BỘ CÔNG THƯƠNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM TP HỒ CHÍ MINH KHOA CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM Môn Phân tích vi sinh thực phẩm Đề tài Streptococcus faecalis TP HCM, Ngày 15 tháng 09 năm 2021 BỘ CÔNG THƯƠ.
BỘ CÔNG THƯƠNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM TP HỒ CHÍ MINH KHOA CƠNG NGHỆ THỰC PHẨM Mơn: Phân tích vi sinh thực phẩm Đề tài: Streptococcus faecalis TP HCM, Ngày 15 tháng 09 năm 2021 BỘ CÔNG THƯƠNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM TP HỒ CHÍ MINH KHOA CƠNG NGHỆ THỰC PHẨM Mơn: Phân tích vi sinh thực phẩm Đề tài: Streptococcus faecalis GVHD: Nguyễn Thành Luân Nhóm sinh viên thực hiện: TP HCM, Ngày 15 tháng 09 năm 2021 PHIẾU GIAO NHIỆM VỤ Trang đính kèm phiếu giao nhiệm vụ GVHD BẢN NHẬN XÉT CỦA GVHD Trang đính kèm nhận xét GVHD BẢNG PHÂN CÔNG NHIỆM VỤ LỜI CAM ĐOAN Chúng cam đoan báo cáo tiểu luận chúng tơi thực hướng dẫn thầy Nguyễn Thành Luân Các số liệu kết phân tích báo cáo trung thực, không chép từ đề tài nghiên cứu khoa học TP.HCM, ngày 15 tháng 09 năm 2021 SINH VIÊN THỰC HIỆN (Kí ghi rõ họ tên) TÓM TẮT TIỂU LUẬN Mục đích tiểu luận tìm hiểu kỹ thuật phát vi khuẩn Streptococcus faecalis thực phẩm Qua giúp nhóm hiểu phương pháp kiểm nghiện vi sinh ứng dụng thực tế Trong tiểu luận, nhóm tìm hiểu đặc điểm vi khuẩn Streptococcus faecalis, phương pháp, nguyên lí bước thực phương pháp, ưu điểm nhược điểm phương pháp LỜI CẢM ƠN Để hồn thành khóa luận này, trước hết chúng em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến quý thầy, cô giáo khoa Công nghệ thực phẩm trường Đại học Công nghiệp thực phẩm Tp Hồ Chí Minh truyền đạt kiến thứcvà kinh nghiệm quý báu cho chúng em suốt trình học tập rèn luyện trường Trong trình thực đề tài chúng em gặp khơng khó khăn Nhưng vớisự động viên giúp đỡ quý thầy cô, người thân bạn bè, chúng em hồn thành tốt đề tài nghiên cứu có kinh nghiệm, kiếnthức hữu ích cho thân Cảm ơn thầy Trung tâm thí nghiệm thực hànhđã tạo điều kiện thuận lợi để chúng em hồn thành thí nghiệm Đặc biệt chúng em xin gởi lời cảm ơn sâu sắc đến thầy Nguyễn Thành Luân, người trực tiếp hướng dẫn tận tìnhgiúp đỡ chúng em suốt thời gian thực đề tài Dù cố gắng khơng thể tránh khỏi sai sót Rất mong thơng cảm đóng góp ý kiến q thầy bạn để khóa luận hồn thiện Cuối cùng, xin kính chúc q thầy bạn sức khỏe, thành công công việc sống Chúng em xin chân thành cảm ơn! TP Hồ Chí Minh, tháng 09, năm 2021 MỤC LỤC DANH MỤC HÌNH ẢNH 10 − Mẫu nước với nhiệt độ tìm thấy khoảng 24 - 29°C độ pH dao động 7,29-8,69 − Mẫu xử lý vòng tủ lạnh 5-7°C 2.3.3 Chuẩn bị mẫu Cách tiến hành − Cho vào ba ống 10ml azide dextrose nước sử dụng (BBL) thêm 10ml nước mẫu, hai khác, ống chứa nước sử dụng thêm 5ml với Iml nước mẫu 0,1ml, tương ứng ứng dụng − Ủ 35 + 0,5°C (24 - 48h) − Độ đục ghi lại xử lý bảng MPN − 5ml azide dextrose nước thịt tiêm với ml − Lắc ủ 44,5°C 48h • Thử sinh hóa: Đối với thử sinh hóa thu cách phát triển hệ thống lạc màu hồng màu đỏ từ đĩa vào canh trường đậu nành trypticase • Kết quả: Các trưởng ống xem dương tính với hệ phân tán liên kết Hình 5: Tỷ lệ tổng số liên cầu khuẩn liên cầu khuẩn phân Thử nghiệm tính nhạy cảm kháng khuẩn Phân liên cầu khuẩn từ mơi trường thạch liên cầu KF có sọc thạch dinh dưỡng 24h Chuẩn bị canh trường ml dung dịch vô trùng 0,1% peptone U 37 °C 24 2.4 Phương pháp lọc màng ISO 7899 – 2:2000 2.4.1 Phạm vi áp dụng − Tiêu chuẩn quy định phương pháp phát đếm khuẩn đường ruột nước cách lọc qua màng − Tiêu chuẩn nhằm để kiểm tra nước uống, nước bể bơi nước tẩy trùng, nước 23 2.4.2 Nguyên tắc 2.4.2.1 Lọc, nuối cấy đếm - Đếm khuẩn đường ruột dựa việc lọc thể tích xác định mẫu nước qiua màng lọc có kích thước lỗ (0,45mm) thích hợp để giữ lại vi khuẩn - Màng lọc đặt vào môi trường đặc chọn lọc chứa natri azid (ngăn chặn sinh trưởng vi khuẩn gram âm) 2,3,5 – triphenyltetrazoli clorua, thuốc nhuộm không màu, khuẩn đường ruột khử thuốc nhuộm thành formaza màu đỏ - Các khuẩn lạc điểm hình mọc lên, có màu đỏ, màu hạt dẻ màu hồng trung tâm khuẩn lạc, khắp nơi Hình 6: Phương pháp lọc màng 2.4.2.2 Khẳng định Nếu quan sát khuẩn lạc điển hình, bươc thử khẳng định cần thiết, cách chuyển toàn khuẩn lọc qua màng chuyển vào thạch mật asculin-azid làm nóng trước nhiệt độ 44oC Khuẩn đường ruột thủy phân acesculin môi trường 2h Sản phẩm cuối 6,7-dihydroxycoumarin kết hợp với ion sắt (III) tạo tành hợp chất màu nâu vàng tới đen, khuếch tán vào môi trường 2.4.3 Thiết bị, dụng cụ Các dụng cụ thiết bị để định lượng vi khuẩn Streptococcus faecalis 24 Bảng 1: Bảng dụng cụ thiết bị Thiết bị dụng cụ Tiêu chuẩn Bộ lọc màng theo ISO 8199 Màng lọc vô khuẩn với kích 0,45mm thước lỗ danh nghĩa Tủ ấm, trì nhiệt độ Tủ ấm, trì nhiệt độ Nồi hấp áp lực, trì nhiệt độ Kẹp vơ khuẩn Bếp điện bếp cách thủy, trì nhiệt độ 2.4.4 Môi trường nuôi cấy thuốc thử 2.4.4.1 Môi trường nuôi cấy Môi trường Slanetz Bartley Môi trường Bảng 2: Thành phần môi trường - Trytoza Chất chiết nấm men Glucoza Dikali hidrophophat (K3HPO4) Natri azid Thạch Nước Chuẩn bị: 20,0g 5,0g 2,0g 4,0g 0,4g 8g đến 184g 1000ml Hồn tan thành phần nước sơi Sau hịa tan hồn tồn đun thêm Làm nguội 50oC đến 60oC Dung dịch TTC Bảng 3: Thành phần dung dịch TTC - 2,3,5 – triphenyltetrazalium clorua Nước Chuẩn bị: 1g 100ml • Hòa tan chất thị nước cách khuấy 25 • Khử khuẩn cách lọc (màn lọc có kích thước lỗ 0,2 mm) • Bảo quản dung dịch khỏi tác động ánh sáng loại bỏ dung dịch xuất màu hồng nhạt Môi trường hồn chỉnh Bảng 4: Thành phần mơi trường hồn chỉnh - Mơi trường (4.3.1.1) Dung dịch TTC (4.3.1.2) Chuẩn bị: 1000ml 10ml • Thêm dung dịch TTC vào môi trường làm nguội 50 oC đến 60oC • Nếu cần, điều chỉnh pH dung dịch natri cacbonat (100g/l) dung dịch natri hydroxit (40g/l) axit clohydric (36,5g/l) cho sau khử trùng pH đạt 25oC Thạch mật – aesculin – azid Bảng 5: Thành phần thạch mật - aesculin - azid - Trypton Pepton Chất chiết nấm men Mật bị, khơ Natri clorua (Nacl) Aesculin Amoni-sắt (III) citrate Thạch Nước Chuẩn bị: 17,0 g 3,0 g 5,0g 10g 5,0g 1,0g 0,15g 8g đến 18g 1000ml • Hịa tan thành phần nước cách đun sôi • Điều chỉnh pH cho sau khử trùng pH đạt 7,1 ± 0,1 25oC • Khử trùng 15 phút 121oC ± 3oC • Làm nguội 50oC đến 60oC rót vào đĩa Petri cho độ dày môi trường khoảng mm đến mm để yên mặt phẳng nằm ngang, chỗ mát • Các đĩa bảo quản đến tuần 5oC ± 3oC 2.4.5 Cách tiến hành Chuẩn bị mẫu 26 - Chuẩn bị mẫu, lọc ủ môi trường phân lập theo hướng dẫn nêu ISO 8199 Nên bắt đầu kiểm tra sau lấy mẫu Nếu giữ mẫu nhiệt độ mơi trường xung quanh, việc kiểm tra cần phải tiến hành vòng 6h kể từ lấy mẫu Trong số trường họp ngoại lệ, cho pháp giữ mẫu tới 24h trước kiểm tra mẫu bảo quản 5oC ± 3oC - Nếu cần phải pha lỗng mẫu, chuẩn bị dung dịch pha loãng theo ISO 8199 Lọc ni cấy - Lọc thể tích nước kiểm tra thích hợp - Đặt màng lọc lên mơi trường Slanetz Bartley - Ủ đĩa 36oC ± 2oC trog 44h ± 4h Kết luận: khẳng định đếm - Sau ủ, coi tất khuẩn lạc mọc có màu nâu đỏ hoặ màu hồng từ trung tâm toàn khuẩn lạc điển hình - Nếu có khuẩn lạc điển hình, dùng kẹp vo khuẩn chuyển màng lọc khuẩn lạc không đảo xuống, lên đĩa thạch mật-aesculin-azid làm nóng trước 44 oC - Ủ 44oC ± 0,5oC 2h - Sau đọc đĩa lập tức: Coi tất khuẩn lạc điển hình có màu từ nâu đến đen môi trường bao quanh phản ứng dương tính đếm chúng khuẩn đường ruột 2.5 Phương pháp định lượng: Cơ chế khử Azo Streptococcus faecalis 2.5.1 Phạm vi áp dụng Trình bày phương pháp hoạt động thử nghiệm azo-reductase chất chiết xuất không tế bào Strep faecalis vi sinh vật khác Các điều kiện thử nghiệm tối ưu khắc phục số bất cập phương pháp trước phương pháp sử dụng để nghiên cứu chế khử azo (Các phương pháp định lượng trước để kiểm tra hoạt tính azo-reductase liên quan đến việc ủ vi khuẩn chất chiết xuất khơng có tế bào với hợp chất azo điều kiện kỵ khí kích thích thuốc nhuộm (Roxon, Ryan & Wright, Năm 1967a ; Scheline cộng sự, 1970) lượng amin thơm tạo thành (Roxon, et ul., 1Oh6) Tính tốn hoạt động azo-reductase cụ thể từ kết phương pháp liên quan đến giả định tỷ lệ thuốc nhuộm không đổi giảm suốt thời gian ủ bệnh 27 2.5.2 Vật liệu: Red 2G ( disodium salt 2-phenylazo-8-acetylamino-l-naphthol-3,6-axit disulph), Glucose6-phosphate, NAD, NADP, riboflavin, FMN, FAD, alcohol dehyrogenase G-6-P drhydrogenase 2.5.3 Phương pháp cách tiến hành Chủng vi sinh vật Streptococcus faecalis 87/2 phân lập thạch tetrazolium -acetateglucose tan chảy từ chất chứa phân chuột đặc trưng phương pháp Cowan Seetle (1970) Dịng phân lập trì chủ ni cấy dốc thạch tryptonesoya mô cấy phụ chuẩn bị hàng tháng Nuôi cấy số lượng lớn Streptococcus faecalis 10ml môi trường nuôi cấy tryptone-soya thường kéo dài 18h sử dụng để cấy 5l nước đậu nành vô trùng để nuôi cấy mẻ máy hút 10l Sự tăng trưởng phục tế bào sục khí liên tục tạo hương thơm cách thuận tiện cách khuấy mạnh Sau 24h ủ 370c tế bào thu sau li tâm 1100g (2000 vòng/ phút) máy li tâm Christ OsterodeHarz Các tế bào rửa cách đình 0,1M-phosphate đệm pH 6.2 ly tâm gần Các ô nối lại 25ml vật đệm bảo quản -20 0c yêu cầu 2.5.4 Chuẩn bị chất chiết suất không chứa tế bào Các chất chiết xuất không tế bào Strep faecalis điều chế cách tạo âm tế bào đình 20 phút với máy phân tích siêu âm Soniprobe (Dawes Instruments Ltd.) tần số 20 kHz tối đa sản lượng điện Tế bào huyền phù chứa tế bào Rossett làm lạnh bên hỗn hợp muối/nước đá Các mảnh vụn tế bào loại bỏ cách ly tâm hai lần 20 phút 12 500(g) 20 000 vòng/ phút máy ly tâm Griffin Christ 1500 phần phía lấy dạng chiết suất không chứa tế bào thô (CFE) Hoạt tính azo-reductase CFE 25-5O% (NH,), SO, phần Strep faecalis ước tính cách sử dụng NADH- NADPH tạo hệ thống với tư cách chất cho điện tử 2G màu đỏ chất azo Các thử nghiệm tiến hành ml có nút, chiều dài đường dẫn , cuvet thủy trinh Unicam SP 800 đôi máy quang phổ ghi chùm trang bị điều khiển chương trình (SI'825), giá đỡ cuvet ổn nhiệt (SP874) thay đổi cuvet tự động (SP830) Cuvet thử nghiệm chứa hệ thống tạo điện tử (etanol +alcohol dehydrogenase + NAD, glucose-6-phosphate + G-6-P dehydrogenase + NADP), flavin (FMN, FAD riboflavin) Red 2G Cofactor concn đa dạng để xác định điều kiện tối ưu concn Red 2G cố định 1,5 x lo- ' mol cuvet Tất đồng yếu tố chất tạo thành đệm 0,1 M-phosphate pH6,2 khử oxy cách sủi bọt với N khơng chứa oxy, 28 10phút trước để khảo nghiệm The vol hỗn hợp xét nghiệm cuvet tạo đến ml với đệm khử oxy, không gian đầu rửa N, nút đưa vào Việc giảm thuốc nhuộm theo sau liên tục gián đoạn khoảng thời gian đặt trước, cách theo dõi độ hấp thụ bước sóng 530nm (AIr, ax cho Red 2G) Thơng thường bốn cuvet mẫu xét nghiệm đồng thời Hoạt tính azo-reductase ước tính từ tỷ lệ biến thuốc nhuộm độ dốc ghi lại tuyến tính Trong việc xác định hoạt động cụ thể enzym, tăng lượng vi sinh vật việc chuẩn bị enzyme sử dụng thử nghiệm, hoạt động cụ thể tính tốn từ kết thu hoạt động quan sát tỷ lệ với lượng enzym thêm vào, tức đồng yếu tố không giới hạn tốc độ Nồng độ cofactor tối ưu điều kiện xét nghiệm xác định chocả hệ thống tạo NADH NADPH quy trình xét nghiệm tiêu chuẩn Bảng Hoạt tính azo-reductase cụ thể chất chiết xuất không chứa tế bào vi khuẩn khác Bảng 7: Ảnh hưởng thời gian sonication đến hoạt động azo-reductase cụ thể Bảng 8: Phân đoạn amoni sulphat hoạt tính azo-reductase 29 CHƯƠNG KẾT QUẢ CỦA PHƯƠNG PHÁP 3.1 Phương pháp đếm khuẩn lạc Bảng 1: Ưu nhược điểm phương pháp đếm khuẩn lạc ƯU ĐIỂM: Không tốn Đếm trược tiếp số vsv Định lượng chọn lọc NHƯỢC ĐIỂM Dễ nhầm lẫn Độ sát khơng cao Tốn sức Khơng thích hợp cho huyền phù vsv có mật độ thấp Cho phép xác định số tế bào sống 3.2 Phương pháp MPN Bảng 3.2 Ưu- nhược điểm phương pháp MPN Ưu điểm Có độ xác cao, độ nhạy nhìn chung đáp ứng đủ cho mục đích thực tiễn Không cần phải đầu tư thiết bị đắt tiền Cho phép định lượng vi sinh có nồng độ nhỏ ( 2400/ml Tổng số phân liên cầu khuẩn chiếm 80% 67% tổng số mẫu − Mẫu dương tính 40% có liên cầu khuẩn khoảng 3- 10, 46% phạm vi 10-100, 10% khoảng 100-1000 4% từ 1000-1500 liên cầu khuẩn/ml − Trên tổng số phần liên cầu khuẩn 51% mẫu có loạt 1-10, 40% khoảng 10-100, 7,5% khoảng 100-1000 ml Chỉ có mẫu cho MPN > 2400 − Giá trị MPN tính cho TS FS 81 57, tương ứng Tỷ lệ FS: TS ước tính 10:14 Do theo chúng tơi điều tra 67% mẫu khơng phải uống chất lượng Điều có nghĩa nước bị ô nhiễm không thích hợp cho sử dụng 3.5 Phương pháp định lượng: Cơ chế khử Azo Streptococcus faecalis Các phương pháp báo cáo trước để đo hoạt tính azo-reductase mơ chất chiết xuất, tồn tế bào vi khuẩn chất chiết xuất không tế bào liên quan đến kỵ khí ủ chất nhuộm azo với chế phẩm enzym tăng cường đo thuốc nhuộm bị khử, amin hình thành, sau thời gian cố định (Roxon cộng sự, 1966 ; Daniel, năm 1967 ; Hernandez, Gillette & Mazel, 1967 ; Williams cộng sự, Năm 1970) 'Phương pháp báo cáo thử nghiệm liên tục, nhanh phù hợp để nghiên cứu chế khử azo Phương pháp tơi tiết lộ có khoảng thời gian trễ trước trình giảm bắt đầu, bất chấp biện pháp phòng ngừa nghiêm ngặt để loại trừ oxy, chất ức chế trình khử azo Có vẻ khoảng thời gian trễ tạo enzym đồng yếu tố bị giảm trước bắt đầu khử thuốc nhuộm: độ trễ kéo dài lượng lớn flavin thêm vào tủ ấm Liên tục ước tính tỷ lệ giảm cho thấy tỷ lệ giảm nồng độ thuốc nhuộm trở nên thấp (Hình 2) Trong thí nghiệm chúng tơi, tỷ lệ giảm thuốc nhuộm ước tính từ độ dốc phần tuyến tính đường cong độ hấp thụ / thời gian biểu thị tốc độ giới hạn enzyme hệ thống không bị ức chế oxy cofactor, 31 giới hạn tỷ lệ chất Các phương pháp đo lường mức độ giảm thời gian cố định bao gồm khoảng thời gian tỷ lệ giảm thay đổi, vàđộ dài khoảng thời gian trễ nào, thân biến, không xác định phương pháp Các kết định lượng báo cáo hoạt tính azo-reductase cách sử dụng xét nghiệm khơng đo khoảng thời gian trễ cần phải diễn giải cách thận trọng kết luận định tính có giá trị kết thu theo điều kiện so sánh CHƯƠNG THẢO LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Các phương pháp báo cáo trước để đo hoạt tính azo-reductase mơ chất chiết xuất, toàn tế bào vi khuẩn chất chiết xuất khơng tế bào liên quan đến kỵ khí ủ chất nhuộm azo với chế phẩm enzym tăng cường đo thuốc nhuộm bị khử, amin hình thành, sau thời gian cố định (Roxon cộng sự, 1966 ; Daniel, năm 1967 ; Hernandez, Gillette & Mazel, 1967 ; Williams cộng sự, Năm 1970) 'Phương pháp báo cáo thử nghiệm liên tục, nhanh phù hợp để nghiên cứu chế khử azo Phương pháp tiết lộ có khoảng thời gian trễ trước trình giảm bắt đầu, bất chấp biện pháp phòng ngừa nghiêm ngặt để loại trừ oxy, chất ức chế q trình khử azo Có vẻ khoảng thời gian trễ tạo enzym đồng yếu tố bị giảm trước bắt đầu khử thuốc nhuộm: độ trễ kéo dài lượng lớn flavin thêm vào tủ ấm Liên tục ước tính tỷ lệ giảm cho thấy tỷ lệ giảm nồng độ thuốc nhuộm trở nên thấp (Hình 2) Trong thí nghiệm chúng tơi, tỷ lệ giảm thuốc nhuộm ước tính từ độ dốc phần tuyến tính đường cong độ hấp thụ / thời gian biểu thị tốc độ giới hạn enzyme hệ thống không bị ức chế oxy cofactor, giới hạn tỷ lệ chất Các phương pháp đo lường mức độ giảm thời gian cố định bao gồm khoảng thời gian tỷ lệ giảm thay đổi, vàđộ dài khoảng thời gian trễ nào, thân biến, khơng xác định phương pháp Các kết định lượng báo cáo hoạt tính azo-reductase cách sử dụng xét nghiệm không đo khoảng thời gian trễ cần phải diễn giải cách thận trọng kết luận định tính có giá trị kết thu theo điều kiện so sánh 32 KẾT LUẬN Qua ưu điểm nhược điểm phương pháp cấy đếm đĩa thạch phương pháp MPN, phương pháp lọc màng, phương pháp lấy mẫu ta thấy khác thời gian phân tích độ nhạy…của phương pháp Đối với phương pháp MPN, có thời gian phân tích lâu, tốn nhiều hóa chất người làm cần phải có kĩ thuật Đối với phương pháp truyền thống cấy đếm đĩa thạc tốn cơng, tốn thời gian có độ nhạy khơng cao Do đó, khơng cịn ứng dụng rộng rãi ngành cơng nghiệp thực phẩm Cịn phương pháp lấy mẫu có độ nhạy, nhanh độ xác cao giới hạn thí nghiệm khác Các phương pháp phân tích Streptococcus faecalis nhiều mặt hạn chế khó khăn mặt kinh phí Do đó, để phát Streptococcus faecalis nhanh chóng xác cịn gặp nhiều vấn đề khó khăn ngành cơng nghiệp thực phẩm Để cải thiện vấn đề đáng kể cịn gặp phải chẩn đốn xác định có mặt Streptococcus faecalis cần phải có phương pháp có độ xác phát nhanh nay, với cần phát triển cơng cụ chẩn đốn để kết hợp với phương pháp có hiệu thông công 33 TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] http://doc.edu.vn/tai-lieu/de-tai-tim-hieu-ve-vi-khuan-streptococcus-faecalis- enterococcus-faecalis-92230/ [2] https://bellelook.vn/streptococcus-faecalis-la-gi/ [3] https://www.slideshare.net/kimqui91/173083723-baigiangltphantichvisinhdhcd [4] https://www.slideshare.net/daykemquynhon/cac-phuong-phap-kiem-nghiem-vi-sinh- vat-thuc-pham [5] https://nihophawa.com.vn/phuong-phap-tiet-trung-bang-mang-loc-vo-trung/ [6] https://www.slideshare.net/daykemquynhon/cac-phuong-phap-kiem-nghiem-vi-sinhvat-thuc-pham [7] https://www.slideshare.net/kimqui91/173083723-baigiangltphantichvisinhdhcd [8] https://www.tandfonline.com/doi/abs/10.3109/00498257109033171 [9] https://thuvienphapluat.vn/TCVN/Tai-nguyen-Moi-truong/TCVN-6189-2-2009-Chatluong-nuoc-Phat-hien-dem-khuan-duong-ruot-Phan-2-908782.aspx 34 ... điểm phương pháp cấy đếm đĩa thạch phương pháp MPN, phương pháp lọc màng, phương pháp lấy mẫu ta thấy khác thời gian phân tích độ nhạy…của phương pháp Đối với phương pháp MPN, có thời gian phân tích. .. luận tìm hiểu kỹ thuật phát vi khuẩn Streptococcus faecalis thực phẩm Qua giúp nhóm hiểu phương pháp kiểm nghiện vi sinh ứng dụng thực tế Trong tiểu luận, nhóm tìm hiểu đặc điểm vi khuẩn Streptococcus. .. lượng Streptococcus faecalis Là phương pháp đánh giá số lượng vi sinh vật theo số lượng vi sinh vật có xác xuất lớn diện đợn vị thể tích mẫu phương pháp dùng để định lượng streptococcus faecalis