Phổ 1H-NMR của hợp chất AV7 (Phụ lục 16) cho thấy tín hiệu proton của bốn nhóm methyl tại H 1,96 (3H, d, J = 1,0 Hz), H 1,31 (3H, d, J = 6,0 Hz ), H 1,03 (3H, s) và H 1,06 (3H, s); năm tín hiệu proton ở vùng trường cao được dự đoán cho liên kết của carbon chứa liên kết đôi C = C hoặc liên kết C-O tại H 4,55 (1H, dd, J = 7,5, 6,5 Hz ), H 4,29 (1H, d, J = 7,5 Hz), H 5,89 (1H, s), H 5,75 (1H, dd, J = 15,5, 7,5 Hz) và H 6,00 (1H, d, J = 15,5 Hz) cùng 4 tín hiệu proton của gốc đường trong đó proton anome tại δ 4,29 (d, J = 7,5 Hz), hằng số tương tác của proton này lớn chứng tỏ cấu hình của liên kết đường có dạng β và 4 tín hiệu proton khác.
104
Bảng 3.2.7: Số liệu phổ 1H và 13C của hợp chất AV7 và chất so sánh
C #C AV7 C DEPT H (J = Hz) HBMC (H C) 1 42,4 42,4 C - 2 50,8 50,8 CH2 2,19 (d, 17,0) 2,63 (d, 17,0) 3 201,2 201,3 C - 4 127,1 127,1 CH 5,89 (s) 6 5 167,1 167,1 C - 6 80,0 80,0 C - 7 133,8 133,8 CH 6,00 (d, 15,5) 6; 9 8 133,7 133,7 CH 5,75 (dd, 15,5, 7,5) 9 74,6 74,7 CH 4,55 (dd, 7,5, 6,0) 10 22,2 22,2 CH3 1,31 (d, 6,0) 9; 8 11 23,5 23,5 CH3 1,03 (s) 1; 2; 6 12 24,7 24,7 CH3 1,06 (s) 11 13 19,5 19,6 CH3 1,96 (d, 1,0) 4; 5; 6 1’ 101,3 101,3 CH 4,29 (d, 7,5) 9, 2’ 2’ 75,0 74,9 CH 3,20 (dd, 9,0, 7,5) 1’; 3’ 3’ 78,2 78,4 CH 3,28 (t, 9,0) 4’ 71,7 71,7 CH 3,27 (t, 9,0) 3’, 5’ 5’ 78,4 78,2 CH 3,18 (m) 6’ 62,8 62,8 CH2 3,65 (dd, 11,5, 5,0) 3,87 (dd, 11,5, 2,0)
#C: độ chuyển dịch 13CNMR của corchoionoside C được đo trong dung môi CD3OD [103]
C: độ chuyển dịch 13CNMR của AV7 được đo ở 125MHz trong CD3OD
Trên phổ 13C-MR (Phụ lục 16) cho thấy tín hiệu của 19 nguyên tử carbon với: bốn nhóm methyl (CH3); chín carbon của nhóm methine (CH); hai carbon của nhóm methylene (CH2) và bốn carbon không liên kết với hydro. Các số liệu phổ proton được gán với các số liệu carbon tương ứng thông qua phổ HSQC (Phụ lục 16). Phân tích số liệu phổ 1H-, 13C-NMR và phổ HSQC cho phép xác định sự tồn tại của hợp chất megastigmane glicoside với các tín hiệu đặc trưng: bốn nhóm methyl tại C 22,2 (C-10)/H 1,31 (3H, d), C 19,6 (C-13)/H 1,96 (3H, d), C 23,5 (C-11)/H 1,03 (3H, s) và C 24,7 (C-12)/H 1,06 (3H, s); một tín hiệu của carbon không liên kết với hidro chứa liên kết carbonyl (C=O) tại C 201,3 (C-3) và ba carbon không liên kết với hydro khác tại C 42,4 (C-1), C 167,1 (C-5) và C 80,0 (C-6); hai nhóm methylene trong đó có một nhóm methylene chứa liên kết với nhóm
105
hydroxyl tại C 62,8 (C-6’)/H 3,65 (1H, dd) và 3,87 (1H, dd) và một nhóm còn lại tại C 50,8 (C-2)/H 2,19 (1H, d) và H 2,63 (1H, d); chín nhóm methine trong đó bao gồm bốn tín hiệu được xác định là có chứa liên kết đôi C=C hoặc chứa liên kết C-O tại C 101,3 (C- 1’)/H 4,29 (1H, d), C 127,1 (C-4)/H 5,89 (1H, s), C 133,7 (C-8)/H 5,75 (1H, dd) và C 133,8 (C-7)/H 6,00 (1H, d) cùng năm nhóm methine khác (Bảng 3.2.7).
Trên phổ HMBC(Phụ lục 16)cho thấy có sự tương tác giữa nguyên tử H-1’ tại H 4,29 tới C-9 (C 74,7). Đồng thời các tương tác trực tiếp HSQC gồm H-1’/C-1’, H-9/C-9 cho phép qui kết các giá trị phổ 1H-, 13C- tại các vị trí này là phù hợp. Tương tự ta cũng xác định được một số tương tác khác trên phổ HMBC giữa nguyên tử H-1’ tại H 4,29 tới C-2’ (C 74,9), giữa nguyên tử H-4’ tại H 3,28 tới C-3’ (C 71,7)/C-5’ ( C 78,2), giữa nguyên tử H-6’ tại H 3,65 tới C-5’ (C 78,2). Đồng thời các tương tác trực tiếp HSQC H/C cho phép qui kết các giá trị phổ 1H-, 13C- tại các vị trí trên đường là phù hợp. Các tương tác HMBC khác được thể hiện giữa nguyên tử H-7 tại H 6,00 tới C-6 (C 80,0)/C- 9 (C 74,7), giữa nguyên tử H-10 tại H 1,30 tới C-9 (C 74,7)/ C-8 (C 133,7), giữa nguyên tử H-13 tại H 1,96 tới C-6 (C 80,0)/C-4 (C 127,1)/ C-5 (C 167,1), giữa nguyên tử H-11 tại H 1,03 tới C-1 (C 42,4)/C-2 (C 50,8)/ C-6 (C 80,0), giữa nguyên tử H-4 tại H 5,89 tới C-6 (C 80,03). Đồng thời các tương tác trực tiếp HSQC H/C cho phép qui kết các giá trị phổ 1H-, 13C- tại các vị trí là phù hợp (Bảng 3.2.7). Từ các dữ kiện đã nêu, cùng với sự phù hợp hoàn toàn về số liệu phổ 13C-NMR và sự tương đương về giá trị độ quay cực so với các số liệu đã được công bố, hợp chất AV7 được xác định là corchoionoside C, một hợp chất đã được phân lập từ lá của cây cbrehorus ofitorius [103]. Hợp chất AV7 là hợp chất thứ ba thuộc nhóm chất megastigmane glycoside và lần đầu được phân lập từ cây ngải cứu.
106