Đang tải... (xem toàn văn)
Untitled Đ Ỗ N G U Y ỄN A N H T H Ư BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VN HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ Đỗ Nguyễn Anh Thư SIN H H Ọ C T H Ự C N G H IỆ M KHẢO SÁT HOẠT TÍNH ỨC C[.]
BỘ GIÁO DỤC VIỆN HÀN LÂM VÀ ĐÀO TẠO KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VN HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ ĐỖ NGUYỄN ANH THƯ Đỗ Nguyễn Anh Thư SINH HỌC THỰC NGHIỆM KHẢO SÁT HOẠT TÍNH ỨC CHẾ ENZYME THỦY PHÂN TINH BỘT VÀ KHÁNG OXY HÓA CỦA CAO CHIẾT RAU CÀNG CUA (PEPEROMIA PELLUCIDA) LUẬN VĂN THẠC SĨ: SINH HỌC THỰC NGHIỆM NĂM 2021 Thành phố Hồ Chí Minh - 2021 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VN HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ Đỗ Nguyễn Anh Thư KHẢO SÁT HOẠT TÍNH ỨC CHẾ ENZYME THỦY PHÂN TINH BỘT VÀ KHÁNG OXY HÓA CỦA CAO CHIẾT RAU CÀNG CUA (PEPEROMIA PELLUCIDA) Chuyên ngành: Sinh học thực nghiệm Mã số: 8420114 LUẬN VĂN THẠC SĨ NGÀNH: SINH HỌC THỰC NGHIỆM NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: Hướng dẫn : PGS.TS Võ Thanh Sang Thành phố Hồ Chí Minh - 2021 Lời cam đoan Tôi xin cam đoan đề tài “Khảo sát hoạt tính ức chế enzyme thủy phân tinh bột kháng oxy hóa cao chiết rau cua (Peperomia pellucida)” tiến hành công khai, dựa cố gắng nổ lực thân hướng dẫn nhiệt tình thầy PGS.TS Võ Thanh Sang hỗ trợ từ phịng thí nghiệm trường Đại học Nguyễn Tất Thành Các số liệu nghiên cứu kết đề tài trung thực hồn tồn khơng chép sử dụng kết đề tài nghiên cứu tương tự Nếu phát có chép kết đề tài khác, tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm Tp Hồ Chí Minh, Ngày tháng Tác giả Đỗ Nguyễn Anh Thư năm 2021 Lời cám ơn Để hoàn thành luận văn Thạc sĩ này, trước tiên xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến PGS.TS Võ Thanh Sang, người thầy định hướng, trực tiếp dẫn dắt cố vấn cho suốt thời gian thực đề tài nghiên cứu khoa học Thầy người cho nhiều học chuyên môn lẫn cách làm việc thông qua đề tài, dự án giúp tơi định hướng phát triển nghiệp Một lần xin gửi lời cám ơn đến thầy tất lịng biết ơn Tơi đồng thời xin gửi lời cám ơn đến Qúy Thầy, Cô Viện Sinh học nhiệt đới, Học viện Khoa học Công nghệ - Viện Hàn lâm Khoa học Việt Nam tận tình truyền đạt kiến thức suốt q trình học tập Sau cùng, tơi xin bày tỏ lòng biết ơn đến bạn đồng nghiệp trường Đại học Nguyễn Tất Thành, gia đình tơi, người đồng hành vượt qua bao lần vấp ngã để có thành ngày hơm Tơi xin chân thành cám ơn tất người Học viên Đỗ Nguyễn Anh Thư MỤC LỤC MỤC LỤC DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT DANH MỤC BẢNG DANH MỤC HÌNH VẼ MỞ ĐẦU CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 TỔNG QUAN VỀ RAU CÀNG CUA 1.1.1 Giới thiệu rau cua 1.1.2 Vai trò rau cua trị bệnh dân gian 10 1.1.3 Các thuốc dân gian trị bệnh tiểu đường từ rau cua 11 1.2 TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU HIỆN NAY VỀ RAU CÀNG CUA 11 1.2.1 Tình hình nghiên cứu ngồi nước rau cua 11 1.2.2 Tình hình nghiên cứu nước 13 1.3 TỔNG QUAN BỆNH ĐÁI THÁO ĐƯỜNG TUÝP 13 1.3.1 Khái niệm 13 1.3.2 Triệu chứng 14 1.3.3 Cách phòng ngừa trị bệnh 15 1.3.4 Một số nhóm thuốc điều trị 15 1.4 ENZYME ALPHA-AMYLASE VÀ ALPHA-GLUCOSIDASE 16 1.5 GIỚI THIỆU VỀ TÁC NHÂN OXI HÓA VÀ KHÁNG OXI HÓA 17 1.5.1 Gốc tự 17 1.5.2 Chất chống oxi hóa 18 1.5.3 Các hợp chất phenolic 19 CHƯƠNG NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 20 2.1 QUY TRÌNH NGHIÊN CỨU CHUNG 20 2.2 NGUYÊN VẬT LIỆU 21 2.3 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 21 2.3.1 Tách chiết 21 2.3.2 Xác định độ ẩm mẫu 22 2.3.3 Xác định hàm lượng tro toàn phần 22 2.3.4 Xác định hàm lượng phenolic tổng 22 2.3.5 Phương pháp khảo sát hoạt tính ức chế α-amylase 24 2.3.6 Phương pháp khảo sát hoạt tính ức chế α-glucosidase 24 2.3.7 Khảo sát khả kích thích chuyển hóa glucose vào tế bào 25 2.3.8 Phương pháp khảo sát lực khử 25 2.3.9 Phương pháp khảo sát bắt gốc tự DPPH 26 2.3.10 Phương pháp khảo sát bắt gốc tự ABTS+ 26 2.3.11 Khảo sát độc tính cao chiết lên tế bào 27 2.3.12 Khảo sát độc tính cấp rau cua mơ hình chuột nhắt trắng 28 2.3.13 Khảo sát khả làm giảm đường huyết cao chiết rau cua chuột có đường huyết cao 28 2.3.14 Xử lý số liệu 29 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 30 3.1 KẾT QUẢ VỀ TÁCH CHIẾT 30 3.2 KẾT QUẢ VỀ ĐỊNH LƯỢNG HỢP CHẤT PHENOLIC TỔNG TRONG CAO CHIẾT ETHANOL TỪ RAU CÀNG CUA 31 3.3 KẾT QUẢ KHẢO SÁT HOẠT TÍNH ỨC CHẾ ENZYME ALPHAAMYLASE VÀ ALPHA-GLUCOSIDASE 32 3.4 KẾT QUẢ KHẢO SÁT VỀ KHẢ NĂNG KÍCH THÍCH CHUYỂN HÓA GLUCOSE VÀO TRONG TẾ BÀO 34 3.5 KẾT QUẢ KHẢO SÁT HOẠT TÍNH KHÁNG OXI HÓA CỦA CAO CHIẾT RAU CÀNG CUA 35 3.6 KẾT QUẢ KHẢO SÁT VỀ HOẠT TÍNH HẠ ĐƯỜNG HUYẾT Ở CHUỘT TIỂU ĐƯỜNG CỦA RAU CÀNG CUA 39 3.6.1 Kết xây dựng mơ hình gây đái tháo đường chuột nhắt trắng 39 3.6.2 Kết thử nghiệm cao chiết rau cua chuột ĐTĐ STZ 43 3.7 KẾT QUẢ KHẢO SÁT ĐỘC TÍNH CỦA CAO CHIẾT RAU CÀNG CUA 47 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 49 4.1 KẾT LUẬN 49 4.2 KIẾN NGHỊ 49 DANH MỤC CƠNG TRÌNH CỦA TÁC GIẢ 50 TÀI LIỆU THAM KHẢO 56 PHỤ LỤC 63 DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT ABTS 2,2’-azinobis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonate BHA Butylated hydroxyl anisole DMEM Dulbecco's modified Eagle's medium DMSO Dimethyl sulfoxide DNS Acid dinitrosalicylic DPPH 2,2-diphenyl-1-picryhydrazyl ĐTĐ Bệnh đái tháo đường EtOAc Ethyl Acetate FBS Huyết thai bò HepG2 Tế bào gan MTT 3-(4, 5-dimethylthiazol-2-yl)-2, 5-diphenyl tetrazolium bromide PBS Dung dịch đệm Phosphate P-NPG 4-Nitrophenyl-β-D-glucuronic acid, Goldbio STZ Streptozotocine DANH MỤC BẢNG Bảng Kết thu nhận cao chiết từ rau cua 30 Bảng 3.2 Hoạt tính ức chế enzyme α-amylasecủa cao chiết rau cua 33 Bảng 3.3 Hoạt tính ức chế enzyme α-glucosidase cao chiết rau cua 33 Bảng 3.4 Hoạt tính bắt gốc tự DPPH cao chiết rau cua 38 Bảng 3.5 Hoạt tính bắt gốc tự ABTS+ cao chiết rau cua 38 Bảng 3.6 Nồng độ đường huyết (mg/dL) chuột trước sau tiêm STZ 41 Bảng 3.7 Trọng lượng chuột (g) trước sau tiêm STZ 41 Bảng 3.8 Nồng độ đường huyết (mg/dL) chuột tiểu đường sau cho uống cao chiết rau cua 44 Bảng 3.9 Sự thay đổi trọng lượng chuột (g) sau thời gian khảo sát 45 DANH MỤC HÌNH VẼ Hình 1.1 Hình rau cua (Peperomia pellucida) Hình 2.1 Quy trình thí nghiệm .20 Hình Đường chuẩn axit galic 32 Hình Giá trị IC50 hoạt tính ức chế α-amylase α-glucosidase cao chiết rau cua acarbose 34 Hình 3 Khả kích thích chuyển hóa glucose vào tế bào gan cao chiết rau cua 35 Hình Năng lực khử cao chiết rau cua 36 Hình Giá trị IC50 khả bắt gốc tự cao chiết rau cua vitamin C 39 Hình Sự thay đổi đường huyết chuột sau tiêm STZ so với ban đầu 42 Hình Sự thay đổi trọng lượng chuột sau tiêm STZ so với ban đầu 42 Hình Sự thay đổi đường huyết chuột thời gian thử nghiệm ngày 14 ngày 46 Hình Sự thay đổi trọng lượng chuột thời gian thử nghiệm ngày 14 ngày 46 Hình 10 Khảo sát độc tính cao chiết rau cua dòng tế bào gan 47 Hình 11 Sự thay đổi trọng lượng chuột sau thời gian uống cao chiết 48 54 55 56 TÀI LIỆU THAM KHẢO Banday MZ, Sameer AS, Nissar S., 2020, Pathophysiology of diabetes: An overview, Avicenna J Med, 13; 10(4):174-188 Galicia-Garcia U, Benito-Vicente A, Jebari S, Larrea-Sebal A, Siddiqi H, Uribe KB, Ostolaza H, Martín C., 2020, Pathophysiology of Type Diabetes Mellitus, Int J Mol Sci, 30;21(17):6275 Nguyễn Thị Bay, 2007, Bệnh học điều trị nội khoa, NXB Y học Hà Nội, tr 327-364 Nguyễn Thị Lâm, Phạm Thu Hương cộng sự, 2008, Hướng dẫn chế độ ăn cho bệnh nhân đái tháo đường theo đơn vị chuyển đổi thực phẩm, NXB Y học, Hà Nội Chaudhury A, Duvoor C, Reddy Dendi VS, Kraleti S, Chada A, Ravilla R, Marco A, Shekhawat NS, Montales MT, Kuriakose K, Sasapu A, Beebe A, Patil N, Musham CK, Lohani GP, Mirza W., 2017, Clinical Review of Antidiabetic Drugs: Implications for Type Diabetes Mellitus Management, Front Endocrinol (Lausanne), 24;8:6 Majumder, P., 2011, Phytochemical, pharmacognostical and physicochemical standardization of Peperomia pellucida (L.) HBK Stem, Pharmacie Globale, 8(06) Alves, N.S.F., Setzer, W.N and da Silva, J.K.R., 2019, The chemistry and biological activities of Peperomia pellucida (Piperaceae): A critical review Journal of ethnopharmacology, 232, pp 90-102 Ng ZX, Than MJY, Yong PH., 2021, Peperomia pellucida (L.) Kunth herbal tea: Effect of fermentation and drying methods on the consumer acceptance, antioxidant and anti-inflammatory activities, Food Chem, 15;344:128738 Hamzah, R.U., Odetola, A.A., Erukainure, O.L and Oyagbemi, A.A., 2012, Peperomia pellucida in diets modulates hyperglyceamia, oxidative stress and dyslipidemia in diabetic rats, Journal of Acute Disease, 1(2), pp.135-140 57 10 Sheikh, H., Sikder, S., Paul, S.K., Hasan, A.R., Rahaman, M and Kundu, S.P., 2013, Hypoglycemic, anti-inflammatory and analgesic activity of Peperomia pellucida (L.) HBK (piperaceae), Int J Pharm Sci Res, 4, pp.45863 11 Susilawati, Y., Nugraha, R., Krishnan, J., Muhtadi, A., Sutardjo, S., Supratman, U., 2017, A New Antidiabetic Compound 8, 9-dimethoxy Ellagic Acid from Sasaladaan (Peperomia pellucida L Kunth), Res J Pharm Biol Chem Sci., 8, 269–274 12 Oloyede, G.K., Onocha, P.A and Olaniran, B.B., 2011, Phytochemical, toxicity, antimicrobial and antioxidant screening of leaf extracts of Peperomia pellucida from Nigeria, Advances in Environmental Biology, 5(12), pp.37003709 13 Phongtongpasuk, S and Poadang, S., 2014, Extraction of antioxidants from Peperomia pellucida L Kunth, Science & Technology Asia, pp.38-43 14 Wei, L.S., Wee, W., Siong, J.Y.F and Syamsumir, D.F., 2011, Characterization of anticancer, antimicrobial, antioxidant properties and chemical compositions of Peperomia pellucida leaf extract, Acta Medica Iranica, pp.670-674 15 Al-Madhagi, W.M., Hashim, N.M., Ali, N.A.A., Alhadi, A.A., Halim, S.N.A and Othman, R., 2018, Chemical profiling and biological activity of Peperomia blanda (Jacq.) Kunth, Peerj, 6, pp 4839 16 Idris, O.O., Olatunji, B.P and Madufor, P., 2016, In vitro Antibacterial Activity of the Extracts of Peperomia pellucida (L), Microbiology Research Journal International, pp 1-7 17 Okoh, S.O., Iweriebor, B.C., Okoh, O.O and Okoh, A.I., 2017, Bioactive constituents, radical scavenging, and antibacterial properties of the leaves and stem essential oils from Peperomia pellucida (L.) Kunth, Pharmacognosy magazine, 13(Suppl 3), pp 392 18 Mutee, A.F., Salhimi, S.M., Yam, M.F., Lim, C.P., Abdullah, G.Z., Ameer, O.Z., Abdulkarim, M.F and Asmawi, M.Z., 2010, In vivo anti- 58 inflammatory and in vitro antioxidant activities of Peperomia pellucida, Int J Pharmacol, 6(5), pp.686-90 19 de Fátima Arrigoni-Blank, M., Dmitrieva, E.G., Franzotti, E.M., Antoniolli, A.R., Andrade, M.R and Marchioro, M., 2004, Anti-inflammatory and analgesic activity of Peperomia pellucida (L.) HBK (Piperaceae), Journal of Ethnopharmacology, 91(2-3), pp.215-218 20 Phùng Bích Hịa, 2014, Thành phần hóa sinh, khả kháng khuẩn chữa bệnh dịch chiết thân cua (Peperomia pellucida), Tạp chí Khoa học Đại học Huế, 97(9), tr 71-78 21 Hà Quang Thanh, Nguyễn Thị Thu Hương, 2018, Khảo sát tác dụng cao chiết cồn từ rau cua mơ hình gây lỗng xương prednison chuột nhắt trắng, Tạp chí Dược liệu, 23(1), tr 33-39 22 Chaudhury A, Duvoor C, Reddy Dendi VS, Kraleti S, Chada A, Ravilla R, Marco A, Shekhawat NS, Montales MT, Kuriakose K, Sasapu A, Beebe A, Patil N, Musham CK, Lohani GP, Mirza W., 2017, Clinical Review of Antidiabetic Drugs: Implications for Type Diabetes Mellitus Management, Front Endocrinol (Lausanne), 24;8:6 23 Padhi S, Nayak AK, Behera A., 2020, Type II diabetes mellitus: a review on recent drug based therapeutics, Biomed Pharmacother, 131:110708 24 Souza, P.M.D., 2010, Application of microbial α-amylase in industry-A review, Brazilian journal of microbiology, 41(4), pp.850-861 25 Auiewiriyanukul W., Saburi W., Kato K., Yao M and Mori H., 2018, Function and structure of GH 13_31 α‐ glucosidase with high α‐ (1→ 4)‐ glucosidic linkage specificity and transglucosylation activity, FEBS letters, 592(13), pp.2268-2281 26 Tundis, R., Loizzo, M.R and Menichini, F., 2010 Natural products as αamylase and α-glucosidase inhibitors and their hypoglycaemic potential in the treatment of diabetes: an update, Mini reviews in medicinal chemistry, 10(4), pp.315-331 27 Truscheit, E., Frommer, W., Junge, B., Müller, L., Schmidt, D.D and Wingender, W., 1981 Chemistry and biochemistry of microbial 59 α‐ glucosidase inhibitors, Angewandte Chemie International Edition in English, 20(9), pp.744-761 28 Đái, Thị Xuân Trang, Phạm, Thị Lan Anh, Trần, Thanh Mến Bùi, Tấn Anh, 2012, Khảo sát khả điều trị bệnh tiểu đường cao chiết ổi (Psidium guajava L.), Tạp chí khoa học, 22b, tr.163-171 29 Lê Quốc Duy, Nguyễn Minh Chơn, Nguyễn Phạm Tuấn, 2016, Khảo sát khả ức chế enzyme α-amylase α-glucosidase số thuốc dân gian điều trị bệnh đái tháo đường, Tạp chí Nơng nghiệp Thủy sản, 22, tr.139-147 30 West, I.C., 2000, Radicals and oxidative stress in diabetes, Diabetic Medicine, 17(3), pp.171-180 31 Niedowicz, D.M and Daleke, D.L., 2005, The role of oxidative stress in diabetic complications, Cell biochemistry and biophysics, 43(2), pp.289-330 32 Bajaj, S and Khan, A., 2012, Antioxidants and diabetes, Indian journal of endocrinology and metabolism, 16(Suppl 2), p.S267 33 Bravo L., 1998, Polyphenols: Chemistry, dietary sources, metabolism, and nutritional significance, Nutrition Reviews, 56, 317–333 34 Tapiero H., Tew K.D., Ba G.N., Mathe G., 2002, Polyphenols: they play a role in the prevention of human pathologies?, Biomedicine and Pharmacotherapy, 56, 200–207 35 Hollman P.C.H., Arts I.C.W., 2000, Flavonols, flavones and flavanolsNature, occurrence and dietary burden, Journal of the Science of Food and Agriculture, 80, 1081–1093 36 Li A.N., Li S., Zhang Y.J., Xu X.R., Chen Y.M., Li H.B., 2014, Resources and biological activities of natural polyphenols, Nutrients, 6(12), 6020–6047 37 Singleton V.L., Orthofer R., Lamuela-Raventós R.M., 1999, Analysis of total phenols and other oxidation substrates and antioxidants by means of Folin-Ciocalteu reagent, Methods in Enzymology, 299, 152-178 60 38 Kazeem MI, Adamson JO, Ogunwande IA., 2013, Modes of inhibition of α -amylase and α -glucosidase by aqueous extract of Morinda lucida Benth leaf Biomed Res Int, 2013:527570 39 Ngo D-H, Ngo D-N, Vo TTN, Vo TS., 2019, Mechanism of Action of Mangifera indica Leaves for Anti-Diabetic Activity, Scientia Pharmaceutica, 87(2):13 40 Payne AC, Mazzer A, Clarkson GJ, Taylor G., 2013, Antioxidant assays consistent findings from FRAP and ORAC reveal a negative impact of organic cultivation on antioxidant potential in spinach but not watercress or rocket leaves, Food Sci Nutr, 1(6):439-44 41 Kedare S.B., Singh R.P., 2011, Genesis and development of DPPH method of antioxidant assay, Journal of Food Science and Technology, 48(4), 412-422 42 Re R., Pellegrini N., Proteggente A., Pannala A., Yang M., Rice-Evans C., 1999, Antioxidant activity applying an improved ABTS radical cation decolorization assay, Free Radical Biology and Medicine, 26(9–10), 12311237 43 Hansen M.B., Nielsen S.E and Berg K., 1989, Re-examination and further development of a precise and rapid dye method for measuring cell growth/cell kill, Journal of Immunological Methods, 119(2), pp 203-210 44 Đỗ Trung Đàm (1996), Phương pháp xác định độc tính cấp thuốc, NXB Y học, Hà Nội, tr 11-137 45 Wu KK, Huan Y., 2008, Streptozotocin-induced diabetic models in mice and rats, Curr Protoc Pharmacol, Mar; Chapter 5: Unit 5.47 46 Velderrain-Rodríguez GR, Palafox-Carlos H, Wall-Medrano A, AyalaZavala JF, Chen CY, Robles-Sánchez M, Astiazaran-García H, AlvarezParrilla E, González-Aguilar GA., 2014, Phenolic compounds: their journey after intake Food Funct 5(2):189-97 47 Kumar N, Goel N., 2009, Phenolic acids: Natural versatile molecules with promising therapeutic applications, Biotechnol Rep (Amst), 24:e00370 61 48 Aryaeian N, Sedehi SK, Arablou T., 2017, Polyphenols and their effects on diabetes management: A review, Med J Islam Repub Iran, 31-134 49 Bahadoran Z, Mirmiran P, Azizi F., 2013, Dietary polyphenols as potential nutraceuticals in management of diabetes: a review, J Diabetes Metab Disord, 12: 43 50 Nguyễn Khoa Hạ Mai, Nguyễn Xuân Hải, Nguyễn Trung Nhân, Nguyễn Thị Thanh Mai, 2014, Tổng hàm lượng Polyphenol số thuốc An Giang, Tạp chí Phát triển Khoa học Công nghệ, 17(2) 51 Mahmood, N., 2016, A review of α-amylase inhibitors on weight loss and glycemic control in pathological state such as obesity and diabetes, Comp Clin Path, 25, 1253-1264 52 Pham, T M H., Ngo, D H., Ngo, D N., Vo, T S., 2019, Investigation of Biological Activities of Wild Bitter Melon (Momordica charantia Linn Var Abbreviata Ser.), Biomolecules, 9, 1-10 53 Tripathy, D.; Carlsson, M.; Almgren, P.; Isomaa, B.; Taskinen, M.R.; Tuomi, T.; Groop, L.C., 2000, Insulin secretion and insulin sensitivity in relation to glucose tolerance: lessons from the Botnia Study, Diabetes, 49, 975-80 54 Schinner S., Scherbaum W.A., Bornstein S.R., Barthel A., 2005, Molecular mechanisms of insulin resistance, Diabet Med, 22, 674-682 55 Xia, E.Q.; Zhu, S.S.; He, M.J.; Luo, F.; Fu, C ;, Zou, T.B, 2017, Marine peptides as potential agents for the management of type diabetes mellitus— A prospect, Mar Drugs, 15, 88 56 Hanhineva K.; Törrönen R.; Bondia-Pons I.; Pekkinen J.; Kolehmainen M.; Mykkänen H., Poutanen K., 2010, Impact of dietary polyphenols on carbohydrate metabolism, Int J Mol Sci, 11, 1365–1402 58 Asmat, U., Abad, K., Ismail, K., 2016, Diabetes mellitus and oxidative stress - A concise review, Saudi Pharm J., 24, pp 547-553 59 Rahimi-Madiseh M., Malekpour-Tehrani A., Bahmani M., RafieianKopaei M., 2016, The research and development on the antioxidants in 62 prevention of diabetic complications, Asian Pac J Trop Med, 9, pp 825831 60 Zatalia, S R., Sanusi H., 2013, The role of antioxidants in the pathophysiology, complications, and management of diabetes mellitus, Acta Med Indones, 45, pp 141-147 61 Phongtongpasuk S., Poadang S., 2014, Extraction of antioxidants from Peperomia pellucida L Kunth, Thammasat Int J Sci Technol, 19, pp 38-43 62 Mutee A F., Salhimi S M., Yam M F., Lim C P., Abdullah G Z., Ameer O Z., Abdulkarim M F., Asmawi M Z., 2010, In vivo antiinflammatory and in vitro antioxidant activities of Peperomia pellucida, Int J Pharmacol, 6, pp 686-690 63 Nahdi AMTA, John A, Raza H., 2017, Elucidation of Molecular Mechanisms of Streptozotocin-Induced Oxidative Stress, Apoptosis, and Mitochondrial Dysfunction in Rin-5F Pancreatic β-Cells, Oxid Med Cell Longev, 2017:7054272 63 PHỤ LỤC Bảng Kết thơ q trình chuẩn hóa ngun liệu Trung bình Độ lệch chuẩn Độ ẩm 12,6 11,5 11,2 11,766 0,7371 Hàm lượng tro 2,1 2,4 2,2 2,23 0,15 Hiệu suất (%) 7,8 7,4 8,5 7,9 0,5 Bảng Kết thô định lượng hợp chất phenolic tổng từ cao chiết rau cua Axit galic (µg/ml) Cao chiết cua Nồng độ 20 40 60 80 OD (765 nm) 0,04 0,16 0,39 0,65 0,823 125 µg/ml 0.952 0.86 1.119 Bảng Kết thơ hoạt tính ức chế α-amylasecủa rau cua Nồng độ (µg/ml) Lơ Lơ Lơ Trung bình ĐLC 0 0 0 64 50 10 20 11 7.0 100 24 24 24 24 0.4 200 42 34 41 39 3.5 400 64 66 65 65 0.8 Bảng Kết thô hoạt tính ức chế α-glucosidase rau cua Nồng độ (µg/ml) Lơ Lơ Lơ Trung bình ĐLC 0 0 0 50 10 2.3 100 24 22 21 22 1.3 200 47 56 58 54 5.6 400 71 76 79 75 4.0 Bảng Kết thô lực khử rau cua Trung bình ĐLC Nồng độ (µg/ml) Lô Lô Lô 1000 0.202 0.198 0.187 0.195667 0.007767 500 0.095 0.121 0.0956 0.103867 0.014841 250 0.075 0.068 0.062 0.068333 0.006506 125 0.027 0.034 0.029 0.03 0.003606 65 Bảng Kết thơ thử hoạt tính trung hịa gốc tự DPPH Nồng độ (µg/ml) Lơ Lơ Lơ Trung bình ĐLC 0 0 0 25 4.4 10.3 9.1 7.9 3.1 50 15.6 16.6 15.0 15.7 0.8 100 45.3 47.1 45.0 45.8 1.1 200 63.1 65.5 64.5 64.4 1.2 Bảng Kết thơ thử hoạt tính trung hịa gốc tự ABTS+ Nồng độ (µg/ml) Lơ Lơ Lơ Trung bình ĐLC 0 0 0 25 6.1 9.6 10.6 8.8 2.3 50 25.2 26.2 33.0 28.1 4.3 100 49.2 45.2 51.6 48.7 3.2 200 66.9 69.3 68.8 68.3 1.3 66 Bảng Kết thô độc tính cao chiết rau cua lên tế bào gan Nồng độ (µg/ml) Lơ Lơ Lơ Trung bình ĐLC 100 100 100 100 100 99.0 97.2 98.5 98.2 0.9 200 97.5 93.2 96.5 95.8 2.3 400 90.7 90.7 92.0 91.1 0.8 600 82.9 81.9 83.3 82.7 0.7 800 72.4 73.3 75.3 73.6 1.5 1000 50.6 43.1 43.6 45.8 4.2 Bảng Kết thơ trọng lượng chuột gây mơ hình chuột tiểu đường (trước tiêm STZ) Lô Lô Lô Lô 37.4 38.8 35.7 35.6 39.5 36.6 35.4 37.3 41.3 38.9 37.6 37.8 36.8 40.3 34.7 40.5 40.6 40.7 40.8 41.2 39.1 36.5 35.8 35.7 Trung 39.1 38.6 36.7 38.0 67 bình ĐLC 1.8 1.8 2.2 2.4 Bảng Kết thơ trọng lượng chuột gây mơ hình chuột tiểu đường (sau tiêm STZ) Lô Lô Lô Lô 40.6 38.1 34.5 34.3 40.3 36.3 35.2 36.2 42.8 37.8 35.8 36 37.5 38.2 34.1 38.6 41.4 39.6 38.3 37.8 41.7 36 35 35.2 Trung bình 40.7 37.7 35.5 36.4 ĐLC 1.8 1.3 1.5 1.6 Bảng 10 Kết thô đường huyết gây mơ hình chuột tiểu đường (trước tiêm STZ) Lô Lô Lô Lô 92 100 106 123 98 124 99 118 68 113 108 103 93 124 98 121 101 105 92 126 107 108 102 114 96 Trung bình 106.7 104.0 111.5 106.3 ĐLC 11.3 11.1 10.6 12.1 Bảng 11 Kết thô đường huyết gây mơ hình chuột tiểu đường (tsau tiêm STZ) Lô Lô Lô Lô 97 147 285 372 105 132 316 319 103 198 406 398 121 176 337 365 98 158 318 349 104 204 253 276 Trung bình 104.7 169.2 319.2 346.5 ĐLC 8.6 28.6 51.8 43.3