Phân lập và xác định đặc tính sinh học của vi nấm chịu axit mạnh phân lập tại việt nam

LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đề tài: “Phân lập xác định đặc tính sinh học vi nấm chịu axit mạnh phân lập Việt Nam” PGS.TS Vũ Nguyên Thành PGS TS Bùi Thị Việt Hà hướng dẫn cơng trình nghiên cứu thân số kết cộng tác với học viên khác Các kết công bố luận văn trung thực, xác tơi xin chịu trách nhiệm hoàn toàn số liệu, nội dung trình bày luận văn Hà Nội, ngày 15 tháng 12 năm 2020 Học viên Lã Thị Mỹ Hạnh Luận văn thạc sĩ LỜI CẢM ƠN Tôi xin gửi lời cảm ơn sâu sắc tới PGS.TS Vũ Nguyên Thành, Giám đốc Trung tâm Vi sinh vật công nghiệp, Viện Công nghiệp thực phẩm PGS.TS Bùi Thị Việt Hà, Giảng viên trường Đại học Khoa học Tự nhiên - ĐHQGHN, thầy tận tình hướng dẫn tạo điều kiện giúp đỡ tơi hồn thành luận văn Tôi xin chân thành cảm ơn giúp đỡ nhiệt tình trách nhiệm tập thể cán Trung tâm Vi sinh vật Công nghiệp, Viện Cơng nghiệp Thực phẩm Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn tới thầy cô giáo trường Đại học Khoa học Tự nhiên- ĐHQGHN, người truyền đạt kiến thức cho suốt hai năm học Cuối cùng, tơi xin cảm ơn gia đình, người thân bạn bè động viên, hỗ trợ để tơi hồn thành q trình học tập nghiên cứu Kết luận văn hỗ trợ đề tài “Khai thác ứng dụng nguồn gen vi sinh vật địa phân hủy lignocellulose xử lý chất thải nhà máy sản xuất cồn sinh học, NVQG2020/ ĐT.01” Hà Nội, ngày 15 tháng 12 năm 2020 Học viên Lã Thị Mỹ Hạnh Lã Thị Mỹ Hạnh K27 – Vi sinh vật học MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN LỜI CẢM ƠN MỤC LỤC .4 DANH MỤC HÌNH DANH MỤC BẢNG .8 DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT .9 MỞ ĐẦU 10 CHƢƠNG - TỔNG QUAN TÀI LIỆU 12 1.1 Vi nấm chịu axit 12 1.1.1 Đặc điểm nhóm vi nấm chịu axit 13 1.1.2 Ứng dụng nhóm vi nấm chịu axit mạnh 15 1.1.3 Một số nhóm vi nấm chịu axit phổ biến 17 1.1.4 Tình hình nghiên cứu vi nấm chịu axit nước 21 1.2 Lignocellulose enzyme thủy phân lignocellulose 22 1.2.1 Giới thiệu lignocellulose 22 1.2.2 Enzyme thủy phân lignocellulose 27 2.1 Đối tƣợng nghiên cứu 31 2.2 Hóa chất thiết bị 31 2.2.1 Hóa chất 31 2.2.2 Thiết bị dụng cụ 32 2.3 Môi trƣờng nghiên cứu 33 2.3.1 Môi trường PDA 33 2.3.2 Môi trường Malt 2Bx (pH 5.6) 33 2.3.3 Môi trường pH thấp (pH 1.0, pH 2.7) 33 2.3.4 Môi trường nuôi tách chiết enzyme chủng mốc pH thấp 34 2.4 Phƣơng pháp nghiên cứu 34 2.4.1 Phương pháp phân lập 34 2.4.2 Quan sát hình thái khuẩn lạc, tế bào 34 2.4.3 Phương pháp điện di protein SDS-PAGE 35 2.4.4 Phương pháp điện di Zymogram 36 2.4.5 Phương pháp tách chiết ADN tế bào vi nấm 37 2.4.6 Phương pháp tinh ADN 37 2.4.7 Phương pháp phân loại nấm men dựa vào đọc trình tự rDNA 38 2.4.8 Phương pháp điện di 38 2.4.9 Nhuộn gel đọc kết 39 2.4.10 Nuôi cấy tách chiết enzyme 39 2.4.11 Xác định hoạt độ enzyme phương pháp DNS 39 2.4.12 Xác định hoạt tính enzyme pH pH 1.0, pH 3.0 pH 5.0 40 2.4.13 Đánh giá độ bền nhiệt enzyme 45 2.4.14 Phương pháp xác định protein (Lowry) 45 2.4.15 Phương pháp xác định hoạt tính phân giải cellulose 46 Chƣơng - KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 48 3.1 Kết phân lập, phân nhóm định tên chủng vi nấm chịu nhiệt .48 3.1.1 Kết phân lập 48 3.1.2 Hình thái khuẩn lạc tế bào 49 3.1.3 Phân nhóm định tên 78 chủng nấm mốc 53 3.2.1 Phân tích hàm lượng protein chủng vi nấm 57 3.2.2 Đánh giá khả phân giải chất CMC chủng vi nấm 59 3.2.3 Đánh giá khả phân giải chất tinh bột chủng vi nấm 61 3.2.4 Khảo sát khả sinh enzyme thủy phân lignocellulose 63 3.2.5 Phân tích hệ protein hệ enzyme thủy phân lignocelulose 69 3.2.6 Kiểm tra khả hoạt động enzyme pH khác 70 3.2.7 Kiểm tra khả bền nhiệt enzyme phương pháp DNS 74 3.2.8 Kiểm tra khả bền nhiệt enzyme phương pháp điện di 77 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ .82 TÀI LIỆU THAM KHẢO 83 PHỤ LỤC 90 DANH MỤC HÌNH Hình 1 Môi trường axit cực mạnh 13 Hình Acidomyces acidophilus 19 Hình Acidothrix acidophila [43] 20 Hình Acidea extrema 21 Hình Cấu trúc lignocellulose 22 Hình Cấu trúc phân tử cellulose 24 Hình Cấu trúc phân tử CMC 24 Hình Cấu trúc phân tử Hemicellulose Lignin 27 Hình Cơ chế phản ứng cellulase 29 Hình 10 Cơ chế phản ứng hemicellulase 30 Hình Đường chuẩn D-xylose pH 1.0, pH 3.0 pH 5.0 .41 Hình 2 Đường chuẩn D-glucose pH 1.0, pH 3.0 pH 5.0 44 Hình Hình ảnh mẫu phân lập 49 Hình Đặc điểm hình thái khuẩn lạc tế bào môi trường PDA (trái) môi trường Malt 2Bx pH 1.0 (phải) chủng AS 173-2 (Thanh chèn 10 µm) 50 Hình 3 Đặc điểm hình thái khuẩn lạc tế bào mơi trường PDA (trái) môi trường Malt 2Bx pH 1.0 (phải) chủng ASS 80-1 (Thanh chèn 10 µm) 50 Hình Đặc điểm hình thái khuẩn lạc tế bào môi trường PDA (trái) môi trường Malt 2Bx pH 1.0 (phải) chủng ASS 45-1 (Thanh chèn 10 µm) 51 Hình Đặc điểm hình thái khuẩn lạc tế bào môi trường PDA (trái) môi trường Malt 2Bx pH 1.0 (phải) chủng ASS 52-1 (Thanh chèn 10 µm) 51 Hình Đặc điểm hình thái khuẩn lạc tế bào môi trường PDA (trái) môi trường Malt 2Bx pH 1.0 (phải) chủng ASM147 (Thanh chèn 10 µm) .51 Hình Đặc điểm hình thái khuẩn lạc tế bào môi trường PDA (trái) môi trường Malt 2Bx pH 1.0 (phải) chủng ASS 74-4 (Thanh chèn 10 µm) 51 Hình Đặc điểm hình thái khuẩn lạc tế bào môi trường PDA (trái) môi trường Malt 2Bx pH 1.0 (phải) chủng ASS 46-2 (Thanh chèn 10 µm) 52 Hình Đặc điểm hình thái khuẩn lạc tế bào môi trường PDA (trái) môi trường Malt 2Bx pH 1.0 (phải) chủng ASS 135-1 (Thanh chèn 10 µm) 52 Hình 10 Đặc điểm hình thái khuẩn lạc tế bào môi trường PDA (trên) môi trường Malt 2Bx pH 1.0 (dưới) chủng ASS 96-1 (Thanh chèn 10 µm) 52 Hình 11 Đặc điểm hình thái khuẩn lạc tế bào mơi trường PDA (trên) môi trường Malt 2Bx pH 1.0 (dưới) chủng AST 155-1 (Thanh chèn 10 µm) 52 Hình 12 Đặc điểm hình thái khuẩn lạc tế bào môi trường PDA (trên) môi trường Malt 2Bx pH 1.0 (dưới) chủng AST 175-2 (Thanh chèn 10 µm) 53 Hình 13 Đặc điểm hình thái khuẩn lạc tế bào môi trường PDA (trái) môi trường Malt 2Bx pH 1.0 (phải) chủng ASM 122 (Thanh chèn 10 µm) 53 Hình 14 Băng điện di protein fingerprinting 54 Hình 15 Cây phân loại chủng vi nấm chịu pH thấp dựa trình tự ITS 54 Hình 16 Hàm lượng protein chủng vi nấm phân lập 58 Hình 17 Vịng phân giải thể khả thủy phân CMC 60 Hình 18 Vòng phân giải thể khả thủy phân Tinh bột 62 Hình 19 Đồ thị hoạt tính CMCase chủng vi nấm 66 Hình 20 Đồ thị hoạt tính Xylanase chủng vi nấm 68 Hình 21 Ảnh điện di SDS-PAGE zymogram CMC, xylan chủng 70 Hình 22 Hoạt tính CMCase số chủng pH 1.0, pH 3.0, pH 5.0 72 Hình 23 Hoạt tính xylanase số chủng pH 1.0, pH 3.0, pH 5.0 73 Hình 24 Độ bền nhiệt xylanase chủng phân lập 75 Hình 25 Độ bền nhiệt CMCase chủng phân lập 76 Hình 26 Ảnh điện di SDS-PAGE zymogram CMC, xylan khảo sát độ bền nhiệt chủng vi nấm 78 Hình 27 Khả phân giải CMC đánh giá tạo thành đường kính vịng thủy phân 80 DANH MỤC BẢNG Bảng 1 Một số nhóm vi nấm chịu acid cơng bố giới .18 Bảng Thành phần lignocellulose rác thải phế phụ liệu nông nghiệp phổ biến 22 Bảng Hàm lượng cellulose số nguyên liệu tự nhiên [16] 23 Bảng Bảng phân loại hệ enzyme cellulase [12, 28] 28 Bảng Mơ tả hình thái khuẩn lạc .49 Bảng Kết phân nhóm 85 chủng fingerprinting .55 Bảng 3 Các chủng sử dụng để đánh giá đặc tính 59 Bảng Kích thước vòng phân giải CMC enzyme vi nấm chịu pH thấp .61 Bảng Kích thước vịng phân giải tinh bột enzyme vi nấm chịu pH thấp .63 Bảng Hoạt tính CMCase chủng vi nấm chịu pH thấp .64 Bảng Hoạt tính xylanase chủng vi nấm chịu pH thấp .67 DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Bp: Base pair (cặp bazơ) CBH: Cellobiohydrolase CBM: Carbohydrate-binding module CE: Carbohydrate esterase CMC: Cacboxymethyl cellulose dNTP: Deoxyribonucleotide triphosphate DNS: Dinitrosalicylic acid EG: Endoglucanase FPU: Filter paper unit GH: Glycoside hydrolase ITS: Internal transcribed spacer PCR: Polymerase chain reaction (kỹ thuật phản ứng chuỗi polymerase) PDA: Potato Dextrose Agar rDNA-Ribosomal DNA rRNA-Ribosomal RNA SDS- PAGE: Sodium dodecyl sulphat polyacrylamide gel electrophoresis T – Type strain (chủng chuẩn) U – Unit (đơn vị) MỞ ĐẦU Vi nấm đóng vai trị phân hủy chất hữu thiếu chu trình chuyển hóa trao đổi vật chất hệ sinh thái Nấm phân bố toàn giới có khả tồn tại, phát triển nhiều điều kiện môi trường khác Vi nấm phát triển môi trường khắc nghiệt quan tâm đặc biệt mặt cơng nghệ cung cấp nguồn enzyme với đặc tính khác biệt, đáp ứng yêu cầu công nghệ đặc thù Vi sinh vật, enzyme hoạt động điều kiện khắc nghiệt nhiệt độ, pH ứng dụng sản xuất nhằm hạn chế nguy tạp nhiễm Là nước nông nghiệp, hàng năm công nghiệp chế biến Việt Nam tạo nguồn phế phụ phẩm lớn không sử dụng hợp lý dẫn tới vấn đề ô nhiễm môi trường Tuy nhiên, phần lớn nguồn nguyên liệu ứng dụng sản xuất thức ăn chăn nuôi công nghệ vi sinh, enzyme Bên cạnh Việt Nam thuộc vùng khí hậu nhiệt đới với hệ vi sinh vật vơ đa dạng phong phú Đa dạng nguồn gen giúp ích việc tìm kiếm tác nhân phù hợp chuyển hóa, chế biến phế phụ phẩm nơng nghiệp thành sản phẩm hữu ích Nghiên cứu đề cập tới nhóm vi nấm có khả phát triển điều kiện môi trường axit mạnh (1% H₂ SO₄ ) nhằm tìm kiếm chủng giống, enzyme có khả hoạt động pH thấp vốn thường gặp trình xử lý nguyên liệu axit Ngoài ra, enzyme vi sinh vật hoạt động pH thấp ứng dụng chăn nuôi khả chống chịu điều kiện axit dịch dày động vật Nhằm mục đích nghiên cứu khả sinh tổng hợp enzyme phân giải vật liệu lignocellulose số chủng nấm chịu axit tự nhiên, tiến hành nghiên cứu đề tài: “Phân lập xác định đặc tính sinh học vi nấm chịu axit mạnh phân lập Việt Nam ” Đề tài nghiên cứu bao gồm nội dung sau: - Phân lập, tuyển chọn vi nấm chịu axit mạnh TCTCTTGGCTCCGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATACGTAATGCGAATTGCAGATCTCCAGTGAG TCATCGAATCTTTGAACGCACATAGCGCCCGCCAGCTCTCTGGCGGGCATGCCCGTCCGAGCGTCGATTACAC CGCTCGAGCGCGCCTCTCTACCCGGGAGGTCGTCGCTCGGTGTTGGGGCAGTAGGGGGGATTTCTCTCCCCTA CGCCCCCAAAAGCATTGCGCGGCCCTCGCATCAGGACCCAAGCACAGTAAACTTCTCACGTTGAGCTGCTTAG GGACACCTACGCCGAGGCGCCAGCCGTAAAACCCCCAACATAGGCCTGCTCGCCAGGCCGCCTGATGTTGACC TCGGATCGGGTAGGACGACCCGCTGAACTTAAGCATATCAATAAGCGGAGGAAAAGAAACCAACAGGGATTGC CCCAGTAGCGGCGAGCGAAGCGGCAAAAGCTCAGATTTGAAATCTGGCCGTCCCCGCGGCGGCCCGAATTGTA ATCTGTAGGGGATGGTTCCAACTGACGTGTTCTGCCTAAGTCCCCTGGAACGGGGCGCCATAGAGGGTGAGAG CCCCGTGAGGTAGGGCGCGCTCGGTAAATTGTGAATCTCCTCCGACGAGTCGAGTAGTTTGGGAATGCTGCTC TAAATGGGAGGTATATTCCTTCTAAAGCTAAATACCGGCCGGAGACCGATAGCGCACAAGTAGAGTGATCGAA AGGTGAAAAGCACTTTGGAAAGAGAGTGAAATAGTACGTGAAATTGTTGCAGGGGAAGCGCTCTTGACCAGTC GCGCGCCGTGGGATCAGCCGTCGTTTACTCGGCGGTGTACTCCCTCCGGTTGCGGGTCAGCACCGGCTCTGGC GGTGGGATAGGCTCGCTGGGAACGTGGCCCTGCCTTCGGGTGGGGTGTTATAGCCCCGGTGTGCGTACCGCCT GCTGGGGCCGAGGTATCTTGCGCCTTACGGCTAGGATG >ASS46.1_ITS_VT2829 GGAAGTAAAAGTCGTAACAAGGTCTCCGTTGGTGAACCAGCGGAGGGATCATTAGAGGGTCTACAGACCACCT ACTGTTCTTAACCATACCGCGTACCTAGCCGGATAACATATGCATCTGCCTCGGCGGCGGCCCCAGGGGGGGC CTCTGCCCGCCAAGCCGCAACCCGCGGTACGGCGGGCGCCGCCGGTGGCGCCTAAACTAAAAAGCATTGTAAG TGGGTTATACCACTGCAAAAGAACAAAACAAAAGATAAAAATCAAAACCCATTACAACCTGCAACAACGGATC TCTTGGCTCCGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATACGTAATGCGAATTGCAGATCTCCAGTGAGTC ATCGAATCTTTGAACGCACATAGCGCCCGCCAGCTCTCTGGCGGGCATGCCCGTCCGAGCGTCGATTACACCG CTCGAGCGCGCCTCTCTACCCGGGAGGTCGTCGCTCGGTGTTGGGGCAGTAGGGGGGGATTTCTCTCCCCTAC GCCCCCAAAAGCATTGCGCGGCCCTCGCATCAGGACCCAAGCACAGTAAACTTCTCACGTTGAGCTGCTTAGG GACACCTACGCCGAGGCGCCAGCCGTAAAACCCCCAACATAGGCCTGCTCGCCAGGCCGCCTGATGTTGACCT CGGATCGGGTAGGACGACCCGCTGAACTTAAGCATATCAATAG >ASS88.1_ITSD1D2_VT2844 TCTTGGTCCAATTAGAGGAAGTAAAAGTCGTAACAAGGTCTCCGTTGGTGAACCAGCGGAGGGATCATTAGAG GGTCTACAGACCACCTACTGTTCTTAACCATACCGCGTACCTAGCCGGATAACATATGCATCTGCCTCGGCGG CGGCCCCAGGGGGGGCCTCTGCCCGCCAAGCCGCAACCCGCGGTACGGCGGGCGCCGCCGGTGGCGCCTAAAC TAAAAAGCATTGTAAGTGGGTTATGCCACTGCAAAAGAACAAAACAAAGATAAAAATCAAAACCCATTACAAC CTGCAACAACGGATCTCTTGGCTCCGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATACGTAATGCGAATTGCA GATCTCCAGTGAGTCATCGAATCTTTGAACGCACATAGCGCCCGCCAGCTCTCTGGCGGGCATGCCCGTCCGA GCGTCGATTACACCGCTCGAGCGCGCCTCCCTACCCGGGGAGGTCGTCGCTCGGTGTTGGGGCAGTAGGGGGG AAGTCTCTCCCCTACGCCCCCAAAAGCATTGCGCGGCCCTCGCATCAGGACCCAAGCACAGTAAACTTCTCAC GTTGAGCTGCTTAGGGACACCTACGCCGAGGCGCCAGCCGTAAAACCCCCAACATAGGCCTGCTCGCCAGGCC GCCTGATGTTGACCTCGGATCGGGTAGGACGACCCGCTGAACTTAAGCATATCAATAAGCGGAGGAAAAGAAA CCAACAGGGATTGCCCCAGTAGCGGCGAGCGAAGCGGCAAAAGCTCAGATTTGAAATCTGGCCGTCCCCGCGG CGGCCCGAATTGTAATCTGTAGGGGATGGTTCCAACTGACGTGTTCTGCCTAAGTCCCCTGGAACGGGGCGCC ATAGAGGGTGAGAGCCCCGTGAGGTAGGGCGCGCTCGGTACATTGTGAATCTCCTCCGACGAGTCGAGTAGTT TGGGAATGCTGCTCTAAATGGGAGGTATATTCCTTCTAAAGCTAAATACCGGCCGGAGACCGATAGCGCACAA GTAGAGTGATCGAAAGGTGAAAAGCACTTTGGAAAGAGAGTGAAATAGTACGTGAAATTGTTGCAGGGGAAGC GCTCTTGACCAGTCGCGCGCCGTGGGATCAGCCGTCGTTTACTCGGCGGTGTACTCCCACCGGTT >ASS99.1_ITS_VT2845 TAGAGGAAGTAAAAGTCGTAACAAGGTCTCCGTTGGTGAACCAGCGGAGGGATCATTAGAGGGTCTACAGACC ACCTACTGTTCTTAACCATACCGCGTACCTAGCCGGATAACATATGCATCTGCCTCGGCGGCGGCCCCAGGGG GGGCCTCTGCCCGCCAAGCCGCAACCCGCGGTACGGCGGGCGCCGCCGGTGGCGCCTAAACTAAAAAGCATTG TAAGTGGGTTATACCACTGCAAAAGAACAAAACAAAAGATAAAAATCAAAACCCATTACAACCTGCAACAACG GATCTCTTGGCTCCGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATACGTAATGCGAATTGCAGATCTCCAGTG AGTCATCGAATCTTTGAACGCACATAGCGCCCGCCAGCTCTCTGGCGGGCATGCCCGTCCGAGCGTCGATTAC ACCGCTCGAGCGCGCCTCTCTACCCGGGAGGTCGTCGCTCGGTGTTGGGGCAGTAGGGGGGGATTTCTCTCCC CTACGCCCCCAAAAGCATTGCGCGGCCCTCGCATCAGGACCCAAGCACAGTAAACTTCTCACGTTGAGCTGCT TAGGGACACCTACGCCGAGGCGCCAGCCGTAAAACCCCCAACATAGGCCTGCTCGCCAGGCCGCCTGATGTTG ACCTCGGATCGGGTAGGACGACCCGCTGAACTTAAGCATATCAATA >ASS104.2_ITS_VT2850 TAGAGGAAGTAAAAGTCGTAACAAGGTCTCCGTTGGTGAACCAGCGGAGGGATCATTAGAGGGTCGAGAGACC ACCTACTGTTCTTAACCATACCGCGTACCTAGCCGGAAAACTTATGTCTCTGCCTCGGCGGCGGCCCCAGGGG GGGCCTCTGCTCGCTAAGCCGCAACCCGCGGCGCGGCGGGCGCCGCCGGTGGCGCCTAAACTAAAAAGCATTG TAAGTGGGTTATACCACTGCAAAAGAACAAACAATATAAAATATCAAAACCCATTACAACCTGCAACAACGGA TCTCTTGGCTCCGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATACGTAATGCGAATTGCAGATCTCCAGTGAG TCATCGAATCTTTGAACGCACATAGCGCCCGCCAGCTCTCTGGCGGGCATGCCCGTCCGAGCGTCGATTACAC CGCTCGAGCCCGCCTCTCCACACCGGGGAGGTGGTGCTCGGTGTTGGGGCAGTAGGCTTCCTACGCCCCCAAA ACCATTGCGCGGCCCTCGCATCAGGACCCAAGCACAGTAAACTTCTCACGTTGAGCTGCTTAGGGGCACCTGC GCCGGGGCGCCAGCCGTAAAACCCCCAACATAGGCCTGCTCGTCAGGCCGCCTGATGTTGACCTCGGATCGGG TAGGACGACCCGCTGAACTTAAGCATATCATA >ASS71.1_ITS_VT2841 TAGAGGAAGTAAAAGTCGTAACAAGGTCTCCGTTGGTGAACCAGCGGAGGGATCATTAGAGGGTCGAGAGACC ACCTACTGTTCTTAACCATACCGCGTACCTAGCCGGAAAACTTATGTCTCTGCCTCGGCGGCGGCCCCAGGGG GGGCCTCTGCTCGCTAAGCCGCAACCCGCGGCGCGGCGGGCGCCGCCGGTGGCGCCTAAACTAAAAAGCATTG TAAGTGGGTTATACCACTGCAAAAGAACAAACAATATAAAATATCAAAACCCATTACAACCTGCAACAACGGA TCTCTTGGCTCCGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATACGTAATGCGAATTGCAGATCTCCAGTGAG TCATCGAATCTTTGAACGCACATAGCGCCCGCCAGCTCTCTGGCGGGCATGCCCGTCCGAGCGTCGATTACAC CGCTCGAGCCCGCCTCTCCACACCGGGGAGGTGGTGCTCGGTGTTGGGGCAGTAGGCTTCCTACGCCCCCAAA ACCATTGCGCGGCCCTCGCATCAGGACCCAAGCACAGTAAACTTCTCACGTTGAGCTGCTTAGGGGCACCTGC GCCGGGGCGCCAGCCGTAAAACCCCCAACATAGGCCTGCTCGTCAGGCCGCCTGATGTTGACCTCGGATCGGG TAGGACGACCCGCTGAACTTAAGCATATCATAAACC >ASS73.1_ITSD1D2_VT2842 AATTAGAGGAAGTAAAAGTCGTAACAAGGTCTCCGTTGGTGAACCAGCGGAGGGATCATTAGAGGGTCGAGAG ACCACCTACTGTTCTTAACCATACCGCGTACCTAGCCGGAAAACTTATGTCTCTGCCTCGGCGGCGGCCCCAG GGGGGGCCTCTGCTCGCTAAGCCGCAACCCGCGGCGCGGCGGGCGCCGCCGGTGGCGCCTAAACTAAAAAGCA TTGTAAGTGGGTTATACCACTGCAAAAGAACAAACAATATAAAATATCAAAACCCATTACAACCTGCAACAAC GGATCTCTTGGCTCCGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATACGTAATGCGAATTGCAGATCTCCAGT GAGTCATCGAATCTTTGAACGCACATAGCGCCCGCCAGCTCTCTGGCGGGCATGCCCGTCCGAGCGTCGATTA CACCGCTCGAGCCCGCCTCTCCACACCGGGGAGGTGGTGCTCGGTGTTGGGGCAGTAGGCTTCCTACGCCCCC AAAACCATTGCGCGGCCCTCGCATCAGGACCCAAGCACAGTAAACTTCTCACGTTGAGCTGCTTAGGGGCACC TGCGCCGGGGCGCCAGCCGTAAAACCCCCAACATAGGCCTGCTCGTCAGGCCGCCTGATGTTGACCTCGGATC GGGTAGGACGACCCGCTGAACTTAAGCATATCAATAAGCGGAGGAAAAGAAACCAACAGGGATTGCCTCAGTA GCGGCGAGCGAAGCGGCAAAAGCTCAGATTTGAAATCTGGCCGTCTCCGCGGCGGTCCGAATTGTAATCTGTA GGGGATGATTCCAACCGACGTGTTCTGCCTAAGTCCCCTGGAACGGGGCGCCATAGAGGGTGAGAGCCCCGTG AGGTAGGGCGCGCTTGGTACAATGTGAATCTCCTCCGACGAGTCGAGTAGTTTGGGAATGCTGCTCTAAATGG GAGGTATATTCCTTCTAAAGCTAAATACCGGCCGGAGACCGATAGCGCACAAGTAGAGTGATCGAAAGGTGAA AAGCACTTTGGAAAGAGAGTGAAATAGTACGTGAAATTGTTGCAGGGGAAGCGCTCTTGACCAGTCGCGCGCC GTGGGATCAGCCGTCGTTCACTCGGCGGTGTACTCCCTCTGGTTGCGGGTCAGCACCGGCTCTGGCGGTGGGA TAGGCGCGTTGGGAACGTGGCCCTACCTTCGGGTGGGGTGTTATAGCCCGGCGTGCGTACCGCCTGCTGGGGC CGAGGTATTCTGCGCCTTACGGCTAGGATGCGGC >ASS80.2_ITSD1D2_VT2815 CCTACTGTTCTTACCATACCGCGTACCTAGCCGGAAAACTTATGTCTCTGCCTCGGCGGCGGCCCCAGGGGGG GCCTCTGCTCGCTAAGCCGCAACCCGCGGCGCGGCGGGCGCCGCCGGTGGCGCCTAAACTAAAAAGCATTGTA AGTGGGTTATACCACTGCAAAAGAACAAACAATATAAAATATCAAAACCCATTACAACCTGCAACAACGGATC TCTTGGCTCCGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATACGTAATGCGAATTGCAGATCTCCAGTGAGTC ATCGAATCTTTGAACGCACATAGCGCCCGCCAGCTCTCTGGCGGGCATGCCCGTCCGAGCGTCGATTACACCG CTCGAGCCCGCCTCTCCACACCGGGGAGGTGGTGCTCGGTGTTGGGGCAGTAGGCTTCCTACGCCCCCAAAAC CATTGCGCGGCCCTCGCATCAGGACCCAAGCACAGTAAACTTCTCACGTTGAGCTGCTTAGGGGCACCTGCGC CGGGGCGCCAGCCGTAAAACCCCCAACATAGGCCTGCTCGTCAGGCCGCCTGATGTTGACCTCGGATCGGGTA GGACGACCCGCTGAACTTAAGCATATCAATAAGCGGAGGAAAAGAAACCAACAGGGATTGCCTCAGTAGCGGC GAGCGAAGCGGCAAAAGCTCAGATTTGAAATCTGGCCGTCTCCGCGGCGGTCCGAATTGTAATCTGTAGGGGA TGATTCCAACCGACGTGTTCTGCCTAAGTCCCCTGGAACGGGGCGCCATAGAGGGTGAGAGCCCCGTGAGGTA GGGCGCGCTTGGTACAATGTGAATCTCCTCCGACGAGTCGAGTAGTTTGGGAATGCTGCTCTAAATGGGAGGT ATATTCCTTCTAAAGCTAAATACCGGCCGGAGACCGATAGCGCACAAGTAGAGTGATCGAAAGGTGAAAAGCA CTTTGGAAAGAGAGTGAAATAGTACGTGAAATTGTTGCAGGGGAAGCGCTCTTGACCAGTCGCGCGCCGTGGG ATCAGCCGTCGTTCACTCGGCGGTGTACTCCCTCTGGTTGCGGGTCAGCACCGGCTCTGGCGGTGGGATAGGC GCGTTGGGAACGTGGCCCTACCTTCGGGTGGGGTGTTATAGCCCGGCGTGCGTACCGCCTGCTGGGGCCGAGG TATTCTGCGCCTTACGGCTAGGATGC >ASS86.1_ITS_VT2849 ATTAGAGGAAGTAAAAGTCGTAACAAGGTCTCCGTTGGTGAACCAGCGGAGGGATCATTAGAGGGTCGAGAGG CCACCTACTGTTCTTAACCATACCGCGTACCTAGCCGGAAAACTTATGTCTCTGCCTCGGCGGCGGCCCCAGG GGGGGCCTCTGCTCGCTAAGCCGCAACCCGCGGCGCGGCGGGCGCCGCCGGTGGCGCCTAAACTAAAAAGCAT TGTAAGTGGGTTATACCACTGCAAAAGAACAAACAATATAAAATATCAAAACCCATTACAACCTGCAACAACG GATCTCTTGGCTCCGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATACGTAATGCGAATTGCAGATCTCCAGTG AGTCATCGAATCTTTGAACGCACATAGCGCCCGCCAGCTCTCTGGCGGGCATGCCCGTCCGAGCGTCGATTAC ACCGCTCGAGCCCGCCTCTCCACACCGGGGAGGTGGTGCTCGGTGTTGGGGCAGTAGGCTTCCTACGCCCCCA AAACCATTGCGCGGCCCTCGCATCAGGACCCAAGCACAGTAAACTTCTCACGTTGAGCTGCTTAGGGGCACCT GCGCCGGGGCGCCAGCCGTAAAACCCCCAACATAGGCCTGCTCGTCAGGCCGCCTGATGTTGACCTCGGATCG GGTAGGACGACCCGCTGAACTTAAGCATATCAATAAA II Tổng hợp kết sàng lọc Nguồn gốc phân lập chủng vi nấm chịu pH thấp Kí hiệu chủng Tên mẫu Loại mẫu AS 17 AS17 Rác sàn xưởng mạ nhiễm acid AS 173-2 AS173 Mùn cỏ nhọn AS 175-2 AS175 Lá thông mục AS 180-1 AS180 Lá cao su mục AS 182-2 AS182 Quả sung khô AS 19 AS19 Rác sàn xưởng mạ nhiễm acid AS 31 AS 318-1 ASM 115 ASM 122 ASM 136 ASM 137-1 ASM 137-2 ASM 138-1 ASM 138-3 ASM 139-1 ASM 140 ASM 141-1 ASM 143-2 ASM 145-2 ASM 147 ASM 152-1 ASM 152-2 ASM 153-1 ASM 153-2 ASM 157 ASM 158 ASM 159-1 ASS 102-1 ASS 104-1 AS31 AS318 AS115 AS115 AS136 AS137 AS137 AS138 AS138 AS139 AS140 AS141 AS143 Hành muối Mùn Pyrit Phú Thọ Pyrit Phú Thọ Kênh thải axit nhà máy Kênh thải axit nhà máy Kênh thải axit nhà máy Kênh thải axit nhà máy Kênh thải axit nhà máy Kênh thải axit nhà máy Kênh thải axit nhà máy Kênh thải axit nhà máy Kênh thải axit nhà máy AS147 AS152 AS152 AS153 AS153 AS157 AS158 AS159 SS102 SS104 Pyrit Minh Quang Pyrit Minh Quang Pyrit Minh Quang Pyrit Minh Quang Pyrit Minh Quang Pyrit Minh Quang Pyrit Minh Quang Pyrit Minh Quang Đất đồi bazan, gần hồ Đất đồi bazan, gần hồ Địa điểm Đường E3, KCN, Lạc Đạo, Văn Lâm, Hưng Yên Quan Lan, Vân Đồn District, Quảng Ninh, Vietnam Ya Ly, Sa Thầy District, Kon Tum Province Đắk Bla, Kon Tum, Kon Tum Province Thắng Lợi, Kon Tum Đường E3, KCN, Lạc Đạo, Văn Lâm, Hưng Yên Lê Thanh Nghị, Hà Nội Hải phòng Hải phòng Hải phòng Hải phòng Hải phòng Hải phịng Hải phịng Hải phịng Hải phịng Ba Vì, Hà Nội Ba Vì, Hà Nội Ba Vì, Hà Nội Ba Vì, Hà Nội Ba Vì, Hà Nội Ba Vì, Hà Nội Ba Vì, Hà Nội Ba Vì, Hà Nội Biển Hồ, Pleiku, Gia Lai Biển Hồ, Pleiku, Gia Lai Kí hiệu chủng ASS 104-2 Tên mẫu SS104 Loại mẫu Đất đồi bazan, gần hồ ASS 125-1 SS125 Đất đá cằn trồng ngô ASS 135-1 SS135 ASS 192-1 SS192 PQ1 Bãi chất thải sau lọc xưởng SX thạch ASS 20 SS20 Đất đồi ASS 30 SS30 Đất nhiễm axit ASS 40-3 SS40 Đất chân núi ASS 45-1 SS45 ASS 46-1 SS46 Đất ruộng khô nẻ ASS 46-2 SS46 Đất ruộng khô nẻ ASS 46-3 SS46 Đất ruộng khô nẻ ASS 52-1 SS52 Đất vườn ASS 53 SS53 Đất vườn ASS 64-1 SS64 Đất đồi ASS 69-1 SS69 Đất vườn ASS 71-1 SS71 Đất gần hồ, cách biển 100 m ASS 73-1 SS73 Đất pha cát, gần biển ASS 73-4 SS73 Đất pha cát, gần biển ASS 74-1 SS74 Đất gần hồ, cách biển 100 m ASS 74-4 SS74 Đất gần hồ, cách biển 100 m ASS 80-1 SS80 Đất gần thác nước ASS 80-2 SS80 Đất gần thác nước ASS 80-3 SS80 Đất gần thác nước ASS 82-2 SS82 Đất đồi ASS 86-1 ASS 86-2 SS86 SS86 Đất đùn tổ kiến vườn cao su Đất đùn tổ kiến vườn cao su ASS 87-1 SS87 Đất ven hồ rừng keo ASS 87-2 SS87 Đất ven hồ rừng keo ASS 88-1 SS88 Đất gần thác nước Địa điểm Biển Hồ, Pleiku, Gia Lai Lũng Táo, Đồng Văn District, Ha Giang, Vietnam Trang web An Tràng - An Lão - Hải Phòng Gần Đền Trung, Ba Vì, Hà Nội, Việt Nam ASS 237 Mỏ Pyrit cũ, Minh Quang, Ba Vì, Hà Nội Đường n Trung, ng bí, Quảng Ninh Bà Nà, Đà Nẵng 217 & 516B, Huyen Cam Thuy, Vietnam 217 & 516B, Huyen Cam Thuy, Vietnam 217 & 516B, Huyen Cam Thuy, Vietnam DUONG Tran Thua, Thanh Pho Nam Dinh, Vietnam DUONG Pham The Hien, Thanh Pho Thai Binh, Vietnam Lâm Sơn, Lương Sơn, Hoa Binh, Vietnam Sân bay quốc tế, Long Hồ, Bình Thủy, Cần Thơ Cơn Đảo, Bà Rịa - Vũng Tàu, Việt Nam Bến Đầm, Côn Đảo, Bà Rịa Vũng Tàu Bến Đầm, Côn Đảo, Bà Rịa Vũng Tàu Côn Đảo, Bà Rịa - Vũng Tàu, Việt Nam Côn Đảo, Bà Rịa - Vũng Tàu, Việt Nam Đắk Long, Kon Plông, Kon Tum, Vietnam Đắk Long, Kon Plông, Kon Tum, Vietnam Đắk Long, Kon Plông, Kon Tum, Vietnam Đắk Long, Kon Plông, Kon Tum, Vietnam Đắk Bla, Kon Tum, Việt Nam Đắk Bla, Kon Tum, Việt Nam Ya Ly, Sa Thầy, Kon Tum, Việt Nam Ya Ly, Sa Thầy, Kon Tum, Việt Nam Đắk Long, Kon Plông, Kon Tum, Vietnam Kí hiệu chủng Tên mẫu Loại mẫu ASS 89-1 SS89 Đất trồng trọt đồi ASS 94-2 SS94 Đất cát, đồi phi lao ASS 96-1 SS96 Đất đồi ASS 97-1 SS97 Đất cát, đồng cỏ nhọn ASS 97-2 SS97 Đất cát, đồng cỏ nhọn ASS 99-1 SS99 Đất mùn chân đồi AST 143-1 AST 144-1 AST 144-2 AST 144-3 AST 145-1 AST 147 AST 148 AST 151-2 AST 152 AST 152-1 AST 154 AST 155-1 AST 155-2 AST 157-1 AST 157-2 AST 157-3 AST 159 AST 160 AST 161-2 SS143 SS144 SS144 SS144 SS145 SS147 SS148 SS151 SS152 SS152 S28 S23 S23 S23 S35 S30 S25 S10 S24, cát S24, cát SS155 SS155 SS157 SS157 SS157 SS159 SS160 SS161 S19 S19 S34 S34 S34 S4 S18 S6 Địa điểm Đắk Long, Kon Plông, Kon Tum, Vietnam Quan Lan, Vân Đồn District, Quảng Ninh, Vietnam Quan Lan, Vân Đồn District, Quảng Ninh, Vietnam Quan Lan, Vân Đồn District, Quảng Ninh, Vietnam Quan Lan, Vân Đồn District, Quảng Ninh, Vietnam Quan Lan, Vân Đồn District, Quảng Ninh, Vietnam Lý Sơn Lý Sơn Lý Sơn Lý Sơn Lý Sơn Lý Sơn Lý Sơn Lý Sơn Lý Sơn Lý Sơn Lý Sơn Lý Sơn Lý Sơn Lý Sơn Lý Sơn Lý Sơn Lý Sơn Lý Sơn Hàm lượng protein chủng phân lập STT 10 11 12 13 14 15 16 18 19 20 21 Kí hiệu chủng AS 173-2 ASS 80-1 ASS 86-2 ASM 137-2 ASS 45-1 ASS 97-2 ASS 40-3 ASS 46-2 ASS 94-2 ASS 52-1 ASM 115 ASM 147 ASM 153-1 ASS 74-4 ASS 64-1 ASS 135-1 ASS 96-1 AST 147 AST 152 AST 155-1 Tên phân loại Penicillium citreonigrum Penicillium citreonigrum Penicillium citreonigrum Penicillium sp.1 Penicillium griseolum Penicillium griseolum Penicillium sp.2 Aspergillus turcosus Aspergillus sp.2 Penicillium sp.3 Penicillium sp.4 Penicillium sp.4 Penicillium sp.4 Penicillium sp.4 Thyronectria sp nov Sarocladium sp Acidomyces acidothermus Acidomyces acidothermus Acidomyces acidothermus Acidomyces acidothermus Protein (mg/ ml) 7.25 7.20 8.05 5.72 8.24 7.55 8.45 8.92 6.04 8.76 8.62 8.87 7.94 8.03 7.20 15.60 5.36 5.18 8.49 11.20 STT 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 Kí hiệu chủng AST 157-3 AS 175-2 ASS 46-1 ASS 88-1 ASS 99-1 ASM 122 ASS 104-2 ASS 71-1 ASS 73-1 ASS 80-2 ASS 86-1 Tên phân loại Acidomyces acidothermus Amplistroma sp Amplistroma sp Amplistroma sp Amplistroma sp Acrodontium griseum Acrodontium griseum Acrodontium griseum Acrodontium griseum Acrodontium griseum Acrodontium griseum Protein (mg/ ml) 8.59 23.26 9.09 7.24 9.76 7.77 15.56 8.95 11.70 16.34 6.77 Hoạt tính enzyme Xylanase pH 1.0, pH 3.0 pH 5.0 31 chủng vi nấm phân lập STT Kí hiệu chủng 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 AS 173-2 ASS 80-1 ASS 86-2 ASM 137-2 ASS 45-1 ASS 97-2 ASS 40-3 ASS 46-2 ASS 94-2 ASS 52-1 ASM 115 ASM 147 ASM 153-1 ASS 74-4 ASS 64-1 ASS 135-1 ASS 96-1 AST 147 AST 152 AST 155-1 AST 157-3 AS 175-2 ASS 46-1 ASS 88-1 ASS 99-1 ASM 122 ASS 104-2 ASS 71-1 ASS 73-1 ASS 80-2 ASS 86-1 Tên phân loại Penicillium citreonigrum Penicillium citreonigrum Penicillium citreonigrum Penicillium sp.1 Penicillium griseolum Penicillium griseolum Penicillium sp.2 Aspergillus turcosus Aspergillus sp.2 Penicillium sp.3 Penicillium sp.4 Penicillium sp.4 Penicillium sp.4 Penicillium sp.4 Thyronectria sp nov Sarocladium sp Acidomyces acidothermus Acidomyces acidothermus Acidomyces acidothermus Acidomyces acidothermus Acidomyces acidothermus Amplistroma sp Amplistroma sp Amplistroma sp Amplistroma sp Acrodontium griseum Acrodontium griseum Acrodontium griseum Acrodontium griseum Acrodontium griseum Acrodontium griseum pH1 2.26 18.03 33.26 78.66 41.55 14.24 61.36 28.38 28.89 31.71 16.42 29.21 35.13 29.46 10.85 31.20 43.70 61.52 24.90 46.74 40.82 217.50 546.76 97.65 204.40 135.72 301.63 263.65 213.90 318.51 193.49 Xylanase (U/ ml) pH3 5.56 54.28 68.93 43.67 80.53 41.12 75.25 68.09 66.27 62.09 37.66 49.42 52.19 58.28 18.37 69.52 60.25 54.19 36.05 59.74 53.89 401.24 1174.59 291.06 484.02 418.10 885.26 731.64 479.55 771.91 615.30 pH5 2.78 32.07 40.95 80.96 74.01 30.37 54.58 55.52 44.54 34.68 14.76 24.68 21.80 75.36 8.01 54.60 41.41 36.23 20.91 37.50 31.00 448.36 1177.07 278.74 453.19 347.68 722.25 605.34 508.10 701.17 576.60 Hoạt tính enzyme CMCase pH 1.0, pH 3.0 pH 5.0 31 chủng vi nấm phân lập STT Kí hiệu chủng AS 173-2 ASS 80-1 ASS 86-2 Tên phân loại Penicillium citreonigrum Penicillium citreonigrum Penicillium citreonigrum pH1 1.39 1.48 1.14 CMCase (U/ ml) pH3 0.09 2.30 10.74 pH5 2.24 2.48 6.77 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 ASM 137-2 ASS 45-1 ASS 97-2 ASS 40-3 ASS 46-2 ASS 94-2 ASS 52-1 ASM 115 ASM 147 ASM 153-1 ASS 74-4 ASS 64-1 ASS 135-1 ASS 96-1 AST 147 AST 152 AST 155-1 AST 157-3 AS 175-2 ASS 46-1 ASS 88-1 ASS 99-1 ASM 122 ASS 104-2 ASS 71-1 ASS 73-1 ASS 80-2 ASS 86-1 Penicillium sp.1 Penicillium griseolum Penicillium griseolum Penicillium sp.2 Aspergillus turcosus Aspergillus sp.2 Penicillium sp.3 Penicillium sp.4 Penicillium sp.4 Penicillium sp.4 Penicillium sp.4 Thyronectria sp nov Sarocladium sp Acidomyces acidothermus Acidomyces acidothermus Acidomyces acidothermus Acidomyces acidothermus Acidomyces acidothermus Amplistroma sp Amplistroma sp Amplistroma sp Amplistroma sp Acrodontium griseum Acrodontium griseum Acrodontium griseum Acrodontium griseum Acrodontium griseum Acrodontium griseum 1.33 0.64 1.49 1.58 1.22 1.46 1.38 1.22 0.77 0.64 1.16 1.03 1.23 0.69 1.20 2.13 1.25 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.97 0.61 0.00 0.00 0.91 7.27 9.06 9.35 12.77 8.26 4.82 9.32 4.28 10.78 7.37 13.14 0.00 2.56 9.20 10.74 10.41 6.16 6.29 7.40 7.37 7.30 9.64 6.71 10.60 4.81 6.79 7.10 2.40 4.20 3.81 1.84 7.76 3.29 2.83 1.48 1.29 2.32 3.43 7.39 0.07 5.21 3.92 3.86 3.91 2.32 2.99 1.91 3.10 2.27 5.02 2.18 5.38 2.71 2.40 5.02 Hoạt tính enzyme Xylanase pH 1.0, pH 3.0 pH 5.0 31 chủng vi nấm phân lập Xylanase (U/ ml) S T T 10 Kí hiệu chủng AS 1732 ASS 801 ASS 862 ASM 137-2 ASS 451 ASS 972 ASS 403 ASS 462 ASS 942 ASS 521 Enzyme không gia nhiệt Enzyme gia nhiệt 70° Enzyme gia nhiệt 90° Rate E0/ E70°C, % Rate E0/ E90°C, % 2.55 0.00 0.00 0.0 0.0 50.81 0.00 0.81 0.0 1.6 60.57 15.18 0.06 25.1 0.1 15.54 1.17 0.00 7.6 0.0 105.69 3.61 0.00 3.4 0.0 281.83 4.82 87.31 1.7 31.0 56.82 6.28 10.94 11.1 19.3 84.59 7.95 0.00 9.4 0.0 Aspergillus sp.2 62.73 0.05 0.00 0.1 0.0 Penicillium sp.3 13.47 0.00 0.00 0.0 0.0 Tên phân loại Penicillium citreonigrum Penicillium citreonigrum Penicillium citreonigrum Penicillium sp.1 Penicillium griseolum Penicillium griseolum Penicillium sp.2 Aspergillus turcosus 11 12 13 14 15 16 17 ASM 115 ASM 147 ASM 153-1 ASS 744 ASS 641 ASS 135-1 ASS 961 18 AST 147 19 AST 152 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 AST 155-1 AST 157-3 AS 1752 ASS 461 ASS 881 ASS 991 ASM 122 ASS 104-2 ASS 711 ASS 731 ASS 802 ASS 861 Penicillium sp.4 Penicillium sp.4 Penicillium sp.4 Penicillium sp.4 Thyronectria sp nov Sarocladium sp Acidomyces acidothermus Acidomyces acidothermus Acidomyces acidothermus Acidomyces acidothermus Acidomyces acidothermus Amplistroma sp Amplistroma sp Amplistroma sp Amplistroma sp Acrodontium griseum Acrodontium griseum Acrodontium griseum Acrodontium griseum Acrodontium griseum Acrodontium griseum 24.17 2.08 0.15 8.6 0.6 46.31 1.72 0.15 3.7 0.3 43.59 1.04 0.00 2.4 0.0 123.43 0.63 0.00 0.5 0.0 13.72 0.00 0.00 0.0 0.0 84.12 13.55 0.90 16.1 1.1 76.52 5.42 0.00 7.1 0.0 63.66 2.30 1.28 3.6 2.0 39.46 1.45 0.00 3.7 0.0 72.76 4.70 0.00 6.5 0.0 46.12 1.36 0.00 2.9 0.0 638.96 22.29 94.82 3.5 14.8 1775.28 184.31 544.39 10.4 30.7 388.15 8.73 96.07 2.3 24.8 721.08 65.95 341.12 9.1 47.3 614.13 9.49 128.15 1.5 20.9 1356.60 56.47 374.65 4.2 27.6 1036.06 137.03 351.19 13.2 33.9 798.95 62.34 251.99 7.8 31.5 1131.44 67.76 338.68 6.0 29.9 896.90 88.09 366.83 9.8 40.9 Hoạt tính enzyme CMCase pH 1.0, pH 3.0 pH 5.0 31 chủng vi nấm phân lập S T T Kí hiệu chủng Tên phân loại AS 1732 ASS 80-1 ASS 86-2 ASM Penicillium citreonigrum Penicillium citreonigrum Penicillium citreonigrum Penicillium Enzyme không gia nhiệt 0.59 CMCase (U/ ml) Enzyme gia Enzyme gia Rate E0/ nhiệt 70° nhiệt 90° E70°C (%) Rate E0/ E90°C (%) 0.88 0.00 148.7 0.0 2.75 0.82 0.00 29.9 0.0 6.48 4.65 0.00 71.8 0.0 1.76 0.43 0.00 24.6 0.0 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 137-2 ASS 45-1 ASS 97-2 ASS 40-3 ASS 46-2 ASS 94-2 ASS 52-1 ASM 115 ASM 147 ASM 153-1 ASS 74-4 ASS 64-1 ASS 135-1 ASS 96-1 AST 147 AST 152 AST 155-1 AST 157-3 AS 1752 ASS 46-1 ASS 88-1 ASS 99-1 ASM 122 ASS 104-2 ASS 71-1 ASS 73-1 ASS 80-2 ASS 86-1 sp.1 Penicillium griseolum Penicillium griseolum Penicillium sp.2 Aspergillus turcosus Aspergillus sp.2 Penicillium sp.3 Penicillium sp.4 Penicillium sp.4 Penicillium sp.4 Penicillium sp.4 Thyronectria sp nov Sarocladium sp Acidomyces acidothermus Acidomyces acidothermus Acidomyces acidothermus Acidomyces acidothermus Acidomyces acidothermus Amplistroma sp Amplistroma sp Amplistroma sp Amplistroma sp Acrodontium griseum Acrodontium griseum Acrodontium griseum Acrodontium griseum Acrodontium griseum Acrodontium griseum 4.58 3.12 0.00 68.1 0.0 3.43 0.00 2.62 0.0 76.4 1.74 1.61 0.00 92.5 0.0 8.17 6.17 0.00 75.4 0.0 4.42 0.00 0.00 0.0 0.0 1.21 2.05 0.00 168.7 0.0 1.50 2.02 0.00 134.7 0.0 1.21 1.27 0.00 104.3 0.0 3.69 3.48 0.00 94.4 0.0 6.09 1.71 0.00 28.1 0.0 0.00 0.00 0.00 0.0 5.15 4.32 0.82 83.8 16.0 3.27 0.69 0.00 21.2 0.0 1.87 0.00 0.00 0.0 0.0 0.98 0.00 0.00 0.0 0.0 1.81 1.32 0.00 72.7 0.0 1.63 0.00 0.00 0.0 0.0 2.18 0.00 0.00 0.0 0.0 2.62 0.00 0.67 0.0 25.4 1.84 0.00 0.48 0.0 26.3 2.02 0.00 0.09 0.0 4.6 3.90 0.00 0.17 0.0 4.4 1.63 0.22 0.28 13.7 16.9 3.95 0.00 0.00 0.0 0.0 2.88 1.27 0.28 43.9 9.6 2.39 0.04 0.20 1.7 8.3 4.26 0.12 0.00 2.8 0.0 Ảnh điện di SDS-PAGE zymogram CMC, xylan khảo sát độ bền nhiệt 32 chủng vi nấm ... tài: ? ?Phân lập xác định đặc tính sinh học vi nấm chịu axit mạnh phân lập Vi? ??t Nam? ?? PGS.TS Vũ Nguyên Thành PGS TS Bùi Thị Vi? ??t Hà hướng dẫn cơng trình nghiên cứu thân số kết cộng tác với học vi? ?n... chủng nấm chịu axit tự nhiên, tiến hành nghiên cứu đề tài: ? ?Phân lập xác định đặc tính sinh học vi nấm chịu axit mạnh phân lập Vi? ??t Nam ” Đề tài nghiên cứu bao gồm nội dung sau: - Phân lập, tuyển... vi nấm chịu axit mạnh - Phân nhóm định tên chủng lựa chọn - Tuyển chọn chủng có khả sinh enzyme thủy phân lignocellulose - Xác định hoạt tính enzyme thủy phân lignocellulose - Xác định hoạt tính