Phổ 1H-NMR của hợp chất AV3 (Phụ lục 12) cho thấy tín hiệu proton của nhóm oxymethyl tại H 3,85 (3H, s); tín hiệu proton của một vòng thơm bị thế ở vị trí 1,3,4,5 với tín hiệu dạng singlet tại H 6,60 (s), tín hiệu này có giá trị lớn chứng tỏ vòng thơm có cấu tạo đối xứng. Ngoài ra phổ 1H NMR còn xuất hiện tín hiệu của một đơn vị đường với proton anome tại δ 4,81 (d, J = 7,5 Hz), hằng số tương tác của proton này lớn chứng tỏ cấu hình của liên kết đường có dạng β.
Hình 3.2.3 Cấu trúc hóa học và các tương tác HMBC chính của hợp chất AV3
Trên phổ 13C-NMR (Phụ lục 12) cho thấy tín hiệu của 17 nguyên tử carbon với các số liệu phổ proton được gán với các số liệu carbon tương ứng thông qua phổ HSQC (Phụ lục 12). Phân tích số liệu phổ 1H-, 13C-NMR và phổ HSQC cho phép xác định sự tồn tại của một hợp chất Phenolic glycoside với các tín hiệu đặc trưng được xác định gồm: hai nhóm oxymethyl tại C 57,0 (H 3,85, s); các tín hiệu của một vòng thơm thế ở vị trí 1,3,4,5 và đối xứng được xác định bởi các tín hiệu tại C 140,5 (C-1), C 107,5 (C- 2/C-6)/H 6,60 (2H, s), C 154,1 (C-3/C-5) và C 134,5 (C-4). Trên phổ 13C-NMR còn thấy tín hiệu của một đường tại C 105,7 (C-1’’)/H 4,81 (1H, d, J = 7,5Hz), C 75,7 (C- 2’’)/H 3,49 (1H, dd, J = 9,0, 7,5 Hz), C 77,8 (C-3’’)/H 3,43 (1H, t, J = 9,0Hz), C 71,3 (C-4’’)/H 3,44 (1H, t, J = 9,0Hz), C 78,3 (C-5’’)/H 3,23 (1H, m) và C 62,6 (C-6’’)/H 3,69 (1H, dd, J = 11,5, 5,5Hz) và H 3,81 (1H, t, J = 11,5, 2,5Hz). Ngoài ra còn có ba nhóm methylene còn lại tại C 33,4 (C-1’)/H 2,66 (2H, t, J = 15,0Hz), C 35,4 (C-2’)/H 1,85 (2H, tt, J = 15,0, 12,5 Hz) và C 62,2 (C-3’)/H 3,59 (2H, t, J = 12,5Hz).
95
Bảng 3.2.3 Số liệu phổ 1H và 13C của hợp chất AV3 và chất so sánh C #C AV3 C DEPT H (J = Hz) HBMC (H C) 1 140,5 140,5 C - 2 107,5 107,5 CH 6,60 (s) 1, 3, 4 3 154,1 154,1 C - 4 134,6 134,5 C - 5 154,1 154,1 C - 6 107,5 107,5 CH 6,60 (s) 1’ 33,4 33,4 CH2 2,66 (t, 15,0) 1, 2, 6, 2’ 2’ 35,4 35,4 CH2 1,85 (tt, 15,0, 12,5) 3’ 62,1 62,2 CH2 3,59 (t, 12,5) 3’OCH3 57,0 57,0 OCH3 3,85 (s) 3’ 5’OCH3 57,0 57,0 OCH3 3,85 (s) 5’ 1’’ 105,7 105,7 CH 4,81 (d, 7,5) 4 2’’ 75,7 75,7 CH 3,49 (dd, 9,0, 7,5) 1’’, 3’’ 3’’ 77,8 77,8 CH 3,43 (t, 9,0) 4’’ 4’’ 71,4 71,3 CH 3,44 (t, 9,0) 5’’ 5’’ 78,3 78,3 CH 3,23 (m) 6’’ 62,6 62,6 CH2 3,69 (dd, 11,5, 5,5) 3,81 (dd, 11,5, 2,5)
#C: độ chuyển dịch 13CNMR của dihydrosyringin được đo ở 125MHz trong CD3OD [99]
C: độ chuyển dịch 13CNMR của AV3 được đo ở 125MHz trong CD3OD
Trên phổ HMBC (Phụ lục 12)cho thấy có sự tương tác giữa nguyên tử H-1’’ tại H 4,81 tới C-4 (C 134,5). Đồng thời các tương tác trực tiếp HSQC gồm H-1’/C-1’, H- 4/C-4 cho phép qui kết các giá trị phổ 1H-, 13C- tại các vị trí này là phù hợp. Tương tự ta cũng xác định được một số tương tác khác trên phổ HMBC trong đơn vị đường giữa nguyên tử H-2’’ tại H 3,49 tới C-3’’ (C 77,8)/C-1’’ ( C 105,7), giữa nguyên tử H-3’’ tại H 3,43 tới C-4’’ (C 71,3), giữa nguyên tử H-4’’ tại H 3,44 tới C-5’’ (C 78,3). Đồng thời các tương tác trực tiếp HSQC H/C cho phép qui kết các giá trị phổ 1H-, 13C- tại các vị trí trên đường là phù hợp. Các tương tác HMBC khác được thể hiện giữa nguyên tử H-2 tại H 6,60 tới C-1 (C 140,5)/C-3 (C 154,1)/C-4 (C 134,5), giữa nguyên tử Hcủanhóm OCH3 tại H 3,85 tới C-3/C-5 (C 154,1), giữa nguyên tử H-1’ tại H 2,66 tới C-1 (C 140,5)/C-2, C-6 (C 107,5)/C-2’ (C 35,4), H-3’ tại H 3,59 tới C-1’ (C 33,4)/C-2’ (C 35,4). Đồng thời các tương tác trực tiếp HSQC H/C cho phép qui kết các giá trị phổ 1H-, 13C- tại các vị trí là phù hợp (Bảng 3.2.3). Từ các dữ kiện đã nêu, cùng với sự phù hợp
96
hoàn toàn về số liệu phổ 13C-NMR so với các số liệu đã được công bố, hợp chất AV3
được xác định là dihydrosyringin và đã được chiết suất từ cây Stixis suaveolens [99]. Tuy nhiên hợp chất AV3 lần đầu tiên được phân lập từ cây ngải cứu.