Nghiên cứu khả năng kháng khuẩn của dịch chiết xuất từ củ nghệ (Curcuma longa), cây cỏ mực (Eclipta prostrata L.) và cây bạch chỉ (Angelica dahurica Benth. Et Hook F.).pdf

Bộ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NGUYỄN TẤT THÀNH KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC VÀ MÔI TRƯỜNG NGUYEN TAT THANH KHÓA LUẬN TÓT NGHIỆP KHẢO SÁT KHẢ NĂNG KHÁNG KHUẨN CỦA DỊCH CHIẾT XUẤT TỪ CỦ NGHỆ (Curcuma longa), CÂY CỎ Mực (Eclipta prostrata L.) VÀ CÂY BẠCH CHỈ (Angelica dahurica Benth Et Hook F.) Sinh viên thực hiện: Bùi Thị Bích Ngọc Chun ngành : Cơng nghệ sinh học TP.HCM, tháng năm 2018 Bộ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NGUYỄN TẤT THÀNH KHOA CƠNG NGHỆ SINH HỌC VÀ MƠI TRƯỜNG gsLQIbo KHĨA LUẬN TÓT NGHIỆP KHẢO SÁT KHẢ NĂNG KHÁNG KHUẨN CỦA DỊCH CHIẾT XUẤT TỪ CỦ NGHỆ (Curcuma longa), CÂY CỎ Mực (Eclipta prostrata L.) VÀ CÂY BẠCH CHỈ (Angelica dahurica Benth Et Hook F.) Sinh viên thực : Bùi Thị Bích Ngọc Mã số sinh viên : 1311524661 Lớp : 13DSH02 Chuyên ngành : Công nghệ Sinh học Y dược Giáo viên hướng dẫn :ThS Nguyền Thị Thùy Trang ThS Nguyễn Trung Hiếu TP.HCM, tháng năm 2018 LỜI CẢM ƠN Đe hoàn thành luận văn tốt nghiệp này, em xin cám ơn thầy ThS Nguyễn Trung Hiếu cô ThS Lê Thị Thuỳ Trang tận tình hướng dần, sửa chửa sai sót tạo điều kiện để em hồn thành tốt luận văn Ngoài ra, em xin gửi lời cám ơn đen cô Nguyễn Thị Thu Hiền Khoa Dược trường Đại học Nguyễn Tất Thành tận tình tạo điều kiện, giúp đỡ, truyền đạt kinh nghiệm kiến thức đe em hồn thành khố luận Em xin chân thành cám ơn Ban giám hiệu toàn the thầy cô khoa Công nghệ Sinh học Môi trường truyền đạt kiến thức cho em bốn năm qua Con xin cám ơn ba mẹ người thân gia đình hồ trợ động viên suốt q trình học tập hồn thành luận văn tốt nghiệp Bùi Thị Bích Ngọc Khoa Công nghệ Sinh học Môi trường Trường Đại Học Nguyễn Tất Thành 11 MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii TÓM TẮT V DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT vii DANH MỤC CÁC HÌNH viii DANH MỤC CÁC BẢNG ix ĐẶT VÁN ĐÈ .1 Mục tiêu đề tài, nội dung nghiên cứu đối tượng nghiên cứu 2.1 Mục tiêu đề tài 2.2 Nội dung nghiên cứu CHƯƠNG TÓNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Nhừng dược liệu 1.1.1 Cây nghệ vàng (Curcuma longa) 1.1.2 Cây cỏ mực (Eclipta prostrata L.) 1.1.3 Cây bạch (Angelica dahurica Benth Et Hook F.) CHƯƠNG NỘI DƯNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨƯ 12 2.1 Địa điềm thời gian thực đề tài 12 2.2 Vật liệu 12 2.3 Dụng cụ, hóa chất, thiết bị 12 2.3.1 Dụng cụ 12 2.3.2 Hóa chất 12 2.4 Phương pháp 13 2.4.1 Chuẩn bị mẫu 13 2.4.2 Các bước chiết xuất 13 2.4.3 Các phương pháp định tính 15 2.4.4 Khảo sát khả kháng khuẩn cùa dịch chiết 15 2.5 Bố trí thí nghiệm 17 iii 2.5.1 Khảo sát hoạt tính kháng khuẩn loại dược liệu lên vi khuấn có lợi đường ruột 17 2.5.2 Khảo sát hoạt tính kháng khuẩn loại dược liệu lên vi khuấn gây bệnh 19 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 21 3.1 Định tính coumarin 21 3.1.1 Định tính phản ứng đóng mở vịng lacton 21 3.1.2 Định tính Coumarin phương pháp sắc kí lớp mỏng 22 3.2 Khảo sát hoạt tính kháng khuấn cùa loại dược liệu lên vi khuấn có lợi đường ruột 23 3.2.1 Khảo sát hoạt tính kháng khuẩn loại dược liệu lên vi khuấn có lợi 23 3.2.2 Khảo sát hoạt tính kháng khuấn phối hợp loại dược liệu lên vi khuẩn có lợi 26 3.3.1 Khảo sát hoạt tính kháng khuẩn loại dược liệu lên vi khuẩn gây bệnh 28 3.3.2 Khảo sát hoạt tính kháng khuẩn phối hợp loại dược liệu lên vi khuẩn gây bệnh 30 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 32 Kết luận 32 Đồ nghị 32 TÀI LIỆU THAM KHAO 33 PHỤ LỤC 34 IV TÓM TẮT Đe tài: “Khảo sát khả kháng khuẩn dịch chiết xuất từ củ nghệ (Curcuma longa}, cỏ mực (Eclipta prostrata L.) bạch (Angelica dahurica Benth Et Hook F)”, thực từ tháng 1/2018 đến 7/2018 phịng thí nghiệm Sinh hóa - Sinh dược - Ký sinh trùng, môn CNSH Y Dược, thuộc khoa NNCNC & CNSH, Trung tâm công nghệ sinh học Thành phố Hồ Chí Minh Đe tài có nội dung: Chiết xuất hoạt chất từ củ nghệ, cỏ mực bạch dung môi cồn nước, định tính diện hoạt chat coumarin dung mơi nước Khảo sát họat tính kháng khuẩn dịch chiết cồn nước từ dược liệu lên chủng vi khuẩn có lợi đường ruột khảo sát họat tính kháng khuẩn dịch chiết cồn nước từ dược liệu lên chủng vi khuẩn có hại đường ruột Các thí nghiệm bố trí theo kiêu hồn tồn ngẫu nhiên Những kết đạt sau tháng nghiên cứu: - Định tính diện hoạt chat coumarin ba loại dược liệu (Cỏ mực, Bạch chỉ, Củ nghệ) dung môi nước cồn phương pháp đóng mở vịng lacton sắc ký lớp mỏng - Đánh giá khả kháng khuẩn dịch chiết từ loại dược liệu lên vi khuẩn có lợi đường ruột - Đánh giá khả kháng khuẩn dịch chiết từ loại dược liệu lên vi khuẩn gây bệnh V SUMMARY The project title “Examine the antibacterial activity of the extract of Curcuma longa, Eclipta prostrata L., Angelica dahurica Benth Et Hook F”was was performed in - 7/2018 at The laboratory Biochemical -Biopsy - Parasites, Department of Biotechnology and Enviroment, Nguyen Tat Thanh University with the target evaluates the ability antimicrobial of the extract from medicinal herbs The research consists of four main contents: Extracting of coumarin from tumeric, false daisy and Dahurian angelica using only a solution of alcohol and water Determining coumari in water and alcohol Assessment of antimicrobial activity of the herbal extract on beneficial probitotic and the antimicrobial activity of the extract on the harmful intestinal microbiota The experiment was analysed as a completely random design: - Quantitative analysis of coumarin in the medicinal plants (turmeric, false daisy and Dahurian angelica) in water - alcohol solution by using the method of producing lactone ring and thin layer chromatography - Evaluating the antibacterial activities of herbal extracts on beneficial probiotic - Evalating the antibacterial activities of the herbal extracts on harmful intestinal microbiota VI DANH MỤC CÁC CHỦ VIẾT TẮT WOO: Môi trường sinh chitinase cải tiến woo cộng MRS: De Man - Rogosa - Shapre L acidophilus: Lactobacillus acidophilus L.plantarum: Lactobacillus plantarum L.casie: Lactobacillus casie E.coli: Escherichia COỈÌ DC: Doi chứng Ctv: Cộng tác viên Vil DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1.1 Cây nghệ vàng (Curcuma longa) Hình 1.2 Cơng thức hóa học curcumin Hình 1.3 Cây cở mực (Eclipta prostrata L.) Hình 1.4 Cây bạch (Angelica dahurica Benth Et Hook F.) Hình 2.1 Một số thiết bị dùng cho thí nghiệm Hình 2.2 Chiết dược liệu bế ủ nhiệt Hình 2.3 Mầu dịch chiết dược liệu Hình 2.4 Đĩa đánh giá hoạt tính kháng khuân dịch chiết Hình 3.1 Phản ứng đóng mở vịng lacton dược liệu Hình 3.2 Hình ảnh sắc ký lớp mỏng ánh sáng tử ngoại bước sóng 365 nm mẫu Hình 3.3 Khả kháng khuấn loại dược liệu lên vi khuẩn có lợi Hình 3.4 Khả kháng khuẩn phối hợp dược liệu lên vi khuẩn có lọi Hình 3.5 Khả kháng khuẩn loại dược liệu lên vi khuẩn gây bệnh Escherichia coll Hình 3.6 Khả kháng khuẩn phối hợp loại dược liệu lên vi khuẩn gây bệnh E.coli viii DANH MỤC • CÁC BẢNG Bảng 2.1 Khảo sát hoạt tính kháng khuẩn loại dược liệu lên vi khuẩn có lợi Bảng 2.2 Khảo sát hoạt tính kháng khuẩn phối họp dược liệu lên vi khuẩn có lợi Bảng 2.3 Khảo sát hoạt tính kháng khuẩn loại dược liệu lên vi khuẩn gây bệnh Bảng 2.4 Khảo sát hoạt tính kháng khuẩn phối họp loại dược liệu lên vi khuân gây bệnh Bảng 3.1 Định tính coumarin phản ứng hóa học Bảng 3.2 Sự xuất băng vạch loại thuốc sắc kỷ lóp mỏng Bảng 3.3 Đường kính kháng khuẩn loại dược liệu lên vi khuẩn có lợi Bảng 3.4 Đường kính kháng khuấn phối hợp dược liệu lên vi khuẩn có lợi Bảng 3.5 Đường kính kháng khuẩn loại dược liệu lên vi khuẩn gây bệnh E.coli Bảng 3.6 Đường kính kháng khuẩn phối hợp dược liệu lên vi khuân gây bệnh E.colỉ IX ... 34 IV TÓM TẮT Đe tài: “Khảo sát khả kháng khuẩn dịch chiết xuất từ củ nghệ (Curcuma longa}, cỏ mực (Eclipta prostrata L.) bạch (Angelica dahurica Benth Et Hook F)”, thực từ tháng 1/2018 đến 7/2018... sằn tự nhiên Từ nguyên nhân đó, nên dã chọn đề tài “Khảo sát khả kháng khuẩn dịch chiết xuất từ củ nghệ (Curcuma longa), cở mực (Eclipta prostrata L.) bạch (Angelica dahurica Benth Et Hook F)” Mục... DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NGUYỄN TẤT THÀNH KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC VÀ MÔI TRƯỜNG gsLQIbo KHÓA LUẬN TÓT NGHIỆP KHẢO SÁT KHẢ NĂNG KHÁNG KHUẨN CỦA DỊCH CHIẾT XUẤT TỪ CỦ NGHỆ (Curcuma longa), CÂY