Đang tải... (xem toàn văn)
“Phân lập và tuyển chọn vi khuẩn sản xuất chất kết tụ sinh học, vi khuẩn chuyển hóa nitơ, vi khuẩn tích lũy polyP trong chất thải trại heo (sau biogas) ở tỉnh Trà Vinh”Mặc dù có hệ thống hầm ủ biogas nhưng chất thải trại heo vẫn làm ô nhiễm môi trường. Nhiều nghiên cứu cho thấy xử lí nước thải bằng biện pháp sinh học cho hiệu quả cao. Vì thế đề tài này được thực hiện nhằm hướng đến ứng dụng các dòng vi khuẩn trong thực tế. Từ 14 mẫu chất thải sau biogas ở Tỉnh Trà Vinh phân lập được một trăm tám mươi tám dòng vi khuẩn (28 dòng sản xuất chất kết tụ sinh học, 135 dòng chuyển hóa nitơ và 25 dòng tích lũy polyP). Có 02 dòng vi khuẩn sản xuất chất kết tụ sinh học có tỉ lệ kết tụ cao với dung dịch kaolin: dòng 03.PS.3 (44,09%) và dòng 04.P.1 (50,87%); 08 dòng có khả năng chuyển hóa nitơ tốt khi kiểm tra trên môi trường minimal bổ sung NH4+, NO3 và NO2 với nồng độ tăng dần; 02 dòng có khả năng tích lũy polyP cao: dòng 01.L.1 (7,98 mgl) và dòng 05.L.4 (8,73 mgml). Tất cả chúng được nhận diện trình tự gen 16S rDNA bằng kỹ thuật PCR với cặp mồi tổng đặc hiệu cho từng loại vi khuẩn. Chúng được chọn để giải trình tự và so sánh trên ngân hàng gen (NCBI) bằng phần mềm BLAST N.
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ VIỆN NGHIÊN CỨU VÀ PHÁT TRIỂN CÔNG NGHỆ SINH HỌC PHÂN LẬP VÀ TUYỂN CHỌN VI KHUẨN SẢN XUẤT CHẤT KẾT TỤ SINH HỌC, VI KHUẨN CHUYỂN HÓA NITƠ VÀ VI KHUẨN TÍCH LŨY POLY-P TRONG CHẤT THẢI TRẠI HEO (SAU BIOGAS) Ở TỈNH TRÀ VINH LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Chuyên ngành CÔNG NGHỆ SINH HỌC Mã số 60 - 42 - 80 NĂM 2012 TÓM LƯỢC “Phân lập tuyển chọn vi khuẩn sản xuất chất kết tụ sinh học, vi khuẩn chuyển hóa nitơ, vi khuẩn tích lũy poly-P chất thải trại heo (sau biogas) tỉnh Trà Vinh” Mặc dù có hệ thống hầm ủ biogas chất thải trại heo làm ô nhiễm môi trường Nhiều nghiên cứu cho thấy xử lí nước thải biện pháp sinh họ c cho hiệu cao Vì đề tài thực nhằm hướng đến ứng dụng dòng vi khuẩn thực tế Từ 14 mẫu chất thải sau biogas Tỉnh Trà Vinh phân lập trăm tám mươi tám dòng vi khuẩn (28 dòng sản xuất chất kết tụ sinh học, 135 dịng chuyển hóa nitơ 25 dịng tích lũy poly-P) Có 02 dịng vi khuẩn sản xuất chất kết tụ sinh học có tỉ lệ kết tụ cao với dung dịch kaolin: dòng 03.PS.3 (44,09%) dịng 04.P.1 (50,87%); 08 dịng có khả chuyển hóa nitơ tốt kiểm tra mơi trường minimal bổ sung NH4+, NO3 - NO2- với nồng độ tăng dần; 02 dịng có khả tích lũy poly-P cao: dòng 01.L.1 (7,98 mg/l) dòng 05.L.4 (8,73 mg/ml) Tất chúng nhận diện trình tự gen 16S rDNA kỹ thuật PCR với cặp mồi tổng đặc hiệu cho loại vi khuẩn Chúng chọn để giải trình tự so sánh ngân hàng gen (NCBI) phần mềm BLAST N Kết cho thấy: 02 dòng sản xuất chất kết tụ sinh học (03.PS.3 04.P.1) tương đồng 98% với dòng thuộc chi Bacillus; 08 dịng chuyển hóa nitơ (12.H4.2, 06.O3.1, 12.O2 1, 03.T.1, 06.O2.1, 14.O3 1, 14.H4.4 07.T.1) tương đồng 97 đến 99% với dòng thuộc chi Arthrobacter, Brevibacterium, Rhodococcus Corynebacterium; 02 dịng tích lũy poly-P (01.L.1 05.L.4) tương đồng 98 đến 99% với dòng thuộc chi Ideonella Variovorax Cây di truyền dựa trình tự 16S rDNA (cho loại vi khuẩn) xây dựng phần mềm MEGA 5.0 cho thấy mối quan hệ di truyền gần gũi: 02 dòng sản xuất chất kết tụ sinh học (03.PS.3, 04.P.1) với dòng khác thuộc chi Bacillus; 05 dịng chuyển hóa nitơ (12.O2.1, 03.T.1, 12.H4.2, 06.O3.1, 06.O2.1) với dòng khác thuộc chi Arthrobacter chi Brevibacterium, dịng chuyển hóa nitơ (14.O3.1) với dòng khác thuộc chi Rhodococcus, 02 dòng chuyển hóa nitơ (07.T.1 14.H4 4) với dịng khác thuộc chi Corynebacterium; 02 dịng tích lũy poly-P (01.L.1, 05.L.4) với dòng khác thuộc chi Ideonella Variovorax Từ khóa: Chuyển hóa nitơ, nước thải trại heo, PCR 16S rDNA, sản xuất chất kết tụ sinh học, tích lũy poly-P i ABSTRACT “Isolation and selection biofloccullant producing bacteria, removal nitrogen bacteria and polyphosphate accumulating bacteria in sludge of pig-farm (after biogas) in Tra Vinh province” Although there are biogas system, but pig farm waste is polluting the environment Many studies show that wastewater treatment by biological methods for high efficiency So this subject were made towards the application of this strain in practice From 14 samples’s sludge of pig-farm (after biogas) in Tra Vinh province were isolated one hundred and eighty - eight isolates (28 biofloccullant producing isolates, 135 removal nitrogen isolates and 25 polyphosphate accumulating isolates) There are 02 bioloccullant producing isolates had the highest focculant rate with kaolin solution: isolate 03.PS.3 (44,09%) and isolate 04.P.1 (50,87%); 08 removal nitrogen isolates had the ability to remove nitrogen strongly after testing on minimal medium added NH 4+, NO3- and NO2- with enrichment concentration; 02 polyphosphate accumulating isolates can form highest polyphosphate: isolate 01.L.1 (7,98 mg/l) and isolate 05.L.4 (8,73 mg/ml) All of them were identified 16S rDNA gene with appropriate primers in each kind of bacteria They were chosen to sequence and compare with GenBank database of NCBI by BLAST N software The results showed that: 02 biofloccullant producing isolates (03.PS.3 and 04.P.1) were 98% of the identity with members of Bacillus; 08 removal nitrogen isolates (12.H4.2, 06.O3.1, 12.O2 1, 03.T.1, 06.O2.1, 14.O3 1, 14.H4.4 and 07.T.1) were 97 to 99% of the identity with members of Arthrobacter, Brevibacterium, Rhodococcus and Corynebacterium; 02 polyphosphate accumulating isolates (01.L.1 and 05.L.4) was 98 to 99% of the identity with members of Ideonella and Variovorax Phylogenetic tree were constructed based on partial 16S rDNA sequences (for each kind of bacteria) by MEGA 5.0 software showing phylogenetic relationships: between 02 biofloccullant producing isolates (03.PS.3, 04.P.1), members of Bacillus; between 05 removal nitrogen isolates (12.O2.1, 03.T.1, 12.H4 2, 06.O3.1, 06.O2 1), members of Arthrobacter and Brevibacterium; between (14.O3 1), members of Rhodococcus; between 02 removal nitrogen isolates (07.T.1 and 14.H4.4), members of Corynebacterium; between 02 polyphosphate accumulating isolates (01.L.1, 05.L.4), members of Ideonella and Variovorax Key words: Biofloccullant producing bacteria, PCR 16S rDNA, polyphosphate accumulating bacteria, removal nitrogen bacteria, sludge of pig-farm ii MỤC LỤC TÓM LƯỢC i ABSTRACT ii MỤC LỤC iii DANH SÁCH HÌNH vi BẢNG TỪ VIẾT TẮT viii CHƢƠNG I GIỚI THIỆU .1 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục tiêu nghiên cứu CHƢƠNG II LƢỢC KHẢO TÀI LIỆU .3 2.1 Tình hình chăn nuôi nƣớc ta tỉnh Trà Vinh 2.2 Đặc tính chất thải trại chăn nuôi heo 2.2.1 Thành phần chất thải từ trại chăn nuôi heo .4 2.2.2 Ảnh hưởng chất thải chăn nuôi đến môi trường 2.2 Giới thiệu vi khuẩn sản xuất chất kết tụ sinh học 2.2.1 Kết tụ sinh học (Flocculation) 2.2.2 Cơ chế trình kết tụ sinh học (Mechanisms of Bioflocculation) 2.2.3 Kiểm tra khả kết tụ sinh học vi khuẩn dung dịch kaolin 2.2.4 Các yếu tố ảnh hưởng đến hiệu kết tụ sinh học .7 2.2.5 Một số vi khuẩn sản xuất chất kết tụ sinh học 2.3 Giới thiệu vi khuẩn chuyển hóa nitơ 10 2.3.1 Chu trình nitơ 10 2.3.2 Một số nghiên cứu vi khuẩn chuyển hóa nitơ 12 2.4 Giới thiệu vi khuẩn tích lũy poly-P 15 2.4.1 Sơ lược phospho 15 iii 2.4.2 Vi khuẩn tích lũy poly-P q trình tích lũy polyphosphate vi khuẩn poly-P 16 2.4.3 Những nghiên cứu vi khuẩn tích lũy poly-P 17 2.5 Phƣơng pháp nhận diện vi khuẩn kỹ thuật sinh học phân tử 18 2.5.1 Sơ lược đặc điểm gen 16S rDNA 18 2.5.2 Kỹ thuật PCR (Khuất Hữu Thanh, 2006) 18 2.5.3 Điện di gel agarose (Hồ Huỳnh Thuỳ Dương, 2002) 19 2.5.4 Phương pháp giải trình tự DNA (Khuất Hữu Thanh, 2006) 20 2.5.5 Phần mềm phân tích DNA giải mã 21 2.5.6 Xây dựng phát sinh loài từ trình tự DNA phần mềm MEGA 22 CHƢƠNG III PHƢƠNG TIỆN VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 23 3.1 Thời điểm địa điểm thực đề tài 23 3.2 Phƣơng tiện nghiên cứu 23 3.2.1 Dụng cụ, thiết bị 23 3.2.2 Nguyên vật liệu 24 3.2.3 Hóa chất 24 3.2.4 Môi trường nuôi cấy, phân lập vi khuẩn 25 3.3 Phƣơng pháp nghiên cứu 28 3.3.1 Thu mẫu 28 3.3.2 Phân tích mẫu chất thải sau biogas 28 3.3.3 Phân lập vi khuẩn sản xuất chất kết tụ sinh học, vi khuẩn chuyển hóa nitơ, vi khuẩn tích lũy poly-P 29 3.3.4 Tuyển chọn dòng vi khuẩn sản xuất chất kết tụ sinh học, vi khuẩn chuyển hóa nitơ vi khuẩn tích lũy poly-P 31 3.3.5 Nhận diện (identification) phân tích đa dạng di truyền dòng vi khuẩn sản xuất chất kết tụ sinh học, vi khuẩn chuyển hóa nitơ, vi khuẩn tích lũy poly-P 36 CHƢƠNG IV KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 42 iv 4.1 Kết phân tích mẫu 42 4.2 Kết phân lập 44 4.2.1 Kết phân lập vi khuẩn sản xuất chất kết tụ sinh học 44 4.2.2 Kết phân lập vi khuẩn chuyển hóa nitơ 46 4.2.3 Kết phân lập vi khuẩn tích lũy poly-P 49 4.3 Kết tuyển chọn dòng vi khuẩn sản xuất chất kết tụ sinh học, vi khuẩn chuyển hóa nitơ vi khuẩn tích lũy poly-P 51 4.3.1 Kết tuyển chọn vi khuẩn sản xuất chất kết tụ sinh học 51 4.3.2 Kết tuyển chọn vi khuẩn chuyển hóa nitơ 51 4.3.3 Kết tuyển chọn vi khuẩn tích lũy poly-P 55 4.4 Kết nhận diện phân tích đa dạng di truyền dòng vi khuẩn sản xuất chất kết tụ sinh học, vi khuẩn chuyển hóa nitơ, vi khuẩn tích lũy poly-P 57 4.4.1 Kết nhận diện vi khuẩn sản xuất chất kết tụ sinh học 58 4.4.2 Kết nhận diện vi khuẩn chuyển hóa nitơ 61 4.4.3 Kết nhận diện vi khuẩn tích lũy poly-P 69 CHƢƠNG V KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 73 5.1 Kết luận 73 5.2 Đề nghị 73 TÀI LIỆU THAM KHẢO 74 PHỤ CHƢƠNG Phụ lục Kết thu mẫu phân tích mẫu chất thải Phụ lục Nguồn gốc đặc điểm hình thái dòng vi khuẩn phân lập Phụ lục Kết khảo sát hoạt tính dịng vi khuẩn phân lập v DANH SÁCH HÌNH Trang Hình Mơ hình chăn ni heo hệ thống hầm ủ biogas số hộ gia đình tỉnh Trà Vinh Hình Chu trình nitơ 10 Hình Chuỗi cấu trúc polyphosphate 15 Hình Mẫu chất thải trại heo sau biogas 24 Hình Thu mẫu chất thải trại chăn nuôi heo (sau biogas) 28 Hình Pha lỗng (A) nhỏ giọt (B) phương pháp đếm sống 30 Hình (A) Khuẩn lạc cấy chuyển từ mẫu trải, (B) Khuẩn lạc ròng trữ ống nghiệm chứa môi trường thạch nghiêng 30 Hình Vi khuẩn sản xuất chất kết tụ sinh học nuôi ống Falcon 31 Hình Xác định khả phát triển vi khuẩn 33 Hình 10 Đường chuẩn đo poly-P 35 Hình 11 Sơ đồ tóm tắt phương pháp nghiên cứu thí nghiệm 41 Hình 12 Kết đo pH mẫu chất thải 42 Hình 13 Mật số vi khuẩn trung bình mẫu chất thải 43 Hình 14 Một số dạng khuẩn lạc vi khuẩn sản xuất chất kết tụ sinh học 45 Hình 15 Hình dạng dịng vi khuẩn 03.PS.3 chụp kính hiển vi điện tử quét độ phóng đại 12000 lần 45 Hình 16 Một số dạng khuẩn lạc vi khuẩn chuyển hóa nitơ 48 Hình 17 Hình dạng dịng vi khuẩn 03.T1 chụp kính hiển vi điện tủ độ phóng đại 5500 lần 49 Hình 18 Một số dạng khuẩn lạc vi khuẩn tích lũy poly-P 50 Hình 19 Hình dạng dịng vi khuẩn 05.L.4 chụp kính hiển vi điện tử độ phóng đại 12000 lần 50 Hình 20 Số dịng vi khuẩn oxy hóa ammonium phát triển môi trường minimal bổ sung NH4+ 51 vi Hình 21 Số dịng vi khuẩn khử nitrate phát triển môi trường minimal bổ sung NO3 - 52 Hình 22 Số dòng vi khuẩn khử nitrite phát triển môi trường minimal bổ sung NO2 - 53 Hình 23 Số dịng vi khuẩn T (oxy hóa ammonium, khử nitrate, khử nitrite) phát triển môi trường minimal bổ sung NH4+, NO3 -, NO2- 54 Hình 24 Kết kiểm tra khả phát triển số dòng vi khuẩn chuyển hóa nitơ mơi trường minimal bổ sung sung NH 4+ , NO3-, NO2- 55 Hình 25 Sự phát triển vi khuẩn mơi trường ni cấy vi khuẩn tích lũy polyP sau ngày 56 Hình 26 Sự phát triển số dịng vi khuẩn mơi trường phosphate khó tan sau ngày 56 Hình 27 Phổ điện di sản phẩm PCR nhân lên từ DNA 02 dòng vi khuẩn sản xuất chất kết tụ sinh học gel agarose 1,2% 58 Hình 28 Cây phả hệ di truyền (phylogenetic tree) trình bày mối quan hệ di truyền dòng vi khuẩn sản xuất chất kết tụ sinh học 60 Hình 29 Phổ điện di sản phẩm PCR nhân lên từ DNA dòng vi khuẩn chuyển hóa nitơ gel agarose 1,2% 61 Hình 30 Cây phả hệ di truyền (phylogenetic tree) trình bày mối quan hệ di truyền dịng vi khuẩn chuyển hóa nitơ 68 Hình 31 Phổ điện di sản phẩm PCR nhân lên từ DNA 02 dịng vi khuẩn tích lũy poly-P gel agarose 1,2% 70 Hình 32 Cây phả hệ di truyền (phylogenetic tree) trình bày mối quan hệ di truyền dịng vi khuẩn tích lũy poly-P 72 Hình 33 Bản đồ hành chánh tỉnh Trà Vinh Hình 34 Phương trình đường chuẩn P 2O5 vii BẢNG TỪ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Từ đƣợc viết tắt ATP Adenosine triphosphate BLAST The Basic Local Alignment Search Tool BLAST N Nucleotide BLAST BSA Bovine Serum Albumin Acetyllated cBOD Carbonaceous Biochemical Oxygen Demand CFU Colony forming Unit EBPR Enhanced biological phosphorus removal EDTA Ethylene Diamin Tetra Aceticacid LB Luria Bertani NCBI National Center for Biotechnology Information OD Optical Density PCR Polymerase Chain Reaction Poly-P Polyphosphate SDS Sodium Dodecyl Sulfate T Tổng ( ammonium, nitrate, nitrite) TAE Tris acetate EDTA Taq Thermus aquaticus TBE Tris boric EDTA TE Tris EDTA Tm Melting temperature w/v Weight/Volume viii Luận văn tốt nghiệp thạc sĩ khóa 17 -2012 Trường ĐHCT CHƢƠNG I GIỚI THIỆU 1.1 Đặt vấn đề Chăn nuôi heo hoạt động sản xuất mạnh Đồng Sông Cửu Long (ĐBSCL), không góp phần làm tăng thu nhập cho người chăn ni mà cịn cung cấp lượng lớn thực phẩm giàu dinh dưỡng, vitamin, khoáng chất cho người tiêu dùng, ngồi phân heo cịn nguồn phân hữu tốt bón cho trồng Trong năm qua tình hình dân số giới ngày tăng nhanh kéo theo nhu cầu lương thực, thực phẩm tăng theo, điều đặt yêu cầu nước phải vừa đảm bảo nhu cầu lương thực vấn đề thực phẩm nhiệm vụ cần quan tâm để người có đủ lượng đạm cần thiết sống hàng ngày Vì vậy, việc chăn ni heo tăng mạnh nhằm đáp ứng nhu cầu tiêu thụ người tiêu dùng (http://www.sonongnghiep.hochiminhcity.gov.vn) Bên cạnh đó, vấn đề mơi trường yêu cầu cấp bách việc quản lý chất thải từ hoạt động chăn nuôi heo Với việc sản xuất nhỏ lẻ, truyền thống chất thải thải trực tiếp sông, nguồn sinh lượng lớn carbohydrate, protein, ammonium, nitrite, nitrate, phosphate… góp phần làm ô nhiễm môi trường nước, đặc biệt tích lũy nồng độ cao nitơ phosphate gây tượng phú dưỡng (Phan Thị Giác Tâm, 2001) Trà Vinh nằm vùng đồng sông Cửu Long (ĐBSCL), nên có điều kiện thuận lợi khí hậu, nhiệt độ ổn định thích hợp cho ngành chăn nuôi heo Theo sở nông nghiệp phát triển nông thôn tỉnh Trà Vinh năm 2012, đầu năm 2011 tồn tỉnh Trà Vinh có tổng đàn heo 449,7 triệu tăng so với năm 2010 (421,8 triệu con) Chăn nuôi Trà Vinh chủ yếu hộ gia đình chất nên thải đưa sơng, gây nhiễm môi trường Mặc dù thời gian qua, số hộ chăn ni đầu tư xây dựng hầm khí sinh học biogas nhằm giảm thiểu ô nhiễm môi trường tận dụng nguồn phân thải Nhưng số cịn so với số hộ chăn ni có làm cho tình trạng nhiễm mơi trường ngày tăng Vì muốn phát triển bền vững song song với việc phát triển kinh tế, người cần quan tâm bảo vệ môi trường Hiện nay, biện pháp hữu hiệu để xử lí nước thải biện pháp sinh học hiệu cao triệt để, khơng gây tái nhiễm chi phí Chun ngành Công nghệ Sinh học -1- Viện nghiên cứu phát triển công nghệ sinh học Luận văn tốt nghiệp thạc sĩ khóa 17 -2012 Trường ĐHCT 29 14.H 4.1 Que ngắn + Trịn Trắng đục Ngun Mơ 0,8 30 14.H 4.2 Que ngắn + Trịn Trắng đục Ngun Mơ 1,5 31 14.H 4.3 Que ngắn + Tròn Trắng đục Nguyên Mơ 0,5 32 14.H 4.4 Que ngắn + Trịn Trắng đục Nguyên Mô 1,0 33 14.H 4.5 Que ngắn + Trịn Trắng sữa Ngun Mơ 1,0 34 01.O 3.1 Que ngắn + Trịn Trắng đục Ngun Mơ 0,5 35 01.O 3.2 Que ngắn + Trịn Trắng đục Ngun Mơ 1,0 36 03.O 3.1 Que ngắn + Tròn Trắng sữa Nguyên Mơ 1,0 37 03.O 3.2 Que ngắn + Trịn Trắng đục Nguyên Mô 0,8 38 03.O 3.3 Que ngắn + Trịn Trắng đục Ngun Mơ 0,5 39 04.O 3.1 Que ngắn + Trịn Trắng sữa Ngun Mơ 0,5 40 04.O 3.2 Que ngắn + Tròn Trắng sữa Nguyên Lài 0,5 41 05.O 3.1 Que ngắn + Tròn Cam nhạt Nguyên Mơ 0,5 42 06.O 3.1 Que ngắn + Trịn Trắng sữa Nguyên Mô 1,2 43 06.O 3.2 Que ngắn + Trịn Trắng sữa Ngun Mơ 0,5 44 06.O 3.3 Que ngắn + Trịn Trắng sữa Ngun Mơ 1,0 45 07.O 3.1 Que ngắn + Trịn Trắng đục Ngun Mơ 0,5 46 07.O 3.2 Que ngắn + Tròn Trắng đục Nguyên Mơ 0,6 47 07.O 3.3 Que ngắn + Trịn Trắng sữa Nguyên Mô 1,0 48 07.O 3.4 Que ngắn + Trịn Trắng đục Ngun Mơ 0,5 49 08.O 3.1 Que ngắn + Trịn Trắng sữa Ngun Mơ 1,0 50 08.O 3.3 Que ngắn + Trịn Trắng sữa Ngun Mơ 0,5 51 09.O 3.4 Que ngắn + Tròn Trắng sữa Nguyên Mơ 1,0 52 10.O 3.2 Que ngắn + Trịn Trắng đục Nguyên Mô 1,2 53 10.O 3.3 Que ngắn + Trịn Nâu nhạt Ngun Mơ 1,0 54 10.O 3.5 Que ngắn + Trịn Nâu nhạt Ngun Mơ 0,5 55 11.O 3.4 Que ngắn + Trịn Trắng đục Ngun Mơ 0,8 56 11.O 3.5 Que ngắn + Tròn Trắng đục Nguyên Mơ 0,5 57 12.O 3.2 Que ngắn + Trịn Trắng đục Nguyên Mô 0,5 58 12.O 3.3 Que ngắn + Trịn Trắng đục Ngun Mơ 0,5 59 12.O 3.4 Que ngắn + Trịn Trắng đục Ngun Mơ 2,0 60 12.O 3.5 Que ngắn + Trịn Trắng đục Ngun Mơ 1,1 Luận văn tốt nghiệp thạc sĩ khóa 17 -2012 Trường ĐHCT 61 14.O 3.1 Que ngắn + Tròn Cam nhạt Ngun Mơ 1,0 62 14.O 3.3 Que ngắn + Trịn Trắng đục Nguyên Mô 0,5 63 14.O 3.4 Que ngắn + Trịn Trắng đục Ngun Mơ 1,5 64 14.O 3.5 Que ngắn + Trịn Trắng đục Ngun Mơ 1,0 65 01.O 2.1 Que ngắn + Trịn Nâu nhạt Mơ Ngun 0,5 66 01.O 2.2 Que ngắn + Tròn Nâu nhạt Mơ Ngun 1,0 67 02.O 2.2 Que ngắn + Trịn Trắng đục Mô Nguyên 1,0 68 03.O 2.1 Que ngắn + Trịn Nâu nhạt Mơ Ngun 0,6 69 03.O 2.3 Que ngắn + Trịn Trắng sữa Mơ Ngun 1,2 70 04.O 2.1 Que ngắn + Trịn Trắng đục Mơ Ngun 1,0 71 04.O 2.2 Que ngắn + Tròn Trắng sữa Mơ Ngun 0,5 72 04.O 2.3 Que ngắn + Trịn Trắng sữa Mô Nguyên 1,0 73 05.O 2.1 Que ngắn + Trịn Trắng đục Mơ Răng cưa 0,5 74 06.O 2.1 Que ngắn + Trịn Trắng sữa Mơ Ngun 1,3 75 06.O 2.3 Que ngắn + Trịn Trắng sữa Mơ Nguyên 1,5 76 07.O 2.1 Que ngắn + Tròn Trắng đục Mô Nguyên 1,0 77 07.O 2.2 Que ngắn + Trịn Trắng đục Mơ Ngun 0,5 78 07.O 2.3 Que ngắn + Trịn Trắng sữa Mơ Ngun 0,8 79 08.O 2.1 Que ngắn + Trịn Trắng sữa Mơ Ngun 1,2 80 08.O 2.2 Que ngắn + Trịn Trắng sữa Mơ Nguyên 1,0 81 08.O 2.3 Que ngắn + Tròn Trắng sữa Mô Nguyên 1,5 82 09.O 2.1 Que ngắn + Trịn Trắng sữa Mơ Ngun 1,3 83 09.O 2.2 Que ngắn + Trịn Trắng sữa Mơ Ngun 1,1 84 09.O 2.3 Que ngắn + Trịn Trắng đục Mơ Ngun 1,0 85 09.O 2.5 Que ngắn + Trịn Trắng đục Mơ Nguyên 1,2 86 10.O 2.1 Que ngắn + Không Trắng sữa Lài Nguyên 2,5 87 10.O 2.3 Que ngắn + Trịn Trắng sữa Mơ Ngun 1,0 88 10.O 2.4 Que ngắn + Trịn Trắng đục Mơ Ngun 2,0 89 11.O 2.1 Que ngắn + Trịn Trắng đục Mơ Ngun 1,0 90 11.O 2.3 Que ngắn + Tròn Trắng sữa Mơ Ngun 0,8 91 11.O 2.4 Que ngắn + Trịn Trắng đục Lài Nguyên 1,0 92 11.O 2.5 Que ngắn + Trịn Trắng vàng Mơ Ngun 2,0 Luận văn tốt nghiệp thạc sĩ khóa 17 -2012 Trường ĐHCT 93 12.O 2.1 Que ngắn + Trịn Trắng vàng Mơ Ngun 1,5 94 13.O 2.1 Que ngắn + Trịn Trắng đục Mơ Nguyên 0,5 95 13.O 2.2 Que ngắn + Tròn Trắng Mơ Ngun 0,8 96 01.T.1 Que ngắn + Trịn Trắng đục Răng cưa Mô 1,0 97 01.T.2 Que ngắn + Trịn Trắng đục Ngun Mơ 0,5 98 01.T.3 Que ngắn + Trịn Trắng đục Ngun Mơ 3,0 99 02.T.1 Que ngắn + Trịn Trắng ngã vàng Ngun Mơ 2,0 100 02.T.2 Que ngắn + Tròn Trắng đục Răng cưa Lài 1,8 101 02.T.4 Que ngắn + Tròn Trắng sữa Ngun Mơ 0,8 102 03.T.1 Que ngắn + Trịn Trắng sữa Ngun Mơ 1,5 103 03.T.2 Que ngắn + Trịn Nâu Ngun Mơ 0,5 104 03.T.3 Que ngắn + Trịn Trắng đục Nguyên Lài 1,0 105 03.T.4 Que ngắn + Trịn Nâu Ngun Mơ 0,4 106 04.T.1 Que ngắn + Trịn Trắng đục Ngun Mơ 0,8 107 04.T.4 Que ngắn + Tròn Trắng đục Răng cưa Lài 2,0 108 04.T.5 Que ngắn + Tròn Trắng đục Răng cưa Cầu chồng 1,5 109 05.T.3 Que ngắn + Tròn Trắng đục Nguyên Lài 1,2 110 06.T.1 Que ngắn + Tròn Trắng sữa Nguyên Lài 1,0 111 06.T.2 Que ngắn + Tròn Trắng đục Nguyên Lài 4,0 112 07.T.1 Que ngắn + Tròn Trắng đục Nguyên Mô 1,0 113 07.T.2 Que ngắn + Trịn Trắng đục Ngun Mơ 1,0 114 07.T.3 Que ngắn + Tròn Trắng sữa Nguyên Lài 1,5 115 08.T.1 Que ngắn + Trịn Trắng sữa Ngun Mơ 1,0 116 08.T.2 Que ngắn + Tròn Trắng đục Răng cưa Lài 1,2 117 08.T.3 Que ngắn + Tròn Trắng đục Nguyên Lài 2,0 118 08.T.4 Que ngắn + Tròn Trắng đục Nguyên Mơ 1,5 119 09.T.1 Que ngắn + Trịn Trắng đục Nguyên Lài 2,0 120 10.T.1 Que ngắn + Tròn Trắng đục Ngun Mơ 1,0 121 10.T.2 Que ngắn + Trịn Trắng sữa Nguyên Mô 1,5 122 10.T.3 Que ngắn + Tròn Trắng đục Nguyên Lài 1,5 123 11.T.3 Que ngắn + Trịn Trắng ngã vàng Ngun Mơ 0,5 Luận văn tốt nghiệp thạc sĩ khóa 17 -2012 Trường ĐHCT 124 11.T.4 Chùm - Trịn Vàng nhạt Ngun Mơ 0,4 125 12.T.1 Chùm - Trịn Vàng nhạt Ngun Mơ 0,4 126 12.T.2 Que ngắn + Trịn Trắng ngã vàng Ngun Mơ 1,2 127 12.T.3 Que ngắn + Trịn Vàng Ngun Mơ 1,0 128 12.T.4 Que ngắn + Tròn Trắng ngã vàng Nguyên Cầu chồng 1,8 129 13.T.2 Que ngắn + Tròn Trắng ngã vàng Nguyên Mô 1,7 130 13.T.3 Que ngắn + Trịn Trắng sữa Ngun Mơ 1,0 131 13.T.4 Que ngắn + Trịn Trắng đục Ngun Mơ 1,5 132 14.T.1 Que ngắn + Trịn Trắng đục Ngun Mơ 1,0 133 14.T.2 Que ngắn + Tròn Trắng đục Nguyên Lài 0,5 134 14.T.3 Que ngắn + Tròn Trắng ngã vàng Nguyên Lài 0,5 135 14.T.4 Que ngắn + Tròn Trắng đục Ngun Mơ 1,0 Luận văn tốt nghiệp thạc sĩ khóa 17 -2012 Trường ĐHCT Bảng 17 Nguồn gốc dòng vi khuẩn tích lũy poly-P S TT 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 Tên vi khuẩn Nguồn gốc 01.L.1 Nguyễn Văn Quang, Trà Ốt, Thơng Hịa, Cầu Kè 02.L.1 Lâm Quốc Thiện, Đầu Giồng, xã Phước Hưng, Trà Cú 02.L.3 Lâm Quốc Thiện, Đầu Giồng, xã Phước Hưng, Trà Cú 02.L.4 Lâm Quốc Thiện, Đầu Giồng, xã Phước Hưng, Trà Cú 03.L.2 Thạch Sôm, Ấp Cầu Tre, xã Long Thới, Tiểu Cần 04.L.1 Lê Văn Nguyễn, Ấp Nô Lựa A, xã Nhị Trường, Cầu Ngang 04.L.2 Lê Văn Nguyễn, Ấp Nô Lựa A, xã Nhị Trường, Cầu Ngang 05.L.4 Lư Ịch, Ấp Giữa, xã Kim Hòa, Cầu Ngang 05.L.5 Lư Ịch, Ấp Giữa, xã Kim Hòa, Cầu Ngang 06.L.1 Võ Văn Chọ, Ấp Ngãi Hiệp, xã Hưng M ỹ, Châu Thành 06.L.3 Võ Văn Chọ, Ấp Ngãi Hiệp, xã Hưng M ỹ, Châu Thành 07.L.3 Huỳnh Thành Thức, Ấp Trà Nóc, xã Song Lộc, Châu Thành 07.L.5 Huỳnh Thành Thức, Ấp Trà Nóc, xã Song Lộc, Châu Thành 08.L.1 Lê Văn Sính, Ấp Trà Ốp, xã Tân An, Càng Long 09.L.1 Nguyễn Văn Bé, Ấp Giồng Bèn, xã Huyền Hội, Càng Long 10.L.1 Nguyễn Văn Việt, Ấp Xẻo Cạn, xã Ninh Thới, Cầu Kè 10.L.2 Nguyễn Văn Việt, Ấp Xẻo Cạn, xã Ninh Thới, Cầu Kè 11.L.2 Nguyễn Hữu Trọng, Khóm - TT Cầu Kè 12.L.1 Lê Văn Dũng, Ấp Te Te 1, xã Tân Hùng, Tiểu Cần 12.L.2 Lê Văn Dũng, Ấp Te Te 1, xã Tân Hùng, Tiểu Cần 13.L.2 Châu Thị Phấn, Ấp Te Te 2, xã Tân Hùng, Tiểu Cần 13.L.3 Châu Thị Phấn, Ấp Te Te 2, xã Tân Hùng, Tiểu Cần 13.L.6 Châu Thị Phấn, Ấp Te Te 2, xã Tân Hùng, Tiểu Cần 14.L.1 Lâm Văn Nhơn, Chông Văn, xã Trường Thọ, Cầu Ngang 14.L.2 Lâm Văn Nhơn, Chông Văn, xã Trường Thọ, Cầu Ngang Luận văn tốt nghiệp thạc sĩ khóa 17 -2012 Trường ĐHCT Bảng 18 Đặc điểm hình thái dịng vi khuẩn tích lũy poly-P Đặc điểm vi khuẩn Đặc điểm khuẩn lạc Dòng vi S TT khuẩn Hình Chuyển dạng động Hình dạng Màu sắc Dạng bìa Độ Kích thƣớc (mm) 01 01.L.1 Que dài + Trịn Trắng đục Ngun Mơ 2,0 02 02.L.1 Que ngắn + Tròn Trắng đục Nguyên Lài 1,8 03 02.L.3 Que ngắn + Trịn Trắng đục Ngun Mơ 1,5 04 02.L.4 Que ngắn + Trịn Trắng đục Ngun Mơ 1,0 05 03.L.2 Que ngắn + Tròn Trắng đục Nguyên Lài 1,5 06 04.L.1 Que ngắn + Tròn Trắng đục Răng cưa Mơ 2,0 07 04.L.2 Que ngắn + Trịn Trắng sữa Nguyên Lài 1,5 08 05.L.4 Que ngắn + Không Trắng sữa Răng cưa Lài 2,5 09 05.L.5 Que ngắn + Trịn Trắng đục Ngun Mơ 1,5 10 06.L.1 Que ngắn + Trịn Trắng đục Ngun Mơ 1,0 11 06.L.3 Que dài - Trịn Trắng đục Ngun Mơ 1,5 12 07.L.3 Que ngắn + Trịn Trắng Ngun Mơ 3,0 13 07.L.5 Que ngắn + Trịn Trắng đục Ngun Mơ 1,5 14 08.L.1 Que ngắn + Tròn Trắng đục Nguyên Mơ 1,0 15 09.L.1 Que ngắn + Trịn Trắng Ngun Mơ 2,5 16 10.L.1 Que ngắn + Trịn Trắng sữa Ngun Mơ 0,5 17 10.L.2 Que ngắn + Trịn Trắng đục Nguyên Mô 1,0 18 11.L.2 Que ngắn + Trịn Trắng đục Ngun Mơ 1,0 19 12.L.1 Que ngắn - Tròn Trắng đục Nguyên Lài 0,5 20 12.L.2 Que ngắn + Tròn Trắng đục Răng cưa Cầu chồng 1,0 21 13.L.2 Que ngắn + Trịn Vàng nhạt ngun Mơ 1,8 22 13.L.3 Que ngắn + Tròn Hồng nhạt Nguyên Mơ 0,5 23 13.L.6 Que ngắn + Trịn Trắng Ngun Mơ 3,0 24 14.L.1 Que ngắn + Trịn Trắng đục Nguyên Lài 0,8 25 14.L.2 Que ngắn + Tròn Vàng nhạt Nguyên Mô 0,5 Luận văn tốt nghiệp thạc sĩ khóa 17 -2012 Trường ĐHCT Phụ lục Kết khảo sát hoạt tính dịng vi khuẩn phân lập Bảng 19 Kết kiểm tra tỉ lệ kết tụ dòng vi khuẩn sản xuất chất kết tụ sinh học S tt Vi khuẩn kết tụ polysaccharide OD (550nm) Tỉ lệ kết tụ Ghi 03.PS.3 0.355 44.09 01 dịng có tỉ lệ kết tụ 40% 01.PS.3 0,406 36,06 03.PS.1 0,412 35,12 05.PS.3 0,421 33,70 09.PS.1 0,432 31,97 02.PS.2 0,445 29,92 01.PS.1 0,463 27,09 05.PS.1 0,469 26,14 02.PS.1 0,476 25,04 10 06.PS.4 0,483 23,94 11 03.PS.2 0.512 19.37 12 08PS.1 0,514 19,06 13 04.PS.3 0,538 15,28 14 06.PS.2 0,552 13,07 15 14.PS.1 0.554 12.76 S tt Vi khuẩn kết tụ protein OD 550nm Tỉ lệ kết tụ Ghi 04.P.1 0.312 50.87 01 dịng có tỉ lệ kết tụ 50% 05.P.2 0,381 40,00 01 dòng có tỉ lệ kết tụ 40% 08.P.1 0,400 37,01 06.P.3 0,401 36,85 03.P.2 0,406 36,06 06.P.1 0,444 30,08 02.P.1 0,476 25,04 07.P.1 0,476 25,04 03.P.1 0,497 21,73 10 12.P.1 0,539 15,12 11 13.P.1 0,545 14,17 12 04.P.2 0,559 11,97 13 02.P.3 0,571 10,08 Kết đo OD 550nm mẫu chứng: 0,635 04 dịng có tỉ lệ kết tụ từ 30 đến 40% 05 dịng có tỉ lệ kết tụ từ 20 đến 30% 05 dịng có tỉ lệ kết tụ từ 10 đến 20% 04 dịng có tỉ lệ kết tụ từ 30 đến 40% 03 dịng có tỉ lệ kết tụ từ 20 đến 30% 04 dịng có tỉ lệ kết tụ từ 10 đến 20% Luận văn tốt nghiệp thạc sĩ khóa 17 -2012 Trường ĐHCT Bảng 20 Kết kiểm tra khả chuyển hóa nitơ dịng vi khuẩn chuyển hóa nitơ Nồng độ NH4+ (mM) S TT Tên vi khuẩn 100 200 300 400 500 600 700 800 900 01.H 4.2 +++ +++ ++ ++ + - - - - 02.H 4.1 +++ +++ +++ - - - - - - 02.H 4.2 +++ +++ +++ ++ + - - - - 03.H 4.1 +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ ++ - 03.H 4.3 +++ +++ ++ ++ + - - - - 04.H 4.1 +++ +++ +++ +++ + - - - - 04.H 4.2 +++ +++ +++ +++ + - - - - 05.H 4.4 +++ +++ +++ +++ ++ ++ ++ + - 06.H 4.2 +++ +++ +++ ++ - - - - - 10 06.H 4.4 +++ +++ +++ ++ - - - - - 11 07.H 4.1 +++ +++ ++ +++ +++ ++ ++ ++ - 12 07.H 4.2 +++ +++ ++ ++ ++ ++ ++ ++ - 13 07.H 4.3 +++ +++ - - - - - - - 14 08.H 4.1 +++ +++ ++ +++ + - - - - 15 08.H 4.3 +++ +++ + ++ + - - - - 16 09.H 4.1 +++ +++ ++ ++ + - - - - 17 10.H 4.1 ++ ++ - - - - - - - 18 10.H 4.2 + ++ ++ ++ ++ - - - - 19 10.H 4.3 ++ ++ +++ ++ ++ ++ ++ - - 20 10.H 4.5 ++ +++ +++ ++ ++ ++ ++ ++ - 21 10.H 4.6 + +++ +++ +++ ++ ++ ++ ++ - 22 11.H 4.1 +++ +++ +++ ++ - - - - - 23 11.H 4.3 +++ +++ ++ ++ ++ ++ ++ - - 24 11.H 4.5 +++ +++ ++ - - - - - - 25 12.H 4.1 +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ - 26 12.H 4.2 +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ - 27 13.H 4.1 +++ +++ +++ ++ ++ ++ ++ - - 28 13.H 4.2 +++ +++ +++ +++ + - - - - 29 14.H 4.1 +++ +++ +++ ++ ++ ++ ++ ++ - 30 14.H 4.2 +++ +++ +++ +++ + - - - - 31 14.H 4.3 +++ +++ +++ +++ ++ ++ ++ ++ - 32 14.H 4.4 +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ - 33 14.H 4.5 +++ +++ +++ +++ ++ ++ ++ ++ - Nồng độ NO 3- (mM) S tt Tên vi khuẩn 01.O 3.1 100 200 300 400 500 600 700 800 900 +++ +++ ++ ++ + ++ ++ ++ - Luận văn tốt nghiệp thạc sĩ khóa 17 -2012 Trường ĐHCT 01.O 3.2 +++ +++ +++ +++ ++ - - - - 03.O 3.1 +++ +++ +++ +++ +++ ++ ++ ++ - 03.O 3.2 +++ +++ ++ +++ +++ ++ +++ +++ +++ 03.O 3.3 +++ +++ ++ +++ ++ ++ ++ ++ - 04.O 3.1 +++ +++ + - - - - - - 04.O 3.2 ++ +++ ++ ++ ++ ++ ++ - - 05.O 3.1 +++ +++ ++ +++ ++ ++ ++ ++ - 06.O 3.1 +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ 10 06.O 3.2 +++ +++ ++ +++ +++ +++ +++ ++ - 11 06.O 3.3 +++ +++ ++ +++ +++ +++ +++ +++ ++ 12 07.O 3.1 +++ +++ +++ ++ +++ ++ ++ ++ + 13 07.O 3.2 +++ +++ ++ +++ ++ +++ ++ ++ - 14 07.O 3.3 +++ +++ ++ ++ +++ +++ ++ ++ - 15 07.O 3.4 +++ +++ ++ ++ ++ +++ +++ ++ - 16 08.O 3.1 +++ +++ ++ ++ + + + - - 17 08.O 3.3 +++ +++ ++ ++ + + - - - 18 09.O 3.4 ++ +++ ++ + - - - - - 19 10.O 3.2 ++ +++ ++ ++ - - - - - 20 10.O 3.3 ++ ++ ++ ++ ++ ++ - - - 21 10.O 3.5 +++ ++ ++ ++ ++ ++ - - - 22 11.O 3.4 +++ +++ +++ +++ ++ - - - - 23 11.O 3.5 +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ ++ - 24 12.O 3.2 +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ ++ 25 12.O 3.3 +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ 26 12.O 3.4 +++ +++ ++ +++ ++ ++ - - - 27 12.O 3.5 +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ ++ 28 14.O 3.1 +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ 29 14.O 3.3 +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ ++ 30 14.O 3.4 ++ +++ ++ +++ ++ ++ - - - 31 14.O 3.5 +++ +++ +++ +++ ++ + - - - Nồng độ NO 2- (mM) S TT Tên vi khuẩn 10 20 30 40 50 60 70 80 90 01.O 2.1 +++ +++ ++ ++ ++ ++ ++ - - 01.O 2.2 +++ ++ ++ ++ ++ + + - - 02.O 2.2 ++ ++ ++ - - - - - - 03.O 2.1 ++ +++ ++ ++ ++ + + - - 03.O 2.3 +++ +++ +++ ++ ++ ++ ++ ++ - 04.O 2.1 ++ ++ ++ - - - - - - 04.O 2.2 +++ ++ ++ + + ++ ++ - - 04.O 2.3 +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ + - 05.O 2.1 +++ ++ + + - - - - - Luận văn tốt nghiệp thạc sĩ khóa 17 -2012 Trường ĐHCT 10 06.O 2.1 +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ 11 06.O 2.3 +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ ++ - 12 07.O 2.1 +++ ++ ++ ++ ++ ++ ++ ++ - 13 07.O 2.2 +++ ++ ++ ++ ++ +++ ++ ++ - 14 07.O 2.3 +++ ++ ++ ++ ++ +++ ++ ++ - 15 08.O 2.1 +++ +++ ++ +++ +++ +++ - - - 16 08.O 2.2 ++ +++ ++ ++ ++ ++ + - - 17 08.O 2.3 ++ ++ + ++ +++ +++ + - - 18 09.O 2.1 ++ ++ ++ ++ ++ ++ - - - 19 09.O 2.2 ++ ++ ++ ++ ++ ++ - - - 20 09.O 2.3 ++ ++ ++ ++ ++ ++ - - - 21 09.O 2.5 +++ +++ ++ +++ ++ +++ - - - 22 10.O 2.1 +++ +++ +++ ++ ++ + ++ ++ - 23 10.O 2.3 +++ +++ +++ ++ ++ + ++ ++ - 24 10.O 2.4 +++ +++ +++ ++ +++ +++ +++ + - 25 11.O 2.1 +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ ++ - 26 11.O 2.3 +++ +++ +++ +++ +++ +++ ++ ++ - 27 11.O 2.4 +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ + 28 11.O 2.5 +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ + 29 12.O 2.1 +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ +++ 30 13.O 2.1 ++ ++ + ++ ++ + + - - 31 13.O 2.2 +++ ++ ++ +++ +++ +++ +++ - - Nồng độ NH4+ - NO 3- - NO 2- (mM) S TT Tên vi khuẩn 100 – 100 - 10 200 – 200 - 20 300 – 300 – 30 400 – 400 - 40 01 01.T.1 +++ + - - 02 01.T.2 +++ + - - 03 01.T.3 +++ ++ - - 04 02.T.1 +++ +++ - - 05 02.T.2 +++ + - - 06 02.T.4 +++ ++ - - 07 03.T.1 +++ +++ + - 08 03.T.2 ++ ++ + - 09 03.T.3 +++ ++ - - Luận văn tốt nghiệp thạc sĩ khóa 17 -2012 Trường ĐHCT 10 03.T.4 +++ ++ - - 11 04.T.1 ++ + - - 12 04.T.4 +++ + 13 04.T.5 +++ + - - 14 05.T.3 +++ + - - 15 06.T.1 ++ + - - 16 06.T.2 +++ + - - 17 07.T.1 +++ +++ + - 18 07.T.2 ++ ++ + - 19 07.T.3 +++ ++ - - 20 08.T.1 ++ + - - 21 08.T.2 ++ + - - 22 08.T.3 ++ - - - 23 08.T.4 ++ - - - 24 09.T.1 + - - - 25 10.T.1 ++ - - - 26 10.T.2 +++ + - - 27 10.T.3 + + - - 28 11.T.3 + - - - 29 11.T.4 + - - - 30 12.T.1 +++ +++ - - 31 12.T.2 +++ +++ - - 32 12.T.3 +++ +++ - - 33 12.T.4 +++ +++ - - 34 13.T.2 +++ ++ - - 35 13.T.3 ++ ++ - - 36 13.T.4 ++ ++ - - 37 14.T.1 ++ - - - 38 14.T.2 +++ + - - 39 14.T.3 +++ +++ - - 40 14.T.4 +++ - - - - Luận văn tốt nghiệp thạc sĩ khóa 17 -2012 Trường ĐHCT Bảng 21 Khả phát triển dòng vi khuẩn tích lũy poly-P mơi trƣờng tích lũy poly-P Thời gian theo dõi (ngày) S tt Dòng đƣợc chọn Dòng vi khuẩn Ngày Ngày Ngày Ngày Ngày 01 01.L.1 + ++ +++ +++ +++ 02 02.L.1 - - + ++ ++ 03 02.L.3 + + ++ ++ ++ 04 02.L.4 + ++ ++ +++ +++ 05 03.L.2 - + + + ++ 06 04.L.1 ++ ++ +++ +++ +++ * 07 04.L.2 + ++ +++ +++ +++ * 08 05.L.4 ++ +++ +++ +++ +++ * 09 05.L.5 - ++ ++ ++ ++ 10 06.L.1 - + ++ ++ ++ 11 06.L.3 - + + + + 12 07.L.3 ++ +++ +++ +++ +++ 13 07.L.5 + + ++ ++ ++ 14 08.L.1 + + ++ ++ ++ 15 09.L.1 ++ +++ +++ +++ +++ 16 10.L.1 - + + + + 17 10.L.2 + + + ++ ++ 18 11.L.2 + + ++ ++ ++ 19 12.L.1 + + ++ ++ ++ 20 12.L.2 - + ++ ++ ++ 21 13.L.2 ++ +++ +++ +++ +++ 22 13.L.3 + ++ ++ ++ ++ 23 13.L.6 +++ +++ +++ +++ +++ * 24 14.L.1 + ++ ++ +++ +++ * 25 14.L.2 - + ++ ++ ++ * * * * * (-) Không phát triển; (+) Phát triển yếu; (++) Phát triển trung bình; (+++) Phát triển tốt; (*) Dịng chọn Luận văn tốt nghiệp thạc sĩ khóa 17 -2012 Trường ĐHCT Bảng 22 Khả phát triển dòng vi khuẩn tích lũy poly-P mơi trƣờng phosphate khó tan Khả phát triển S tt Dòng vi khuẩn Khả tạo halo Dòng đƣợc chọn 01.L.1 + ++ * 02.L.1 + ++ * 02.L.3 + ++ * 02.L.4 + ++ x 03.L.2 ++ ++ 04.L.1 ++ +++ x 04.L.2 ++ +++ * 05.L.4 +++ +++ * 05.L.5 ++ +++ * 10 06.L.1 ++ ++ * 11 06.L.3 + ++ * 12 07.L.3 +++ +++ x 13 07.L.5 + ++ * 14 08.L.1 + ++ * 15 09.L.1 +++ +++ * 16 10.L.1 + ++ * 17 10.L.2 ++ ++ x 18 11.L.2 + +++ 19 12.L.1 ++ ++ x 20 12.L.2 ++ +++ * 21 13.L.2 ++ +++ * 22 13.L.3 ++ ++ * 23 13.L.6 +++ +++ x 24 14.L.1 + ++ x 25 14.L.2 ++ ++ * * * (x) Có khả hịa tan phosphate khó tan (tạo halo); (o) Khơng khả hịa tan phosphate khó tan (khơng tạo halo); (-) Khơng phát triển; (+) Phát triển yếu; (++) Phát triển trung bình; (+++) Phát triển tốt; (*) Dòng chọn Luận văn tốt nghiệp thạc sĩ khóa 17 -2012 Trường ĐHCT Bảng 23 Tổng hợp kết xác định khả tích lũy poly-P S TT Tên dòng A B Dòng đƣợc chọn 01.L.1 01.L.1 01.L.1 * 02.L.1 02.L.1 02.L.3 02.L.3 02.L.4 03.L.2 04.L.1 04.L.1 04.L.2 04.L.2 04.L.2 * 05.L.4 05.L.4 05.L.4 * 05.L.5 05.L.5 06.L.1 06.L.1 11 06.L.3 06.L.3 12 07.L.3 13 07.L.5 07.L.5 14 08.L.1 08.L.1 15 09.L.1 02.L.4 03.L.2 07.L.3 09.L.1 10.L.1 17 10.L.2 18 11.L.2 09.L.1 * 10.L.1 11.L.2 12.L.1 20 12.L.2 12.L.2 21 13.L.2 22 13.L.3 23 13.L.6 13.L.6 24 14.L.1 14.L.1 25 14.L.2 13.L.2 13.L.2 * 13.L.3 14.L.2 (A) Dịng chọn kiểm tra mơi tích lũy poly-P; (B) Dòng chọn kiểm tra mơi trường phosphate khó tan; (*) Dịng chọn giao A B Luận văn tốt nghiệp thạc sĩ khóa 17 -2012 Trường ĐHCT Bảng 24 Kết đo OD để xác định hàm lƣợng polyphosphate S tt Mẫu OD1 OD2 Ống 0 Ống 10 0,1 Ống 20 0,237 Ống 30 0,387 Ống 40 0,522 Ống 50 0,625 01.L.1 0,058 0,095 04.L.2 0,076 0,093 05.L.4 0,083 0,115 10 09.L.1 0,015 0,037 11 13.L.2 0,04 0,063 Hình 34 Phương trình đường chuẩn P 2O5 ... 3.3.3 Phân lập vi khuẩn sản xuất chất kết tụ sinh học, vi khuẩn chuyển hóa nitơ, vi khuẩn tích lũy poly-P 29 3.3.4 Tuyển chọn dòng vi khuẩn sản xuất chất kết tụ sinh học, vi khuẩn chuyển hóa. .. Phân lập dòng vi khuẩn sản xuất chất kết tụ sinh học, vi khuẩn chuyển hóa nitơ, vi khuẩn tích lũy poly-P từ chất thải trại heo (sau biogas) tỉnh Trà Vinh - Tuyển chọn dòng vi khuẩn sản xuất chất. .. vi khuẩn chuyển hóa nitơ 46 4.2.3 Kết phân lập vi khuẩn tích lũy poly-P 49 4.3 Kết tuyển chọn dòng vi khuẩn sản xuất chất kết tụ sinh học, vi khuẩn chuyển hóa nitơ vi khuẩn tích lũy
