Sắc ký điều chế và ứng dụng

Bài trình bày về "Sắc ký điều chế và ứng dụng" trong môn các phương pháp phân tích hoá lý.

    Môn   1:  GV: T HVTH:   TP. HỒ CHÍ MINH, 1/2014 Su ch và ng dng Trang 2   2  5  5   5  5  5  6  6  6 1.3.1. Silica gel 6 1.3.2. Nhôm oxit. 7 1.3.3. Cellulose. 7 1.3.4. Silica gel ghép. 7  7 1.4. Dung môi. 8  8  10 1.6.1. Soi UV. 10  10 1.6.3.  10  11  11 2.1. Các c 11  11  12  12  13  13  13  13  13  13 2.3.2. Nhôm oxit. 14 Su ch và ng dng Trang 3 2.3.3. Kieselguhr. 15 2.3.4. Polyamide. 15  15  16 2.3.7.Cellulose. 16  17  17  18  19  19  21 2.5.3. Dung môi c 22  22  23 2.6.1. UV detector. 23 2.6.2. Refractive detector (RI). 23 ký. 23  23  25 2.7.3. C 25  25  26  26  27 anh (FC  Flash Chromatography). 28  28  28  29  31  31  32  34 HP 34 -  34 Su ch và ng dng Trang 4 -  35  36 3.3.1. Normal-phase silica gels. 37 3.3.2. Reversed-phase silica gels. 37  38  39  39 -  39  40 -  41 3.6.               . 42 3.7. . 44  45  45  45  45 4.2.1. Chu 45  45  46  47 Su ch và ng dng Trang 5            2,0  dung môi        ký khác ho   1.2. ,   .      0,25 mm. So với sắc ký cột: -  -  - . - . Su ch và ng dng Trang 6 -                   1.3. Ph.   4 5     1.3.1. Silica gel.   là các nhóm   .  gel  Su ch và ng dng Trang 7              0 C  0 C. 1.3.2. Nhôm oxit.   .  oxit    nhôm càng  Oxit  1.3.3. Cellulose. hân    1.3.4. Silica gel ghép. --R, Si-O- R hay Si-O-Si-R. Khi   Khi  ica gel không ghép. 1.3.5.    Su ch và ng dng Trang 8 1.4. Dung môi.  . .         1.5. .                            Su ch và ng dng Trang 9   2 cm.                 2 cm.   10 µg.      -   -   -  -          3 cm                        micropipette hay   Su ch và ng dng Trang 10 1.6. . 1.6.1. Soi UV.   .                     . Phun   .  .  .  .   - . - . - . - . - . [...]... Snyder: Trang 20 Sắc ký điều chế và ứng dụng Độ tinh khiết của pha động: Không có hoạt chất nào 100% tinh khiết Độ tinh khiết càng cao, giá càng cao Cần phù hợp yếu tố chi phí với độ tinh khiết nhằm đưa các ảnh hưởng của nó về giới hạn phù hợp 2.5.2 Dung môi cho sắc ký pha thuận Trang 21 Sắc ký điều chế và ứng dụng 2.5.3 Dung môi cho sắc ký pha đảo 2.5.4.Dung môi cho sắc ký gel - Theo cơ chế rây phân tử,... phải có sự điều chỉnh khi áp dụng từ TLC đến FC Thể tích cột CV = 1/Rf Rf nằm trong khoảng từ 0.15 – 0.4 sẽ tương ứng với thể tích cột 2.5 -6.6 2.9.5 Nạp mẫu lên cột Việc nạp mẫu đối với sắc ký cột bình thường là một công việc đơn giản trong phân tích sắc ký, tuy nhiên trong sắc ký điều chế, cột thường được triển khai quá tải và việc nạp mẫu là rất quan trọng Trang 31 Sắc ký điều chế và ứng dụng Lúc.. .Sắc ký điều chế và ứng dụng PHẦN 2 SẮC KÝ CỘT ĐIỀU CHẾ Phương pháp sắc ký dựa vào sự phân bố khác nhau của các chất giữa hai pha động và tĩnh Có nhiều nguyên nhân đưa đến sự phân bố khác nhau của các chất, nhưng chính sự lặp đi lặp lại hiện tượng hấp phụ - phản hấp phụ của các chất khi dòng pha động chuyển động qua pha tĩnh là nguyên nhân chủ yếu của việc tách sắc ký 2.1 Các cách tiến... những lượng mẫu rất nhỏ như trong sắc ký lớp mỏng Trang 13 Sắc ký điều chế và ứng dụng - Ngày nay, Silicagel có kích thước các lỗ là 40,60 và 100Å (Si-40, Si-60, Si-100) được dùng tron sắc ký điều chế Si-60 thường được sử dụng nhất Trong một vài trường hợp, kích thước hạt quá nhỏ làm giảm hiệu quả của sự chiết tách - Silicagel có diện tích bề mặt từ 0.4-0.6g/cm3, và nhiều nhất là 2.2g/cm3 Có nhiều... đoạn để thay đổi dung môi nhằm tách tốt hơn Ví dụ các kết quả: Trang 32 Sắc ký điều chế và ứng dụng Trang 33 Sắc ký điều chế và ứng dụng PHẦN 3 HPLC ĐIỀU CHẾ 3.1 Nguyên tắc - yêu cầu Sự tách cá c chấ t bằ ng phương pháp sắ c ký dựa trên trạng thái cân bằng giữa các thành phần, một chấ t hấ p phu ̣ trong cột (=pha tinh) và một dung môi chảy qua nó (pha ̃ đô ̣ng) Khi một thành phầ n liên kế... rìa tùy theo mỗi pic được thu thập và phần còn lại nằm giữa chúng có thể được thu hồi và tái phân lập Trường hợp tiến hành sắc ký quá tải có thể xảy ra hiện tượng kéo đuôi, cần có sự điều chỉnh vị trí thu thập để tránh lẫn phần kéo đuôi của pic trước Trang 27 Sắc ký điều chế và ứng dụng 2.9 Sắc ký cột nhanh (FC – Flash Chromatography) 2.9.1 Nguyên tắc Sự phân lập sắc ký dựa trên một trạng thái cân bằng... tương tác với dung môi không phù hợp Trang 22 Sắc ký điều chế và ứng dụng 2.6 Cách phát hiện trong sắc ký cột điều chế Phương phát ghi nhận sắc ký bằng detector UV thường được sử dụng nhất Trong khi việc phun thuốc thử giống để phát hiện là không khả thi thì sử dụng máy đo UV lại tỏ rõ hiệu quả, sự chọn lọc và tính khả dụng 2.6.1 UV detector Áp dụng được cho các hợp chất có nhân thơm, có nối đôi liên... hơn Trong sắc ký pha đảo, pha tĩnh là chất không phân cực và sự rửa giải được thực hiện bởi dung môi phân cực Những pha tĩnh này được thiết kế bằng cách thay đổi silica Trang 28 Sắc ký điều chế và ứng dụng gel với nhóm không phân cực nhưng C-18 hoặc những gốc tương đồng Vật liệu pha đảo mắc hơn nhiều so với pha tĩnh chuẩn và đó là lý do chính khiến pha tĩnh chuẩn được sử dụng chủ yếu trong sắc ký nhanh... yếu trong sắc ký nhanh 2.9.3 Khảo sát hệ thống sắc ký trƣớc bằng sắc ký lớp mỏng Như đã đề cập, đa phần sắc ký cột nhanh sử dụng pha tĩnh là silica gel bình thường hoặc phân cực cao do đó việc tiến hành khảo sát trước bằng TLC là hợp lý với một sự đầu tư nhỏ nhất về thời gian và vật liệu, hứa hẹn tìm ra điều kiện sắc ký có khả năng áp dụng cho cột sắc ký nhanh Xác định pha tĩnh Tìm pha động với sự... oxit - Ít được sử dụng hơn silicagel Thường được dùng trong sắc ký hấp phụ - Là chất hấp phụ phân cực - Trong sắc ký có 3 dạng nhôm oxit: nhôm trung tính, acid, base.Tùy vào chất cần tách mà lựa chọn loại oxit nhôm sử dụng cho phù hợp(chiết các acid amin có tính base cần dùng oxit nhôm base, khi cần tách các chất trung tính thì dùng oxit nhôm trung bình) Trang 14 Sắc ký điều chế và ứng dụng - Để tách . Nhôm oxit. 7 1.3.3. Cellulose. 7 1.3.4. Silica gel ghép. 7  7 1.4. Dung môi. 8  8  10.  19  19  21 2.5.3. Dung môi c 22  22 .    2,0  dung môi      