Nghiên cứu tạo tế bào t biểu hiện thụ thể lai đặc hiệu CD20 (CD20 CAR t cell) và bước đầu đánh giá hoạt tính gây độc tế bào ung thư của chúng

SỞ NÔNG NGHIỆP VÀ PHÁT TRIỂN NÔNG THÔN TP HỒ CHÍ MINH TRUNG TÂM CƠNG NGHỆ SINH HỌC BÁO CÁO TỔNG HỢP KẾT QUẢ NHIỆM VỤ NGHIÊN CỨU KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ NGHIÊN CỨU TẠO TẾ BÀO T BIỂU HIỆN THỤ THỂ LAI ĐẶC HIỆU CD20 (CD20-CAR-T CELL) VÀ BƯỚC ĐẦU ĐÁNH GIÁ HOẠT TÍNH GÂY ĐỘC TẾ BÀO UNG THƯ CỦA CHÚNG Mã số: YD01/18-20 Cơ quan chủ trì nhiệm vụ: Trung tâm Cơng nghệ Sinh học TP Hồ Chí Minh Chủ nhiệm nhiệm vụ: TS Võ Nguyễn Thanh Thảo Thành phố Hồ Chí Minh - 2021 SỞ NƠNG NGHIỆP VÀ PTNT THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH TRUNG TÂM CƠNG NGHỆ SINH HỌC CỘNG HỊA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập-Tự do-Hạnh phúc Tp Hồ Chí Minh, ngày 28 tháng 12 năm 2021 BÁO CÁO THỐNG KÊ KẾT QUẢ THỰC HIỆN NHIỆM VỤ NGHIÊN CỨU KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ I THÔNG TIN CHUNG Tên nhiệm vụ: Nghiên cứu tạo tế bào T biểu thụ thể lai đặc hiệu CD20 (CD20-CART-cell) bước đầu đánh giá hoạt tính gây độc tế bào ung thư chúng (Mã số: YD01/18-20) Chủ nhiệm nhiệm vụ: Họ tên: Võ Nguyễn Thanh Thảo Ngày, tháng, năm sinh: 20/10/1984 Nam/ Nữ: Nữ Học hàm, học vị: Tiến sĩ Chức danh khoa học: Nghiên cứu viên Chức vụ: Phó trưởng phịng CNSH Y dược Điện thoại: 0901450949 E-mail: vntthao.snn@tphcm.gov.vn Tên tổ chức công tác: Trung tâm CNSH TP.HCM Địa tổ chức: 2374 Quốc Lộ 1, P Trung Mỹ Tây, Q 12, Tp HCM Địa nhà riêng: Số 39, Đường số 5, F.17, Q Gò Vấp Tổ chức chủ trì nhiệm vụ: Tên tổ chức chủ trì nhiệm vụ: Trung tâm Cơng nghệ Sinh học TP.HCM Điện thoại: 028 37153792 Fax: 028 38916997 E-mail: ttcnsh.snn@tphcm.gov.vn Website: hcmbiotech.com.vn Địa chỉ: 2374 Quốc Lộ 1, P Trung Mỹ Tây, Q 12, Tp HCM Họ tên thủ trưởng tổ chức: TS Nguyễn Đăng Quân ngày 28/10/2019 triển nông thôn việc giao tiếp tục thực nhiệm vụ khoa học công nghệ cấp sở chuyển tiếp từ năm 2016, 2017, 2018 sang năm 2019, 2020, 2021 Số 41/2019/HĐSNN ngày 09/12/2019 Hợp đồng thực nhiệm vụ khoa học công nghệ cấp sở Số 151/QĐ-CNSH ngày 10/06/2020 Quyết định Trung Tâm Công nghệ Sinh học Tp HCM việc thành lập Hội đồng Khoa học Giám định nhiệm vụ khoa học công nghệ cấp Trung tâm Quyết định Sở Nông nghiệp Phát triển nông thôn việc gia hạn thời gian thực Số 383/QĐ-SNN ngày nhiệm vụ khoa học công nghệ cấp 12/10/2020 sở, đơn vị Trung tâm Công nghệ Sinh học Tp HCM Quyết định Trung tâm Công nghệ Sinh học Tp HCM việc thành lập Hội đồng Khoa học Nghiệm thu nhiệm vụ khoa học công nghệ cấp sở Số 291/QĐ-CNSH ngày 25/11/2021 Tổ chức phối hợp thực nhiệm vụ: Số TT Tên tổ chức đăng ký theo Thuyết minh Tên tổ chức tham gia thực Nội dung Sản phẩm tham gia chủ chủ yếu đạt yếu Ghi chú* - Lý thay đổi (nếu có): Cá nhân tham gia thực nhiệm vụ: (Người tham gia thực đề tài thuộc tổ chức chủ trì quan phối hợp, không 10 người kể chủ nhiệm) Số TT Tên cá nhân đăng ký theo Thuyết minh Tên cá nhân Nội dung tham tham gia gia thực TS Võ Nguyễn Thanh Thảo TS Võ Nguyễn Thanh Thảo Chủ nhiệm đề tài, lên kế hoạch thí nghiệm, tổng kết kết quả, viết báo cáo TS Nguyễn Đăng Quân TS Nguyễn Đăng Quân Lên kế hoạch Báo cáo tổng hợp nghiên cứu, kết nghiên tổng kết kết cứu Sản phẩm chủ yếu đạt Ghi chú* Nghỉ thai sản Thuyết minh đề từ 07/2020 cương, báo cáo 02/2021 tiến độ, báo cáo giám định, báo cáo nghiệm thu CN Lê CN Lê Tham gia thực Báo cáo kết Thị Thu Thị Thu thí ngiệm nghiên cứu Lệ Lệ theo phân công phân công Nghỉ việc từ 02/2019 CN Chu Đào Xuân Trúc CN Chu Tham gia thực Báo cáo kết Đào thí nghiệm nghiên cứu Xn theo phân cơng phân công Trúc Nghỉ việc từ 06/2020 CN Huỳnh Vũ CN Huỳnh Vũ CN Ngô Tham gia thực Báo cáo kết Lương thí nghiệm nghiên cứu Đăng theo phân công phân công Thức Tham gia thực Báo cáo kết thí nghiệm nghiên cứu theo phân cơng phân cơng Chuyển phịng CM từ tháng 04/2020 Tham gia đề tài từ tháng 03/2020 7 CN Tham gia thực Báo cáo kết Phùng thí nghiệm nghiên cứu Thị Việt theo phân công phân công Anh Tham gia đề tài từ tháng 02/2021 - Lý thay đổi (nếu có): Tình hình hợp tác quốc tế: Theo kế hoạch Thực tế đạt (Nội dung, thời gian, kinh phí, (Nội dung, thời gian, kinh phí, Số Ghi chú* TT địa điểm, tên tổ chức hợp tác, số địa điểm, tên tổ chức hợp tác, số đoàn, số lượng người tham gia ) đoàn, số lượng người tham gia ) - Lý thay đổi (nếu có): Tình hình tổ chức hội thảo, hội nghị: Số TT Theo kế hoạch (Nội dung, thời gian, kinh phí, địa điểm) Thực tế đạt (Nội dung, thời gian, kinh phí, địa điểm) Ghi chú* - Lý thay đổi (nếu có): Tóm tắt nội dung, cơng việc chủ yếu: Số TT Các nội dung, công việc chủ yếu (Các mốc đánh giá chủ yếu) Thời gian (Bắt đầu, kết thúc - tháng … năm) Theo kế Thực tế hoạch đạt Võ Nội dung 1: Tạo cassette mã hóa (chimeric antigen receptor, CAR) 02/2018 - 04/2018 - mang vùng biến động scFv 07/2018 kháng thể kháng CD20 (CD20CAR) Nguyễn Thanh Thảo- thụ thể kháng nguyên dạng khảm Người, quan thực 12/2018 TTCNSH; Nguyễn Đăng Quân TTCNSH; Lê Thị Thu LệTTCNSH; Chu Đào Xuân Trúc- TTCNSH; Vũ- Huỳnh TTCNSH Võ Nguyễn Thanh Thảo – TTCNSH; Nguyễn Đăng QuânTTCNSH; Nội dung 2: Tạo dòng CD20- CAR 08/2018 - 01/2019 - Lê Thị Thu vào vector pcDNA3.3 01/2019 06/2019 Lệ TTCNSH; Chu Đào Xuân Trúc – TTCNSH; Vũ- Huỳnh TTCNSH Võ Nguyễn Thanh Thảo – TTCNSH; Nội dung 3: Biểu CD20- CAR 02/2019 - 07/2019 tế bào Jurkat T 06/2019 12/2020 Nguyễn Đăng QuânTTCNSH; Ngô Lương Đăng ThứcTTCNSH Võ Nguyễn Thanh Thảo – TTCNSH; Nguyễn Nội dung 4: Tạo tế bào T biểu CD20-CAR đánh giá hoạt tính tế bào Đăng Quân07/2019 - 01/2021 - TTCNSH; 12/2020 12/2021 Ngô Lương Đăng ThứcTTCNSH, Phùng Thị Việt Anh TTCNSH - Lý thay đổi (nếu có): Nội dung theo đề cương “Chuẩn bị dịch virus mang cassette mã hóa CD20-CAR”, khơng mua Kit Lentivirus nên chuyển thực “Nội dung 2: Tạo dòng CD20-CAR vào vector pcDNA3.3” đề chuyển nạp CD20-CAR vào tế bào phương pháp điện biến nạp (Đã hội đồng thông qua vào đợt báo cáo tiến độ 2018) III SẢN PHẨM KH&CN CỦA NHIỆM VỤ Sản phẩm KH&CN tạo ra: a) Sản phẩm Dạng I: Số TT Tên sản phẩm tiêu chất lượng chủ yếu - Chủng vi khuẩn E.coli mang plasmid biểu CD20-CAR Đơn vị đo Số lượng Theo kế hoạch Thực tế đạt Chủng Chủng E.coli mang plasmid biểu CD20CARSEQ01, SEQ02, Tên tác giả Tạp chí Khoa học Đại học Mở Thành phố Hồ Chí Minh, Số(Tập), số trang Zhang, Z., Qiu, S., Zhang, X., & Chen, W (2018) Optimized DNA electroporation for primary human T cell engineering BMC Biotechnology, 18(1), 1–9 doi: 10.1186/S12896-018-0419-0/FIGURES/5 TÓM TẮT Tên đề tài: Tạo dịng cassete mã hóa thụ thể kháng nguyên dạng khảm đặc hiệu CD20 Sinh viên thực hiện: Nguyễn Ngọc Hồng Linh Số thẻ SV: 107150303 Lớp: 15SH Tóm tắt - Phẫu thuật, hóa trị xạ trị tảng điều trị ung thư Tuy nhiên liệu pháp nhiều tác dụng phụ mang lại hiệu không cao Những tiến lĩnh vực miễn dịch học (một ngành nghiên cứu tất khía cạnh hệ thống miến dịch) phát triển cách thức phòng vệ thể được sử dụng để điều trị ung thư máu Liệu pháp tế bào T thụ thể kháng nguyên dạng khảm (CART) loại liệu pháp miễn dịch sử dụng tế bào T bệnh nhân để nhận biết công bào ung thư Các thụ thể gọi khảm CARs kết hợp tính đặc hiệu vùng chức nhận dạng kháng nguyên ung thư có lực cao, thường có nguồn gốc từ kháng thể đơn dòng - với vùng chức hoạt hoá tế bào T thụ thể Trong nghiên cứu này, chèn thêm đoạn gene nhận diện kháng nguyên CD20 để nhằm tăng tính hiệu mà cassete mang lại Kết thu được: Đã tạo thành cơng Seq mang cassete mã hóa thụ thể kháng nguyên CD20 biểu thành công Seq Jurkat mức độ RNA Từ khóa: Ung thư, Kháng thể đơn dòng, Thụ thể kháng nguyên, Khảm, Tế bào lympho T ... VỤ NGHIÊN CỨU KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ I THÔNG TIN CHUNG T? ?n nhiệm vụ: Nghiên cứu t? ??o t? ?? bào T biểu thụ thể lai đặc hiệu CD20 (CD20- CART -cell) bước đầu đánh giá ho? ?t tính gây độc t? ?? bào ung thư chúng. .. bào T biểu thụ thể kháng nguyên dạng khảm đặc hiệu CD20 (CD20 CAR -T cell) bước đầu đánh giá ho? ?t tính gây độc t? ?? bào chúng? ?? Đề t? ?i tiếp cận hướng nghiên cứu mới, nghiên cứu t? ??o tiền đề quan trọng... cứu Đề t? ?i thực nhằm nghiên cứu t? ??o t? ?? bào T biểu thụ thể kháng nguyên dạng khảm đặc hiệu CD20 (CD20- Chimeric Antigen Receptor T cells, CD20- CART -cell) có khả tiêu di? ?t t? ?? bào ung thư biểu CD20