VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 41
Các loài nấm Phytophthora gây bệnh trên cây ăn quả có múi tại Cao Bằng
Một số vi sinh vật đối kháng với nấm Phytophthora
Các giống cây ăn quả có múi tại Cao Bằng (Cam Trưng Vương, Quýt Hà Trì, Quýt
Trà Lĩnh và bưởi Phục Hòa)
Điều tra hiện trạng bệnh do nấm Phytophthora spp gây hại trên cây ăn quả có múi tại Cao Bằng cho thấy tình hình sản xuất cây ăn quả có múi (CĂQCM) đang gặp nhiều thách thức, đặc biệt là bệnh thối rễ và chảy gôm Việc nắm bắt thông tin này là cần thiết để đưa ra các biện pháp phòng ngừa và quản lý hiệu quả, nhằm bảo vệ cây trồng và nâng cao năng suất sản xuất tại địa phương.
Thu thập, phân lập, xác định nấm Phytophthora gây bệnh thối rễ, chảy gôm trên
2 2 2 Nghiên cứu đặc điểm sinh học, quy luật phát sinh gây hại của nấm Phytophthora spp gây hại trên cây ăn quả có múi tại Cao Bằng
Xác định các loài nấm Phytopthora gây bệnh thối rễ, chảy gôm trên CĂQCM bằng đặc điểm hình thái và kỹ thuật phân tử
Nghiên cứu ảnh hưởng của các yếu tố môi trường, nhiệt độ, pH, đến sinh trưởng của nấm các loài nấm Phytophthora gây bệnh trên CĂQCM tại Cao Bằng
Nghiên cứu quy luật phát sinh, gây hại của nấm Phytophthora trên CĂQCM tại Cao Bằng
2 2 3 Phân lập, tuyển chọn vi sinh vật đối kháng nấm Phytophthora spp gây bệnh thối rễ, chảy gôm trên cây ăn quả có múi tại Cao Bằng
Thu thập và phân lập các vi sinh vật có khả năng đối kháng mạnh mẽ với nấm Phytophthora gây hại trên cây có múi Định danh các vi sinh vật này và đánh giá mức độ an toàn sinh học của chúng.
Nghiên cứu các yếu tố ảnh hưởng đến sự phát triển và khả năng nuôi cấy sinh khối của các nguồn vi sinh vật (VSV) đối kháng có tiềm năng, đồng thời đánh giá hiệu quả phòng trừ của chế phẩm đối với nấm Phytophthora, nguyên nhân gây bệnh thối rễ, là cần thiết để cải thiện năng suất cây trồng và bảo vệ môi trường.
Đánh giá khả năng sử dụng vi sinh vật đối kháng trong việc phòng trừ bệnh Phytophthora trên cây ăn quả có múi tại Cao Bằng là một phần quan trọng trong hệ thống quản lý tổng hợp cây trồng Nghiên cứu này nhằm xác định hiệu quả của các vi sinh vật đối kháng trong việc kiểm soát bệnh hại, từ đó nâng cao năng suất và chất lượng sản phẩm nông nghiệp Việc ứng dụng vi sinh vật đối kháng không chỉ giúp giảm thiểu sử dụng hóa chất mà còn góp phần bảo vệ môi trường và phát triển bền vững trong canh tác cây ăn quả.
Nghiên cứu khả năng hạn chế bệnh thối rễ, chảy gôm của các biện pháp canh tác
(giống, đốn tỉa, bón phân, tưới nước…) và vi sinh vật đối kháng
Nghiên cứu khả năng hạn chế bệnh thối rễ chảy gôm của các thuốc trừ nấm sinh học và vi sinh vật đối kháng
Nghiên cứu đánh giá hiệu quả của thuốc trừ nấm hóa học và vi sinh vật đối kháng trong việc hạn chế bệnh thối rễ chảy gôm do nấm Phytophthora spp gây ra Đề xuất quy trình áp dụng vi sinh vật đối kháng nhằm quản lý tổng hợp bệnh trên cây ăn quả có múi (CĂQCM) tại Cao Bằng.
2 3 Địa điểm và thời gian nghiên cứu
Các vùng trồng cây ăn quả có múi của Cao Bằng
Nhà lưới, Phòng thí nghiệm Bộ môn Bệnh cây và Miễn dịch Thực vật - Viện
- Các nguồn nấm Phytophthora phân lập trên cây ăn quả có múi (cam, bưởi, quýt) tại Cao Bằng
- Các nguồn vi sinh vật đối kháng (Tichoderma spp , Bacillus app , Streptomyces spp )
+ Môi trường: PDA, PSA, PCA, PGA, CMA, CRA, PSM - Phytophthora
Selective, Medium); Môi trường Hugh& Leifson, Môi trường LB – vi khuẩn, môi trường
Hóa chất sử dụng trong phương pháp PCR: Các Cặp mồi ITS4 và ITS5; Cặp mồi
Các chế phẩm sinh học SH-BV1, Phyto-M của Viện Bảo vệ thực vật
Các thuốc trừ nấm hóa học
Máy PCR, máy điện di, kính hiển vi quang học, kính lúp soi nổi, máy đo pH, tủ sấy, nồi hấp và các dụng cụ, vật liệu thí nghiệm khác là những thiết bị cần thiết trong nghiên cứu và phân tích khoa học.
Phương pháp điều tra và thu thập mẫu bệnh thối rễ, chảy gôm, thối quả được thực hiện tại vùng sản xuất cây có múi ở các huyện Hòa An, Trà Lĩnh, Thạch An, Nguyên Bình và Phục Hòa Nghiên cứu tuân thủ theo phương pháp Bảo vệ thực vật năm 1997 và Quy chuẩn kỹ thuật Quốc gia (QCVN 01 - 119).
Chọn tuyến điều tra đại diện cho các tuổi cây trên giống, điều kiện canh tác khác nhau
Mẫu đất và mẫu rễ được thu thập từ các cây bị bệnh ở độ sâu 20 cm, sau khi gạt bỏ lớp đất mặt khoảng 5-7 cm Mỗi cây sẽ được lấy 4 mẫu tại 4 hướng khác nhau, cách mép tán cây khoảng 30-50 cm, và sau đó trộn đều các mẫu lại với nhau.
Thu thập mẫu, thân, quả bị bênh, ghi rõ ngày tháng, tên giống, bảo quản trong túi polyethylen, lưu giữ trong phòng thí nghiệm
2 5 2 Phương pháp xác định tác nhân gây bệnh
Xác định tác nhân gây bệnh theo chu trình Koch kết hợp với kỹ thuật sinh học phân tử để xác định tên nấm
Để phân lập nấm từ mẫu bệnh, trước tiên mẫu bệnh cần được rửa dưới vòi nước chảy và để khô trong phòng thí nghiệm Sau đó, cắt mẫu thành các miếng nhỏ kích thước 5 x 5 mm, bao gồm cả mô bệnh và mô khỏe Tiếp theo, ngâm các miếng mẫu trong nước javen trong 2 phút, sau đó rửa bằng cồn 70° trong 1 phút và rửa sạch bằng nước cất vô trùng Cuối cùng, làm khô mẫu bằng giấy thấm vô trùng và đặt vào môi trường PSM.
Khi tản nấm đã phát triển với kích thước 1 – 2 cm, lấy phần đầu sợi nấm cấy truyền sang môi trường PDA
Theo dõi sự phát triển của tản nấm, thời gian hình thành bọc bào tử, mô tả hình thái bọc bào tử, sợi nấm
- Phân lập nấm từ mẫu đất: Sử dụng phương pháp mồi bẫy cánh hoa hồng của
+ Cho đất vào 1/3 cốc, thêm nước cất vô trùng vào tới khi đạt 3/4 cốc chiều cao
Khuấy nhẹ đất trong cốc bằng đũa thuỷ tinh, để lắng trong 2 giờ (tốt nhất để qua đêm)
+ Cắt cánh hoa hồng có kích thước 0,5 x 0,5 cm (1 mồi bẫy) và thả nhẹ vào cốc nước làm mồi bẫy, để cốc qua đêm ở nhiệt độ 20-25°C
+ Sau 1, 2 và 3 ngày, khi cánh hoa bị mất màu, quan sát bào tử nang của nấm
Phytophthora dưới kính hiển vi
+ Phân lập và làm thuần nấm như phương pháp phân lập từ mẫu mô cây bị bệnh
2 5 2 2 Phương pháp lây bệnh nhân tạo
* Lây bệnh nhân tạo trên quả:
Quả cam Trưng Vương chín sinh lý được sử dụng để lây bệnh Để đảm bảo an toàn, quả cam được khử trùng bề mặt bằng dung dịch NaClO 1%, sau đó rửa sạch bằng nước cất vô trùng và làm khô bằng giấy thấm vô trùng.
Dung dịch nấm có mật độ 2 x 10^5 cfu/ml được sử dụng để nhúng miếng vải màn kích thước 1x1cm, sau đó áp lên bề mặt quả, với một miếng cho mỗi quả Miếng vải được cố định trên vỏ quả bằng băng dính, trong khi quả đối chứng sử dụng nước cất vô trùng Các quả đã lây nhiễm và đối chứng được đặt trong điều kiện ẩm độ và nhiệt độ từ 25-28 độ C, trong bóng tối hoàn toàn, trong khoảng thời gian từ 5 đến 7 ngày Quá trình này bao gồm việc quan sát hàng ngày và ghi nhận sự phát triển của bệnh.
* Lây bệnh trên cây con:
Lây bệnh cho cây con bằng cách lây trên thân cây và tưới vào gốc cây Cây cam
Trưng Vương 12 tháng tuổi được ghép trên gốc chấp và trồng trong chậu với hỗn hợp đất phù sa, mùn và trấu khử trùng, ở nhiệt độ 25-28 độ C Nấm được nhân nuôi trên môi trường PDA, trong khi thân cây được khử trùng bằng cồn 70 độ, lật phần vỏ cây có đường kính 5mm Sau đó, miếng thạch chứa nấm 5 ngày tuổi được áp lên phần vỏ cây, theo phương pháp của Alvarez và cộng sự (2008) Một giọt nước cất vô trùng được nhỏ vào và quấn kín bằng giấy parafilm, sau đó bao lại bằng giấy thiếc để hạn chế thoát hơi nước Dung dịch nấm Phytophthora được tưới vào các cây thí nghiệm và chăm sóc hàng ngày bằng máy phun sương, trong khi cây đối chứng sử dụng miếng thạch PDA không có nấm.
Thí nghiệm được thực hiện với 10 mẫu nấm mỗi mẫu lây bệnh cho 10 cây Quan sát, ghi nhận và mô tả vết bệnh sau 30 ngày lây nhiễm
- Phân lập nấm từ các cây lây bệnh
Quả và cây sau khi xuất hiện vết bệnh sẽ được mô tả triệu chứng, tái phân lập nấm
So sánh triệu chứng của cây bị bệnh tự nhiên và cây bị lây bệnh nhân tạo cho thấy sự khác biệt rõ rệt trong hình thái nấm phát triển Cây bị bệnh tự nhiên thường có triệu chứng như lá vàng, héo úa và nấm xuất hiện ở các vết bệnh với hình thái tự nhiên Trong khi đó, cây bị lây bệnh nhân tạo thường có triệu chứng nghiêm trọng hơn, với nấm phát triển mạnh mẽ và có thể lan rộng nhanh chóng Hình thái nấm từ vết bệnh tự nhiên thường ít đa dạng hơn so với mẫu nấm qua lây bệnh nhân tạo, cho thấy sự ảnh hưởng của môi trường và cách thức lây lan bệnh.
2 5 2 3 Phương pháp xác định loài nấm Phytophthora
- Xác định loài Phytophthora dựa vào đặc điểm hình thái học
Việc xác định loài Phytophthora dựa vào hình thái của bọc bào tử (sporang), núm
(papilla), các cấu trúc sinh sản hữu tính như bao đực, bao trứng, bào tử trứng (oospore) theo khóa phân loại của Drenth, Sendall (2001), Erwin và Ribeiro (1996)
- Xác định loài Phyophthora bằng phương pháp PCR
+ PCR và giải trình tự
Mẫu nấm được nhân nuôi trên môi trường PDA (2 3 1 1) trong 5 ngày DNA được tách chiết từ các mẫu nấm đã nuôi cấy trên môi trường theo phương pháp CTAB
(Cetyltrimethyl ammonium bromide) của Doyle & Doyle (1987) Lấy 0,1 g đến 0,2 g sinh khối nấm vào ống eppendorf dung tớch 1,5ml cú chứa 700 àl dung dịch đệm CTAB 2%
Sử dụng dung dịch 0,1 M Tris-HCl pH 8, 10 mM EDTA, 2% CTAB và 100 µg protease K, bổ sung 0,4% β-mercaptoethanol trước khi thực hiện Ủ dịch ở 65°C trong 45 phút, lắc nhẹ sau mỗi 15 phút Thêm 500 µl hỗn hợp chloroform: isoamyl alcohol (24:1) vào ống và lắc nhẹ trong 1 phút Ly tâm ở 12000 vòng/phút trong 10 phút và chuyển 600 µl phần dịch nổi sang ống eppendorf mới Lặp lại quy trình với 500 µl chloroform: isoamyl alcohol thêm hai lần Sau đó, lấy 500 µl phần dịch nổi và chuyển sang ống mới chứa 700 µl isopropanol lạnh (-20°C); lắc nhẹ và ly tâm ở 12000 vòng/phút trong 10 phút Loại bỏ phần chất lỏng bề trên, rửa kết tủa DNA bằng 700 µl ethanol 70% Làm khô cặn DNA trong 30 phút và hòa tan với 100 µl đệm TE (10 mM Tris-HCl pH 8,0; 1 mM EDTA pH 8,0), bổ sung 5 µl ribonuclease (RNAse 10 mg/ml) vào mỗi ống Cuối cùng, đặt các ống trong tủ định ôn ở 37°C trong 1 giờ và lưu giữ ở -20°C.
Phản ứng PCR sử dụng hai mồi ITS4 và ITS5 (White và cộng sự, 1990) đã được áp dụng để nhân bản vùng ITS từ các mẫu nấm Trình tự của mồi ITS5 và ITS4 được chỉ định để đảm bảo hiệu quả trong quá trình nhân bản.
KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 59
3 1 Hiện trạng sản xuất cây ăn quả có múi và bệnh thối rễ, chảy gôm trên cây ăn quả có múi tại Cao Bằng
3 1 1 Hiện trạng sản xuất cây ăn quả có múi tại Cao B ằng
Hòa An, Trà Lĩnh, Nguyên Bình, Thạch An và Phục Hòa là những huyện chính tại Cao Bằng chuyên trồng cây ăn quả có múi Tính đến năm 2014, diện tích trồng cây có múi tại đây đạt 208 ha, bao gồm 6 loài đặc sản Trong số đó, Cam Trưng Vương và quýt Hà Trì được trồng chủ yếu ở huyện Hòa An, trong khi quýt Trà Lĩnh được trồng tại Trà Lĩnh.
Hoa Thám được trồng tại huyện Nguyên Bình, quýt Trọng Con được trồng ở huyện
Bưởi Phục Hòa, một sản phẩm nổi bật của huyện Phục Hòa Trà Lĩnh, nằm trong vùng trồng quýt lớn nhất tỉnh Cao Bằng Vào năm 2019, diện tích trồng quýt tại Trà Lĩnh đạt 164,5 ha, chiếm 62,5% tổng diện tích cây có múi của tỉnh Hòa An, cho thấy vùng này rất phù hợp cho sự phát triển của cả cam và quýt.
2019 diện tích trồng cây cây ăn quả có múi của tỉnh Cao Bằng đã đạt 263, (bảng 3 1)
Bảng 3 1 Diện tích trông cây ăn quả có múi tại Cao Bằng (Năm 2019)
TT Loại cây Địa điểm
Hòa An Hòa An Trà Lĩnh Nguyên Bình Thạch An Phục Hòa
Việc trồng cây giống mới ở các vùng cây có múi tại Cao Bằng phụ thuộc vào tập quán của người dân Họ thường sử dụng phương pháp trồng từ hạt, cành chiết hoặc cây giống ghép trên gốc ghép bưởi Trong những năm gần đây, cây giống ghép trên gốc ghép chấp đã trở nên phổ biến hơn trong việc trồng mới.
Tại Hòa An, người dân chủ yếu trồng mới cây ăn quả bằng hạt (50%), tiếp theo là phương pháp chiết cành (23,3%) Ngoài ra, 10% số hộ trồng cây ghép trên gốc bưởi và 16,7% sử dụng cây giống ghép trên gốc ghép chấp Cây giống ghép trên gốc ghép chấp được phát triển thông qua dự án hợp tác giữa tỉnh Cao Bằng và viện nghiên cứu.
BVTV cấp cho các hộ dân tham gia mô hình trồng mới của dự án
Tại Trà Lĩnh, trước đây, người dân chủ yếu trồng quýt bằng hạt và cành chiết Tuy nhiên, trong những năm gần đây, nhiều hộ gia đình đã áp dụng phương pháp ghép trên gốc bưởi để nhân giống Hiện nay, tỷ lệ vườn quýt được trồng bằng cây giống ghép trên gốc bưởi đạt khá cao, lên tới 53,3%.
Tại Phục Hòa tỷ lệ các hộ trồng bằng cành chiết cao hơn (66,7%) so với các hộ trồng bằng cây ghép trên gốc bưởi (33,3%)
Tại Nguyên Bình và Thạch An, người dân chủ yếu trồng cây ăn quả có múi bằng hạt, trong khi một số ít sử dụng phương pháp chiết cành Các hộ tham gia dự án phát triển cây ăn quả có múi kết hợp giữa tỉnh Cao Bằng và Viện Bảo vệ Thực vật thường trồng cây giống ghép trên gốc ghép chấp.
Bảng 3 2 Tình hình sử dụng cây giống để trông mới (Năm 2015)
TT Địa điểm Số vườn điều tra
Giống ghép (%) Gốc Bưởi Gốc chấp
Các vườn cây ăn quả có múi tại Cao Bằng chủ yếu nằm trong độ tuổi từ 5 đến 15 năm Cụ thể, vườn cây dưới 5 năm tuổi chiếm từ 6,7% đến 33,3%, trong khi cây từ 5 đến 10 năm tuổi chiếm tỷ lệ cao nhất, đạt từ 33,3% đến 66,6% Đặc biệt, các khu vực Hòa An và Phục Hòa Nguyên là nơi có sự tập trung cây ăn quả có múi nhiều nhất.
Bình và Thạch An Có 40% số vườn cây từ 10 đến 15 năm tuổi tại vùng Quýt Trà Lĩnh
Vườn cây bưởi Phục Hòa trên 15 năm tuổi chỉ đạt tỷ lệ 13,3% tại các vùng Hòa An, Trà Lĩnh Sự suy giảm này chủ yếu do sâu bệnh hại nặng và việc người dân thường xuyên phải chặt bỏ cây để trồng lại.
Bảng 3 3 Hiện trạng tuổi cây tại các vùng trông cây ăn quả có múi tại Cao Bằng
TT Địa điểm Số vườn điều tra Dưới 5 tuổi
Tình hình áp dụng các biện pháp kỹ thuật chăm sóc cây có múi:
Về sử dụng phân bón: Các hộ sử dụng phân bón cho cây ăn quả có múi tại Trà
Tại Hòa An, tỷ lệ sử dụng phân hữu cơ đạt 86,7%, trong khi ở các huyện Phục Hòa, Thạch An và Nguyên Bình chỉ dao động từ 13,3% đến 26,7% Phần lớn các hộ gia đình sử dụng phân hữu cơ từ nguồn sẵn có với lượng ít, bón không đúng cách, trung bình chỉ khoảng 1-1,2 kg phân chuồng/cây/năm và thường chỉ bón một lần sau thu hoạch Việc bổ sung phân hóa học rất hạn chế hoặc không thực hiện, dẫn đến tình trạng dinh dưỡng không đầy đủ cho cây trồng Hệ quả là nhiều vườn cây sinh trưởng kém, dễ bị sâu bệnh và tỷ lệ chết cây cao.
Tại Trà Lĩnh, tỷ lệ hộ áp dụng kỹ thuật cắt tỉa cây đạt 53,3%, trong khi các huyện Hòa An, Nguyên Bình và Thạch An chỉ đạt từ 26,7% đến 33,3% Đặc biệt, tại Phục Hòa, 100% hộ không thực hiện cắt tỉa Hầu hết các vườn cây được khảo sát đều có bộ tán không cân đối, với nhiều cành tăm, cành sâu bệnh và cành vượt, tạo điều kiện thuận lợi cho sự phát triển của sâu bệnh, đặc biệt trong giai đoạn ra hoa và đậu quả.
Kết quả điều tra cho thấy 66,7% hộ trồng quýt tại Trà Lĩnh thực hiện tưới nước bổ sung cho cây trong mùa khô Trong khi đó, các vùng trồng cây có múi khác gặp khó khăn về nguồn nước tưới và sự thiếu quan tâm của người dân đối với việc tưới cây trong thời gian khô hạn, dẫn đến tình trạng cây không được cung cấp đủ nước cần thiết Điều này là một trong những nguyên nhân chính làm giảm năng suất và chất lượng vườn cây.
Tại Trà Lĩnh, tỷ lệ hộ sử dụng thuốc bảo vệ thực vật (BVTV) để phòng trừ sâu bệnh đạt 100%, trong khi Hòa An là 66,7% Các huyện Nguyên Bình và Thạch An có tỷ lệ thấp hơn, chỉ khoảng 6,7 – 20,0% Đặc biệt, tại Phục Hòa, 100% số hộ không sử dụng thuốc BVTV Hầu hết các hộ gia đình sử dụng thuốc BVTV từ 3 đến 4 lần mỗi năm nhằm kiểm soát sâu hại và bệnh vàng lá Tuy nhiên, do không sử dụng đúng loại thuốc và phương pháp, hiệu quả phòng trừ sâu bệnh thường kém, dẫn đến nhiều vườn cây bị ảnh hưởng nặng nề.
Bảng 3 4 Tình hình áp dụng các biện pháp kỹ thuật chăm sóc
Số hộ phòng trừ sâu bệnh (%)
Quýt Trà Lĩnh, cam Trưng Vương, Quýt Hà Trì và bưởi Phục Hòa là những loại cây ăn quả có múi nổi bật tại Cao Bằng Người dân chủ yếu trồng cây có múi bằng hạt và cành chiết, tuy nhiên, việc sử dụng phân bón vẫn còn hạn chế, chủ yếu là phân hữu cơ với lượng ít Hầu hết các vùng trồng phụ thuộc vào lượng mưa tự nhiên, chỉ một số hộ ở Trà Lĩnh đã chủ động tưới nước trong thời kỳ khô hạn để đảm bảo sự sinh trưởng của cây Kỹ thuật cắt tỉa và phòng trừ sâu bệnh còn thiếu sót và không được thực hiện đúng thời điểm, dẫn đến tình trạng vườn cây suy thoái, sâu bệnh phát triển mạnh, làm giảm tuổi thọ của cây.
3 1 2 Thành phần bệnh hại trên cây ăn quả có múi tại Cao Bằng
Từ tháng 12 năm 2014 đến tháng 12 năm 2015, trên cây ăn quả có múi tại Cao Bằng đã phát hiện 13 loại sinh vật gây hại, bao gồm 1 loại virus và 2 loại vi khuẩn.
9 loài nấm và 1 loài tảo (Bảng 3 5)
Bảng 3 5 Thành phần bệnh hại trên cây ăn quả có múi tại Cao Bằng
Cam, quýt, greening Liberibacter asiaticus bưởi
3 Bệnh loét Xanthomonas Cành, lá, 5 – 9 + Cam, bưởi campestris Dowson quả
4 Thối rễ, Phytophthora spp Rễ, thân, 1-12 +++ Cam quýt chảy gôm, thối quả lá ,quả bưởi
5 Muội đen Meliola citricola Cành, lá, 8 – 12 + Cam quýt
6 Đốm dầu Mycosphaerella citri Lá, quả 1 – 12 ++ Cam, quýt
7 Mốc xanh Penicilium italicum Quả 11,12,1 ++ Cam, quýt, quả Wehmer bưởi
8 Phấn Oidium tingitanium Cành, lá 2 – 5 + Quýt trắng Carter non, quả non
9 Thán thư Collectotrichum Cành, quả 4 – 7 +++ Cam quýt gloeosporioides
10 Thối quả Geotrichum Quả 11,12,1 + Cam, quýt, candidum Link bưởi
11 Thối rễ, Fusarium sp ; Rễ 5-10 +++ Cam quýt vàng lá bưởi
12 Nấm Corticium sp Cành 5 - 9 + Cam quýt hồng bưởi
13 Đốm tảo Cephaleuros Thân, 7 - 10 + Cam quýt virescens Kunz cành bưởi
Số cây (số lá) bị bệnh : < 10%
Số cây (số lá) bị bệnh : 25 -50%
++: Số cây (số lá) bị bệnh : 11% - 25%
++++: Số cây (số lá) bị bệnh : >50%
Kết quả cho thấy, trong 13 loại bệnh, bệnh thối rễ, chảy gôm, thối quả
Phytophthora và bệnh thán thư Collectotrichum gloeosporioides là hai bệnh gây hại nghiêm trọng, với tỷ lệ nhiễm từ 25-50% ở các vườn được khảo sát Bệnh thán thư gây chết cành và rụng quả, trong khi bệnh do nấm Phytophthora khiến cây còi cọc, lá vàng, và có thể gây nứt vỏ chảy gôm trên thân cành, dẫn đến quả bị thối rụng Ngoài ra, bệnh mốc xanh quả và đốm dầu thường gây hại ở mức độ thấp, trong khi bệnh thối quả do nấm Geotrichum candidum, nấm hồng, phấn trắng, và muội đen chỉ chiếm tỷ lệ dưới 10% Bệnh vàng lá Greening cũng là một vấn đề cần lưu ý.
Tristeza xuất hiện ở mức độ thấp