JI 4 Bộ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NGUYỄN TẤT THÀNH KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC VÀ MÔI TRƯỜNG NGUYEN TAT THANH KHÓA LUẬN TÓT NGHIỆP KHẢO SÁT KHẢ NĂNG KHÁNG KHUẮN CỦA DỊCH CHIẾT XUẤT TỪ CÂY KIM TIỀ[.]
4 JI Bộ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NGUYỄN TẤT THÀNH KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC VÀ MƠI TRƯỜNG NGUYEN TAT THANH KHĨA LUẬN TĨT NGHIỆP KHẢO SÁT KHẢ NĂNG KHÁNG KHUẮN CỦA DỊCH CHIẾT XUẤT TỪ CÂY KIM TIỀN THẢO (Desmodium styracifolium (Osbeck) Merr.), SÀI ĐẤT (Wedelia chỉnensis (Osb.) Merr.), RAU ĐẮNG (Polygonum aviculare L.) Sinh viên thực : Bảo Quí Nhân Chuyên ngành : Công nghệ sinh học TP.HCM, tháng năm 2018 h—— ——— —— —————đ Bộ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NGUYỄN TẤT THÀNH KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC VÀ MƠI TRƯỜNG KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP KHẢO SÁT KHẢ NĂNG KHÁNG KHUẨN CỦA DỊCH CHIẾT XUẤT TỪ CÂY KIM TIỀN THẢO (Desmodium styracifolium (Osbeck) Merr.), SÀI ĐẤT (Wedelia chinensis (Osb.) Merr.), RAU ĐẮNG (Polygonum aviculare L.) Sinh viên thực Bảo Quí Nhân Mã số sinh viên 1311520690 Lớp 13DSH02 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Giáo viên hướng dần ThS Lê Thị Thuỳ Trang ThS Nguyền Trung Hiếu Tp Hồ Chí Minh tháng năm 2018 LỜI CẢM ƠN Tôi xin chân thành cảm ơn tất thầy người phịng thí nghiệm Sinh hóa - Sinh dược - Ký sinh trùng giúp đỡ tơi nhiệt tình thời gian thực tập Đặc biệt, em xin bày tỏ lòng tri ân sâu sắc Cô ThS Lê Thị Thuỳ Trang Thầy ThS Nguyễn Trung Hiếu hướng dần chi tiết, tận tình, dìu dắt, truyền đạt tất kiến thức đế em có thê hồn thành khóa luận Đồng thời em chân thành cảm ơn cô Nguyễn Thị Thu Hiền Khoa Dược trường Đại học Nguyễn Tất Thành truyền đạt kinh nghiệm tạo điều kiện cho em dễ dàng thực đề tài Cuối cùng, xin cảm ơn cha mẹ người thân chăm sóc hồ trợ cho suốt q trình học tập đe hồn thành luận văn Bảo Q Nhân Khoa Công nghệ Sinh học Môi trường Trường Đại Học Nguyền Tất Thành 111 MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN iii TÓM TẮT vi SUMMARY vii DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾTTẮT viii DANH MỤC CÁC HÌNH ix DANH MỤC CÁC BẢNG X ĐẶT VÁN ĐÈ xi Tính cấp thiết đề tài xi Mục tiêu đề tài, nội dung nghiên cứu đối tượng nghiên cứu xi CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀILIỆU 1.1 Đại cương số dược liệu 1.1.1 Cây Kim tiền thảo (Desmodium styracifolium (Osbeck) Merr.) 1.1.2 Cây Sài đất (Wedelia chinensis (Osb.) Merr.) 1.1.3 Cây Rau đắng (Polygonum aviculare L.) 1.2 Tình hình đề kháng kháng sinh loại vi khuẩn CHƯƠNG NỘI DƯNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN cứu 2.1 Địa điếm thời gian thực đề tài 2.2 Vật liệu 2.3 Dụng cụ, hóa chất, thiết bị 2.3.1 Dụng cụ 2.3.2 Hóa chất 2.3.3 Thiết bị 2.4 Phương pháp 2.4.1 Chuẩn bị mẫu IV 2.4.2 Các bước chiết xuất 2.4.3 Các phương pháp định tính 2.4.4 Khảo sát khả kháng khuẩn loại dịch chiết 10 2.5 Bố trí thí nghiệm 11 2.5.1 Khảo sát hoạt tính kháng khuẩn loại dược liệu lên vi khuẩn có lợi 11 2.5.2 Khảo sát hoạt tính kháng khuẩn loại dược liệu lên vi khuẩn gây bệnh 13 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THAO LUẬN 15 3.1 Định tính coumarin loại dược liệu 15 3.1.1 Định tính phản ứng đóng mở vịng lacton 15 3.1.2 Định tính Coumarin phương pháp sắc kí lớp mỏng 16 3.2 Khảo sát hoạt tính kháng khuấn loại dược liệu lên vi khuấn có lợi đường ruột 18 3.2.1 Khảo sát hoạt tính kháng khuẩn loại dược liệu lên vi khuẩn có lợi 18 3.2.2 Khảo sát hoạt tính kháng khuẩn phối hợp loại dược liệu lên vi khuẩn có lợi : 20 3.3 Khảo sát hoạt tính kháng khuẩn loại dược liệu lên vi khuẩn gây bệnh 22 3.3.1 Khảo sát hoạt tính kháng khuẩn loại dược liệu lên vi khuẩn gây bệnh 22 KÉT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 26 V TÓM TẮT Đe tài: “Khảo sát khả kháng khuẩn dịch chiết xuất từ Kim tiền thảo (Desmodiitnt styracifolium (Osbeck) Merr.), Sài đất (Wedelia chinensìs (Osb.) Merr.), Rau dang (Polygonum aviculare L.)” thực từ tháng 02/2018 đến 08/2018 phịng thí nghiệm Sinh hóa - Sinh dược - Ký sinh trùng, môn CNSH Y Dược, thuộc Khoa CNSH & Môi trường, Trường Đại học Nguyễn Tất Thành Đe tài có nội dung: Chiết xuất hoạt chất từ Kim tiền thảo, Sài đất Rau dung môi cồn tuyệt đối nước; Định tính diện cùa hoạt chất coumarin dung môi cồn dung môi nước; Khảo sát hoạt tính kháng khuẩn dịch chiết cồn dịch chiết nước từ dược liệu lên chủng vi khuẩn có lợi cho đường ruột khảo sát hoạt tính kháng khuẩn dịch chiết nước từ dược liệu lên chủng vi khuẩn có hại cho đường ruột Các thí nghiệm bố trí theo kiểu hồn tồn ngầu nhiên Những kết đạt sau tháng nghiên cứu: - Định tính diện hoạt chat coumarin ba loại dược liệu (Kim tiền thảo, Sài đất, Rau đắng) dung mơi nước cồn phương pháp đóng mở vòng lacton sắc ký lớp mỏng - Đánh giá khả kháng khuẩn dịch chiết từ loại dược liệu lên vi khuẩn có lợi đường ruột - Đánh giá khả kháng khuẩn dịch chiết từ loại dược liệu lên vi khuân gây bệnh VI SUMMARY project title “Examination of antibacterial activity of extract of Desmodium The styracifolium (Osbeck) Merr., Wedelia chinensis (Osb.) Merr., Polygonum aviculare L.” was performed from January to July 2018 at The laboratory Biochemical -Biopsy Parasites, Department of Biotechnology and Enviroment, Nguyen Tat Thanh University The research consists of four main contents: Extracting of coumarin from Desmodium styracifolium, Wedelia chinensis and Polygonum aviculare by using ethanol and distilled water Determining coumarin in ethanol and distilled water Assessment of antimicrobial activity of the herbal extract on beneficial probiotic and the antimicrobial activity of the extract on the harmful intestinal microbiota The experiment was arranged as a completely random design These are results obtained after months of research: - Quantitative analysis of coumarin in the medicinal plants (Desmodium styracifolium, Wedelia chinensis and Polygonum aviculare) in ethanol - distilled water solution by using the method of producing lactone ring and thin layer chromatography - Evaluating the antibacterial activities of herbal extracts on beneficial probiotic - Evaluting the antibacterial activities of the herbal extracts on harmful intestinal microbiota Vil DANH MỤC CÁC CHŨ VIẾT TẮT L acidophilus : Lactobacillus acidophilus L.plantarum: Lactobacillus plantarum L.casie: Lactobacillus casie E.coli: Escherichia coll WOO: Môi trường sinh chitinase cải tiến woo cộng MRS: De Man - Rogosa - Shapre ĐKTB: Đường kính kháng khuẩn trung bình ĐC: Đối chứng Vlll DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1.1 Cây Kim tiền thảo Hình 1.2 Cây Sài đất Hình 1.3 Cây Rau đắng Hình 2.1 Một sổ thiết bị dùng cho thí nghiệm Hình 2.2 Đĩa đánh giá hoạt tính kháng khuẩn dịch chiết Hình 3.1 Phản ứng đóng mở vịng lacton cùa dược liệu Hình 3.2 Hình ảnh trien khai sắc ký lóp mỏng cùa loại dược liệu Hình 3.3 Khả kháng khuẩn loại dược liệu lên vi khn có lợi Hình 3.4 Khả kháng khuẩn phối họp dược liệu lên vi khuẩn có lợi Hình 3.5 Khả kháng khuẩn loại dược liệu lên vi khuẩn gây bệnh Escherichia coli Hình 3.6 Khả kháng khuẩn phối hợp loại dược liệu lên vi khuẩn gây bệnh Escherichia coli IX DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 2.1 Khảo sát hoạt tính kháng khuẩn loại dược liệu lên vi khuấn có lợi Bảng 2.2 Khảo sát hoạt tính kháng khuẩn phối họp dược liệu lên vi khuẩn có lợi Bảng 2.3 Khảo sát hoạt tính kháng khuẩn loại dược liệu lên vi khuẩn gây bệnh Bảng 2.4 Khảo sát hoạt tính kháng khuẩn phối họp loại dược liệu lên vi khuẩn gây bệnh Bảng 3.1 Định tính coumarin phản ứng hóa học Bảng 3.2 Sự xuất băng vạch cùa loại thuốc sắc ký lóp mỏng Bảng 3.3 Đường kính kháng khuẩn loại dược liệu lên vi khuẩn có lợi Bảng 3.4 Đường kính kháng khuẩn phối hợp dược liệu lên vi khuẩn có lợi Bảng 3.5 Đường kính kháng khuẩn loại dược liệu lên vi khuẩn gây bệnh E.coli Bảng 3.6 Đường kính kháng khuẩn phối họp dược liệu lên vi khuẩn gây bệnh E.coli X ... KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP KHẢO SÁT KHẢ NĂNG KHÁNG KHUẨN CỦA DỊCH CHIẾT XUẤT TỪ CÂY KIM TIỀN THẢO (Desmodium styracifolium (Osbeck) Merr. ), SÀI ĐẤT (Wedelia chinensis (Osb. ) Merr. ), RAU ĐẮNG (Polygonum. .. dụng Vì l? ? trên, tơi chọn đe tài ? ?Khảo sát khả kháng khuẩn dịch chiết xuất từ Kim tiền thảo (Desmodium styracifolium) , Sài đất (Wedelia chinensis (Osb .), Rau đắng (Polygonum aviculare L .)? ?? Mục... Nguyền Tất Thành 2.2 Vật liệu Bột dược liệu Kim tiền thảo (Desmodium styracifolium (Osbeck) Merr. ), Sài đất (Wedelia chinensis (Osb. ) Merr. ) Rau đắng (Polygonum aviculare L .) mua hiệu thuốc Đông