3. NỘI DUNG, NGUYÊN LIỆU, PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
3.5.2.Phương pháp lấy mẫu, phân lập vi khuẩn
Theo phương pháp thường quy của Bộ môn Vi sinh vật Ờ Truyền nhiễm và bộ môn Vi trùng Ờ Viện Thú y Quốc giạ
Mẫu dịch ngoáy mũi và phổi có bệnh tắch của bệnh viêm phổi ựược cấy trên các môi trường thông thường và các môi trường chọn lọc với từng loại vi khuẩn rồi nuôi ở các ựiều kiện thắch hợp. Sau khi vi khuẩn mọc, căn cứ vào tắnh chất mọc trên các môi trường nuôi cấy ựể chọn các khuẩn lạc ựiển hình. Sau ựó, nuôi cấy lại các vi khuẩn trên các môi trường chọn lọc cho thuần khiết rồi tiến hành các phương pháp thử khác ựể giám ựịnh loại vi khuẩn gây bệnh. Sơ ựồ nuôi cấy vi khuẩn ựược trình bày ở hình 3.1.
Cách chọn một số loại khuẩn lạc của các vi khuẩn:
+ Vi khuẩn Ạ pleuropneumoniae: Vi khuẩn Ạ pleuropneumoniae ựược cấy trên hai loại môi trường là môi trường TSA (có bổ sung 1 Ờ 3% fresh yeast extract và 5% huyết thanh ngựa) và trên môi trường thạch máu có cấy kèm ựường cấy của Staphylococcus aureus.
Trên môi trường TSA, vi khuẩn mọc tạo thành khuẩn lạc nhỏ, dưới ánh sáng ựèn ựiện có ánh xanh xám, kắch thước khuẩn lạc khoảng 0,5 Ờ 1mm. Trên môi trường thạch máu có cấy kèm ựường cấy S. aureus, vi khuẩn thường nhỏ, nằm xung quanh ựường cấy S. aureus này và gây dung huyết. Sự dung huyết mạnh hay yếu phụ thuộc vào ựộc lực của vi khuẩn.
Vi khuẩn H. parasuis: Cách phân lập vi khuẩn H. parasuis tương tự như cách phân lập vi khuẩn Ạ pleuropneumoniae. Nhưng khuẩn lạc của vi khuẩn này thường nhỏ hơn, trong hơn vi khuẩn Ạ pleuropneumoniae và không gây dung huyết.
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 29 + Vi khuẩn P. multocida: Vi khuẩn P. multocida ựược nuôi cấy trên môi trường thạch BHI (có bổ sung 5% máu). Trên môi trường thạch này khuẩn lạc có dạng S hay dạng M màu trắng ựục, có mùi giống mùi tanh của nước dãi khô, không gây dung huyết, phản ứng Oxydaza và Catalaza dương tắnh.
+ Vi khuẩn S. suis: Vi khuẩn S. suis ựược nuôi cấy trên môi trường thạch máu và thạch MacConkeỵ Trên thạch máu vi khuẩn tạo khuẩn lạc dạng S, màu trắng, trong, rìa gọn, mịn, gây dung huyết, kắch thước khuẩn lạc nhỏ.