trình thực Luận Văn Thạc Sĩ Tôi xin gửi lời cảm ơn đến em ThS Lê Văn Trình ThS Đặng Minh Thành theo sát, hướng dẫn giúp đỡ nhiều suốt thời gian thực Luận Văn Thạc Sĩ Ngồi tơi xin chân thành cảm ơn em Thông, Thủy, Trân, Nhân Ngọc, người bên cạnh, động viên tinh thần chia sẻ với nhiều kinh nghiệm quý báu, sát cánh, hỗ trợ tôi, mang lại nhiều niềm vui kỉ niệm đáng nhớ Một lần nữa, xin chân thành cảm ơn cô, anh chị em làm việc PTN Nghiên Cứu Ứng dụng Tế bào gốc toàn thể bạn sinh viên học tập dạy cho nhiều kiến thức hỗ trợ vật chất tinh thần, cho trải nghiệm q báu giúp đỡ tơi hồn thành luận văn Tôi xin cảm ơn Quý Thầy, Cô khoa Công Nghệ Sinh Học Quý Thầy Cô khoa Đào Tạo Sau Đại Học trường Đại học Mở Thành phố Hồ Chí Minh tận tình dạy bảo, truyền đạt cho em kiến thức, kinh nghiệm suốt thời gian học tập Tôi xin cảm ơn Ban Giám Hiệu trường Đại học Mở Thành phố Hồ Chí Minh tạo điều kiện cho tơi có hội học tập hồn thành trình độ đào tạo Thạc Sĩ Xin Chân Thành Cảm Ơn! TP Hồ Chí Minh, ngày 20 tháng 04 năm 2021 Nguyễn Minh Thư a TÓM TẮT Tắc mật bẩm sinh hay thủng đường mật trẻ sơ sinh (BA) không phát sớm, không điều trị dẫn đến suy gan, xơ gan (Bates, Bucuvalas, Alonso, & Ryckman, 1998) Thống kê cho thấy tỉ lệ mắc bệnh nước Châu Á cao so với châu Âu châu Mỹ, chẳng hạn tỉ lệ mắc bệnh Mỹ 1:19.000, Anh nước châu Âu 1:16.000, tỉ lệ mắc bệnh nước châu Á Nhật Bản Trung Quốc khoảng 1:9.600, đặc biệt cao Việt Nam với tỉ lệ 1:2400 (M B Liu et al., 2017) Phương pháp phẫu thuật Kasai phát triển bác sĩ người Nhật Morio Kasai giúp giảm bớt tắc mật cách phẫu thuật nối hỗng tràng với nhánh nhỏ mật gan (portoentersstomy) Các trường hợp bệnh nhân không tiến hành phẫu thuật tử vong vịng năm, với thời gian sống trung bình tháng (Bates et al., 1998) Tỷ lệ bệnh nhân sống sót sau năm khơng cấy ghép gan khoảng 32%-63% (Shinkai et al., 2009) Và tỷ lệ không cải thiện vòng 45 năm qua, nước phát triển Theo WHO, Đơng Nam Á, có Việt Nam, có tỷ lệ gánh nặng bệnh tật lớn so với khu vực khác giới có bệnh BA (M B Liu et al., 2017) Một số phương pháp áp dụng sau phẫu thuật Kasai sử dụng kháng sinh, thuốc vận mật (choleretics), steroid nhằm giúp cải thiện tình trạng bệnh cho dù có chứa nhiều tác dụng phụ Nghiên cứu nhằm đánh giá tác động tế bào gốc trung mô tế bào gốc trung mô kết hợp với thuốc Plenastem® tổn thương gan tắc ống dẫn mật mơ hình chuột Chuột Swiss tiến hành phẫu thuật thắt ống dẫn mật (BDL) để gây bệnh xơ gan Sau BDL ngày, chuột chia làm nhóm, nhóm tiêm giả dược PBS (BDL-PBS), nhóm tiêm thuốc Plenasterm® với liều 184.5mg/kg chuột (BDL-PLENA) (tương đương 15mg/kg người), nhóm tiêm tế bào gốc trung mô phân lập từ mô dây rốn (umbilical cord blood-derived - UCB-MSC) với liều 5x105 tb/con (BDL-MSC) nhóm tiêm kết hợp thuốc Plenasterm® UCB-MSC với liều lượng (BDL-PLENA/MSC) Hiệu điều trị đánh giá thông qua b tỉ lệ sống chết, số sinh hóa (AST, ALT, Albumin) thay đổi cấu trúc mơ học (nhuộm H&E), tích lũy collagen mơ gan (nhuộm Sirius Red), hoạt hóa tế bào hình (nhuộm hóa mơ miễn dịch với marker α-SMA) tăng sinh ống mật gan (nhuộm IHC với marker Ck7) Kết quả: Sau 12 ngày điều trị, so với nhóm đối chứng (Normal), chuột tiêm MSC (5x105 tb/con) có tỉ lệ sống cao (100%), giảm tổn thương gan (chỉ số sinh hóa men gan Alb, AST ALT trung bình 2.42±0.14Dg/L, 355.53±102.82 UI/L 329.95±112.98 UI/L,), giảm diện tích xơ gan thơng qua diện tích hoại tử trung bình 5.06±2.85%, tích lũy collagen gan trung bình 1.81±0.76% tỷ lệ dương tính protein α-SMA 1.06±0.39% số lượng ống mật tăng sinh (Ck7) 20.71±3.66 ống mật/mm2 Trong hai nhóm BDL-PBS BDLPLENA chuột có tỷ lệ sống thấp (lần lượt 62.5% 61.53%); số men gan cao (AST đạt 498.77±69.18 UI/L 344.58±133.59UI/L, ALT đạt 500.85±136.72 UI/L 366.40±116.88 UI/L) giảm khả sản xuất Alb gan (Alb BDL-PBS BDL-PLENA 2.14±0.07 Dg/L 2.08±0.13 Dg/L); diện tích hoại tử cao (8.73±4.86% 21.49±10.98%), tích lũy collagen nhiều (2.83±1.53% 2.55±0.84%), tỷ lệ dương tính protein α-SMA 3.15±0.83%, 2.88±0.82% số lượng ống mật tăng sinh 9.20±1.22 ống mật/mm2 17.03±4.82 ống mật/mm2 Riêng nhóm BDL-PLENA/MSC có tỷ lệ sống thấp (14.29% tương đương 1/8 sống) nên khơng an tồn khơng đủ cỡ mẫu, nghiên cứu không đánh giá hiệu điều trị nhóm Kết luận: Bước đầu đánh giá tính an toàn hiệu điều trị chuột tổn thương gan tắc ống dẫn mật điều trị tế bào gốc trung mô phân lập từ dây rốn (UCB-MSC) an tồn có hiệu chuột BDL Sử dụng thuốc Plenastem® với liều lượng 15mg/kg người = 184.5mg/kg đơn lẻ hay kết hợp UCB-MSC liều 5x105 tb/con khơng thích hợp chuột Swiss mơ hình BDL c ABSTRACT Congenital obstruction or perforation of the Biliary atresia (BA) in newborn infants, if not detected early, and untreated can lead to liver failure and cirrhosis (Bates, Bucuvalas, Alonso, & Ryckman, 1998) Statistics show that the incidence rate in Asia is higher than that in Europe and America, such as 1: 19,000 in the US, 1: 16,000 in the UK and European countries, while That is, the prevalence rate in Asian countries such as Japan and China is about 1: 9,600, especially quite high in Vietnam at the rate of 1: 2400 (MB Liu et al., 2017) Kasai surgery method developed by Japanese doctor Morio Kasai helps to reduce the obstruction by surgically connecting the jejunum with the small bile branch in the liver (portoentersstomy) If not treated early, can lead to die within years, with an average survival time of months (Bates et al., 1998) The proportion of patients who survive years without liver transplantation is about 32% -63% (Shinkai et al., 2009) And this rate has not improved over the past 45 years, even in developed countries According to WHO, Southeast Asia, including Vietnam, has the largest rate of disease burden compared to other regions in the world including BA disease (M B Liu et al., 2017) Some methods are applied after Kasai surgery such as antibiotics, choleretics, steroids to help improve the condition even though they contain many side effects This study aimed to evaluate the effects of mesenchymal stem cells and mesenchymal stem cells in combination with the drug Plenastem® on liver damage caused by bile duct obstruction in a mouse model Swiss mice underwent bile duct surgery (BDL) for cirrhosis After days of BDL, groups, including injected placebo PBS (BDL-PBS), injected the drug Plenasterm® (BDL-PLENA) with a dose of 184.5 mg/kg in mice (equivalent to 15mg/kg in human), injected mesenchymal stem cells isolated from umbilical cord blood-derived (UCB-MSC) at a dose of 5x10 cell/mice (BDL-MSC) and a groub of injection of Plenasterm® and UCB-MSC was the same dose (BDL-PLENA/MSC) Treatment efficacy was assessed by mortality, biochemical indicators (AST, ALT, Albumin) and histological changes (H&E TRƯỜNG ĐẠI HỌC MỞ THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH HỘI ĐỒNG CHẤM LUẬN VĂN THẠC SĨ CỘNG HOÀ XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập – Tự – Hạnh phúc BIÊN BẢN ĐIỀU CHỈNH THEO GÓP Ý CỦA HỘI ĐỒNG (Bảo vệ ngày 17-05-2021) Tên Học viên: NGUYỄN MINH THƯ Tên Đề Tài: ĐÁNH GIÁ HIỆU QUẢ ĐIỀU TRỊ CỦA TẾ BÀO GỐC TRUNG MÔ VÀ THUỐC PLENASTEM® TRÊN MƠ HÌNH CHUỘT TỔN THƯƠNG GAN DO TẮC ỐNG DẪN MẬT Những điều cần chỉnh sửa theo góp ý Hội Đồng STT Nội dung Trang, mục Nên bỏ kết luận “Chưa thể đánh giá hiệu việc kết hợp tế bào gốc trung mô từ cuống rốn thuốc Plenastem liều mô hình chuột Nên ghi rõ dịng tế bào gốc trung mô người Trang 51 việc kết hợp tế bào gốc trung mô từ cuống rốn thuốc Plenastem Trang 19 Đã thêm thông tin tế bào gốc trung mô phần Vật liệu người vào phần Vật liệu Bổ sung bố trí thí nghiệm cấy ghép tế bào gốc Đã bổ sung phương pháp cấy ghép UCB- trung mô tiêm Plena MSC tiêm thước Plenastem® Bổ sung phương pháp xác định khối lượng gan, Trong phần phương pháp tính tốn sử dụng Trang, mục Trang 52 liều mơ hình chuột BDL” Trang 24 lách Nội dung chỉnh sửa Đã bỏ kết luận “Chưa thể đánh giá hiệu BDL” Những điều chỉnh sửa Đã bổ sung phần xác định khối lượng Trang 20 Trang 25-26 Trang 25 gan vào phần thu mô gan Trang 24 Đã bổ sung phần thiết lập set scale vào Trang 27 ImageJ, tác giả nên bổ sung thêm bước thiết lập phần tính tồn sử dụng ImageJ thước đo ban đầu (Analyze – Set scale) Hình 4.2, tác giả nên bổ sung giá trị phần trăm tế Trang 30 bào dương tính (marker đặc trưng cho tế bào gốc Đã bổ sung giá trị % dương tính % âm Trang 32 tính marker tring mơ) phần trăm tế bào âm tính Hình 4.3 Biểu đồ 4.1, tác giả nên trình bày rõ Trang 31 thêm giá trị trung bình phần trăm thay đổi Đã bổ sung giá trị trung bình vào Trang 33 hình 4.3 biểu đồ 4.1 khối lượng thể chuột, số lượng tế bào bạch cầu tổng tỷ lệ phần trăm bạch cầu trung tính để người đọc dễ theo dõi (vì phần Phụ lục tác giả chưa đưa vào kết phân tích giá trị này) Tác giả xem lại giá trị khối lượng chuột từ Trang 33, đoạn 2, câu nhóm thí nghiệm hay phần trăm khối lượng thay Đã thêm phần giải thích kết % thay đổi khối lượng nhóm chuột Trang 35, đoạn 2, câu đổi khối lượng chuột Tác giả sửa lại lỗi trình bày trính dẫn tham khảo Trang 33, đoạn (Garrido et al., 2017) 10 Tác giả nên bổ sung ký hiệu “%” số liệu kết Đã sửa lại lỗi trình bày, bị bớt tham khảo Trang 35, đoạn dư Trang 35, đoạn phần trăm khối lượng gan lách Đoạn Đã bổ sung ký hiệu % vào kết tỷ lệ gan/cơ thể lách/cơ thể Trang 37, đoạn số nên chuyển vào phần Bàn luận 11 Tác giả kiểm tra lại nhóm BDL-PLENA/MSC hay BDL-PLENA Phần trăm bạch cẩu trung tính nhóm tác giả trình bày 14.25%, Trang 36, đoạn 1, dịng Đã sửa lại số liệu nhóm BDL-PLENA BDL-MSC, khơng có nhóm BDLPLENA/MSC Trang 38, đoạn 1, dịng biểu đồ 4.5, giá trị khooảng 28.5%, tác giả nên kiểm tra kết 12 Thước (scale bar) nên chỉnh sửa lại rõ Trang 38-42 hình ảnh giải nhuộm hóa mơ miễn Đã chình sửa lại scale bar hình Trang 38-42 từ 4.7 đến hình 4.10 dịch 13 Các hình từ 4.7 đến 4.10, biểu đồ 4.10, tác giả Trang 38-42 nên bổ sung thêm thông tin mơ hay quan Đã thêm thích thơng tin mơ Trang 41-45 quan hình từ 4.7 đến 4.10 sử dụng cho phân tích 14 Chỉnh lại số liệu mật độ tế bào 15 Kết luận nên ngắn gọn lại theo mục tiêu tổng quát 16 17 Trang 51, dòng 11 Trang 52 Đã chình sửa lại format chữ Đã sửa lại kết luận theo mục tiêu tổng hay mục tiêu cụ thể quát gồm nội dung Tài liệu tham khảo nên chỉnh sửa lại theo hướng Đã chỉnh sửa lại theo hướng dẫn phần dẫn Đơn vị đào tạo: cách viết tên tác giả, có Tài liệu tham khảo trường Đại học DOI hay khơng, cách trích dẫn bài,… Mở TPHCM Sắp xếp thứ tự tiểu mục hợp lí đề Trang 11-15, mục 2.3 cập theo thứ tự: TBG trung mô, Vai trị tiềm Đã chình sửa thứ tự tiểu mục theo đề Trang 54, dòng 11 Trang 54 Trang 55 -63 Trang 13-14, mục nghĩ phản biện 2.3.2 2.3.3 Đã chỉnh sửa theo đề nghị phản biện Trang 21, mục TBG trung mô, TBG trung mơ phân lập từ dây rốn, Tính an tồn sử dụng TBG trung mơ từ dây rốn điều trị (Mặc dù tác giả chưa đề cập tính an tồn UCBMSC) 18 Phương pháp giải đơng, ni cấy dịng tế bào gốc trung mơ từ cuống rốn nên đưa lên trước Trang 25 đưa phương pháp giải đông, nuôi cấy 3.2.2 19 thí nghiệm thực cho nội dung dịng tế bào gốc trung mơ từ cuống rốn đề tài lên đầu Turnitin (Phụ lục) Đã thêm kết Turnitin vào phần Phụ Trang 73 lục 11 20 21 Tên thích hình biểu đồ nên Đã chỉnh sửa tên hình biểu đồ Việt Việt (biểu đồ 4.3, biểu đồ 4.5) Thống cách viết chữ số thập phân Đã chỉnh sửa lại cách viết chữ số thập Trang 33, 36 phân, thống dùng dấu “.” 22 Sử dụng đại từ “tơi” cho tồn luận văn Đã chỉnh sửa lại đại từ nhân xưng đại từ “tơi” 23 Tác giả nên nêu rõ hình ảnh từ kết Trang 29, hình 4.1 tác giả (cách trích dẫn gây hiểu lầm) 24 Tỉ lệ sống chết nhóm thí nghiệm, trục y (Probability of survival) khơng xác, Đã chỉnh lại cách viết để tránh gây hiểu Trang 31, hình 4.1 lầm kết tác giả Trang 33 Đã chỉnh sửa trục y đơn vị %, bỏ Trang 36 Survival proportions: Survival Survival proportions: Survival khơng xác 25 Chưa làm rõ phải kết hợp tế bào gốc Đã bổ sung lý kết hợp thuốc thuốc Plenastem cho việc điều trị, chưa giới Plenastem® với UCB-MSC tình hình thiệu tình hình giới kết hợp cho nghiên cứu kết hợp giới Trang 5, 19 việc điều trị chưa 26 Cách sử dụng thông số cho giải pháp điều Đã bổ sung cách tính thuốc Plenastem® trị (ví dụ MSC, plenastem điều trị bệnh gan từ người sang chuột mơ hình BDL; ví dụ thơng số sử dụng Trang 26 184.5mg/kg thuốc Plenastem nghiên cứu chưa rõ ràng) Nhận xét HĐ Nhận xét GVHD Tên học viên