Phương pháp phân lập các hợp chất

Một phần của tài liệu (Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính gây độc tế bào ung thư cây đại bi Blumea balsamifera (L.) DC. và cây ngải cứu Artemisia vulgaris L. thuộc họ Cúc Asteraceae (Trang 46 - 47)

- Sắc ký lớp mỏng (TLC): là phương pháp sắc ký tách hỗn hợp chất bằng cách cho pha động là chất lỏng di chuyển trên bề mặt pha tĩnh là chất rắn. Chất hấp phụ (hay pha tĩnh) được trải đều trên tấm kính (thường gọi là bản kính) hoặc tấm kim loại (thường dùng là nhôm và thường gọi là bản giấy). Trong quá trình chuyển động qua lớp chất hấp phụ, dựa vào sự hấp phụ khác nhau của các chất trong hỗn hợp cần phân tách với dung môi thích hợp ta thu được một sắc đồ trên lớp mỏng. Sắc ký lớp mỏng được thực hiện trên bản mỏng tráng sẵn DC-Alufolien 60 F254 (Merck 1,05715), RP18 F254S (Merck). Chất được phát hiện bằng đèn tử ngoại ở hai bước sóng 254 nm và 365 nm (thường dùng ở bước sóng 254nm) hoặc dùng thuốc thử là dung dịch sulforic acid 10% được phun đều lên bản mỏng, sấy khô rồi hơ nóng từ từ đến khi hiện màu.

- Sắc ký lớp mỏng điều chế: được thực hiện trên bản mỏng tráng sẵn Silica gel 60G F254 (Merck, ký hiệu 105875), phát hiện vệt chất bằng đèn tử ngoại hai bước sóng 254 nm và 368 nm, hoặc cắt rìa bản mỏng để phun thuốc thử là dung dịch H2SO4 10%, hơ nóng để phát hiện vệt chất, ghép lại bản mỏng như cũ để xác định vùng chất, sau đó cạo lớp Silica gel có chất, giải hấp phụ và tinh chế lại bằng cách kết tinh trong dung môi thích hợp.

- Sắc ký cột (CC): được tiến hành với chất hấp phụ là Silica gel pha thường và pha đảo. Silica gel pha thường có cỡ hạt là 0,040-0,063 mm (240-430 mesh, Merck). Silica gel pha đảo ODS (ODS-A, 12 nm S-150 m, YMC Co., Ltd.). Nhựa trao đổi ion Dianion HP-20 (Supelco).

- Sắc ký lỏng trung áp (MPLC): được thực hiện trên thiết bị sắc ký lỏng trung áp Biotage - Isolera One tại Viện Hóa sinh biển, Viện Hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt Nam, nhằm phân tách các phân đoạn dịch chiết.

- Sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC): được sử dụng để phân tích và tinh chế các hợp chất. Các thí nghiệm được thực hiện trên hệ thống HPLC phân tích Agilent 1200 series và Hệ thống sắc ký lỏng điều chế Preparative HPLC-Agilent 1200 series tại Viện Hóa sinh biển, Viện Hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt Nam.

33

Một phần của tài liệu (Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính gây độc tế bào ung thư cây đại bi Blumea balsamifera (L.) DC. và cây ngải cứu Artemisia vulgaris L. thuộc họ Cúc Asteraceae (Trang 46 - 47)