Bộ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NGUYỄN TẤT THÀNH KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC VÀ MÔI TRƯỜNG NGUYEN TAT THANH KHÓA LUẬN TÓT NGHIỆP KHẢO SÁT KHẢ NĂNG PHÂN GIẢI BÀO TỬ NẤM LINH CHI (GANODERMA LUCIDUM) T[.]
Bộ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NGUYỄN TẤT THÀNH KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC VÀ MÔI TRƯỜNG NGUYEN TAT THANH KHÓA LUẬN TÓT NGHIỆP KHẢO SÁT KHẢ NĂNG PHÂN GIẢI BÀO TỬ NẤM LINH CHI (GANODERMA LUCIDUM) TỪ CHỦNG VI KHUẨN LACTOBACILLUS CASEI PHÂN LẶP TỪ SỮA CHUA Sinh viên thực : Phan Thị Khã Hân Chuyên ngành TP.HCM, tháng năm 2018 : Công nghệ sinh học Bộ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NGUYỄN TẤT THÀNH KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC VÀ MƠI TRƯỜNG cĩÍĨIbo KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP KHẢO SÁT KHẢ NĂNG PHÂN GIẢI BÀO TỬ NẤM LINH CHI ịGANODERMA LUCIDUM) TỪ CHỦNG VI KHUẨN LACTOBACILLUS CASEI PHÂN LẶP TỪ SỮA CHUA Sinh viên thực : Phan Thị Khã Hân Mã số sinh viên : 1411531506 Lớp : 14DSH02 Chuyên ngành : Công nghệ Sinh học Giáo viên hướng dẫn : ThS Nguyền Trung Hiếu TP.HCM, tháng năm 2018 LỜI CẢM ƠN Tôi xin chân thành cảm ơn tất thầy cô người giúp đỡ để tơi hồn tất khố luận Tơi xin chân thành cảm ơn Thầy ThS Nguyễn Trung Hiếu tận tình dìu dắt, hướng dần, truyền đạt tất kiến thức kinh nghiệm truyền cho niềm dam mê nghiên cứu Thầy giúp học tập thực đề tài Tôi xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến quý Thầy, Cô khoa Công Nghệ Sinh Học Môi Trường - Trường Đại học Nguyễn Tất Thành người Thầy tận tâm truyền đạt vốn kiến thức quý báu cho suốt thời gian năm thời sinh viên Đây khơng tảng cho trình nghiên cứu đạt kết tốt mà cịn hành trang q báu đe tơi trải nghiệm vừng bước sau Sau cùng, không quên gửi lời cảm ơn đến nguồn động viên ủng hộ lớn gia đình Và bạn bè, anh chị, bạn làm phịng nghiêm cứu Sinh Dược - Sinh Hố - Ký sinh trùng Trường Đại học Nguyền Tất Thành tập the lớp 14DSH02 nhiệt tỉnh giúp đỡ, ủng hộ chia sè khó khăn với trình nghiên cứu, học tập làm khố luận Phan Thị Khã Hân Khoa Cơng nghệ Sinh học Môi trường Trường Đại Học Nguyễn Tất Thành MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii TÓM TẨT V MỤC CÁC CHỪ VIẾT TẮT viii DANH MỤC CÁC HÌNH xi DANH MỤC CÁC BẢNG xii ĐẶT VÁN ĐỀ CHƯƠNG TỐNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Nấm Linh chi 1.1.1 Giới thiệu 1.1.2 Đặc điểm phân bố 1.1.3 Phân loại 1.1.4 Điều kiện sinh trưởng phát triển nấm Linh chi 1.1.5 Thành phần hoá học dược lý Gcưioderma lucidum 1.1.6 Công dụng nấm 1.2 Vi khuẩn Lactobacillus casei 1.2.1 Giới thiệu 1.2.2 Sinh thái học trao đổi chất 1.2.3 Bệnh học 1.2.4 ứng dụng công nghệ sinh học 1.3 Lịch sử nghiên cứu 1.3.1 Nghiên cứu giới 1.3.2 Nghiên cứu Việt Nam 1.4 Triterpenoid nấm Linh chi iii CHƯƠNG NỘI DƯNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN cúư 11 2.1 Vật liệu nghiên cứu 11 2.1.1 Nơi thực 11 2.2 Nội dung nghiên cứu 11 2.3 Dụng cụ, hóa chất, thiết bị 12 2.3.1 Dụng cụ 12 2.3.2 Hóa chất 12 2.3.3 Thiết bị 12 2.4 Phương pháp nghiên cứu 13 2.4.1 Chuẩn bị mầu 13 2.4.2 Mầu vi khuẩn 14 2.4.3 Định danh vi khuẩn 15 2.4.4 Phương pháp nhuộm gram 15 2.4.5 Lên men bào tử nấm Linh chi vi khuan Lactobacillus caseỉ 16 2.4.6 Phương pháp định lượng triterpenoid 16 2.5 Bố trí thí nghiệm 17 2.5.1 Thí nghiệm lên men bào tử nấm hấp vơ trùng vi khuẩn L casei 17 2.5.2 Thí nghiệm lên men bào tử nấm song vi khuan L casei 18 2.5.3 Thí nghiệm lên men bào tử nấm mơi trường MRS có bo sung lactose 21 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LƯẬN 23 3.1 Ket phân lập định danh chủng vi khuan Lactobacillus casei từ dịch sữa chua Yakult 23 3.2 Ket khảo sát khả phóng thích triterpenoid từ bào tử nấm hấp vô trùng vi khuẩn Lactobacillus casei 24 iv 3.3 Kết khảo sát khả phóng thích triterpenoid từ bào tử nấm sống vi khuẩn Lactobacillus easel 27 KÉT LUẬN VÀ ĐÈ NGHỊ 32 TÀI LIỆU THAM KHẢO 34 PHỤ LỤC 34 V TÓM TẮT Đe tài “Khảo sát khả phân giải bào tử nấm Linh chi (Ganoderma lucidum) từ chủng vi khuẩn Lactobacillus caseì phân lập từ sữa chua Đã thực phịng thí nghiệm Sinh Dược - Sinh Hoá - Ký sinh trùng - Khoa Công nghệ sinh học Môi trường - Đại học Nguyễn Tất Thành Đe tài thực từ 02/2018 đến tháng 08/2018 với mục tiêu đánh giá khả phân giải bào tử nấm Linh chi đỏ từ chủng vi khuẩn Lactobacillus casei phân lập từ sữa chua Yakult Thí nghiệm bố trí theo trình tự nội dung thực sau - Phân lập, định danh nhân sinh khối chủng vi khuẩn Lactobacillus casei từ sữa chua Yakult - Khảo sát khả phóng thích triterpenoid từ bào tử nấm hấp vơ trùng vi khuân Lactobacillus casei - Khảo sát khả phóng thích triterpenoid lên men bào tử nấm sống vi khuân Lactobacillus casei - Khảo sát khả phóng thích triterpenoid lên men bào tử nấm mơi trường MRS có bo sung lactose Ket đạt - Phân lập định danh chủng vi khuan Lactobacillus casei từ sữa chua Yakult - Dùng vi khuan Lactobacillus easel đe lên men bào tử nấm hấp nấm sống cho tác động làm yếu cấu trúc bào tử làm tăng khả phóng thích lượng triterpenoid ngồi mơi trường ni cấy - Thời gian lên men có ảnh hưởng đến hiệu suất lên men, thời gian lên men lâu lượng triterpenoid phóng thích sè nhiều, lượng triterpenoid cịn lại có khác biệt đáng kể nghiệm thức lên men đến ngày thứ - Môi trường base ảnh hưởng yếu lên cấu trúc bào tử nấm sống ủ trước lên men VI Bào tử nấm sống lên men với vi khuẩn Lactobacillus cassei mơi trường ni cấy có chứa glucosse cho hiệu phóng thích hoạt chất ngồi mơi trường cao so với mơi trường ni cấy có bo sung lactose vii SUMMARY Topic "Survey-resolution reishi mushroom spores (Ganoderma lucidum) from Lactobacillus easel strain isolated from a yogurt from yogurt” Was done in laboratory Pharmaceutical Biology - Biochemistry - Parasitology - Faculty of Biotechnology and Environment - University of Nguyen Tat Thanh Thread is made from 02/2018 to 08/2018 month with the goal of assessing resolution red reishi mushroom spores from the bacteria Lactobacillus casei strain isolated from Yakult yogurt The experiment was arranged in sequence and perform the following content - Isolation, identification and human biomass Lactobacillus casei bacteria from Yakult yogurt - Survey ability triterpenoid release from respiratory fungal spores were sterile by bacteria Lactobacillus casei - Survey ability triterpenoid release spores when fermented by the bacteria Lactobacillus casei - Survey ability fermentation triterpenoid release spores in the environment MRS supplemented with lactose Result - Isolation and identification of bacteria is Lactobacillus easel strain from Yakult yogurt - Using bacteria Lactobacillus casei fermented fungal spores and fungi live steaming evenly dampen impact spores structure and increases the amount released into the environment triterpenoid culture - Time of fermentation that affects the performance of fermentation, the fermentation time as long as the amount of triterpenoid releases will be more and more, and the amount of triterpenoid rest differ significantly among treatments when fermented to date 5th - Environmental bases very weak influence on the structure of live spores when incubated before fermentation - Live fungal spores when fermented with Lactobacillus bacteria in culture medium cassei containing glucose to effectively release the active ingredient viii into the environment is higher than the culture medium supplemented with lactose IX ... vờ bào tử nấm để khắc phục hạn chế Vì thế, tơi thực đề tài ? ?Khảo sát khả phân giải bào tử nấm Linh chi (Ganodernta lucidutn) từ chủng vi khuẩn Lactobacillus casei phân lập từ sữa chua từ sữa chua? ??... TỐT NGHIỆP KHẢO SÁT KHẢ NĂNG PHÂN GIẢI BÀO TỬ NẤM LINH CHI ịGANODERMA LUCIDUM) TỪ CHỦNG VI KHUẨN LACTOBACILLUS CASEI PHÂN LẶP TỪ SỮA CHUA Sinh vi? ?n thực : Phan Thị Khã Hân Mã số sinh vi? ?n : 1411531506... - Phân lập, định danh nhân sinh khối chủng vi khuẩn Lactobacillus casei từ sữa chua Yakult - Khảo sát khả phóng thích triterpenoid từ bào tử nấm hấp vô trùng vi khuân Lactobacillus casei - Khảo