Khảo sát độc tính cấp và thăm dò tác dụng đông máu của dịch chiết nước từ lá cây Lấu Đỏ Psychotria Rubra (Lour.) Poir, Rubiaceae.pdf

NTTU-NCKH-04 CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập - Tự - Hạnh phúc Đơn vị chủ trì: Trường Đại học Nguyễn Tất Thành BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐÈ TÀI NCKH DÀNH CHO CÁN Bộ - GIẢNG VIÊN 2017 - 2018 Tên đề tài: Khảo sát độc tính cấp thăm dị tác dụng đơng máu dịch chiết nước từ Lấu đỏ Psychotria rubra (Lour.) Poir, Rubiaceae Số hợp đồng: 2018.01.41/HĐ-KHCN Chủ nhiệm đề tài: ThS Nguyễn Lê Thanh Tuyền Đơn vị công tác: Khoa Dược - Đại học Nguyễn Tất Thành Thời gian thực hiện: 09 tháng TP Hồ Chí Minh, ngày 10 thảng 12 năm 2018 CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập - Tự - Hạnh phúc Đơn vị chủ trì: Trường Đại học Nguyễn Tất Thành BÁO CÁO TỎNG KẾT ĐÈ TÀI NCKH DÀNH CHO CÁN Bộ - GIẢNG VIÊN 2017 - 2018 Tên đề tài: Khảo sát độc tính cấp thăm dị tác dụng đông máu dịch chiết nước từ Lấu đỏ (Psychotria rubra (Lour.) Poir, Rubiaceae) Số hợp đồng: 2018.01.41/HĐ-KHCN Chủ nhiệm đề tài: ThS Nguyễn Lê Thanh Tuyền Đơn vị công tác: Khoa Dược - Đại học Nguyễn Tất Thành Thời gian thực hiện: 09 tháng Các thành viên phối họp cộng tác: STT Họ tên Chuyên ngành Cơ quan công tác Nguyễn Thị Thùy Trang Dược lý Khoa dược - ĐH NTT Hoàng Thị Phương Liên Dược lý Khoa dược - ĐH NTT Ký tên MỤC LỤC MỞ ĐẦU CHƯƠNG TÓNG QUAN TÀI LIỆU CHƯƠNG NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN cứu 13 2.1 Thú vật thữ nghiệm 13 2.2 Dược liệu 13 2.3 Hóa chất, thiết bị 13 2.4 Chiết xuất dược liệu 14 2.5 Phương pháp xác định độc tính cấp 14 2.6 Khảo sát tác động cam máu đông máu 15 2.7 Xừ lý số liệu phân tích thong kê 16 CHƯƠNG KÉT QƯẢ VÀ THẢO LƯẬN 17 3.1 Chiết xuất dược liệu 17 3.2 Độc tính cấp 17 3.3 Khão sát tác động cam máu, đông máu 19 3.3.1 Khảo sát tác động cầm máu, đông máu mô hình in vivo 19 3.3.2 Khảo sát tác động đơng máu mơ hình in vitro 20 CHƯ ONG KÉT LƯẬN VÀ KIẾN NGHỊ 22 4.1 Ket luận 22 4.1 Kiến nghị 22 TÀI LIỆƯ THAM KHẢO 24 DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẤT Ký hiệu Tiêng Anh ADP Adenosin diphosphat APTT Activated partial Tiêng Việt Thời gian thromboplastin phần hoạt hoá thromboplastin time Dịch chiết Lau đỏ DC DMSO Dimethyl sulfoxide IC50 Inhibitory concentration Liều ức che trung bình INR International normalized ratio Xét nghiệm thời gian hình thành cục máu đơng LD50 Mean lethal dose Lieu tù vong trung bình PT Prothrombin time Thời gian prothrombin TT Thrombin time Thời gian thrombin VWF Von Willebrand factor Yeu to von Willebrand DANH MỤC CÁC BẢNG BIÉU, sơ ĐỒ, HÌNH ẢNH DANH MỤC CÁC BẢNG Bàng Ket thừ nghiệm xác định LD50 18 Bảng Ket thừ nghiệm khảo sát thời gian chảy máu, đông máu cùa cao chiết nuớc từ Lau đỏ mơ hình in vivo 19 Bàng Tác động cao Lấu đỏ lên PT aPTT 20 DANH MỤC CÁC HÌNH Hình Hình vẽ Lấu Hình Một so thành phần hóa học cùa Lau đỏ Hình Duợc liệu Lấu đỏ tươi sau sấy 13 Hình Cao chiết nước từ Lau đỏ 17 Hình Đại the chuột sau thừ nghiệm độc tính cấp 18 TÓM TẤT KÉT QUẢ NGHIÊN cứu Sản phẩm đăng ký thuyết minh Sản phẩm thực đạt STT 220,45 g cao đặc từ Lấu đỏ Cao đặc từ Lau đỏ (50 g) Quy trình chiết cao nước từ Lấu đỏ Quy trình chiết cao nước từ Lau đỏ Thừ nghiệm độc tính cấp, xác định Ket độc tính cấp cùa dịch chiết nước LD50 = 25,01 g/kg thể trọng chuột từ Lau đỏ Bảng két ve tác động cùa dịch chiết Ket quà khảo sát tác động cùa dịch chiết nước từ Lấu đỏ lên trình cấm nước từ Lấu đỏ lên trình cam máu, đông máu máu, đông máu Bài báo cáo khoa học Tạp chí Khoa Báo cáo khoa học học Công nghệ - Đại học Nguyền Tất Thành Khóa luận tốt nghiệp đại học cùa 01 sinh Đào tạo 01 Dược sĩ Đại học viên khóa 13DDS, khoa Dược Thòi gian đăng ký: Từ ngày 01/06/2018 đến ngày 01/02/2019 Thòi gian nộp báo cáo: Ngày 20/12/2018 MỞ ĐẦU (ABSTRACT) Mục tiêu: Lấu đỏ (Psychotria rubra) loại có nhiều Việt Nam, phân bố phổ biến hầu het tỉnh vùng trung du núi thấp, tinh từ Quảng Bình trở Một số nghiên cứu the giới thực đe khảo sát tính chống oxy hóa, gây độc tế bào tác dụng kháng viêm cua Lấu đỏ [1], [2], [3] Theo kinh nghiệm dân gian, Lau đò sử dụng điều trị nhiều bệnh, đặc biệt xuất huyết, tiếu máu, sù dụng cho phụ nữ sau sinh nhàm cầm máu giảm đau [4] Đố đàm bào tính an toàn, hiệu SŨ dụng dược liệu này, việc tiến hành nghiên cứu mơ hình thực nghiệm để khảo sát độc tính tác dụng dược lý cùa dược liệu Lau đỏ cần thiết Vì tiên hành chiết cao từ Lau đỏ, khảo sát độc tính cấp, khâo sát ảnh hưởng lên thời gian đông máu cùa cao chiết Nội dung thực hiện: Dược liệu thu hái huyện Minh Hóa, tinh Quảng Bình, sấy khơ chiết nóng với nước 90°C cô thành cao đặc Xác định độc tính cấp cùa cao Lấu đỏ Sau đó, đánh giá tác động cùa cao Lấu đỏ lên thời gian cầm máu, đơng máu mơ hình in vivo tác động lên thời gian đông máu in vitro thông qua thông số PT aPTT Kết quả: Từ 1000 g dược liệu khô Lấu đô, chiết 220,45 g cao đặc, hiệu suất chiết 20,05% Từ kết thừ nghiệm độc tính cấp, xác định LD50 = 25,01 g/kg Khảo sát tác động cao Lấu đị lên thời gian chày máu máu, đơng máu mơ hình in vivo liều 2,50 1,25 g/kg chuột Ket quâ cho thay cao Lau đỏ có tác dụng cầm máu, làm giảm thời gian chảy máu đáng kể so với lô chứng sinh lý cà liều thừ nghiệm không ânh hưởng đến thời gian đơng máu Trên mơ hình in vitro, khảo sát ânh hưởng cùa cao Lấu đỏ nong độ 0,5; 1,0; 2,0 mg/ml lên q trình đơng máu thơng qua chi so PT aPTT, ket quà cho thấy cao Lấu đỏ không làm thay đổi thời gian PT aPTT so với mẫu chứng DMSO CHƯƠNG TĨNG QUAN TÀI LIỆU Lau cịn gọi Lau đó, Lấu bà, Bo giác, Bồ chất, Bầu giác, Men sứa, Cây chạo, Lá tàn Tên khoa học Psychotria rubra (Lour.) Poir Hay (Psycho tria reevesii Wall), thuộc họ Cà phê Rubiaceae [5] Đặc điểm hình thái: Cây nhỏ hay nhỡ, cao - m Cành non gần hình vng, màu nâu đỏ, cành già trịn màu xám sầm Lá mọc đoi, hình bầu dục - thuôn, dài 8-20 cm, rộng 2-7 cm, goc thuôn, đau nhọn, mặt màu lục, pha nâu đỏ, mặt màu xám nhạt, gân rõ, kèm sớm rụng Cụm hoa mọc đầu cành thành xim ngù, dài - cm; hoa màu trắng, đài có ngan, tràng cánh có lơng họng; nhị đính họng tràng, chi nhị dài bang bao phấn, bầu Q gan hình cầu, có đài tồn tại, chín màu đỏ, ô chứa hạt Mùa quâ vào tháng - tháng [5] Hình Hình vẽ lấu A: Cành mang quả; B: Hố nhỏ mang lông tơ; c, D: Hoa; E: Quà; F, G: Hạch; H: Nội nhũ Kích thước: A = 10 mm; B - D = 2,5 mm; E - H = 5mm Phân bố sinh thải: Cây Lau von có nguồn gốc Àn Độ, thấy phân bố rái rác tình phía nam đâo Hải Nam, Trung Quốc, Lào vài nước nhiệt đới châu Á khác, Việt Nam, lấu phân bố phồ biến hầu hét tinh vùng trung du núi thấp, tinh từ Quảng Bình trở Cây thường mọc rừng thứ sinh, đoi bụi, bờ nương rầy vùng đồng Bắc Bộ, Lau mọc lần lùm bụi quanh làng Lau chịu bóng, có the chịu hạn, xanh tốt gan quanh năm, hoa quà nhiều, tái sinh tự nhiên từ hạt Cây bị chặt phá, có khả tái sinh choi khỏe [5] Bộ phận dùng: Rề, thu hái quanh năm, rữa sạch, thái mòng, phơi sấy khị Lá thường dùng tươi, chế thành cao khơ [5] Thành phần hóa học: Re Lấu chứa tanin 14,9%, dẫn xuất anthraquinon psychorubin helenalin Năm 2013, Bùi Mỳ Linh Trần Thị Thuý Quỳnh khoa Y học cổ truyền - Đại học Y dược thành Ho Chí Minh phân lập hợp chất xác định cấu trúc Lấu đò, 2,6-dimethoxy-p-benzoquinon, acid betulinic acid oleanolic [6] Năm 2014, Hai Xiao Lu cộng phân lập flavonoid 6-hydroxy-luteolin-7-O- rutinosid, luteolin-7-O-rutinosid, hai iridoid 6a-hydroxygeniposid, psyrubrin A từ cao chiết ethanol 95% cuà rễ Lau đỏ [7] 2.6-dimethoxy-|> benzoquinon 6a-hydroxygeniposid Acid oleanolic OH 6-hydroxy-luteolin-7-ỡ- rutinosíd Hình Một số thành phần hóa học Lấu dở Tác dụng dược lý: - Tác dụng kháng khuẩn: Dùng phương pháp khuếch tán thạch Vòng vơ khuẩn (tính bang milimet) cùa số vi khuẩn sau: Staphylococcus aureus 10,83; Proteus vulgaris 10,00; Streptococcus faecalis 12,00; Bacillus anthracis 13,00; Escherichia coli 6,30; Streptococcus pneumoniae 9,50 [5] - Tác dụng độc tế bào: Psychorubin naphthoquinon, có tác dụng độc tế bào ung thư K.B (Human epidemic carcinoma) nong độ ED50 = 3.0 pg/ml, kết Toshimitsu Hayashi cộng thực Nghiên cứu cùa Rodrigo L Fabri cộng cho thấy psychorubin có tác dụng độc với so dòng te bào ung thư: HL60, Jurkat, MCF7 [2] - Tác dụng kháng viêm: tiến hành thực nghiệm bời Ths Phạm Thị Hoá, khoa Y học cổ truyền - Đại học Y Dược thành phố Ho Chí Minh Nghiên cứu cho thay rang cao nước cao Lau dở lieu 7,2 g/kg 14,4 g/kg the hoạt tính kháng viêm tốt, cao liều 7,2 g/kg cao nước lieu 14,4 g/kg the rõ nhất, đáng lưu ý, tương đương với diclofenac lieu 10mg/kg [9] Tác dụng kháng viêm cùa cao chiết từ thân Lấu đở thành phần cao chiểt từ thân Lấu đỏ có chứa sesquiterpen lactone helenalin, nhiều cơng trình nghiên cứu có tác dụng kháng viêm tốt [10] - Ngồi ra, psychorubin cịn thể tác dụng kháng Leishmania - ký sinh trùng gây bệnh suy nhược Leishmania Psychorubin ức che chùng: Leishmania amazonensis (IC50 = 2,7 pM) Leishmania chagasi (IC50 = 1,7 pM) Leishmania braziliensis (IC50 = l,7pM), Leishmania major (IC50 = 2,4 pM ) Psychorubin cịn có tác dụng ức ché vi khuẩn [11] Tính vị, cơng năng: Rỗ lấu có vị đang, tính mát, có tác dụng nhiệt, giải độc, khu phong, trừ thấp, tiếp cốt, sinh Lá Lau có vị đắng, chát, tính bình, có tác dụng thu sáp, chi tả, tiêu độc, cầm máu Rễ Lau trị kiết lỵ, thương hàn, thấp khớp, đau lưng, nhức xương, vet thương chảy máu Lá lấu chữa cảm mạo, bạch hầu, viêm amidan, viêm họng, tiêu chảy Dùng ngoài, trị đòn ngã tổn thương, đụng dập, vét thương chày máu, viêm mũ da, chàm, mẩn ngưa, sa Thân Lau chữa băng huyết, lỵ, đau bụng sau sinh, khí hư, bạch đới, đau Liều dùng: rễ 15 - 30 g; thân 10 - 20 g, tươi 30 - 90 g Dùng ngồi khơng kể liều lượng [5] Bài thuốc chứa Lẩu: Từ lâu, dân gian Lấu sừ dụng để trị nhiều bệnh: [5] - Chữa tiêu chày: dùng lau, cù nâu, sim, thứ 10 - 20 g sac uống - Chữa lỵ, đau bụng sau sinh: vỏ lau, vỏ vải, mồi thứ 10 - 20 g sắc uống - Chữa chàm, mẫn ngứa, mụn lở chảy nước: lau phần nấu nước rửa phan tán bột rây mịn rắc Bệnh viện Quàng Ninh dùng rề lau 100 g chặt nhó, nấu với nước cô đặc thành cao lỏng để bôi - Chữa kiết lỵ: rễ lau - 16 g, sắc uống Dùng 3-5 ngày - Chữa thương hàn: rễ lấu phơi khô tán thành bột mịn Người lớn uống 2- g, trẻ em 0,5 g, ngày lần 10 LD50 tính theo phương pháp Karber - Behrens: = ^100 ~ ~~ ntb Trong đó: LD100: lieu toi thiểu làm chết tất thú vật a: số thú chết trung bình lieu d: hiệu số cũa lieu ntb: sổ thú vật trung bình nhóm - Trường hợp 3: Sau cho chuột uống, phân suất tử vong thấp 100%, không xác định liều gây chết tuyệt đối, xác định LD50 2.6 Khảo sát tác động cầm máu đông máu 2.6.1 Mô hình cầm máu, đơng máu in vivo [ 14],[ 15] Chuột chia thành nhóm: - Nhóm chứng: Chuột cho uống nước cất - Nhóm thừ nghiệm: Chuột cho uống cao thuốc, liều ngoại suy từ kết độc tính cấp lieu sử dụng dân gian * Phương pháp khảo sát thời gian chảy máu: Cầm chuột cách nam giữ phần da đau da lưng chuột, tránh tác động vào đuôi chuột Dùng kéo sắt cắt đoạn đuôi dài khoảng mm tính từ đầu mút ngồi, đường kính khoảng 1,5 mm Ngâm phần cịn lại vào cốc dung dịch NaCl 0,9% 37°c Thời gian từ lúc bắt đầu chảy máu đen máu ngừng chây * Phương pháp khảo sát thời gian đông máu: Hứng giọt máu từ chuột lên lam kính đặt đĩa petri đe tránh tác động yeu tố ánh hưởng, đường kính giọt máu khoảng 6-7 mm Theo dõi thời gian từ lúc lấy giọt máu khởi chuột đen giọt máu đơng hồn tồn 2.6.2 Mơ hình đơng máu in vitro [14] Lấy máu chuột nhắt (Swiss albino), chống đông bang dung dịch citrate 3,8%, tỳ lệ máu citrate 9:1, ly tâm (3000 vòng/phút, 15 phút) thu huyết tương nghèo tiếu cầu (PPP) Đe xác định thời gian hoạt hóa thromboplastin phần (APTT) in vitro, lấy huyết tương nghèo tiểu cầu (PPP) ũ với cao thừ thuốc thừ APTT phút 37 °C Thời gian đông máu APTT xác định từ bắt đầu thêm calci clorid Đe đánh giá thời gian prothrobin (PT), ũ huyết tương không tiểu cầu với cao thử phút 37 °C Thời gian đơng máu bắt đau tính từ cho thuốc thừ PT 15 2.7 Xử lý số liệu phân tích thống kê Ket xữ lý bang phan mem Microsoft Excel, trình bày dạng giá trị trung bình ± sai số chuẩn cũa giá trị trung bình (Mean ± SEM) đánh giá ý nghĩa thống kê phép kiem Mann-Whitney phần mem SPSS 23.0 Sự khác biệt có ý nghĩa p < 0,05 16 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Chiết xuất dược liệu Sau bay dung mơi, khối lượng cao tồn phần thu từ 1000 g dược liệu khô Lá lấu đỏ 220,45 g Hiệu suất chiết 20,05% Hàm ẩm cao 9,05% Cao thu có màu nâu đỏ, đặc sệt, mùi thơm nhẹ cùa dược liệu Hình Cao chiết nước từ Lấu đỏ 3.2 Độc tính cấp Biểu độc tính cấp cao Lấu đỏ lên động vật thử nghiệm Sau chuột nhịn đói 12 giờ, tiến hành cho chuột uống cao Lau với nồng độ đặc qua kim 4,76 g/ml, the tích cho uống 0,2 ml/10 g the trọng chuột Sau đó, ghi nhận biêu cùa chuột 72 sau: Chuột tữ vong đen Trong 30 - 45 phút sau cho uống, chuột bắt đầu giảm hoạt động, nam im, hô hấp nhanh, có triệu chứng co thắt vùng bụng liên tục Biểu chuột trước chết: chuột thụ động, nằm im chỗ, hai chân sau co giật liên tục Kết thử nghiệm sơ khởi Sau thử nghiệm lieu khác nhau, thu kết sau: LD0 = 21,05 g/kg LD100 = 34,30 g/kg Kết thử nghiệm xác định LD50 Chuột chia thành lô, gom phái, cho uống cao chiết từ Lau dở với liều là: 21,05; 23,70; 26,35; 29,50; 31,30; 34,30 g/kg thể trọng chuột 17 Theo dõi ghi nhận cừ động tổng quát, biểu hành vi, trạng thái lông, ăn uống, tiêu tiểu số lượng chết cùa chuột 72 Neu sau 72 giờ, chuột khơng có dấu hiệu bất thường chết, tiếp tục theo dõi 14 ngày Chuột chết 14 ngày chuột sống sót sau 14 ngày mổ để quan sát đại thể quan (Hình 5) Chuột chết thời gian thử nghiệm (Hình 5B) sau mổ quan sát đại thể, thấy có tượng tắc nghẽn ruột, gan sầm màu so với chuột lơ Sinh lý (Hình 5A) Chuột cho uống cao, cịn sống sau 14 ngày thử nghiệm (Hình 5C, D), đại thể quan bình thường, khơng có thay đổi so với lơ sinh lý Hình Đại thể chuột sau thử nghiệm độc tính cấp A: Sinh lý; B: Chuột chết thời gian thừ nghiệm; C: Chuột sống sau 14 ngày; D: Chuột đực sống sau 14 ngày Tỷ lệ chuột chết trinh bày Bảng Bảng Ket quà thừ nghiệm xác định LD50 Liều (g/kg) 21,05 23,70 26,35 29,50 31,30 34,30 Số chuột/lô 10 12 12 10 Số chuột chết/lô 6 9 Phân suất tử vong (%) 60 50 75 90 100 Theo phương pháp Behrens - Karber, LD50 xác định sau: S(a xd) - = 25,01 g/kg ntb Vậy LD50 cùa cao chiết nước từ Lau đò 25,01 g/kg LDso = LD100 - 18 3.3 Khảo sát tác động cầm máu, đông máu 3.3.1 Khảo sát tác động cầm máu, đơng máu mơ hình in vivo Từ ket quà thừ nghiệm độc tính cấp, xác định LD50 = 25,01 g/kg Từ đó, ngoại suy lieu thử nghiệm tác động cam máu đông máu cũa cao chiết nước từ Lấu đò 2,50 g/kg (1/10 LD50) 1,25 g/kg (1/20 LD50) Chuột thừ nghiệm chia ngầu nhiên làm lô, chuột đực lô: - Lô (sinh lý): uống nước cất - Lô 2: uống cao Lau đỏ với liều 2,50 g/kg - Lô 3: uống cao Lấu đỏ với liều 1,25 g/kg Chuột cho uống nước cất cao Lấu đỏ lần/ngày vào buổi sáng (9h đến11 h), thể tích uổng 0,1 ml/10g ngày 90 phútsau lieu cuối cùng, cất đuôi chuột đoạn mm từ đau tận Giọt máu đau tiên hứng lên lam tính thời gian máu đơng hồn tồn đế xác định thời gian đông máu Đồng thời, đuôi chuột nhúng vào nước muối sinh lý 37°c Thời gian tính từ bắt đau nhúng đen máu ngừng chảy đe xác định thời gian chày máu Ket quà thời gian đông máu thời gian chày máu in vivo trình bày Bảng Băng Ket quà thừ nghiệm khảo sát thời gian chảy máu, đông máu cùa cao chiết nước từ Lau đỏ mơ hình in vivo Thịi gian đơng máu Thịi gian chảy máu Lơ Lơ Lơ Lô Lô Lô (Sinh lý) (LDso/10) (LD50/2O) (Sinh lý) (LDso/10) (LDso/20) Thòi gian (s) 237,88 59,75 92,00 252,75 248,63 275,63 TB±SEM ±27,91 ± 13,01** ± 14,35** ± 13,29 ± 10,23 ±8,96 25,12% ** 38,67% ** 98,37% 109,05% Lơ % so vói lơ Sinh lý **:p 0,05) 19 * Kết thử nghiệm thịi gian đơng máu Thời gian đơng máu trung bình cùa lơ sinh lý 252,75 ± 13,29 giây Ớ lô thử nghiệm, thời gian đông máu thay đổi không đáng ke so với lô sinh lý (p > 0,05) khác biệt ve thời gian đơng máu hai lô thử nghiệm * Bàn luận Từ kết quà trên, cho thấy cao chiết từ Lau đỏ có tác dụng cam máu mơ hình thừ nghiệm in vivo, làm giảm thời gian chảy máu, nhiên khơng có tác động thời gian đơng máu Điều giãi thích q trình cầm máu két họp cúa nhiều giai đoạn khác như: co mạch chỗ, kết tập tiểu cầu, tạo cục máu đơng [12] Vì vậy, hiệu q làm giảm thời gian cháy máu cùa cao Lau đỏ có the tác động làm tăng trình co mạch chỗ kích thích q trình két tập tiểu cầu, không làm ảnh hưởng đen yeu tố đông máu không làm thay đồi thời gian đông máu 3.3.2 Khảo sát tác động đông máu mơ hình in vitro Đe khảo sát rõ tác động cùa cao chiết Lấu đỏ trình đơng máu, đề tài tiếp tục tiến hành mơ hình in vitro, đánh giá ánh hường cùa Lau đỏ đường đông máu ngoại sinh nội sinh qua thông số PT (thời gian prothrombin) aPTT (thời gian hoạt hóa thromboplastin phần) Huyet tương nghèo tiểu cầu ũ với cao Lau đỏ nồng độ 0,5; 1,0; 2,0 mg/ml Ket so sánh với mầu chứng DMSO dung mơi hịa tan cao Ket quà trình bày Bảng Bảng Tác động cũa cao Lấu đỏ lên PT aPTT Mấu chứng Mẩu thử DMSO PT (s) TB ± SEM aPTT (s) TB±SEM Thông số (0,5 mg/ml) Mẩu thử (1,0 mg/ml) Mẩu thử (2,0 mg/ml) 18,48 ± 1,16 17,00 ± 1,21 17,55 ±0,34 17,51 ± 1,44 24,48 ± 1,73 26,89 ± 3,62 28,66 ± 2,69 21,94 ± 1,78 * Thòi gian prothrombin Thời gian prothrombin trung bỉnh lô chứng (DMSO) 18,48 ±1,16 giây Sau ủ huyết tương với cao chiết từ Lau đỏ nong độ thừ nghiệm: 0,5; 1,0; 2,0 mg/ml, thời gian PT thay đổi không đáng kể so với lô chứng (p > 0,05) 20 ... g cao đặc từ Lấu đỏ Cao đặc từ Lau đỏ (50 g) Quy trình chiết cao nước từ Lấu đỏ Quy trình chiết cao nước từ Lau đỏ Thừ nghiệm độc tính cấp, xác định Ket độc tính cấp cùa dịch chiết nước LD50... trọng chuột từ Lau đỏ Bảng két ve tác động cùa dịch chiết Ket quà khảo sát tác động cùa dịch chiết nước từ Lấu đỏ lên trình cấm nước từ Lấu đỏ lên q trình cam máu, đơng máu máu, đông máu Bài báo... cùa cao chiết nước từ Lau đò 25,01 g/kg LDso = LD100 - 18 3.3 Khảo sát tác động cầm máu, đông máu 3.3.1 Khảo sát tác động cầm máu, đông máu mơ hình in vivo Từ ket q thừ nghiệm độc tính cấp, xác