Phân lập và xác định đặc tính sinh học của một số vi khuẩn gây bệnh đường hô hấp phức hợp ở lợn nuôi tại huỵên chương mỹ, thành phố hà nội

BỘ GIÁO DỤC VÀ ðÀO TẠO TRƯỜNG ðẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI  BÙI THỊ LAN THƯƠNG PHÂN LẬP VÀ XÁC ðỊNH ðẶC TÍNH SINH HỌC CỦA MỘT SỐ VI KHUẨN GÂY BỆNH ðƯỜNG HÔ HẤP PHỨC HỢP Ở LỢN NUÔI TẠI HUYỆN CHƯƠNG MỸ, THÀNH PHỐ HÀ NỘI LUẬN VĂN THẠC SĨ NÔNG NGHIỆP Chuyên ngành : Thú y Mã số : 60.62.50 Người hướng dẫn khoa học : 1. TS. HUỲNH THỊ MỸ LỆ 2. TS. ðỖ NGỌC THÚY HÀ NỘI – 2012 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… i LỜI CAM ðOAN Tôi xin cam ñoan rằng, ñây là nghiên cứu khoa học của riêng tôi. Toàn bộ các số liệu và kết quả thu ñược là do bản thân tôi trực tiếp ñiều tra, thu thập và theo dõi với một thái ñộ hoàn toàn khách quan và trung thực, chưa từng ñược ai công bố trong bất kỳ công trình nào . Tôi xin cam ñoan rằng các thông tin trích dẫn trong luận văn ñều ñã ñược chỉ rõ nguồn gốc. Tôi xin cam ñoan mọi sự giúp ñỡ cho việc thực hiện luận văn này ñã ñược cảm ơn./. Hà Nội, ngày 19 tháng 9 năm 2012 Tác giả luận văn Bùi Thị Lan Thương Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… ii LỜI CẢM ƠN ðế hoàn thành Luận văn này, ngoài sự cố gắng của bản thân, tôi luôn nhận ñược sự quan tâm giúp ñỡ của các thầy cô giáo, bạn bè và ñồng nghiệp. Trước hết, tôi xin chân thành cảm ơn các thầy cô giáo Khoa Thú y, Viện ðào tạo sau ðại học, Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội ñã giảng dạy, truyền ñạt kiến thức cho tôi trong suốt thời gian học tập tại Trường. Tôi xin chân thành cảm ơn tập thể: Bộ môn Vi sinh vật – truyền nhiễm, Khoa Thú y, Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội; Bộ môn Vi trùng, Viện Thú y Quốc; Trạm Thú y Chương Mỹ, thành phố Hà Nội. ðặc biệt, tôi xin gửi lời cảm ơn sâu sắc tới cô giáo hướng dẫn: TS. Huỳnh Thị Mỹ Lệ và TS. ðỗ Ngọc Thuý ñã tận tình giúp ñỡ, hướng dẫn tôi trong quá trình thực hiện và hoàn thành Luận văn này. Tôi cũng xin gửi lời cảm ơn ñến người thân trong gia ñình, bạn bè và ñồng nghiệp luôn giúp ñỡ, ñộng viên tôi hoàn thành Luận văn tốt nghiệp này./. Hà Nội, ngày 19 tháng 9 năm 2012 Tác giả luận văn Bùi Thị Lan Thương Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… iii MỤC LỤC Lời cam ñoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục các chữ viết tắt v Danh mục bảng vi Danh mục hình vii 1 MỞ ðẦU 1 1.1 ðặt vấn ñề 1 1.2 Mục tiêu của ñề tài 2 2 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 4 2.1 Tình hình nghiên cứu bệnh hô hấp phức hợp ở lợn (Porcine respiratory disease complex – prdc) trong nước và nước ngoài 4 2.2 Một số hiểu biết chung về ñường hô hấp 5 2.3 Một số bệnh ñường hô hấp do vi khuẩn gây ra ở lợn 8 3 NỘI DUNG, NGUYÊN LIỆU, PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 26 3.1 ðối tượng nghiên cứu 26 3.2 ðịa ñiểm nghiên cứu 26 3.3 Nội dung nghiên cứu 26 3.4 Nguyên liệu nghiên cứu 26 3.5 Phương pháp nghiên cứu 28 4 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 34 4.1 ðiều kiện tự nhiên, kinh tế - xã hội của huyện Chương Mỹ - Hà Nội 34 4.1.1 ðiều kiện tự nhiên 34 4.1.3 Tình hình chăn nuôi lợn của huyện Chương Mỹ - Hà Nội 35 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… iv 4.2 Tình hình bệnh hô hấp phức hợp ở lợn nuôi tại huyện Chương Mỹ - Hà Nội 37 4.2.1 Tỷ lệ lợn mắc bệnh ñường hô hấp phức hợp tại huyện Chương Mỹ - Hà Nội 37 4.2.3 Tỷ lệ lợn mắc, tỷ lệ tử vong do bệnh ñường hô hấp ở lợn theo tháng ñiều tra 41 4.2.4 Tỷ lệ lợn mắc bệnh ñường hô hấp theo phương thức chăn nuôi 42 4.3.2 Kết quả giám ñịnh một số ñặc tính sinh học của vi khuẩn phân lập ñược 50 4.4 Kết quả thử nghiệm một số phác ñồ ñiều trị bệnh ñường hô hấp ở lợn 57 5 KẾT LUẬN VÀ ðỀ NGHỊ 60 5.1 Kết luận 60 5.1.1 Tình hình chăn nuôi lợn của huyện Chương Mỹ - Hà Nội 60 5.1.2 Tình hình bệnh hô hấp phức hợp ở lợn nuôi tại huyện Chương Mỹ - Hà Nội 60 5.1.3 Kết quả phân lập và giám ñịnh vi khuẩn gây bệnh ñường hô hấp ở lợn 60 5.1.4 Kết quả thử nghiệm một số phác ñồ ñiều trị 61 5.2 ðề nghị 61 TÀI LIỆU THAM KHẢO 62 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… v DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Chữ viết ñầy ñủ A. pleuropneumoniae : Actinobacillus pleuropneumoniae APP : Actinobacillus pleuropneumoniae B. bronchiseptica : Bordetella bronchiseptica BHI : Brain Heart Infusion cs : cộng sự H. parasuis : Haemophilus parasuis P. multocida : Pasteurella multocida PCR : Polymerase chain reaction PCV2 : Porcine Circovirus PRCV : The Porcine Respiratory Coronavirus PRDC : Porcine respiratory disease complex PRRS : Porcine reproductive and respiratory syndrome PRRSV : Porcine reproductive and respiratory syndrome virus PRV : Pseudorabies Virus S. suis : Streptococcus suis Spp : Species plural TSA : Tryptone Soya Agar TSB : Tryptone Soya Broth TT : Thể trọng Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… vi DANH MỤC BẢNG STT Tên bảng Trang 2.1 Những mầm bệnh gây bệnh ñường hô hấp ở lợn 7 3.1 Bảng ñánh giá kết quả khả năng mẫn cảm của các vi khuẩn với các chất kháng khuẩn 32 4.1 Tình hình chăn nuôi lợn tại huyện Chương Mỹ - Hà Nội 36 4.2 Tỷ lệ lợn mắc bệnh ñường hô hấp phức hợp tại huyện Chương Mỹ - Hà Nội 37 4.3 Kết quả ñiều tra tỷ lệ lợn mắc bệnh ñường hô hấp theo lứa tuổi 40 4.4 Kết quả xác ñịnh tỷ lệ mắc, tỷ lệ tử vong do bệnh ñường hô hấp ở lợn theo tháng 41 4.5 Kết quả ñiều tra tỷ lệ lợn mắc bệnh ñường hô hấp theo phương thức chăn nuôi 42 4.6 Kết quả phân lập vi khuẩn ñường hô hấp từ dịch ngoáy mũi của lợn 44 4.7 Kết quả phân lập một số vi khuẩn từ phổi lợn mắc bệnh ñường hô hấp 46 4.8 Kết quả phân lập vi khuẩn ñường hô hấp trong dịch ngoáy mũi và mẫu viêm phổi ở lợn sau cai sữa và lợn trưởng thành 48 4.9 Kết quả kiểm tra ñặc tính sinh học của các chủng Actinobacillus phân lập ñược 51 4.10 Kết quả kiểm tra một số ñặc tính sinh học của Streptococcus spp. 52 4.11 Kết quả kiểm tra một số ñặc tính sinh học của Pasteurella multocida 53 4.12 Kết quả kiểm tra một số ñặc tính sinh học của Haemophilus parasuis 55 4.13 Kết quả kiểm tra tính mẫn cảm với kháng sinh của vi khuẩn 56 4.14 Kết quả ñiều trị bệnh ñường hô hấp ở lợn 59 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… vii DANH MỤC HÌNH STT Tên hình Trang 3.1 Sơ ñồ phân lập vi khuẩn 30 4.1 Tỷ lệ lợn mắc bệnh ñường hô hấp ở theo ñịa bàn ñiều tra 38 4.2 So sánh tỷ lệ tử vong theo ñịa bàn ñiều tra 39 4.3 Biểu ñồ so sánh tỷ lệ mắc, tử vong theo phương thức chăn nuôi 43 4.4 Tỷ lệ phân lập vi khuẩn từ dịch ngoáy mũi lợn 44 4.5 Tỷ lệ phân lập vi khuẩn từ phổi lợn mắc bệnh ñường hô hấp 46 4.6 Tỷ lệ phân lập vi khuẩn từ dịch ngoáy mũi lợn và mẫu phổi viêm ở 2 lứa tuổi 50 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… 1 1. MỞ ðẦU 1.1. ðặt vấn ñề Chăn nuôi lợn ñóng vai trò quan trọng trong ngành chăn nuôi nói riêng và nông nghiệp nói chung ở Việt Nam. Năng suất ngành chăn nuôi lợn ở nước ta trong thời gian qua ñã không ngừng ñược nâng lên rõ rệt. Trong ñó, huyện Chương Mỹ là một huyện ngoại thành Hà Nội có 95.543 con lợn - là một trong những huyện có tổng ñàn lợn lớn nhất của thành phố Hà Nội: Ba Vì, Chương Mỹ, Sóc Sơn, Thanh Oai, Mỹ ðức. Với mật ñộ chăn nuôi lợn lớn, vấn ñề dịch bệnh ảnh hưởng rất nhiều ñến hiệu quả kinh tế của ngành chăn nuôi của huyện Chương Mỹ, ñặc biệt là thiệt hại kinh tế do bệnh hô hấp phức hợp gây ra. Ngày nay, bệnh hô hấp phức hợp ở lợn (Porcine Respiratory Disease Complex – PRDC) ñược người chăn nuôi lợn quan tâm rất nhiều. Các nguyên nhân gây bệnh bao gồm: Mycoplasma hyopneumoniae, virus cúm, PRRSV (porcine reproductive and respiratory syndrome virus), Bordetella bronchiseptica, Pasteurella multocida, Haemophilus parasuis, Actinobacillus pleuropneumoniae, Streptococcus suis, … Ngày 17/1/2008 Cục Thú y ñã ban hành văn bản số 75/TY-DT về việc hướng dẫn phòng, chống Hội chứng rối loạn hô hấp và sinh sản ở lợn. Tuy nhiên vào ñầu năm 2010, dịch PRRS ñã bùng phát trở lại và gây thiệt hại nặng nề cho ngành chăn nuôi lợn cả nước nói chung và khu vực Hà Nội cùng với những ñịa phương phụ cận nói riêng. Tính ñến ngày 20/8/2012, cả nước có 03 tỉnh: ðắk Lắk, Nghệ An và Cao Bằng Nghệ An, Quảng Trị, Hà Tĩnh có dịch Tai xanh chưa qua 21 ngày. Hiện tượng bội nhiễm thứ phát viêm phổi ñịa phương (Enzootic pneumonia), Streptococcus suis, Pasteurella multocida, Actinobacillus pleuropneumoniae (APP), Haemophilus parasuis làm cho dịch càng trở nên nghiêm trọng. Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… 2 Tác giả Nguyễn Thị Phương Giang (2008) ñã phân lập và ñánh giá ñộc lực của Pasteurella multocida, Streptococcus suis và Actinobacillus pleuropneumoniae trong bệnh hô hấp ở lợn nhằm cung cấp thêm những kiến thức góp phần phòng chống bệnh. Ở nước ngoài ñã có một số công trình nghiên cứu về vi khuẩn kế phát trong bệnh ñường hô hấp ở lợn. Bochev (2007) ñã tổng hợp về bệnh ñường hô hấp phức hợp ở lợn (về căn bệnh, dịch tễ học, triệu chứng lâm sàng, ñặc ñiểm bệnh lý) và cho biết những biến ñổi bệnh lý thường không ñặc trưng do nhiều nguyên nhân gây ra. LI Yu và cs (2009) ñã phân lập và xác ñịnh khả năng mẫn cảm kháng sinh của Haemophilus parasuis trong bệnh lợn tai xanh ở tỉnh Anhui và cho biết chủng H. parasuis này ñã kháng Roxithromycin (100%) và Amikacin (83,3%) ñồng thời vẫn còn mẫn cảm với Ciprofloxacin và Amoxicillin (83,3%). Nhiều nhà khoa học và người chăn nuôi ñều thống nhất quan ñiểm về vai trò của các vi khuẩn trong bệnh hô hấp phức hợp ở lợn, là nguyên nhân chủ yếu gây ra các biểu hiện lâm sàng và tỷ lệ chết cao cho lợn bị bệnh. Do vậy, việc nghiên cứu về vi khuẩn kế phát có ý nghĩa quan trọng, góp phần nâng cao hiệu quả trong công tác phòng, chống dịch bệnh tại ñịa phương. Xuất phát từ nhu cầu thực tiễn trên, chúng tôi tiến hành thực hiện ñề tài:"Phân lập và xác ñịnh ñặc tính sinh học của một số vi khuẩn gây bệnh ñường hô hấp phức hợp ở lợn nuôi tại huyện Chương Mỹ, thành phố Hà Nội". 1.2. Mục tiêu của ñề tài - Xác ñịnh ñặc tính sinh học và khả năng mẫn cảm với kháng sinh của một số vi khuẩn phân lập ñược từ lợn mắc bệnh ñược hô hấp phức hợp nhằm phục vụ công tác phòng chống bệnh tại ñịa phương. [...]... 0,6 – 1,4 m Vi khu n không di ñ ng, không sinh bào t và có hình thành giáp mô Dư i kính hi n vi ñi n t th y vi khu n có lông v i ñư ng kính kho ng 0,5 – 2nm và dài 60 – 450 nm Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… 8 Tính ch t nuôi c y Vi khu n A pleuropneumoniae là m t lo i vi khu n khó nuôi c y Vi khu n không m c trên môi trư ng th ch máu thông thư ng nhưng... 1985; Trigo và cs, 1996; Vonaltrock, 1998; Wissing và cs, 2001; Aerestrup và cs, 2004) Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… 25 3 N I DUNG, NGUYÊN LI U, PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN C U 3.1 ð i tư ng nghiên c u - Vi khu n gây b nh ñư ng hô h p ñàn l n nuôi t i huy n Chương M , thành ph Hà N i 3.2 ð a ñi m nghiên c u - Huy n Chương M , thành ph Hà N i - B môn Vi sinh v... t – Truy n nhi m và b môn Vi trùng – Vi n Thú y Qu c gia 3.3 N i dung nghiên c u - ði u tra tình hình b nh hô h p ph c h p l n nuôi t i huy n Chương M - Hà N i - Phân l p, giám ñ nh ñ c tính sinh h c vi khu n gây b nh ñư ng hô h p ph c h p l n - Xây d ng phác ñ ñi u tr b nh, th nghi m và ñánh giá hi u qu ñi u tr b nh 3.4 Nguyên li u nghiên c u 3.4.1 Môi trư ng nuôi c y và phân l p vi khu n - Môi trư... tê li t Tri u ch ng vi m não l n trư ng thành r t ít bi u hi n 2.3.2.6 B nh tích L n b b i huy t, vi m kh p, vi m ph i, vi m màng não; ngoài ra còn vi m n i tâm m c, vi m âm ñ o, s y thai Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… 15 Th vi m kh p thư ng x y ra l n ñang bú và l n trư ng thành l n trư ng thành có hi n hư ng vi m m t kh p, kh p vi m thư ng là kh p... ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c sĩ khoa h c nông nghi p …………………… 18 MacConkey, không gây dung huy t khi nuôi c y trên môi trư ng th ch máu, không ñòi h i y u t X và V ð c tính sinh hóa: không di ñ ng, ph n ng oxidase và catalase dương tính, sinh indole, ph n ng urease âm tính Vi khu n lên men ñư ng Glucose, Sucrose, Mannitol; không lên men ñư ng Lactose, Maltose; không sinh H2S S c ñ kháng... p thông tin v tình hình b nh ñư ng hô h p ph c h p l n t i huy n Chương M - Xác ñ nh ñư c ñ c tính sinh h c c a m t s vi khu n phân l p ñư c t l n b nh *Ý nghĩa th c ti n - K t qu ki m tra tính m n c m v i kháng sinh giúp ñ xu t ñư c phác ñ ñi u tr có hi u qu - D a trên k t qu phân l p s xác ñ nh ñư c y u t nguy cơ gây b nh và ñ xuát bi n pháp phòng b nh có hi u qu Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N... sinh v t – Truy n nhi m và b môn Vi trùng – Vi n Thú y Qu c gia M u d ch ngoáy mũi và ph i có b nh tích c a b nh vi m ph i ñư c c y trên các môi trư ng thông thư ng và các môi trư ng ch n l c v i t ng lo i vi khu n r i nuôi các ñi u ki n thích h p Sau khi vi khu n m c, căn c vào tính ch t m c trên các môi trư ng nuôi c y ñ ch n các khu n l c ñi n hình Sau ñó, nuôi c y l i các vi khu n trên các môi trư... th do ñi u ki n và ch ñ nuôi dư ng như nhi t ñ và ñ m chu ng nuôi tăng cao ñ t ng t, th c ăn b ôi m c, kh u ph n ăn không ñ dinh dư ng ho c b các tác nhân gây b nh khác như phó thương hàn, suy n l n, lúc ñó các vi khu n ñang s ng c ng sinh trong cơ th th a cơ nhân lên v s lư ng, tăng cư ng v ñ c l c và gây b nh ñ c trưng cho vi khu n ñó (Nguy n Vĩnh Phư c, 1978) Các vi khu n ñư ng hô h p có th lây... c a ñ ng v t và b nh tích ñ i th ð kh ng ñ nh b nh c n nuôi c y phân l p, giám ñ nh ñ c tính sinh h c c a m m b nh và ki m tra b nh tích vi th N u có ñi u ki n, l y m t s khu n l c gây dung huy t d ng alpha ñư c phân l p t m t ho c nhi u con m c b nh ñ xác ñ nh serotyp, giúp kh ng ñ nh s suis gây vi m màng não n ñ nh c a các serotyp S l n (Reams và cs, 1996) K t qu này cũng giúp cho vi c l a ch n... th p t 11 tr i chăn nuôi l n v i các ñi u ki n chăn nuôi khác nhau có th phân l p ñư c vi khu n 139 m u (chi m 72,8%) Ki m tra tính m n c m kháng sinh ñi u ki n phòng thí nghi m c a các ch ng vi khu n phân l p ñư c thì th y t l kháng cao nh t là v i nhóm Macrolides và Florphenicol Cũng nghiên c u v kh năng m n c m kháng sinh c a nh ng vi khu n gây b nh hô h p ph c h p l n, Leon và cs (2009) công b . DỤC VÀ ðÀO TẠO TRƯỜNG ðẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI  BÙI THỊ LAN THƯƠNG PHÂN LẬP VÀ XÁC ðỊNH ðẶC TÍNH SINH HỌC CỦA MỘT SỐ VI KHUẨN GÂY BỆNH ðƯỜNG HÔ HẤP PHỨC HỢP Ở LỢN NUÔI TẠI. hợp ở lợn nuôi tại huyện Chương Mỹ, thành phố Hà Nội& quot;. 1.2. Mục tiêu của ñề tài - Xác ñịnh ñặc tính sinh học và khả năng mẫn cảm với kháng sinh của một số vi khuẩn phân lập ñược từ lợn. Kết quả phân lập vi khuẩn ñường hô hấp từ dịch ngoáy mũi của lợn 44 4.7 Kết quả phân lập một số vi khuẩn từ phổi lợn mắc bệnh ñường hô hấp 46 4.8 Kết quả phân lập vi khuẩn ñường hô hấp trong