Vi nấm đóng vai trò phân hủy chất hữu cơ và không thể thiếu được trong chu trình chuyển hóa và trao đổi vật chất của hệ sinh thái. Nấm phân bố trên toàn thế giới và có khả năng tồn tại, phát triển ở nhiều điều kiện môi trường khác nhau. Vi nấm phát triển trong môi trường khắc nghiệt được quan tâm đặc biệt về mặt công nghệ vì có thể cung cấp nguồn enzyme với đặc tính khác biệt, đáp ứng các yêu cầu công nghệ đặc thù. Vi sinh vật, enzyme hoạt động trong điều kiện khắc nghiệt về nhiệt độ, pH cũng có thể được ứng dụng trong sản xuất nhằm hạn chế nguy cơ tạp nhiễm. Là một nước nông nghiệp, hàng năm công nghiệp chế biến ở Việt Nam tạo ra một nguồn phế phụ phẩm rất lớn và nếu không được sử dụng hợp lý sẽ dẫn tới các vấn đề ô nhiễm môi trường. Tuy nhiên, phần lớn nguồn nguyên liệu này có thể được ứng dụng trong sản xuất thức ăn chăn nuôi bằng công nghệ vi sinh, enzyme. Bên cạnh đó Việt Nam thuộc vùng khí hậu nhiệt đới với hệ vi sinh vật vô cùng đa dạng và phong phú. Đa dạng nguồn gen có thể giúp ích trong việc tìm kiếm các tác nhân phù hợp trong chuyển hóa, chế biến phế phụ phẩm nông nghiệp thành những sản phẩm hữu ích. Nghiên cứu này đề cập tới nhóm vi nấm có khả năng phát triển trong điều kiện môi trường axit mạnh (1% H₂SO₄) nhằm tìm kiếm các chủng giống, enzyme có khả năng hoạt động ở pH thấp vốn thường gặp trong quá trình xử lý nguyên liệu bằng axit. Ngoài ra, enzyme và vi sinh vật hoạt động ở pH thấp cũng có thể được ứng dụng trong chăn nuôi do khả năng chống chịu điều kiện axit của dịch dạ dày động vật. Nhằm mục đích nghiên cứu khả năng sinh tổng hợp enzyme phân giải vật liệu lignocellulose của một số chủng nấm chịu axit trong tự nhiên, chúng tôi tiến hành nghiên cứu đề tài: “Phân lập và xác định đặc tính sinh học của vi nấm chịu axit mạnh phân lập tại Việt Nam ”. Đề tài nghiên cứu bao gồm các nội dung sau: Phân lập, tuyển chọn vi nấm chịu axit mạnh Phân nhóm và định tên các chủng lựa chọn Tuyển chọn chủng có khả năng sinh enzyme thủy phân lignocellulose Xác định hoạt tính enzyme thủy phân lignocellulose Xác định hoạt tính enzyme ở các điều kiện pH, nhiệt độ khác nhau
TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN KHOA SINH HỌC Lã Thị Mỹ Hạnh PHÂN LẬP VÀ XÁC ĐỊNH ĐẶC TÍNH SINH HỌC CỦA VI NẤM CHỊU AXIT MẠNH TẠI VIỆT NAM LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC HÀ NỘI - 2020 Luận văn thạc sĩ TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN KHOA SINH HỌC Lã Thị Mỹ Hạnh PHÂN LẬP VÀ XÁC ĐỊNH ĐẶC TÍNH SINH HỌC CỦA VI NẤM CHỊU AXIT MẠNH TẠI VIỆT NAM CHUYÊN NGÀNH: Vi Sinh Vật Học MÃ SỐ: 8420101.07 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Người hướng dẫn: PGS.TS Vũ Nguyên Thành PGS.TS Bùi Thị Việt Hà 2 Lã Thị Mỹ Hạnh HÀ NỘI - 2020 K27 – Vi sinh vật học Luận văn thạc sĩ LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đề tài: “Phân lập xác định đặc tính sinh học vi nấm chịu axit mạnh phân lập Việt Nam” PGS.TS Vũ Nguyên Thành PGS TS Bùi Thị Việt Hà hướng dẫn công trình nghiên cứu thân tơi số kết cộng tác với học viên khác Các kết công bố luận văn trung thực, xác tơi xin chịu trách nhiệm hồn tồn số liệu, nội dung trình bày luận văn Hà Nội, ngày 15 tháng 12 năm 2020 Học viên Lã Thị Mỹ Hạnh 3 Lã Thị Mỹ Hạnh K27 – Vi sinh vật học Luận văn thạc sĩ LỜI CẢM ƠN Tôi xin gửi lời cảm ơn sâu sắc tới PGS.TS Vũ Nguyên Thành, Giám đốc Trung tâm Vi sinh vật công nghiệp, Viện Công nghiệp thực phẩm PGS.TS Bùi Thị Việt Hà, Giảng viên trường Đại học Khoa học Tự nhiên - ĐHQGHN, thầy tận tình hướng dẫn tạo điều kiện giúp đỡ tơi hồn thành luận văn Tơi xin chân thành cảm ơn giúp đỡ nhiệt tình trách nhiệm tập thể cán Trung tâm Vi sinh vật Công nghiệp, Viện Công nghiệp Thực phẩm Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn tới thầy cô giáo trường Đại học Khoa học Tự nhiên- ĐHQGHN, người truyền đạt kiến thức cho suốt hai năm học Cuối cùng, xin cảm ơn gia đình, người thân bạn bè ln động viên, hỗ trợ để tơi hồn thành trình học tập nghiên cứu Kết luận văn hỗ trợ đề tài “Khai thác ứng dụng nguồn gen vi sinh vật địa phân hủy lignocellulose xử lý chất thải nhà máy sản xuất cồn sinh học, NVQG2020/ ĐT.01” Hà Nội, ngày 15 tháng 12 năm 2020 Học viên Lã Thị Mỹ Hạnh 4 Lã Thị Mỹ Hạnh K27 – Vi sinh vật học Luận văn thạc sĩ MỤC LỤC 5 Lã Thị Mỹ Hạnh K27 – Vi sinh vật học Luận văn thạc sĩ DANH MỤC HÌNH 6 Lã Thị Mỹ Hạnh K27 – Vi sinh vật học Luận văn thạc sĩ DANH MỤC BẢNG Bảng Mơ tả hình thái khuẩn lạc49 7 Lã Thị Mỹ Hạnh K27 – Vi sinh vật học Luận văn thạc sĩ DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Bp: Base pair (cặp bazơ) CBH: Cellobiohydrolase CBM: Carbohydrate-binding module CE: Carbohydrate esterase CMC: Cacboxymethyl cellulose dNTP: Deoxyribonucleotide triphosphate DNS: Dinitrosalicylic acid EG: Endoglucanase FPU: Filter paper unit GH: Glycoside hydrolase ITS: Internal transcribed spacer PCR: Polymerase chain reaction (kỹ thuật phản ứng chuỗi polymerase) PDA: Potato Dextrose Agar rDNA-Ribosomal DNA rRNA-Ribosomal RNA SDS- PAGE: Sodium dodecyl sulphat polyacrylamide gel electrophoresis T – Type strain (chủng chuẩn) U – Unit (đơn vị) 8 Lã Thị Mỹ Hạnh K27 – Vi sinh vật học Luận văn thạc sĩ MỞ ĐẦU Vi nấm đóng vai trị phân hủy chất hữu khơng thể thiếu chu trình chuyển hóa trao đổi vật chất hệ sinh thái Nấm phân bố tồn giới có khả tồn tại, phát triển nhiều điều kiện môi trường khác Vi nấm phát triển môi trường khắc nghiệt quan tâm đặc biệt mặt cơng nghệ cung cấp nguồn enzyme với đặc tính khác biệt, đáp ứng yêu cầu công nghệ đặc thù Vi sinh vật, enzyme hoạt động điều kiện khắc nghiệt nhiệt độ, pH ứng dụng sản xuất nhằm hạn chế nguy tạp nhiễm Là nước nông nghiệp, hàng năm công nghiệp chế biến Việt Nam tạo nguồn phế phụ phẩm lớn không sử dụng hợp lý dẫn tới vấn đề ô nhiễm môi trường Tuy nhiên, phần lớn nguồn nguyên liệu ứng dụng sản xuất thức ăn chăn nuôi công nghệ vi sinh, enzyme Bên cạnh Việt Nam thuộc vùng khí hậu nhiệt đới với hệ vi sinh vật vô đa dạng phong phú Đa dạng nguồn gen giúp ích việc tìm kiếm tác nhân phù hợp chuyển hóa, chế biến phế phụ phẩm nơng nghiệp thành sản phẩm hữu ích Nghiên cứu đề cập tới nhóm vi nấm có khả phát triển điều kiện mơi trường axit mạnh (1% H₂SO₄) nhằm tìm kiếm chủng giống, enzyme có khả hoạt động pH thấp vốn thường gặp trình xử lý nguyên liệu axit Ngoài ra, enzyme vi sinh vật hoạt động pH thấp ứng dụng chăn nuôi khả chống chịu điều kiện axit dịch dày động vật Nhằm mục đích nghiên cứu khả sinh tổng hợp enzyme phân giải vật liệu lignocellulose số chủng nấm chịu axit tự nhiên, tiến hành nghiên cứu đề tài: “Phân lập xác định đặc tính sinh học vi nấm chịu axit mạnh phân lập Việt Nam ” Đề tài nghiên cứu bao gồm nội dung sau: - Phân lập, tuyển chọn vi nấm chịu axit mạnh 9 Lã Thị Mỹ Hạnh K27 – Vi sinh vật học Luận văn thạc sĩ - Phân nhóm định tên chủng lựa chọn - Tuyển chọn chủng có khả sinh enzyme thủy phân lignocellulose - Xác định hoạt tính enzyme thủy phân lignocellulose - Xác định hoạt tính enzyme điều kiện pH, nhiệt độ khác 10 10 Lã Thị Mỹ Hạnh K27 – Vi sinh vật học Luận văn thạc sĩ >AS175.2_ITSD1D2_VT2819 CCTACTGTTCTTACCATACCGCGTACCTAGCCGGATAACATATGCATCTGCCTCGGCGGCGGCCCCAGGGGGG GCCTCTGCCCGCCAAGCCGCAACCCGCGGTACGGCGGGCGCCGCCGGTGGCGCCTAAACTAAAAAGCATTGTA AGTGGGTTATACCACTGCAAAAGAACAAAACAAAAGATAAAAATCAAAACCCATTACAACCTGCAACAACGGA TCTCTTGGCTCCGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATACGTAATGCGAATTGCAGATCTCCAGTGAG TCATCGAATCTTTGAACGCACATAGCGCCCGCCAGCTCTCTGGCGGGCATGCCCGTCCGAGCGTCGATTACAC CGCTCGAGCGCGCCTCTCTACCCGGGAGGTCGTCGCTCGGTGTTGGGGCAGTAGGGGGGATTTCTCTCCCCTA CGCCCCCAAAAGCATTGCGCGGCCCTCGCATCAGGACCCAAGCACAGTAAACTTCTCACGTTGAGCTGCTTAG GGACACCTACGCCGAGGCGCCAGCCGTAAAACCCCCAACATAGGCCTGCTCGCCAGGCCGCCTGATGTTGACC TCGGATCGGGTAGGACGACCCGCTGAACTTAAGCATATCAATAAGCGGAGGAAAAGAAACCAACAGGGATTGC CCCAGTAGCGGCGAGCGAAGCGGCAAAAGCTCAGATTTGAAATCTGGCCGTCCCCGCGGCGGCCCGAATTGTA ATCTGTAGGGGATGGTTCCAACTGACGTGTTCTGCCTAAGTCCCCTGGAACGGGGCGCCATAGAGGGTGAGAG CCCCGTGAGGTAGGGCGCGCTCGGTAAATTGTGAATCTCCTCCGACGAGTCGAGTAGTTTGGGAATGCTGCTC TAAATGGGAGGTATATTCCTTCTAAAGCTAAATACCGGCCGGAGACCGATAGCGCACAAGTAGAGTGATCGAA AGGTGAAAAGCACTTTGGAAAGAGAGTGAAATAGTACGTGAAATTGTTGCAGGGGAAGCGCTCTTGACCAGTC GCGCGCCGTGGGATCAGCCGTCGTTTACTCGGCGGTGTACTCCCTCCGGTTGCGGGTCAGCACCGGCTCTGGC GGTGGGATAGGCTCGCTGGGAACGTGGCCCTGCCTTCGGGTGGGGTGTTATAGCCCCGGTGTGCGTACCGCCT GCTGGGGCCGAGGTATCTTGCGCCTTACGGCTAGGATG >ASS46.1_ITS_VT2829 GGAAGTAAAAGTCGTAACAAGGTCTCCGTTGGTGAACCAGCGGAGGGATCATTAGAGGGTCTACAGACCACCT ACTGTTCTTAACCATACCGCGTACCTAGCCGGATAACATATGCATCTGCCTCGGCGGCGGCCCCAGGGGGGGC CTCTGCCCGCCAAGCCGCAACCCGCGGTACGGCGGGCGCCGCCGGTGGCGCCTAAACTAAAAAGCATTGTAAG TGGGTTATACCACTGCAAAAGAACAAAACAAAAGATAAAAATCAAAACCCATTACAACCTGCAACAACGGATC TCTTGGCTCCGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATACGTAATGCGAATTGCAGATCTCCAGTGAGTC ATCGAATCTTTGAACGCACATAGCGCCCGCCAGCTCTCTGGCGGGCATGCCCGTCCGAGCGTCGATTACACCG CTCGAGCGCGCCTCTCTACCCGGGAGGTCGTCGCTCGGTGTTGGGGCAGTAGGGGGGGATTTCTCTCCCCTAC GCCCCCAAAAGCATTGCGCGGCCCTCGCATCAGGACCCAAGCACAGTAAACTTCTCACGTTGAGCTGCTTAGG GACACCTACGCCGAGGCGCCAGCCGTAAAACCCCCAACATAGGCCTGCTCGCCAGGCCGCCTGATGTTGACCT CGGATCGGGTAGGACGACCCGCTGAACTTAAGCATATCAATAG >ASS88.1_ITSD1D2_VT2844 TCTTGGTCCAATTAGAGGAAGTAAAAGTCGTAACAAGGTCTCCGTTGGTGAACCAGCGGAGGGATCATTAGAG GGTCTACAGACCACCTACTGTTCTTAACCATACCGCGTACCTAGCCGGATAACATATGCATCTGCCTCGGCGG CGGCCCCAGGGGGGGCCTCTGCCCGCCAAGCCGCAACCCGCGGTACGGCGGGCGCCGCCGGTGGCGCCTAAAC TAAAAAGCATTGTAAGTGGGTTATGCCACTGCAAAAGAACAAAACAAAGATAAAAATCAAAACCCATTACAAC CTGCAACAACGGATCTCTTGGCTCCGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATACGTAATGCGAATTGCA GATCTCCAGTGAGTCATCGAATCTTTGAACGCACATAGCGCCCGCCAGCTCTCTGGCGGGCATGCCCGTCCGA GCGTCGATTACACCGCTCGAGCGCGCCTCCCTACCCGGGGAGGTCGTCGCTCGGTGTTGGGGCAGTAGGGGGG AAGTCTCTCCCCTACGCCCCCAAAAGCATTGCGCGGCCCTCGCATCAGGACCCAAGCACAGTAAACTTCTCAC GTTGAGCTGCTTAGGGACACCTACGCCGAGGCGCCAGCCGTAAAACCCCCAACATAGGCCTGCTCGCCAGGCC GCCTGATGTTGACCTCGGATCGGGTAGGACGACCCGCTGAACTTAAGCATATCAATAAGCGGAGGAAAAGAAA CCAACAGGGATTGCCCCAGTAGCGGCGAGCGAAGCGGCAAAAGCTCAGATTTGAAATCTGGCCGTCCCCGCGG CGGCCCGAATTGTAATCTGTAGGGGATGGTTCCAACTGACGTGTTCTGCCTAAGTCCCCTGGAACGGGGCGCC ATAGAGGGTGAGAGCCCCGTGAGGTAGGGCGCGCTCGGTACATTGTGAATCTCCTCCGACGAGTCGAGTAGTT TGGGAATGCTGCTCTAAATGGGAGGTATATTCCTTCTAAAGCTAAATACCGGCCGGAGACCGATAGCGCACAA GTAGAGTGATCGAAAGGTGAAAAGCACTTTGGAAAGAGAGTGAAATAGTACGTGAAATTGTTGCAGGGGAAGC GCTCTTGACCAGTCGCGCGCCGTGGGATCAGCCGTCGTTTACTCGGCGGTGTACTCCCACCGGTT >ASS99.1_ITS_VT2845 TAGAGGAAGTAAAAGTCGTAACAAGGTCTCCGTTGGTGAACCAGCGGAGGGATCATTAGAGGGTCTACAGACC ACCTACTGTTCTTAACCATACCGCGTACCTAGCCGGATAACATATGCATCTGCCTCGGCGGCGGCCCCAGGGG GGGCCTCTGCCCGCCAAGCCGCAACCCGCGGTACGGCGGGCGCCGCCGGTGGCGCCTAAACTAAAAAGCATTG TAAGTGGGTTATACCACTGCAAAAGAACAAAACAAAAGATAAAAATCAAAACCCATTACAACCTGCAACAACG GATCTCTTGGCTCCGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATACGTAATGCGAATTGCAGATCTCCAGTG AGTCATCGAATCTTTGAACGCACATAGCGCCCGCCAGCTCTCTGGCGGGCATGCCCGTCCGAGCGTCGATTAC ACCGCTCGAGCGCGCCTCTCTACCCGGGAGGTCGTCGCTCGGTGTTGGGGCAGTAGGGGGGGATTTCTCTCCC CTACGCCCCCAAAAGCATTGCGCGGCCCTCGCATCAGGACCCAAGCACAGTAAACTTCTCACGTTGAGCTGCT 87 87 Lã Thị Mỹ Hạnh K27 – Vi sinh vật học Luận văn thạc sĩ TAGGGACACCTACGCCGAGGCGCCAGCCGTAAAACCCCCAACATAGGCCTGCTCGCCAGGCCGCCTGATGTTG ACCTCGGATCGGGTAGGACGACCCGCTGAACTTAAGCATATCAATA >ASS104.2_ITS_VT2850 TAGAGGAAGTAAAAGTCGTAACAAGGTCTCCGTTGGTGAACCAGCGGAGGGATCATTAGAGGGTCGAGAGACC ACCTACTGTTCTTAACCATACCGCGTACCTAGCCGGAAAACTTATGTCTCTGCCTCGGCGGCGGCCCCAGGGG GGGCCTCTGCTCGCTAAGCCGCAACCCGCGGCGCGGCGGGCGCCGCCGGTGGCGCCTAAACTAAAAAGCATTG TAAGTGGGTTATACCACTGCAAAAGAACAAACAATATAAAATATCAAAACCCATTACAACCTGCAACAACGGA TCTCTTGGCTCCGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATACGTAATGCGAATTGCAGATCTCCAGTGAG TCATCGAATCTTTGAACGCACATAGCGCCCGCCAGCTCTCTGGCGGGCATGCCCGTCCGAGCGTCGATTACAC CGCTCGAGCCCGCCTCTCCACACCGGGGAGGTGGTGCTCGGTGTTGGGGCAGTAGGCTTCCTACGCCCCCAAA ACCATTGCGCGGCCCTCGCATCAGGACCCAAGCACAGTAAACTTCTCACGTTGAGCTGCTTAGGGGCACCTGC GCCGGGGCGCCAGCCGTAAAACCCCCAACATAGGCCTGCTCGTCAGGCCGCCTGATGTTGACCTCGGATCGGG TAGGACGACCCGCTGAACTTAAGCATATCATA >ASS71.1_ITS_VT2841 TAGAGGAAGTAAAAGTCGTAACAAGGTCTCCGTTGGTGAACCAGCGGAGGGATCATTAGAGGGTCGAGAGACC ACCTACTGTTCTTAACCATACCGCGTACCTAGCCGGAAAACTTATGTCTCTGCCTCGGCGGCGGCCCCAGGGG GGGCCTCTGCTCGCTAAGCCGCAACCCGCGGCGCGGCGGGCGCCGCCGGTGGCGCCTAAACTAAAAAGCATTG TAAGTGGGTTATACCACTGCAAAAGAACAAACAATATAAAATATCAAAACCCATTACAACCTGCAACAACGGA TCTCTTGGCTCCGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATACGTAATGCGAATTGCAGATCTCCAGTGAG TCATCGAATCTTTGAACGCACATAGCGCCCGCCAGCTCTCTGGCGGGCATGCCCGTCCGAGCGTCGATTACAC CGCTCGAGCCCGCCTCTCCACACCGGGGAGGTGGTGCTCGGTGTTGGGGCAGTAGGCTTCCTACGCCCCCAAA ACCATTGCGCGGCCCTCGCATCAGGACCCAAGCACAGTAAACTTCTCACGTTGAGCTGCTTAGGGGCACCTGC GCCGGGGCGCCAGCCGTAAAACCCCCAACATAGGCCTGCTCGTCAGGCCGCCTGATGTTGACCTCGGATCGGG TAGGACGACCCGCTGAACTTAAGCATATCATAAACC >ASS73.1_ITSD1D2_VT2842 AATTAGAGGAAGTAAAAGTCGTAACAAGGTCTCCGTTGGTGAACCAGCGGAGGGATCATTAGAGGGTCGAGAG ACCACCTACTGTTCTTAACCATACCGCGTACCTAGCCGGAAAACTTATGTCTCTGCCTCGGCGGCGGCCCCAG GGGGGGCCTCTGCTCGCTAAGCCGCAACCCGCGGCGCGGCGGGCGCCGCCGGTGGCGCCTAAACTAAAAAGCA TTGTAAGTGGGTTATACCACTGCAAAAGAACAAACAATATAAAATATCAAAACCCATTACAACCTGCAACAAC GGATCTCTTGGCTCCGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATACGTAATGCGAATTGCAGATCTCCAGT GAGTCATCGAATCTTTGAACGCACATAGCGCCCGCCAGCTCTCTGGCGGGCATGCCCGTCCGAGCGTCGATTA CACCGCTCGAGCCCGCCTCTCCACACCGGGGAGGTGGTGCTCGGTGTTGGGGCAGTAGGCTTCCTACGCCCCC AAAACCATTGCGCGGCCCTCGCATCAGGACCCAAGCACAGTAAACTTCTCACGTTGAGCTGCTTAGGGGCACC TGCGCCGGGGCGCCAGCCGTAAAACCCCCAACATAGGCCTGCTCGTCAGGCCGCCTGATGTTGACCTCGGATC GGGTAGGACGACCCGCTGAACTTAAGCATATCAATAAGCGGAGGAAAAGAAACCAACAGGGATTGCCTCAGTA GCGGCGAGCGAAGCGGCAAAAGCTCAGATTTGAAATCTGGCCGTCTCCGCGGCGGTCCGAATTGTAATCTGTA GGGGATGATTCCAACCGACGTGTTCTGCCTAAGTCCCCTGGAACGGGGCGCCATAGAGGGTGAGAGCCCCGTG AGGTAGGGCGCGCTTGGTACAATGTGAATCTCCTCCGACGAGTCGAGTAGTTTGGGAATGCTGCTCTAAATGG GAGGTATATTCCTTCTAAAGCTAAATACCGGCCGGAGACCGATAGCGCACAAGTAGAGTGATCGAAAGGTGAA AAGCACTTTGGAAAGAGAGTGAAATAGTACGTGAAATTGTTGCAGGGGAAGCGCTCTTGACCAGTCGCGCGCC GTGGGATCAGCCGTCGTTCACTCGGCGGTGTACTCCCTCTGGTTGCGGGTCAGCACCGGCTCTGGCGGTGGGA TAGGCGCGTTGGGAACGTGGCCCTACCTTCGGGTGGGGTGTTATAGCCCGGCGTGCGTACCGCCTGCTGGGGC CGAGGTATTCTGCGCCTTACGGCTAGGATGCGGC >ASS80.2_ITSD1D2_VT2815 CCTACTGTTCTTACCATACCGCGTACCTAGCCGGAAAACTTATGTCTCTGCCTCGGCGGCGGCCCCAGGGGGG GCCTCTGCTCGCTAAGCCGCAACCCGCGGCGCGGCGGGCGCCGCCGGTGGCGCCTAAACTAAAAAGCATTGTA AGTGGGTTATACCACTGCAAAAGAACAAACAATATAAAATATCAAAACCCATTACAACCTGCAACAACGGATC TCTTGGCTCCGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATACGTAATGCGAATTGCAGATCTCCAGTGAGTC ATCGAATCTTTGAACGCACATAGCGCCCGCCAGCTCTCTGGCGGGCATGCCCGTCCGAGCGTCGATTACACCG CTCGAGCCCGCCTCTCCACACCGGGGAGGTGGTGCTCGGTGTTGGGGCAGTAGGCTTCCTACGCCCCCAAAAC CATTGCGCGGCCCTCGCATCAGGACCCAAGCACAGTAAACTTCTCACGTTGAGCTGCTTAGGGGCACCTGCGC CGGGGCGCCAGCCGTAAAACCCCCAACATAGGCCTGCTCGTCAGGCCGCCTGATGTTGACCTCGGATCGGGTA GGACGACCCGCTGAACTTAAGCATATCAATAAGCGGAGGAAAAGAAACCAACAGGGATTGCCTCAGTAGCGGC 88 88 Lã Thị Mỹ Hạnh K27 – Vi sinh vật học Luận văn thạc sĩ GAGCGAAGCGGCAAAAGCTCAGATTTGAAATCTGGCCGTCTCCGCGGCGGTCCGAATTGTAATCTGTAGGGGA TGATTCCAACCGACGTGTTCTGCCTAAGTCCCCTGGAACGGGGCGCCATAGAGGGTGAGAGCCCCGTGAGGTA GGGCGCGCTTGGTACAATGTGAATCTCCTCCGACGAGTCGAGTAGTTTGGGAATGCTGCTCTAAATGGGAGGT ATATTCCTTCTAAAGCTAAATACCGGCCGGAGACCGATAGCGCACAAGTAGAGTGATCGAAAGGTGAAAAGCA CTTTGGAAAGAGAGTGAAATAGTACGTGAAATTGTTGCAGGGGAAGCGCTCTTGACCAGTCGCGCGCCGTGGG ATCAGCCGTCGTTCACTCGGCGGTGTACTCCCTCTGGTTGCGGGTCAGCACCGGCTCTGGCGGTGGGATAGGC GCGTTGGGAACGTGGCCCTACCTTCGGGTGGGGTGTTATAGCCCGGCGTGCGTACCGCCTGCTGGGGCCGAGG TATTCTGCGCCTTACGGCTAGGATGC >ASS86.1_ITS_VT2849 ATTAGAGGAAGTAAAAGTCGTAACAAGGTCTCCGTTGGTGAACCAGCGGAGGGATCATTAGAGGGTCGAGAGG CCACCTACTGTTCTTAACCATACCGCGTACCTAGCCGGAAAACTTATGTCTCTGCCTCGGCGGCGGCCCCAGG GGGGGCCTCTGCTCGCTAAGCCGCAACCCGCGGCGCGGCGGGCGCCGCCGGTGGCGCCTAAACTAAAAAGCAT TGTAAGTGGGTTATACCACTGCAAAAGAACAAACAATATAAAATATCAAAACCCATTACAACCTGCAACAACG GATCTCTTGGCTCCGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATACGTAATGCGAATTGCAGATCTCCAGTG AGTCATCGAATCTTTGAACGCACATAGCGCCCGCCAGCTCTCTGGCGGGCATGCCCGTCCGAGCGTCGATTAC ACCGCTCGAGCCCGCCTCTCCACACCGGGGAGGTGGTGCTCGGTGTTGGGGCAGTAGGCTTCCTACGCCCCCA AAACCATTGCGCGGCCCTCGCATCAGGACCCAAGCACAGTAAACTTCTCACGTTGAGCTGCTTAGGGGCACCT GCGCCGGGGCGCCAGCCGTAAAACCCCCAACATAGGCCTGCTCGTCAGGCCGCCTGATGTTGACCTCGGATCG GGTAGGACGACCCGCTGAACTTAAGCATATCAATAAA II Tổng hợp kết sàng lọc Nguồn gốc phân lập chủng vi nấm chịu pH thấp Kí hiệu chủng Tên mẫu Loại mẫu AS 17 AS17 Rác sàn xưởng mạ nhiễm acid AS 173-2 AS173 Mùn cỏ nhọn AS 175-2 AS175 Lá thông mục AS 180-1 AS180 Lá cao su mục AS 182-2 AS182 Quả sung khô AS 19 AS19 Rác sàn xưởng mạ nhiễm acid AS 31 AS 318-1 ASM 115 ASM 122 ASM 136 ASM 137-1 ASM 137-2 ASM 138-1 ASM 138-3 ASM 139-1 ASM 140 ASM 141-1 ASM 143-2 ASM 145-2 ASM 147 ASM 152-1 ASM 152-2 ASM 153-1 ASM 153-2 ASM 157 AS31 AS318 AS115 AS115 AS136 AS137 AS137 AS138 AS138 AS139 AS140 AS141 AS143 Hành muối Mùn Pyrit Phú Thọ Pyrit Phú Thọ Kênh thải axit nhà máy Kênh thải axit nhà máy Kênh thải axit nhà máy Kênh thải axit nhà máy Kênh thải axit nhà máy Kênh thải axit nhà máy Kênh thải axit nhà máy Kênh thải axit nhà máy Kênh thải axit nhà máy AS147 AS152 AS152 AS153 AS153 AS157 Pyrit Minh Quang Pyrit Minh Quang Pyrit Minh Quang Pyrit Minh Quang Pyrit Minh Quang Pyrit Minh Quang Địa điểm Đường E3, KCN, Lạc Đạo, Văn Lâm, Hưng Yên Quan Lan, Vân Đồn District, Quảng Ninh, Vietnam Ya Ly, Sa Thầy District, Kon Tum Province Đắk Bla, Kon Tum, Kon Tum Province Thắng Lợi, Kon Tum Đường E3, KCN, Lạc Đạo, Văn Lâm, Hưng Yên Lê Thanh Nghị, Hà Nội Hải phòng Hải phòng Hải phòng Hải phòng Hải phòng Hải phòng Hải phịng Hải phịng Hải phịng Ba Vì, Hà Nội Ba Vì, Hà Nội Ba Vì, Hà Nội Ba Vì, Hà Nội Ba Vì, Hà Nội Ba Vì, Hà Nội 89 89 Lã Thị Mỹ Hạnh K27 – Vi sinh vật học Luận văn thạc sĩ Kí hiệu chủng ASM 158 ASM 159-1 ASS 102-1 ASS 104-1 ASS 104-2 Tên mẫu AS158 AS159 SS102 SS104 SS104 Loại mẫu Pyrit Minh Quang Pyrit Minh Quang Đất đồi bazan, gần hồ Đất đồi bazan, gần hồ Đất đồi bazan, gần hồ ASS 125-1 SS125 Đất đá cằn trồng ngô ASS 135-1 SS135 ASS 192-1 SS192 PQ1 Bãi chất thải sau lọc xưởng SX thạch ASS 20 SS20 Đất đồi ASS 30 SS30 Đất nhiễm axit ASS 40-3 SS40 Đất chân núi ASS 45-1 SS45 ASS 46-1 SS46 Đất ruộng khô nẻ ASS 46-2 SS46 Đất ruộng khô nẻ ASS 46-3 SS46 Đất ruộng khô nẻ ASS 52-1 SS52 Đất vườn ASS 53 SS53 Đất vườn ASS 64-1 SS64 Đất đồi ASS 69-1 SS69 Đất vườn ASS 71-1 SS71 Đất gần hồ, cách biển 100 m ASS 73-1 SS73 Đất pha cát, gần biển ASS 73-4 SS73 Đất pha cát, gần biển ASS 74-1 SS74 Đất gần hồ, cách biển 100 m ASS 74-4 SS74 Đất gần hồ, cách biển 100 m ASS 80-1 SS80 Đất gần thác nước ASS 80-2 SS80 Đất gần thác nước ASS 80-3 SS80 Đất gần thác nước ASS 82-2 SS82 Đất đồi ASS 86-1 ASS 86-2 SS86 SS86 Đất đùn tổ kiến vườn cao su Đất đùn tổ kiến vườn cao su ASS 87-1 SS87 Đất ven hồ rừng keo Địa điểm Ba Vì, Hà Nội Ba Vì, Hà Nội Biển Hồ, Pleiku, Gia Lai Biển Hồ, Pleiku, Gia Lai Biển Hồ, Pleiku, Gia Lai Lũng Táo, Đồng Văn District, Ha Giang, Vietnam Trang web An Tràng - An Lão - Hải Phòng Gần Đền Trung, Ba Vì, Hà Nội, Việt Nam ASS 237 Mỏ Pyrit cũ, Minh Quang, Ba Vì, Hà Nội Đường Yên Trung, ng bí, Quảng Ninh Bà Nà, Đà Nẵng 217 & 516B, Huyen Cam Thuy, Vietnam 217 & 516B, Huyen Cam Thuy, Vietnam 217 & 516B, Huyen Cam Thuy, Vietnam DUONG Tran Thua, Thanh Pho Nam Dinh, Vietnam DUONG Pham The Hien, Thanh Pho Thai Binh, Vietnam Lâm Sơn, Lương Sơn, Hoa Binh, Vietnam Sân bay quốc tế, Long Hồ, Bình Thủy, Cần Thơ Côn Đảo, Bà Rịa - Vũng Tàu, Việt Nam Bến Đầm, Côn Đảo, Bà Rịa Vũng Tàu Bến Đầm, Côn Đảo, Bà Rịa Vũng Tàu Côn Đảo, Bà Rịa - Vũng Tàu, Việt Nam Côn Đảo, Bà Rịa - Vũng Tàu, Việt Nam Đắk Long, Kon Plông, Kon Tum, Vietnam Đắk Long, Kon Plông, Kon Tum, Vietnam Đắk Long, Kon Plông, Kon Tum, Vietnam Đắk Long, Kon Plông, Kon Tum, Vietnam Đắk Bla, Kon Tum, Việt Nam Đắk Bla, Kon Tum, Việt Nam Ya Ly, Sa Thầy, Kon Tum, Việt Nam 90 90 Lã Thị Mỹ Hạnh K27 – Vi sinh vật học Luận văn thạc sĩ Kí hiệu chủng ASS 87-2 SS87 Đất ven hồ rừng keo ASS 88-1 SS88 Đất gần thác nước ASS 89-1 SS89 Đất trồng trọt đồi ASS 94-2 SS94 Đất cát, đồi phi lao ASS 96-1 SS96 Đất đồi ASS 97-1 SS97 Đất cát, đồng cỏ nhọn ASS 97-2 SS97 Đất cát, đồng cỏ nhọn ASS 99-1 SS99 Đất mùn chân đồi AST 143-1 AST 144-1 AST 144-2 AST 144-3 AST 145-1 AST 147 AST 148 AST 151-2 AST 152 AST 152-1 AST 154 AST 155-1 AST 155-2 AST 157-1 AST 157-2 AST 157-3 AST 159 AST 160 AST 161-2 SS143 SS144 SS144 SS144 SS145 SS147 SS148 SS151 SS152 SS152 S28 S23 S23 S23 S35 S30 S25 S10 S24, cát S24, cát Địa điểm Ya Ly, Sa Thầy, Kon Tum, Việt Nam Đắk Long, Kon Plông, Kon Tum, Vietnam Đắk Long, Kon Plông, Kon Tum, Vietnam Quan Lan, Vân Đồn District, Quảng Ninh, Vietnam Quan Lan, Vân Đồn District, Quảng Ninh, Vietnam Quan Lan, Vân Đồn District, Quảng Ninh, Vietnam Quan Lan, Vân Đồn District, Quảng Ninh, Vietnam Quan Lan, Vân Đồn District, Quảng Ninh, Vietnam Lý Sơn Lý Sơn Lý Sơn Lý Sơn Lý Sơn Lý Sơn Lý Sơn Lý Sơn Lý Sơn Lý Sơn SS155 SS155 SS157 SS157 SS157 SS159 SS160 SS161 S19 S19 S34 S34 S34 S4 S18 S6 Lý Sơn Lý Sơn Lý Sơn Lý Sơn Lý Sơn Lý Sơn Lý Sơn Lý Sơn Tên mẫu Loại mẫu Hàm lượng protein chủng phân lập STT 10 11 12 13 14 15 Kí hiệu chủng AS 173-2 ASS 80-1 ASS 86-2 ASM 137-2 ASS 45-1 ASS 97-2 ASS 40-3 ASS 46-2 ASS 94-2 ASS 52-1 ASM 115 ASM 147 ASM 153-1 ASS 74-4 ASS 64-1 Tên phân loại Penicillium citreonigrum Penicillium citreonigrum Penicillium citreonigrum Penicillium sp.1 Penicillium griseolum Penicillium griseolum Penicillium sp.2 Aspergillus turcosus Aspergillus sp.2 Penicillium sp.3 Penicillium sp.4 Penicillium sp.4 Penicillium sp.4 Penicillium sp.4 Thyronectria sp nov Protein (mg/ ml) 7.25 7.20 8.05 5.72 8.24 7.55 8.45 8.92 6.04 8.76 8.62 8.87 7.94 8.03 7.20 91 91 Lã Thị Mỹ Hạnh K27 – Vi sinh vật học Luận văn thạc sĩ STT 16 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 Kí hiệu chủng ASS 135-1 ASS 96-1 AST 147 AST 152 AST 155-1 AST 157-3 AS 175-2 ASS 46-1 ASS 88-1 ASS 99-1 ASM 122 ASS 104-2 ASS 71-1 ASS 73-1 ASS 80-2 ASS 86-1 Tên phân loại Sarocladium sp Acidomyces acidothermus Acidomyces acidothermus Acidomyces acidothermus Acidomyces acidothermus Acidomyces acidothermus Amplistroma sp Amplistroma sp Amplistroma sp Amplistroma sp Acrodontium griseum Acrodontium griseum Acrodontium griseum Acrodontium griseum Acrodontium griseum Acrodontium griseum Protein (mg/ ml) 15.60 5.36 5.18 8.49 11.20 8.59 23.26 9.09 7.24 9.76 7.77 15.56 8.95 11.70 16.34 6.77 Hoạt tính enzyme Xylanase pH 1.0, pH 3.0 pH 5.0 31 chủng vi nấm phân lập STT Kí hiệu chủng 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 AS 173-2 ASS 80-1 ASS 86-2 ASM 137-2 ASS 45-1 ASS 97-2 ASS 40-3 ASS 46-2 ASS 94-2 ASS 52-1 ASM 115 ASM 147 ASM 153-1 ASS 74-4 ASS 64-1 ASS 135-1 ASS 96-1 AST 147 AST 152 AST 155-1 AST 157-3 AS 175-2 ASS 46-1 ASS 88-1 ASS 99-1 ASM 122 ASS 104-2 ASS 71-1 ASS 73-1 ASS 80-2 ASS 86-1 Tên phân loại Penicillium citreonigrum Penicillium citreonigrum Penicillium citreonigrum Penicillium sp.1 Penicillium griseolum Penicillium griseolum Penicillium sp.2 Aspergillus turcosus Aspergillus sp.2 Penicillium sp.3 Penicillium sp.4 Penicillium sp.4 Penicillium sp.4 Penicillium sp.4 Thyronectria sp nov Sarocladium sp Acidomyces acidothermus Acidomyces acidothermus Acidomyces acidothermus Acidomyces acidothermus Acidomyces acidothermus Amplistroma sp Amplistroma sp Amplistroma sp Amplistroma sp Acrodontium griseum Acrodontium griseum Acrodontium griseum Acrodontium griseum Acrodontium griseum Acrodontium griseum pH1 2.26 18.03 33.26 78.66 41.55 14.24 61.36 28.38 28.89 31.71 16.42 29.21 35.13 29.46 10.85 31.20 43.70 61.52 24.90 46.74 40.82 217.50 546.76 97.65 204.40 135.72 301.63 263.65 213.90 318.51 193.49 Xylanase (U/ ml) pH3 5.56 54.28 68.93 43.67 80.53 41.12 75.25 68.09 66.27 62.09 37.66 49.42 52.19 58.28 18.37 69.52 60.25 54.19 36.05 59.74 53.89 401.24 1174.59 291.06 484.02 418.10 885.26 731.64 479.55 771.91 615.30 pH5 2.78 32.07 40.95 80.96 74.01 30.37 54.58 55.52 44.54 34.68 14.76 24.68 21.80 75.36 8.01 54.60 41.41 36.23 20.91 37.50 31.00 448.36 1177.07 278.74 453.19 347.68 722.25 605.34 508.10 701.17 576.60 Hoạt tính enzyme CMCase pH 1.0, pH 3.0 pH 5.0 31 chủng vi nấm phân lập 92 92 Lã Thị Mỹ Hạnh K27 – Vi sinh vật học Luận văn thạc sĩ STT 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 Kí hiệu chủng AS 173-2 ASS 80-1 ASS 86-2 ASM 137-2 ASS 45-1 ASS 97-2 ASS 40-3 ASS 46-2 ASS 94-2 ASS 52-1 ASM 115 ASM 147 ASM 153-1 ASS 74-4 ASS 64-1 ASS 135-1 ASS 96-1 AST 147 AST 152 AST 155-1 AST 157-3 AS 175-2 ASS 46-1 ASS 88-1 ASS 99-1 ASM 122 ASS 104-2 ASS 71-1 ASS 73-1 ASS 80-2 ASS 86-1 Tên phân loại pH1 1.39 1.48 1.14 1.33 0.64 1.49 1.58 1.22 1.46 1.38 1.22 0.77 0.64 1.16 1.03 1.23 0.69 1.20 2.13 1.25 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.97 0.61 0.00 0.00 Penicillium citreonigrum Penicillium citreonigrum Penicillium citreonigrum Penicillium sp.1 Penicillium griseolum Penicillium griseolum Penicillium sp.2 Aspergillus turcosus Aspergillus sp.2 Penicillium sp.3 Penicillium sp.4 Penicillium sp.4 Penicillium sp.4 Penicillium sp.4 Thyronectria sp nov Sarocladium sp Acidomyces acidothermus Acidomyces acidothermus Acidomyces acidothermus Acidomyces acidothermus Acidomyces acidothermus Amplistroma sp Amplistroma sp Amplistroma sp Amplistroma sp Acrodontium griseum Acrodontium griseum Acrodontium griseum Acrodontium griseum Acrodontium griseum Acrodontium griseum CMCase (U/ ml) pH3 0.09 2.30 10.74 0.91 7.27 9.06 9.35 12.77 8.26 4.82 9.32 4.28 10.78 7.37 13.14 0.00 2.56 9.20 10.74 10.41 6.16 6.29 7.40 7.37 7.30 9.64 6.71 10.60 4.81 6.79 7.10 pH5 2.24 2.48 6.77 2.40 4.20 3.81 1.84 7.76 3.29 2.83 1.48 1.29 2.32 3.43 7.39 0.07 5.21 3.92 3.86 3.91 2.32 2.99 1.91 3.10 2.27 5.02 2.18 5.38 2.71 2.40 5.02 Hoạt tính enzyme Xylanase pH 1.0, pH 3.0 pH 5.0 31 chủng vi nấm phân lập Xylanase (U/ ml) S T T Kí hiệu chủng Tên phân loại AS 1732 ASS 801 ASS 862 ASM 137-2 ASS 451 ASS 972 ASS 403 Penicillium citreonigrum Penicillium citreonigrum Penicillium citreonigrum Penicillium sp.1 Penicillium griseolum Penicillium griseolum Penicillium sp.2 Enzyme không gia nhiệt Enzyme gia nhiệt 70° Enzyme gia nhiệt 90° Rate E0/ E70°C, % Rate E0/ E90°C, % 2.55 0.00 0.00 0.0 0.0 50.81 0.00 0.81 0.0 1.6 60.57 15.18 0.06 25.1 0.1 15.54 1.17 0.00 7.6 0.0 105.69 3.61 0.00 3.4 0.0 281.83 4.82 87.31 1.7 31.0 56.82 6.28 10.94 11.1 19.3 93 93 Lã Thị Mỹ Hạnh K27 – Vi sinh vật học Luận văn thạc sĩ 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 ASS 462 ASS 942 ASS 521 ASM 115 ASM 147 ASM 153-1 ASS 744 ASS 641 ASS 135-1 ASS 961 AST 147 AST 152 AST 155-1 AST 157-3 AS 1752 ASS 461 ASS 881 ASS 991 ASM 122 ASS 104-2 ASS 711 ASS 731 ASS 802 ASS 861 Aspergillus turcosus Aspergillus sp.2 Penicillium sp.3 Penicillium sp.4 Penicillium sp.4 Penicillium sp.4 Penicillium sp.4 Thyronectria sp nov Sarocladium sp Acidomyces acidothermus Acidomyces acidothermus Acidomyces acidothermus Acidomyces acidothermus Acidomyces acidothermus Amplistroma sp Amplistroma sp Amplistroma sp Amplistroma sp Acrodontium griseum Acrodontium griseum Acrodontium griseum Acrodontium griseum Acrodontium griseum Acrodontium griseum 84.59 7.95 0.00 9.4 0.0 62.73 0.05 0.00 0.1 0.0 13.47 0.00 0.00 0.0 0.0 24.17 2.08 0.15 8.6 0.6 46.31 1.72 0.15 3.7 0.3 43.59 1.04 0.00 2.4 0.0 123.43 0.63 0.00 0.5 0.0 13.72 0.00 0.00 0.0 0.0 84.12 13.55 0.90 16.1 1.1 76.52 5.42 0.00 7.1 0.0 63.66 2.30 1.28 3.6 2.0 39.46 1.45 0.00 3.7 0.0 72.76 4.70 0.00 6.5 0.0 46.12 1.36 0.00 2.9 0.0 638.96 22.29 94.82 3.5 14.8 1775.28 184.31 544.39 10.4 30.7 388.15 8.73 96.07 2.3 24.8 721.08 65.95 341.12 9.1 47.3 614.13 9.49 128.15 1.5 20.9 1356.60 56.47 374.65 4.2 27.6 1036.06 137.03 351.19 13.2 33.9 798.95 62.34 251.99 7.8 31.5 1131.44 67.76 338.68 6.0 29.9 896.90 88.09 366.83 9.8 40.9 Hoạt tính enzyme CMCase pH 1.0, pH 3.0 pH 5.0 31 chủng vi nấm phân lập STT Kí hiệu chủng AS 173-2 ASS 80-1 Pe Pe 94 94 Lã Thị Mỹ Hạnh K27 – Vi sinh vật học Luận văn thạc sĩ 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 ASS 86-2 ASM 137-2 ASS 45-1 ASS 97-2 ASS 40-3 ASS 46-2 ASS 94-2 ASS 52-1 ASM 115 ASM 147 ASM 153-1 ASS 74-4 ASS 64-1 ASS 135-1 ASS 96-1 AST 147 AST 152 AST 155-1 AST 157-3 AS 175-2 ASS 46-1 ASS 88-1 ASS 99-1 ASM 122 ASS 104-2 ASS 71-1 ASS 73-1 ASS 80-2 ASS 86-1 Pe Pe Pe Pe Pe Asp Asp Pe Pe Pe Pe Pe Th Sar Ac Ac Ac Ac Ac Am Am Am Am Ac Ac Ac Ac Ac Ac 95 95 Lã Thị Mỹ Hạnh K27 – Vi sinh vật học Luận văn thạc sĩ Ảnh điện di SDS-PAGE zymogram CMC, xylan khảo sát độ bền nhiệt 32 chủng vi nấm 96 96 Lã Thị Mỹ Hạnh K27 – Vi sinh vật học Luận văn thạc sĩ 97 97 Lã Thị Mỹ Hạnh K27 – Vi sinh vật học Luận văn thạc sĩ 98 98 Lã Thị Mỹ Hạnh K27 – Vi sinh vật học Luận văn thạc sĩ 99 99 Lã Thị Mỹ Hạnh K27 – Vi sinh vật học Luận văn thạc sĩ 100 100 Lã Thị Mỹ Hạnh K27 – Vi sinh vật học Luận văn thạc sĩ 101 101 Lã Thị Mỹ Hạnh K27 – Vi sinh vật học ... thạc sĩ TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN KHOA SINH HỌC Lã Thị Mỹ Hạnh PHÂN LẬP VÀ XÁC ĐỊNH ĐẶC TÍNH SINH HỌC CỦA VI NẤM CHỊU AXIT MẠNH TẠI VI? ??T NAM CHUYÊN NGÀNH: Vi Sinh Vật Học MÃ SỐ: 8420101.07... lập xác định đặc tính sinh học vi nấm chịu axit mạnh phân lập Vi? ??t Nam ” Đề tài nghiên cứu bao gồm nội dung sau: - Phân lập, tuyển chọn vi nấm chịu axit mạnh 9 Lã Thị Mỹ Hạnh K27 – Vi sinh vật học. .. lập xác định đặc tính sinh học vi nấm chịu axit mạnh phân lập Vi? ??t Nam? ?? PGS.TS Vũ Nguyên Thành PGS TS Bùi Thị Vi? ??t Hà hướng dẫn cơng trình nghiên cứu thân số kết cộng tác với học vi? ?n khác Các