(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính gây độc tế bào ung thư cây đại bi Blumea balsamifera (L.) DC. và cây ngải cứu Artemisia vulgaris L. thuộc họ Cúc Asteraceae

(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính gây độc tế bào ung thư cây đại bi Blumea balsamifera (L.) DC. và cây ngải cứu Artemisia vulgaris L. thuộc họ Cúc Asteraceae(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính gây độc tế bào ung thư cây đại bi Blumea balsamifera (L.) DC. và cây ngải cứu Artemisia vulgaris L. thuộc họ Cúc Asteraceae(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính gây độc tế bào ung thư cây đại bi Blumea balsamifera (L.) DC. và cây ngải cứu Artemisia vulgaris L. thuộc họ Cúc Asteraceae(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính gây độc tế bào ung thư cây đại bi Blumea balsamifera (L.) DC. và cây ngải cứu Artemisia vulgaris L. thuộc họ Cúc Asteraceae(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính gây độc tế bào ung thư cây đại bi Blumea balsamifera (L.) DC. và cây ngải cứu Artemisia vulgaris L. thuộc họ Cúc Asteraceae(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính gây độc tế bào ung thư cây đại bi Blumea balsamifera (L.) DC. và cây ngải cứu Artemisia vulgaris L. thuộc họ Cúc Asteraceae(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính gây độc tế bào ung thư cây đại bi Blumea balsamifera (L.) DC. và cây ngải cứu Artemisia vulgaris L. thuộc họ Cúc Asteraceae(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính gây độc tế bào ung thư cây đại bi Blumea balsamifera (L.) DC. và cây ngải cứu Artemisia vulgaris L. thuộc họ Cúc Asteraceae(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính gây độc tế bào ung thư cây đại bi Blumea balsamifera (L.) DC. và cây ngải cứu Artemisia vulgaris L. thuộc họ Cúc Asteraceae(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính gây độc tế bào ung thư cây đại bi Blumea balsamifera (L.) DC. và cây ngải cứu Artemisia vulgaris L. thuộc họ Cúc Asteraceae(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính gây độc tế bào ung thư cây đại bi Blumea balsamifera (L.) DC. và cây ngải cứu Artemisia vulgaris L. thuộc họ Cúc Asteraceae(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính gây độc tế bào ung thư cây đại bi Blumea balsamifera (L.) DC. và cây ngải cứu Artemisia vulgaris L. thuộc họ Cúc Asteraceae(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính gây độc tế bào ung thư cây đại bi Blumea balsamifera (L.) DC. và cây ngải cứu Artemisia vulgaris L. thuộc họ Cúc Asteraceae(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính gây độc tế bào ung thư cây đại bi Blumea balsamifera (L.) DC. và cây ngải cứu Artemisia vulgaris L. thuộc họ Cúc Asteraceae(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính gây độc tế bào ung thư cây đại bi Blumea balsamifera (L.) DC. và cây ngải cứu Artemisia vulgaris L. thuộc họ Cúc Asteraceae(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính gây độc tế bào ung thư cây đại bi Blumea balsamifera (L.) DC. và cây ngải cứu Artemisia vulgaris L. thuộc họ Cúc Asteraceae(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính gây độc tế bào ung thư cây đại bi Blumea balsamifera (L.) DC. và cây ngải cứu Artemisia vulgaris L. thuộc họ Cúc Asteraceae(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính gây độc tế bào ung thư cây đại bi Blumea balsamifera (L.) DC. và cây ngải cứu Artemisia vulgaris L. thuộc họ Cúc Asteraceae(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính gây độc tế bào ung thư cây đại bi Blumea balsamifera (L.) DC. và cây ngải cứu Artemisia vulgaris L. thuộc họ Cúc Asteraceae(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính gây độc tế bào ung thư cây đại bi Blumea balsamifera (L.) DC. và cây ngải cứu Artemisia vulgaris L. thuộc họ Cúc Asteraceae(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính gây độc tế bào ung thư cây đại bi Blumea balsamifera (L.) DC. và cây ngải cứu Artemisia vulgaris L. thuộc họ Cúc Asteraceae(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính gây độc tế bào ung thư cây đại bi Blumea balsamifera (L.) DC. và cây ngải cứu Artemisia vulgaris L. thuộc họ Cúc Asteraceae(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính gây độc tế bào ung thư cây đại bi Blumea balsamifera (L.) DC. và cây ngải cứu Artemisia vulgaris L. thuộc họ Cúc Asteraceae(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính gây độc tế bào ung thư cây đại bi Blumea balsamifera (L.) DC. và cây ngải cứu Artemisia vulgaris L. thuộc họ Cúc Asteraceae(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính gây độc tế bào ung thư cây đại bi Blumea balsamifera (L.) DC. và cây ngải cứu Artemisia vulgaris L. thuộc họ Cúc Asteraceae

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - LÊ THỊ THÚY HẰNG NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ HOẠT TÍNH GÂY ĐỘC TẾ BÀO UNG THƯ CÂY ĐẠI BI - BLUMEA BALSAMIFERA (L.) DC VÀ CÂY NGẢI CỨU - ARTEMISIA VULGARIS L THUỘC HỌ CÚC -ASTERACEAE LUẬN ÁN TIẾN SỸ HÓA HỌC Hà Nội – 2021 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - LÊ THỊ THÚY HẰNG NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HĨA HỌC VÀ HOẠT TÍNH GÂY ĐỘC TẾ BÀO UNG THƯ CÂY ĐẠI BI - BLUMEA BALSAMIFERA (L.) DC VÀ CÂY NGẢI CỨU - ARTEMISIA VULGARIS L THUỘC HỌ CÚC -ASTERACEAE Chuyên ngành: Hóa hữu Mã số: 44 01 14 LUẬN ÁN TIẾN SỸ HÓA HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: TS Nguyễn Văn Thanh TS Nguyễn Xuân Cường Hà Nội – 2021 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan: Luận án cơng trình nghiên cứu tơi hướng dẫn khoa học TS Nguyễn Văn Thanh TS Nguyễn Xuân Cường Các số liệu, kết luận án trung thực chưa công bố cơng trình khác Hà Nội, ngày tháng năm 2021 Tác giả luận án Lê Thị Thúy Hằng LỜI CẢM ƠN Luận án hoàn thành Viện Hóa sinh biển - Viện Hàn lâm Khoa học Cơng nghệ Việt Nam Trong q trình nghiên cứu, tác giả nhận nhiều giúp đỡ quý báu thầy cô, nhà khoa học, đồng nghiệp, bạn bè gia đình Tơi xin bày tỏ lời cảm ơn sâu sắc tới TS Nguyễn Văn Thanh TS Nguyễn Xuân Cường - người Thầy tận tâm hướng dẫn khoa học, động viên, khích lệ tạo điều kiện thuận lợi cho suốt thời gian thực luận án Tôi xin trân trọng cảm ơn Ban lãnh đạo Học viện Khoa học Công nghệ quan tâm giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi cho tơi suốt q trình học tập hồn thành luận án Tôi xin trân trọng cảm ơn Ban lãnh đạo Viện Hóa sinh biển tập thể cán Viện quan tâm giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi cho suốt trình học tập nghiên cứu Tơi xin chân thành cảm ơn tập thể Phòng Dược liệu biển, Phòng Hoạt chất sinh học - Viện Hóa sinh biển, đặc biệt tơi xin cảm ơn TS Nguyễn Hồi Nam, TS Trần Hồng Quang, TS Nguyễn Phương Thảo, Ths Phạm Thanh Bình giành cho tơi lời khun bổ ích góp ý quý báu việc thực hồn thiện luận án Tơi xin chân thành cảm ơn tới Lãnh đạo Trường Đại học Tài Nguyên Môi Trường Hà Nội tập thể đồng nghiệp khoa Khoa học Đại cương, đặc biệt quý thầy cô mơn Hóa Học ủng hộ, tạo điều kiện thuận lợi cho suốt thời gian làm nghiên cứu sinh Tôi xin chân thành cảm ơn hỗ trợ từ đề tài: “Nghiên cứu áp dụng phương pháp fingerprint xác định thành phần thực phẩm chức năng” - Mã số: VAST.TĐ.TP.05/16-18 “Nghiên cứu sử dụng chất/nhóm chất chìa khóa có nguồn gốc từ dược liệu phục vụ xác định dược liệu chất lượng”- Mã số: VAST.TĐNDTP.05/19-21 Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn chân thành sâu sắc tới tồn thể gia đình, bố mẹ, anh chị em hai bên gia đình, bạn bè người thân, đặc biệt chồng ln ln quan tâm, khích lệ, động viên, giúp đỡ tạo điều kiện cho hồn thành q trình học tập nghiên cứu Xin trân trọng cảm ơn! Tác giả Lê Thị Thúy Hằng MỤC LỤC MỤC LỤC DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG 10 DANH MỤC CÁC HÌNH 12 ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG I: TỔNG QUAN VỀ ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 1.1 Sơ lược đối tượng nghiên cứu 1.2 Tổng quan đại bi - Blumea balsamifera (L.) DC 1.2.1 Đặc điểm thực vật đại bi – B balsamifera (L.) DC 1.2.2 Nghiên cứu thành phần hóa học đại bi - B balsamifera (L.) DC 1.2.3 Nghiên cứu hoạt tính sinh học đại bi – B balsamifera (L.) DC 14 1.3 Tổng quan ngải cứu - Artemisia vulgaris 19 1.3.1 Đặc điểm thực vật ngải cứu A vulgaris L 19 1.3.2 Nghiên cứu thành phần hóa học ngải cứu - A vulgaris 20 1.3.3 Nghiên cứu hoạt tính sinh học ngải cứu - A vulgaris 28 CHƯƠNG II: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 31 2.1 Mẫu thực vật 31 2.2 Các phương pháp nghiên cứu 32 2.2.1 Phương pháp phân lập hợp chất 32 2.2.2 Các phương pháp xác định cấu trúc 33 2.2.3 Phương pháp thử nghiệm hoạt tính gây độc tế bào 33 2.3 Phân lập hợp chất 35 2.3.1 Phân lập hợp chất từ đại bi – B balsamifera 35 2.3.2 Phân lập hợp chất từ ngải cứu A vulgaris 41 2.4 Thông số vật lý kiện phổ hợp chất phân lập 42 2.4.1 Thông số vật lý kiện phổ hợp chất phân lập từ đại bi – B balsamifera 42 2.4.2 Thông số vật lý kiện phổ hợp chất phân lập từ ngải cứu A vulgaris 44 2.5 Kết thử hoạt tính gây độc tế bào hợp chất phân lập 46 2.5.1 Kết thử hoạt tính gây độc tế bào ung thư hợp chất phân lập từ đại bi – B balsamifera 46 CHƯƠNG III THẢO LUẬN KẾT QUẢ 50 3.1 Xác định cấu trúc hợp chất phân lập từ đại bi - B balsamifera 50 3.1.1 Hợp chất BB1: Balsamiferoside A (Hợp chất mới) 50 3.1.2 Hợp chất BB2: Balsamiferoside B (Hợp chất mới) 54 3.1.3 Hợp chất BB3: Balsamiferine K (Hợp chất mới) 59 3.1.4 Hợp chất BB4: Isohemiphloin 65 3.1.5 Hợp chất BB5: ()-Angelicoidenol 2-O-β-D-glucopyranoside 67 3.1.6 Hợp chất BB6: (1S,2R,4S)-borneol -D-glucopyranoside 70 3.1.7 Hợp chất BB7: 1,4,7-trihydroxyeudesmane 73 3.1.8 Hợp chất BB8: 6,15-epoxy-1,4-dihydroxyeudesmane 75 3.1.9 Hợp chất BB9: Blumeanen J 77 3.1.10 Tổng hợp kết xác định cấu trúc hợp chất từ Đại bi – B balsamifera 80 3.2 Xác định cấu trúc hợp chất phân lập từ ngải cứu A vulgaris 81 3.2.1 Hợp chất AV1: Vulgarolide A (Hợp chất mới) 81 3.2.2 Hợp chất AV2: Vulgarolide B (Hợp chất mới) 88 3.2.3 Hợp chất AV3: Dihydrosyringin 94 3.2.4 Hợp chất AV4: Coniferin 96 3.2.5 Hợp chất AV5: Turpenionoside A 98 3.2.6 Hợp chất AV6: (6S,9R)-roseoside 101 3.2.7 Hợp chất AV7: Corchoionoside C 103 3.2.8 Hợp chất AV8: Pinoresinol glucoside 106 3.2.9 Hợp chất AV9: eucommin A 107 3.2.10 Hợp chất AV10: Syringaresinol glucoside 110 3.2.11 Tổng hợp kết xác định cấu trúc hợp chất từ ngải cứu – A vulgaris 111 3.3 Hoạt tính gây độc tế bào hợp chất phân lập 113 3.3.1 Hoạt tính gây độc tế bào ung thư hợp chất phân lập từ đại bi – B balsamifera 113 3.3.2 Hoạt tính gây độc tế bào ung thư hợp chất phân lập từ ngải cứu – A vulgaris 113 TÍNH MỚI CỦA LUẬN ÁN 115 KẾT LUẬN 116 KIẾN NGHỊ 117 DANH MỤC CƠNG TRÌNH ĐÃ CƠNG BỐ 118 LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN 118 TÀI LIỆU THAM KHẢO 119 DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT HepG2: Tế bào ung thư gan SK-Mel-2: Tế bào ung thư da LNCaP: Tế bào ung thư tiền liệt tuyến MCF-7: Tế bào ung thư vú AGS: Tế bào ung thư dày HeLa: Tế bào ung thư cổ tử cung CHCl3: Dichloromethane EtOAc: Ethylacetate KB: Tế bào ung thư biểu mô khoang miệng NCl-H187: Tế bào ung thư phổi TLC: Sắc ký lớp mỏng CC: Sắc ký cột MPLC: Sắc ký lỏng trung áp HPLC: Sắc ký lỏng hiệu cao HMBC: Phổ tương tác dị hạt nhân qua nhiều liên kết HR-ESI-MS: Phổ khối lượng phân giải cao phun mù điện tử HSQC: Phổ tương tác dị hạt nhân qua liên kết Phổ cộng hưởng từ hạt nhân proton H-NMR: 13 C-NMR: Phổ cộng hưởng từ hạt nhân carbon DM: Dichloromethane/methanol DMW: Dichloromethane/methanol/nước YMC: Sắc ký cột pha đảo MW: Methanol/nước DA: Dichloromethane/axeton HA: Hexane/acetone AW: Acetone/nước DAW: Dichloromethane/acetone/nước EM: Ethylacetate /methanol HE: Hexan/ethylacetate EMW: Ethylacetate /methanol/nước CD3OD: Methanol CTPT: Công thức phân tử DPPH: 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl IC50: nồng độ ức chế tối đa nửa MIC: nồng độ ức chế tối thiểu MDA: malondialdehyde (chỉ số máu) NO: Oxit nitric (chỉ số máu) ALP: phosphatase kiềm (chỉ số máu) AST: aspartate aminotransferase (chỉ số máu) ALT: Alanine aminotransferase (chỉ số máu) NAG: natri máu (chỉ số máu) DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1: Các hợp chất thuộc lớp chất flavonoid đại bi Bảng 1.2: Các hợp chất thuộc lớp chất terpene đại bi 10 Bảng 1.3: Hoạt tính sinh học hợp chất từ dịch chiết đại bi – B balsamifera 15 Bảng 1.4: Các hợp chất Terpene tinh dầu ngải cứu 22 Bảng 1.5: Các hợp chất Flavonoid phân lập từ ngải cứu - A vulgaris 27 Bảng 2.5.1.a: % Ức chế phát triển tế bào hợp chất phân lập từ đại bi – B balsamifera nồng độ 100 µM 46 Bảng 2.5.1.b: Kết đánh giá hoạt tính gây độc tế bào hợp chất phân lập từ đại bi – B balsamifera 47 Bảng 2.5.2.b: Kết đánh giá hoạt tính gây độc tế bào hợp chất phân lập từ ngải cứu A vulgaris 48 Bảng 2.5.2.c: Kết đánh giá hoạt tính gây độc tế bào hợp chất phân lập từ ngải cứu A vulgaris 49 Bảng 3.1.1: Số liệu phổ NMR hợp chất BB1 chất tham khảo 52 Bảng 3.1.2: Số liệu phổ 1H 13C hợp chất BB2 chất so sánh 56 Bảng 3.1.3: Số liệu phổ 1H 13C hợp chất BB3 hợp chất so sánh 61 Bảng 3.1.4 Số liệu phổ 1H 13C hợp chất BB4 chất so sánh 66 Bảng 3.1.5: Số liệu phổ 1H 13C hợp chất BB5 chất so sánh 69 Bảng 3.1.6: Số liệu phổ 1H 13C hợp chất BB6 chất so sánh 72 Bảng 3.1.7 Số liệu phổ 1H 13C hợp chất BB7 chất so sánh 73 Bảng 3.1.8: Số liệu phổ 1H 13C hợp chất BB8 chất so sánh 75 Bảng 3.1.9 Số liệu phổ 1H 13C hợp chất BB9 chất so sánh 78 Bảng 3.2.1 Số liệu phổ 1H 13C hợp chất AV1 chất so sánh 83 Bảng 3.2.2: Số liệu phổ 1H 13C hợp chất AV2 chất so sánh 91 Bảng 3.2.3 Số liệu phổ 1H 13C hợp chất AV3 chất so sánh 95 Bảng 3.2.4 Số liệu phổ 1H 13C hợp chất AV4 chất so sánh 97 Bảng 3.2.5: Số liệu phổ 1H 13C hợp chất AV5 chất so sánh 100 Bảng 3.2.6: Số liệu phổ 1H 13C hợp chất AV6 chất so sánh 102 Bảng 3.2.7: Số liệu phổ 1H 13C hợp chất AV7 chất so sánh 104 Bảng 3.2.8: Số liệu phổ 13C-NMR 1H-NMR AV8 chất so sánh 106 ... DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - LÊ THỊ THÚY HẰNG NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ HOẠT TÍNH GÂY ĐỘC TẾ BÀO UNG THƯ CÂY ĐẠI... Nghiên cứu thành phần hóa học đại bi - B balsamifera (L.) DC 1.2.3 Nghiên cứu hoạt tính sinh học đại bi – B balsamifera (L.) DC 14 1.3 Tổng quan ngải cứu - Artemisia vulgaris ... vật ngải cứu A vulgaris L 19 1.3.2 Nghiên cứu thành phần hóa học ngải cứu - A vulgaris 20 1.3.3 Nghiên cứu hoạt tính sinh học ngải cứu - A vulgaris 28 CHƯƠNG II: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN