Bộ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NGƯYẺN TÁT THÀNH KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC VÀ MÔI TRƯỜNG NGUYEN TAT THANH KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP KHẢO SÁT KHẢ NĂNG PHÂN GIẢI BÀO TỬ NẤM LINH CHI (Ganoderma lucidum) T[.]
Bộ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NGƯYẺN TÁT THÀNH KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC VÀ MÔI TRƯỜNG NGUYEN TAT THANH KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP KHẢO SÁT KHẢ NĂNG PHÂN GIẢI BÀO TỬ NẤM LINH CHI (Ganoderma lucidum) TỪ CHỦNG VI KHUẨN Lactobacillus PHÂN LẬP TỪ NƯỚC CẢI CHƯA Sinh viên thực : Vũ Khánh Duy Chuyên ngành TP.HCM, tháng năm 2018 : Công nghệ sinh học Bộ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NGUYỄN TẤT THÀNH KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC VÀ MÔI TRƯỜNG KHÓA LUẬN TÓT NGHIỆP KHẢO SÁT KHẢ NĂNG PHÂN GIẢI BÀO TỬ NẤM LINH CHI (Ganoderma lucidum) TỪ CHỦNG VI KHUẨN Lactobacillus PHÂN LẬP TỪ NƯỚC CẢI CHUA Sinh viên thực : Vũ Khánh Duy Mã số sinh viên :1411529463 Lớp : 14DSH02 Chuyên ngành : Công nghệ Sinh học Giáo viên hướng dần : ThS Lê Thị Thùy Trang ThS Nguyền Trung Hiếu TP.HCM, tháng năm 2018 LỜI CẢM ƠN Đe hồn thành khóa luận trước hết xin gửi lời cảm ơn chân thành đến quý thầy, cô giáo Khoa Công nghệ Sinh học Môi trường, Trường Đại học Nguyền Tất Thành toàn thể anh, chị nghiên cứu viên phịng Sinh hóa - Sinh dược - Ký sinh trùng, Khoa Công nghệ sinh học Môi trường, Đại học Nguyễn Tất Thành hồ trợ tạo điều kiện thuận lợi thời gian tơi thực khóa luận tốt nghiệp Tôi xin gửi lời cám ơn chân thành đến Ban Giám hiệu Trường Đại học Nguyền Tất Thành tạo cho môi trường học tập văn minh đại Đặc biệt, xin tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến ThS Lê Thị Thùy Trang ThS Nguyễn Trung Hiếu đà với tri thức tâm huyết tận tâm hướng dần động viên trinh thực khóa luận tốt nghiệp Cuối cùng, tơi xin cảm ơn gia đình, bạn bè ln bên cạnh tạo điều kiện thuận lợi để tơi hồn thành khóa luận Vũ Khánh Duy Khoa Công nghệ Sinh học Môi trường Trường Đại Học Nguyễn Tất Thành 11 MỤC LỤC MỤC LỤC iii TÓM TẤT V DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT vii DANH MỤC HÌNH viii ĐẶT VÁN ĐỀ .1 CHƯƠNG TÓNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tông quan nâm Linh chi 1.1.1 Giới thiệu 1.1.2 Phân loại khoa học 1.1.3 Đặc điểm sinh học 1.1.4 Phân bo nấm Linh chi 1.2 Tong quan probiotic 1.2.1 Giới thiệu probiotic 1.2.2 Giới thiệu Lactobacillus .8 1.3.1 Các nghiên cứu giới 1.3.2 Các nghiên cứu nước CHƯƠNG NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN cứu 10 2.1 Vật liệu nghiên cứu 10 2.2 Thiết bị, hóa chất dụng cụ 10 2.2.1 Thiết bị 10 2.2.2 Hóa chất 10 2.2.3 Dụng cụ 11 2.3 Nội dung nghiên cứu 12 2.4 Phưorng pháp nghiên cứu 12 2.4.1 Chuẩn bị mẫu 12 2.3.2 Lên men bào tử nấm Linh chi vi khuẩn Lactobacillus 13 2.4 Bo trí thí nghiệm 15 2.4.1 Thí nghiệm lên men bào tử nấm hấp vô trùng vi khuẩn Lactobacillus 15 iii 2.4.3 Thí nghiệm lên men bào tử nấm môi trường woo thay lactose glucose vi khuan Lactobacillus 16 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 18 3.1 Định danh vi khuân 18 3.2 Ket thí nghiệm lên men bào tử nấm hấp vô trùng vi khuẩn Lactobacillus .19 3.3 Ket thí nghiệm lên men bào tử nấm sống vi khuẩn Lactobacillus 21 3.4 Ket thí nghiệm lên men bào tử nấm sống môi trường nuôi cấy thay lactose băng glucose 22 KẾT LUẬN VÀ ĐÈ NGHỊ 25 PHỤ LỤC 27 IV TÓM TẮT Đe tài: “Khảo sát khả phân giải bào tử nấm Linh chi (Ganoderma lucidum) từ chủng vi khuẩn Lactobacillus phân lập từ nước cải chua” thực phịng Sinh hóa - Sinh dược - Kí sinh trùng, Khoa Cơng nghệ sinh học & Môi trường, Đại học Nguyễn Tất Thành từ tháng 02/2018 đến 08/2018 Với mục tiêu đánh giá khả phân giải bào tử nấm Linh chi đỏ (Ganderma lucidum) từ chủng vi khuấn Lactobacillus Đe tài gồm nội dung: - Phân lập, định danh nhân sinh khối chủng Lactobacillus từ dịch lên men cải chua Khảo sát khả phóng thích triterpenoid lên men bào tử nấm hấp - vô trùng vi khuẩn Lactobacillus - Khảo sát khả phóng thích triterpenoid lên men bào tử nấm song vi khuẩn Lactobacillus - Khảo sát khả phóng thích triterpenoid lên men bào tử nấm hấp vô trùng vi khuẩn Lactobacillus môi trường bổ sung glucose thay the lactose Sau thực thí nghiệm, chúng tơi thu kết sau: - Phân lập định danh chủng vi khuẩn Lactobacillus từ dịch cải chua - Lên men bào tử nấm bào tử nấm sống bào tử nấm hấp vi khuẩn Lactobacillus điều làm tăng khả phóng thích lượng triterpenoid ngài môi trường nuôi cấy - Thời gian lên men lâu lượng hoạt chất phóng thích nhiều, mạnh thời điềm 3-5 ngày chậm lại thời diem 5-7 ngày lên men - Bào tử nấm sống lên men với vi khuẩn Lactobacillus môi trường ni cấy có chứa glucose cho hiệu phóng thích hoạt chất ngồi mơi trường cao hon so với mơi trường ni cấy có bo sung lactose V SUMMARY Study on the ability of Ganoderma lucidum to dissociate from Lactobacillus isolated from pickled water "was conducted at the Biochemistry - Biopharmaceuticals - Biogas Unit, Faculty of Biotechnology and Environment, Nguyen Tat Thanh University from 02/2018 to 08/2018 Under the guidance of MSc Le Thi Thuy Trang Topics include: Lactobacillus Isolation, identification and humanity, from the fermented fermented sour; investigated the ability of triterpenoid to be fermented as autoclave with Lactobacillus-, investigated the ability of triterpenoid to be released when fermented fungal spores of Lactobacillus investigated the ability to release triterpenoid when fermented fungal spores were sterile by Lactobacillus In lactose replacement glucose supplements After the experiment, we obtained the following results: - Isolation, identification and multiplication of Lactobacillus - Fungal spore after fermentation with Lactobacillus The ability to release triterpenoids out of the environment is much higher than that of spore preservation Lactobacillus Weakened spore structure is weak, so the amount of active ingredient is lost, the longer the fermentation time, - Spores of live fungus when fermented with Lactobacillus The use of habitat in lactose replacement culture by glucose gives the highest release of active ingredient compared to the fungus vi DANH MỤC CÁC CHŨ VIẾT TẮT woo Môi trường sinh chitinase cải biến woo cộng ưv - VIS Ultraviolet - Visible CFU Mật độ tế bào (Colony Forming Unit) HL Hàm lượng BT Trung bình ĐC Đối chứng TB Trung bình Vll DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1.1 Nấm Linh chi đỏ Hình 1.2 Nấm Linh chi phân loại theo màu sắc Hình 1.3 Chu trình cùa nấm Linh chi Hình 1.4 Hình thái vi khuẩn Lactobacillus quan sát kính hiển vi oox Hình 2.1 Bào tử nấm sản xuất trại nấm Đất Thép Hình 2.2 Thiết bị dùng thí nghiệm Hình 2.3 Mầu bào tử nấm Linh chi sau lên men mẫu ĐC, A B Hình 2.4 Mầu trắng mẫu thử dùng đe định lượng triterpenoid thí nghiệm lên men Hình 3.1 Khuấn lạc Lactobacillus phân lập từ dịch cải chua Hình 3.2 Thử nghiệm catalase thử nghiệm oxidase Hình 3.3 Te bào vi khuấn sau nhuộm Gram Hình 3.4 Hàm lượng triterpenoid/khối lượng khơ cịn lại bên bào tử sau lên men vi khuẩn Lactobacillus so sánh theo ngày với mầu A, B ĐC Hình 3.5 Hàm lượng triterpenoid/khối lượng khơ cịn lại bên bào tử sau lên men vi khuẩn Lactobacillus so sánh theo ngày với mẫu A, B ĐC Hình 3.6 Hàm lượng triterpenoid/khối lượng khơ cịn lại bên bào tử sau lên men vi khuẩn Lactobacillus môi trường ni cấy có bổ sung glucose, so sánh theo ngày với mầu A, B ĐC viii ... LUẬN TÓT NGHIỆP KHẢO SÁT KHẢ NĂNG PHÂN GIẢI BÀO TỬ NẤM LINH CHI (Ganoderma lucidum) TỪ CHỦNG VI KHUẨN Lactobacillus PHÂN LẬP TỪ NƯỚC CẢI CHUA Sinh vi? ?n thực : Vũ Khánh Duy Mã số sinh vi? ?n :1411529463... với chủng vi khuẩn đường ruột an tồn cho thể Chúng tơi tiến hành đề tài: ? ?Khảo sát khả phân giải bào tử nấm Linh chi (Ganoderma lucidum) từ chủng vi khuẩn Lactobacillus phân lập từ nước cải chua? ??... 27 IV TÓM TẮT Đe tài: ? ?Khảo sát khả phân giải bào tử nấm Linh chi (Ganoderma lucidum) từ chủng vi khuẩn Lactobacillus phân lập từ nước cải chua? ?? thực phịng Sinh hóa - Sinh dược