Luận văn thạc sĩ: Định lượng đồng thời paracetamol, clopheninamin maleat và phenylephin hydroclorit trong thuốc tiffi bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) và phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử (UVVIS)

Luận văn thạc sĩ: Định lượng đồng thời paracetamol, clopheninamin maleat và phenylephin hydroclorit trong thuốc tiffi bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) và phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử (UVVIS)Luận văn thạc sĩ: Định lượng đồng thời paracetamol, clopheninamin maleat và phenylephin hydroclorit trong thuốc tiffi bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) và phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử (UVVIS)Luận văn thạc sĩ: Định lượng đồng thời paracetamol, clopheninamin maleat và phenylephin hydroclorit trong thuốc tiffi bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) và phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử (UVVIS)Luận văn thạc sĩ: Định lượng đồng thời paracetamol, clopheninamin maleat và phenylephin hydroclorit trong thuốc tiffi bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) và phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử (UVVIS)Luận văn thạc sĩ: Định lượng đồng thời paracetamol, clopheninamin maleat và phenylephin hydroclorit trong thuốc tiffi bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) và phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử (UVVIS)Luận văn thạc sĩ: Định lượng đồng thời paracetamol, clopheninamin maleat và phenylephin hydroclorit trong thuốc tiffi bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) và phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử (UVVIS)Luận văn thạc sĩ: Định lượng đồng thời paracetamol, clopheninamin maleat và phenylephin hydroclorit trong thuốc tiffi bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) và phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử (UVVIS)Luận văn thạc sĩ: Định lượng đồng thời paracetamol, clopheninamin maleat và phenylephin hydroclorit trong thuốc tiffi bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) và phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử (UVVIS)Luận văn thạc sĩ: Định lượng đồng thời paracetamol, clopheninamin maleat và phenylephin hydroclorit trong thuốc tiffi bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) và phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử (UVVIS)Luận văn thạc sĩ: Định lượng đồng thời paracetamol, clopheninamin maleat và phenylephin hydroclorit trong thuốc tiffi bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) và phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử (UVVIS)Luận văn thạc sĩ: Định lượng đồng thời paracetamol, clopheninamin maleat và phenylephin hydroclorit trong thuốc tiffi bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) và phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử (UVVIS)Luận văn thạc sĩ: Định lượng đồng thời paracetamol, clopheninamin maleat và phenylephin hydroclorit trong thuốc tiffi bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) và phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử (UVVIS)Luận văn thạc sĩ: Định lượng đồng thời paracetamol, clopheninamin maleat và phenylephin hydroclorit trong thuốc tiffi bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) và phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử (UVVIS)Luận văn thạc sĩ: Định lượng đồng thời paracetamol, clopheninamin maleat và phenylephin hydroclorit trong thuốc tiffi bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) và phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử (UVVIS)Luận văn thạc sĩ: Định lượng đồng thời paracetamol, clopheninamin maleat và phenylephin hydroclorit trong thuốc tiffi bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) và phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử (UVVIS)Luận văn thạc sĩ: Định lượng đồng thời paracetamol, clopheninamin maleat và phenylephin hydroclorit trong thuốc tiffi bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) và phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử (UVVIS)Luận văn thạc sĩ: Định lượng đồng thời paracetamol, clopheninamin maleat và phenylephin hydroclorit trong thuốc tiffi bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) và phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử (UVVIS)Luận văn thạc sĩ: Định lượng đồng thời paracetamol, clopheninamin maleat và phenylephin hydroclorit trong thuốc tiffi bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) và phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử (UVVIS)Luận văn thạc sĩ: Định lượng đồng thời paracetamol, clopheninamin maleat và phenylephin hydroclorit trong thuốc tiffi bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) và phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử (UVVIS)

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM VŨ DUY LONG I PARACETAMOL, CLOPHENINAMIN MALEAT VÀ PHENYLEPHIN HYDROCLORIT SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO (HPLC) VÀ PHƢƠNG PHÁP QUANG PHỔ HẤP THỤ PHÂN TỬ (UV-VIS) C Mã số: 60.44.01.18 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC VẬT CHẤT Hƣớng dẫn khoa học: TS MAI XUÂN TRƢỜNG THÁI NGUYÊN - NĂM 2014 Số hóa Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/ LỜI CẢM ƠN Trong trình học tập thực luận văn tác giả nhận nhiều quan tâm, động viên giúp đỡ thầy giáo, giáo, bạn bè gia đình Tác giả bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới: - - yên, thầy cô giáo tham gia giảng dạy cung cấp kiến thức giúp tơi suốt q trình học tập nghiên cứu Đặc biệt tác giả xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới thầy giáo TS Mai Xuân Trường người tận tình hướng dẫn bảo giúp đỡ tơi suốt q trình nghiên cứu, thực hoàn thành luận văn Cuối tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc đến gia đình, bạn bè người ln bên tơi, động viên khuyến khích tơi q trình thực đề tài nghiên cứu , chắn luận văn khơng thể tránh khỏi thiếu sót Tác giả mong nhận ý kiến đóng góp chân thành từ thầy giáo, giáo bạn đọc Xin chân thành cảm ơn ! Thái Nguyên, tháng năm 2014 Tác giả Vũ Duy Long Số hóa Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/ MỤC LỤC Trang Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục từ viết tắt luận văn iv Danh mục bảng luận văn v Danh mục hình luận văn vi MỞ ĐẦU Chƣơng 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tổng quan paracetamol, clopheninamin maleat phenylephin hydroclorit 1.1.1 Paracetamol 1.1.2 Chlorpheniramin 1.1.3 Phenylephin hydroclorit 1.2 Các định luật sở hấp thụ ánh sáng 13 1.2.1 Định luật Bughe - Lămbe – Bia 13 1.2.2 Định luật cộng tính 14 1.2.3 Những nguyên nhân làm cho hấp thụ ánh sáng dung dịch không tuân theo định luật Bughe – Lămbe – Bia 15 1.3 Một số phương pháp xác định đồng thời cấu tử 16 1.3.1 Phương pháp Vierordt 16 1.3.2 Phương pháp phổ đạo hàm 18 1.3.3 Phương pháp mạng nơron nhân tạo 19 1.3.4 Phương pháp lọc Kalman 21 1.4 Phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao HPLC 22 1.4.1 Nguyên tắc phương pháp HPLC 22 1.4.2 Sơ đồ máy HPLC 23 1.4.3 Kết xác định số chất theo phương pháp HPLC 23 Số hóa Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/ Chƣơng 2: THỰC NGHIỆM 25 2.1 Nội dung nghiên cứu 25 2.1.1 Phương pháp HPLC 25 2.1.2 Phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử 25 2.2 Phương pháp nghiên cứu 26 26 26 2.3 Đánh giá độ tin cậy quy trình phân tích 27 2.3.1 Giới hạn phát (LOD) 27 2.3.2 Giới hạn định lượng (LOQ) 27 2.3.3 Đánh giá độ tin cậy phương pháp 27 2.3.4 Đánh giá kết phép phân tích theo thống kê 28 Chƣơng 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 32 3.1 Phương pháp HPLC 32 3.1.1 Xây dựng điều kiện để xác định đồng thời chất PRC, CPM PNH 32 3.1.2 Đánh giá phương pháp định lượng 35 3.1.3 Xác định PRC, CPM PNH thuốc TIFFY 42 3.2 Phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử 43 3.2.1 Khảo sát phổ hấp thụ phân tử paracetamol, clopheninamin maleat phenylephin hydroclorit 43 3.2.2 Khảo sát phụ thuộc độ hấp thụ quang PRC, CPM PNH vào pH 44 3.2.3 Khảo sát phụ thuộc độ hấp thụ quang PRC, CPM PNH theo thời gian 45 3.2.4 Khảo sát phụ thuộc độ hấp thụ quang PRC, CPM PNH theo nhiệt độ 46 Số hóa Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/ 3.2.5 Khảo sát khoảng tuyến tính tuân theo định luật Bughe – Lambe – Bia PRC, CPM PNH Xác định số LOD LOQ 48 3.2.6 Khảo sát đánh giá độ tin cậy phương pháp nghiên cứu mẫu tự pha 54 3.2.7 Xác định hàm lượng PRC, CPM PNH 61 KẾT LUẬN 66 TÀI LIỆU THAM KHẢO 68 Số hóa Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/ DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT CỦA LUẬN VĂN Tiếng việt Tiếng Anh Viết tắt Paraxetamon Paracetamol PRC Clopheninamin maleat Chlorpheniramine maleate CPM Phenylephin hidrocloric Phenylephrine hydrochloride PNH Giới hạn phát Limit Of Detection LOD Giới hạn định lượng Limit Of Quantity LOQ Sai số tương đối Relative Error Độ lệch chuẩn Standard Deviation Phương pháp sắc ký lỏng hiệu High cao Chromatography Số hóa Trung tâm Học liệu Performance RE S hay SD Liquid HPLC http://www.lrc-tnu.edu.vn/ DANH MỤC CÁC BẢNG CỦA LUẬN VĂN Trang Bảng 3.1 Giá trị đại lượng đặc trưng 36 Bảng 3.2 Kết khảo sát thời gian lưu 36 Bảng 3.3 Kết khảo sát diện tích pic 36 Bảng 3.4 Mối tương quan nồng độ diện tích pic PRC, CPM PNH 37 Bảng 3.5 Kết khảo sát độ lặp lại 40 Bảng 3.6 Kết khảo sát độ 41 Bảng 3.7 Kết phân tích thuốc TIFFY 42 Bảng 3.8 Độ 44 Bả PRC, CPM PNH theo thời gian 45 Bả thụ quang PRC, CPM PNH theo nhiệt độ 47 Bảng 48 50 Bảng 3.13 50 Bảng 3.14 Kết tính LOD LOQ CPM 52 52 Bảng 3.16 Kết tính LOD LOQ PNH 54 54 55 56 57 58 59 60 , CPM PNH 60 Số hóa Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/ Bảng 3.25 Kết tính nồng độ, sai số PRC, CPM PNH mẫu thuốc TIFFY 62 Bảng 3.26 Thành phần dung dịch chuẩn PRC, CPM PNH thêm vào dung dịch mẫu thuốc TIFFY 63 Bảng 3.27 Kết xác định độ thu hồi PRC, CPM PNH mẫu thuốc TIFFY 64 Số hóa Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/ DANH MỤC CÁC HÌNH CỦA LUẬN VĂN Trang Hình 1.1 Cơng thức cấu tạo paracetamol Hình 1.2 Cơng thức cấu tạo paracetamol dạng khơng gian ba chiều 1.3 Mơ hình hoạt động mạng nơron 20 1.4 Mơ hình hoạt động lọc Kalman 21 Hình 1.5 Sơ đồ hệ thống máy HPLC 23 Hình 3.1 phổ pic PRC (500 µg/mL) 33 Hình 3.2 phổ pic CPM (8 µg/mL) 33 Hình 3.3 phổ pic PNH (20 µg/mL) 33 Hình 3.4 Phổ pic PRC (3), CPM (1) PNH (2) 34 Hình 3.5 Đồ thị biểu diễn phụ thuộc tuyến tính nồng độ diện tích pic PRC 38 Hình 3.6 Đồ thị biểu diễn phụ thuộc tuyến tính nồng độ diện tích pic CPM 38 Hình 3.7 Đồ thị biểu diễn phụ thuộc tuyến tính nồng độ diện tích pic PNH 39 3.8 Phổ hấp thụ dung dịch chuẩn PRC (1), CPM (2) PNH (3) 43 Hình 3.9 Sự phụ thuộc độ hấp thụ quang PRC, CPM PNH theo thời gian 46 47 Hình 3.11 Phổ hấp thụ quang PRC nồng độ 0,2 40,0 g/mL 48 3.12 49 Hình 3.13 Phổ hấp thụ quang CPM nồng độ 0,2 40 g/mL 50 Hình 3.14 Đường hồi quy tuyến tính biểu diễn phụ thuộc độ hấp thụ quang A vào nồng độ CPM 51 Số hóa Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/ Hình 3.15 Phổ hấp thụ quang PNH nồng độ 1,0 40,0 g/mL 52 H 53 Số hóa Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/ C0PRC C0PNH (μ CPRC CPNH (μg/mL) hàm lượng PRC, PNH xác định theo phương pháp lọc kalman RE% CPRC RE% CPNH sai số phép xác định hàm lượng PRC, PNH Mẫu CPNH/ CPRC C PNH C PRC CPNH CPRC RE% RE% CPNH CPRC 1/1 7,0 7,0 6,98 7,01 -0,3 0,2 1/5 2,0 10,0 1,95 10,01 -2,5 0,1 1/10 1,0 10,0 0,96 9,99 -3,7 -0,1 1/20 0,5 10,0 0,45 9,99 -9,6 -0,1 1/40 0,1 4.0 0,09 4,01 -11,0 0,1 1/60 0,1 6,0 0,09 5,98 -12,0 -0,4 1/80 0,1 8,0 0,09 7,99 -15,0 -0,2 1/100 0,1 10.0 0,08 9,99 -19,0 -0,1 Nhận xét (nhỏ 1%) 3.2.6.3 X CPM/ CPNH 1/10, thể tích V CPM VPNH lấy bảng 3.21 sau định mức dung dịch HCl 0,1M bình định mức 25 mL Số hóa Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/ Mẫu CCPM/ CPNH CCPM CPNH VCPM VPNH 1/1 15 15 15 1,5 1/2 10 20 10 2,0 1/3 10 30 10 3,0 1/4 10 40 10 4,0 1/5 8,0 40 8,0 4,0 1/6 5,0 30 5,0 3,0 1/7 5,0 35 5,0 3,5 1/8 5,0 40 5,0 4,0 1/9 5,0 45 5,0 4,5 10 1/10 5,0 50 5,0 5,0 Trong đó: VCPM thể tích dung dịch CPM tương ứng với nồng độ 25 µg/mL VPNH thể tích dung dịch PNH tương ứng với nồng độ 250 µg/mL sóng 210 – 290 nm, 0,5 nm lấy giá trị Từ số liệu đo quang tiến hành tính hàm lượng CPM PNH theo chương trình lọc Kalman [22] Kết trình bày bảng 3.22 Trong bảng 3.22 thì: C0PNH C0CPM (μ CPNH CCPM (μg/mL) hàm lượng CPM PNH xác định theo phương pháp lọc kalman RE% CPNH RE% CCPM sai số phép xác định hàm lượng CPM PNH Số hóa Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/ , Mẫu CPM/PNH C0CPM C0PNH CCPM RE% RE% CCPM CPNH CPNH 1/1 10,0 10,0 9,98 10,01 -0,2 0,1 1/2 10,0 20,0 9,96 20,01 -0,5 0,1 1/3 10,0 30,0 9,92 30,09 -0,9 0,3 1/4 10,0 40,0 9,89 40,38 -1,1 1,0 1/5 8,0 40,0 7,78 40,52 -2,7 1,3 1/6 5,0 30,0 4,82 30,50 -3,6 1,7 1/7 5,0 35,0 4,81 35,70 -3,8 2,0 1/8 5,0 40,0 4,79 40,98 -4,2 2,4 1/9 5,0 45,0 4,78 46,33 -4,4 2,9 10 1/10 5,0 50,0 4,76 51,91 -4,9 3,8 Nhận xét: Kết thu bảng 3.22 cho thấy hàm lượng CPM/PNH từ 1/1 đến 1/10 lần phương pháp lọc Kalman mắc sai số (