Hình 3.1.1.a Cấu trúc hóa học và các tương tác HMBC chính của hợp chất BB1
và hợp chất so sánh BB1A
Hợp chất BB1 được phân lập là chất dạng bột, màu trắng. Công thức phân tử của
BB1 được xác định là C16H21NaO10S bởi sự xuất hiện của pic ion giả phân tử [M+Na]+ tại m/z: 451,0644 trên phổ khối lượng phân giải cao HR-ESI-MS (tính toán lý thuyết cho ion [C16H21Na2O10S]+ là 451,0645).
Hình 3.1.1.b Phổ HR-ESI-MS của hợp chất BB1
Phổ 1H-NMR và 13C-NMR của hợp chất BB1 cho thấy các tín hiệu của một vòng thơm bị thế 3 vị trí 1,2,4 [C 146,30 (C-1), 150,97 (C-2), 114,42 (C-3), 136,61 (C-4), 122,08 (C-5) và 118,56 (C-6); H 6,84 (1H, d, J = 2,0 Hz, H-3), 6,74 (1H, dd, J = 8,0, 2,0 Hz, H-5) và 7,11 (1H, d, J = 8,0 Hz, H-6)], một nhóm methylene [C 40,74 (C-7); H 3,35 (2H, m, H-7)], một liên kết đôi bị thế 1 vị trí [C 138,99 (C-8) và 115,84 (C-9); H
51
5,97 (1H, m, H-8) và 5,06 (2H, m, H-9)] và một nhóm metoxi [C 56,79 (OMe); 3,85 (3H, s, OMe)], cho thấy hợp chất này là một dẫn xuất của eugenol.
Hình 3.1.1.c Phổ 1H-NMR của BB1
52
Bảng 3.1.1:Số liệu phổ NMR của hợp chất BB1 và các chất tham khảo
C 1δC 2δC δCa,b DEPT δHa,cdạng pic (J = Hz) HMBC (HC) 1 147,1 146,30 C - 2 151,5 150,97 C - 3 119,0 114,42 CH 6,84 d (2,0) 1, 2, 5, 7 4 139,8 136,61 C - 5 122,9 122,08 CH 6,74 dd (8,0, 2,0) 1, 3, 7 6 114,9 118,56 CH 7,11 d (8,0) 1, 2, 4 7 41,6 40,74 CH2 3,35 m 3, 4, 5, 8, 9 8 137,2 138,99 CH 5,97 m 7 9 116,7 115,84 CH2 5,06 m 7 1' 103,8 105,0 102,76 CH 4,98 d (8,0) 1 2' 75,7 74,4 73,54 CH 3,69 dd (9,0, 8,0) 3' 79,0 85,8 85,32 CH 4,36 t (9,0) 4' 72,1 70,1 70,15 CH 3,65 t (9,0) 5' 78,6 77,9 77,68 CH 3,47 m 6' 63,3 62,5 62,28 CH2 3,73 dd (12,0, 5,5) 3,88 dd (12,0, 2,0) 2-OCH3 57,4 56,79 CH3 3,85 s 2
1δC: số liệu phổ của hợp chấteugenyl O-β-D-glucopyranoside (BB1A)đo trong CD3OD [83]; 2δC: số liệu phổ phần đường β-D-(3-O-sodium sulfo)glucopyranose của hợp chất
ptilosaponoside B đo trong CD3OD[84];
δCa,b: số liệu phổ của hợp chất BB1: ađo trong CD3OD, b125MHz, c 500MHz.
53
Ngoài ra, các tín hiệu của một đường hexose cũng được ghi nhận tại C 102,76 (C-1), 73,54 (C-2), 85,32 (C-3), 70,15 (C-4), 77,68 (C-5) và 62,28 (C-6)/H 4,98 (1H, d, J = 8,0 Hz, H-1), 3,69 (1H, dd, J = 9,0, 8,0 Hz, H-2), 4,36 (1H, t, J = 9,0 Hz, H-3), 3,65 (1H, t, J = 9,0 Hz, H-4), 3,47 (1H, m, H-5), 3,73 (1H, dd, J = 12,0, 5,5, Hz, Ha-6) và 3,88 (1H, dd, J = 12,0, 2,0 Hz, Hb-6). Từ các dữ kiện đã nêu, số liệu phổ 1H-NMR và 13C-NMR được so sánh và cho thấy sự phù hợp so với các số liệu tương ứng về số thứ tự vị trí các nguyên tử đã được công bố của hợp chất eugenyl O-β-D-glucopyranoside [83] (xem bảng 3.1.1), ngoại trừ sự khác biệt lớn ở các tín hiệu của đơn vị đường. Tín hiệu 13C-NMR tại C-3 của BB1 bị dịch chuyển mạnh về phía vùng trường thấp tại C 85,3 so với tín hiệu tương ứng của eugenyl O-β-D-glucopyranoside [83] tại C 79,0, cho thấy vị trí liên kết của nhóm sulphat tại carbon này như trong trường hợp của hợp chất ptilosaponoside B với tín hiệu C-3 xuất hiện tại C 85,8 [84]. Vị trí liên kết của đơn vị đường (3-O-sodium sulfo)glucopyranose tại C-1 được chứng minh bằng tương tác HMBC của proton anome H-1 (H 4,98) với carbon C-1 (C 146,3). Phân tích chi tiết các tương tác HMBC khác (xem hình 3.1.1.a) cho phép chứng minh chính xác cấu trúc hóa học của BB1 là eugenyl 1-O-β-D-(3-O-sodium sulfo)glucopyranoside. Đây là một
hợp chất mới và được đặt tên là balsamiferoside A.
54
3.1.2. Hợp chất BB2: Balsamiferoside B (Hợp chất mới)
Hợp chất BB2 cũng được phân lập là chất dạng bột, màu trắng. Công thức phân tử của BB2 được xác định là C16H27NaO9S bởi sự xuất hiện của pic ion giả phân tử [M+Na]+ tại m/z 441,1167 trên phổ khối lượng phân giải cao HR-ESI-MS (tính toán lý thuyết cho ion [C16H27Na2O9S]+ là 441,1166).
Hình 3.1.2.a Cấu trúc hóa học của hợp chất BB2 và hợp chất tham khảo BB2A
Hình 3.1.2.b Phổ HR-ESI-MS của hợp chất BB2
Tương tự như hợp chất BB1, trên các phổ 1H-NMR và 13C-NMR của hợp chất BB2
cho thấy các tín hiệu của một đơn vị đường β-D-(3-O-sodium sulfo)glucopyranose tại C 102,91 (C-1), 73,76 (C-2), 85,87 (C-3), 70,45 (C-4), 77,38 (C-5) và 62,59 (C-6)/H 4,37 (1H, d, J = 8,0 Hz, H-1), 3,37 (1H, dd, J = 9,0, 8,0 Hz, H-2), 4,25 (1H, t, J = 9,0 Hz, H-3), 3,55 (1H, t, J = 9,0 Hz, H-4), 3,30 (1H, m, H-5), 3,71 (1H, dd, J = 12,0, 5,5 Hz, Ha-6) và 3,87 (1H, dd, J = 12,0, 2,0 Hz, Hb-6).
75
sự tương tác của proton tại H 1,65 (C 30,1) với nguyên tử C-5 (C 46,1). Từ các dữ kiện đã nêu, cùng với sự phù hợp hoàn toàn về số liệu phổ 13C-NMR và giá trị độ quay cực so với các số liệu đã được công bố, cho phép khẳng định cấu hình tương đối của hợp chất BB7 là 1β,4β,7α-trihydroxyeudesmane đã được công bố được phân lập từ cây
Homalomena aromatica là một loài thực vật có hoa trong họ Ráy (Araceae) [90]. Tuy nhiên đây là hợp chất sesquiterpene thuộc lớp chất terpene – một lớp chất chính của cây đại bi – lần đầu được phân lập từ cây đại bi.
3.1.8. Hợp chất BB8: 6,15-epoxy-1,4-dihydroxyeudesmane
Hình 3.1.8 Cấu trúc hóa học và các tương tác HMBC chính của hợp chất BB8
Phổ 1H-NMR của hợp chất BB8 (Phụ lục 8) cho thấy tín hiệu proton của ba nhóm methyl tại H 1,04 (3H, s), 0,94 (3H, d, J = 7,0 Hz), 1,00 (3H, d, J = 6,5 Hz); một nhóm oximethylene tại H 3,59 (1H, d, J = 8,5 Hz ) và 3,70 (1H, d, J = 9,0 Hz), hai proton của nguyên tử carbon liên kết với nhóm hydroxyl tại H 3,36 (1H, dd, J = 4,0, 11,5 Hz) và 3,86 (1H, dd, J = 11,5, 9,0 Hz) và tín hiệu của ba nhóm methine cùng bốn nhóm methylene khác. Bảng 3.1.8:Số liệu phổ 1H và 13C của hợp chất BB8 và chất so sánh C #C BB8 C DEPT H (dạng pic, J = Hz) HBMC (H C) 1 80,5 81,3 CH 3,36 (dd, 4,0, 11,5) 9 2 28,0 28,7 CH2 1,62 (m) 1, 4, 10 2,04 (dd, 3,0, 1,5) 3 39,7 40,4 CH2 1,08 (m) 1,81 (m) 4 77,2 76,8 C -
76 5 57,5 58,8 CH 1,06 (m) 6, 7 6 75,6 77,2 CH 3,86 (dd, 11,5, 9,0) 7 51,2 52,5 CH 1,34 (m) 8 22,2 23,2 CH2 1,26 (d, 3,0) 1,6 (m) 9 33,2 34,2 CH2 1,59 (m) 1,90 (m) 10 39,1 40,4 C - 11 29,5 30,6 CH 1,89 (m) 12 18,5 18,7 CH3 0,94 (d, 7,0) 13 20,7 21,0 CH3 1,00 (d, 6,5) 7; 11; 12 14 12,8 13,4 CH3 1,04 (s) 1; 10; 9 15 80,4 81,3 CH2 3,59 (d, 8,5) 3; 4; 5; 6 3,70 (d, 9,0)
#C: độ dịch chuyển 13CNMR của 6,15-epoxy-1,4-dihydroxyeudesmane được đo ở 90 MHz trong dung môi CDCl3 [91]
C: độ dịch chuyển 13CNMR của BB8 được đo ở 125MHz trong CD3OD
Trên phổ 13C-NMR (Phụ lục 8) cho thấy tín hiệu của 15 nguyên tử carbon với: ba nhóm methyl (CH3); năm carbon của nhóm methine (CH); năm carbon của nhóm methylene (CH2) và hai carbon không liên kết với hydro. Các số liệu phổ proton được gán với các số liệu carbon tương ứng thông qua phổ HSQC (Phụ lục 8). Phân tích số liệu phổ 1H-, 13C-NMR và phổ HSQC cho phép xác định sự tồn tại cấu trúc khung sesquiterpene với các tín hiệu đặc trưng: ba nhóm methyl tại C 13,4 (C-14)/H 1,04 (3H, s), C 18,7 (C-12)/H 0,94 (3H, d) và C 21,0 (C-13)/H 1,00 (3H, d); hai tín hiệu của carbon không liên kết với hydro trong đó có một carbon chứa liên kết với nhóm hydroxyl tại C 76,8 (C-4) và một carbon còn lại tại C 40,4 (C-10); một nhóm oximethylene tại C 81,3 (C-15)/H 3,59 (1H, d) và 3,70 (1H, d). Trên phổ 13C-NMR còn cho thấy tín hiệu của một nhóm methine chứa liên kết với nhóm hydroxyl tại C 81,3 (C-1)/H 3,37 (1H, d), một nhóm oximethine tại C 77,2 (C-6)/H 3,86 (1H, dd) cùng với tín hiệu của ba nhóm methine và bốn nhóm methylene khác. Trên phổ HMBC (Phụ lục 8)cho thấy có sự tương tác giữa nguyên tử H-1 tại H 3,37 tới C-14 (C 13,4)/C-2 (C 28,7)/C-10 (C 40,4), tương tác giữa nguyên tử H-5 tại H 1,06 với C-7 (C 52,5)/C-6 (C 77,2). Đồng thời các tương tác trực tiếp HSQC H/C cho phép qui kết các giá trị phổ 1H-, 13C- tại các
77
vị trí này cũng như cho phép xác định cấu trúc đóng vòng tại C-5 và C-10. Tương tác HMBC khác cho thấy có sự tương tác giữa nguyên tử Hb-15 tại H 3,70 với C-5 (C 58,8)/C-4 (C 76,8)/C-6 (C 77,16). Đồng thời các tương tác trực tiếp HSQC H/C cho phép qui kết các giá trị phổ 1H-, 13C- tại các vị trí là hoàn toàn phù hợp, và tương tác HMBC giữa H-15 với C-6 cho thấy cấu trúc đóng vòng giữa C-15 và C-6 được khẳng định chặt chẽ. Ngoài ra, trên phổ HMBC cũng cho phép xác định một số tương tác khác trong hợp chất BB8. Từ các dữ kiện đã nêu, cùng với sự phù hợp hoàn toàn về số liệu phổ 13C-NMR và giá trị độ quay cực đã xác định so với các số liệu đã được công bố, hợp chất BB8 được xác định có cấu hình tương đối là 6,15-epoxy-1,4-dihydroxyeudesmane. Hợp chất này đã được công bố được phân lập từ cây Ageratina saltillensis - là một loài thực vật có hoa trong họ Cúc [92] cũng như từ thân rễ của Curculigo capitulata - cây sâm cau [91]. Hợp chất BB8 cũng là một chất sesquiterpene thuộc lớp chất terpene – một lớp chất chính của cây đại bi - và đây là lần đầu tiên hợp chất này được phân lập từ cây đại bi.
3.1.9. Hợp chất BB9: Blumeanen J
Hình 3.1.9 Cấu trúc hóa học và các tương tác HMBC chính của hợp chất BB9
Phổ 1H-NMR của hợp chất BB9 (Phụ lục 9) cho thấy tín hiệu proton của năm nhóm methyl (CH3) trong đó có hai nhóm methyl dưới dạng singlet tại H 1,22 (3H, s), 1,35 (3H, s), và ba nhóm methyl khác dưới dạng douplet tại H 0,95 (3H, d, J = 6,5 Hz), 1,05 (3H, d, J = 6,5 Hz) và 1,20 (3H, d, J = 6,5 Hz); tám proton của bốn nhóm methylene (CH2) tại H 1,72 (1H, dd, J = 13,0, 3,5 Hz ), 2,04 (1H, dt, J = 13,5, 5,0 Hz), 2,40 (1H, dt, J = 7,0, 1,5 Hz), 2,53 (1H, ddd, J = 11,5, 5,0, 2,5 Hz), 1,88 (1H, dd, J = 8,0, 2,0 Hz), 2,15 (1H, dt, J = 7,5, 2,0 Hz ), 4,89 (1H, s), 5,20 (1H, s); năm proton của năm nhóm
78
methine (CH) tại H 3,04 (1H, s), 1,88 (1H, dd, J = 8,0; 2,0 Hz), 4,78 (1H, dt, J = 11,5, 2,0 Hz), 1,91 (1H, m) và 3,90 (1H, dt, J = 13,0, 6,5 Hz).
Trên phổ 13C-NMR (Phụ lục 9) cho thấy có tín hiệu của 20 nguyên tử carbon trong đó có năm nhóm methyl (CH3), bốn nhóm methylene (CH2), năm nhóm methine (CH) và sáu nguyên tử carbon không liên kết với hidro. Các số liệu phổ proton được gán với các số liệu carbon tương ứng thông qua phổ HSQC (Hình 3.70). Phân tích số liệu phổ 1H-, 13C-NMR và phổ HSQC cho phép xác định sự tồn tại cấu trúc khung sesquiterpeneoid esters. Các tín hiệu phổ carbon đặc trưng được xác định bởi một nhóm carbonyl este tại tín hiệu C 176,3 (C-16); một tín hiệu của carbon không liên kết với hydro chứa liên kết đôi C=C tại C 151,1 (C-4); một tín hiệu của nguyên tử carbon không liên kết với hydro bị oxi hóa và chứa liên kết C-OH tại C 105,2 (C-6), ba tín hiệu của nguyên tử carbon không liên kết với hydro khác bị oxi hóa ( chứa liên kết C-O hoặc C-OH) tại C 92,9, 81,0 và 78,8 (C-1, C-10 và C-17). Một tín hiệu của nhóm methylene có độ chuyển dịch cao tại C 110,4 được xác định có chứa liên kết đôi C=C (C-15)/H 4,89 (1H, s) và H 5,20 (1H, s). Hai tín hiệu khác của carbon được xác định là hai nhóm methine chứa liên kết C-OH hoặc C-O tại C 72,9 (C-18)/H 3,90 (1H, dt) và 79,7 (C-9)/H 4,78 (1H, dt), ba nhóm methine tại C 29,1 (C-11)/H 1,91 (1H, m); 51,5 (C-7)/H 1,88 (1H, dd) và 59,0 (C-5)/H 3,04 (1H, s). Các tín hiệu carbon còn lại thuộc về ba nhóm methylene tại C 39,0 (C-2)/H 1,72 (1H, dd) và H 2,03 (1H, s), C 34,4 (C-3)/H 2,40 (1H, dt) và H 2,53 (1H, ddd), C 27,1 (C-8)/H 1,88(1H, dd) và H 2,15 (1H, dt) và năm nhóm methyl còn lại tại C 19,4 (C- 13)/H 0,95 (3H, d), C 23,5 (C-12)/H 1,05 (3H, d), C 18,8 (C-14)/H 1,22 (3H, s), C 17,0 (C-19)/H 1,20 (3H, d) và C 22,7 (C-20)/H 1,35 (3H, s). Bảng 3.1.9 Số liệu phổ 1H và 13C của hợp chất BB9 và chất so sánh C #C BB9 C DEPT H (dạng pic, J = Hz) HBMC (H C) 1 92,9 92,9 C - 2 38,9 39,0 CH2 1,72 (dd, 12,5, 3,5) 3; 5 2,04 (dt, 12,5, 5,0) 3 34,4 34,4 CH2 2,40 (dt, 7,0, 2,0) 1; 4 2,54 (ddd, 11,5, 5,0; 2,0)
79 4 151,1 151,1 C - 5 58,9 59,0 CH 3,04 (s) 1, 4; 6 6 105,3 105,6 C - 7 51,4 51,5 CH 1,88 (dd, 8,0, 2,0) 8 27,1 27,1 CH2 1,88 (dd, 8,0, 2,0) 9; 7 2,15 (dt, 7,5, 2,0) 9 79,7 79,7 CH 4,78 (dt, 11,5, 2,0) 10 81,1 81,0 C - 11 29,1 29,1 CH 1,91 (m) 12 23,5 23,5 CH3 1,05 (d, 6,5) 11; 13; 7 13 19,4 19,4 CH3 0,95 (d, 6,5) 11; 12 14 18,8 18,8 CH3 1,22 (s) 1; 10; 9 15 110,6 110,4 CH2 4,89 (s) 3; 5 5,20 (s) 16 176,7 176,5 C - 17 79,7 78,8 C - 18 72,9 72,9 CH 3,90 (dt, 13,0, 6,5) 16 19 17,0 17,0 CH3 1,20 (d, 6,5) 18; 17 20 22,7 22,7 CH3 1,35 (s) 16; 18; 17
#C: độ dịch chuyển 13CNMR của blumeanen J được đo ở 125MHz trong CD3OD [10]
C: độ dịch chuyển 13CNMR của BB9 được đo ở 125MHz trong CD3OD
Trên phổ HMBC(Phụ lục 9)cho thấy có sự tương tác giữa nguyên tử H-2 tại H 1,72 tới C-3 (C 34,4)/C-5 (C 59,0). Đồng thời các tương tác trực tiếp HSQC gồm H- 2/C-2, H-3/C-3; H-5/C-5 cho phép qui kết các giá trị phổ 1H-, 13C- tại các vị trí này. Tương tác khác trên phổ HMBC cho thấy có sự tương tác giữa nguyên tử H-3 tại H 2,40 tới C-1 (C 92,9)/ C-4 (C 151,1), giữa nguyên tử H-5 tại H 3,04 tới C-1 (C 92,9)/ C-4 (C 151,1)/ C-6 (C 105,6); giữa nguyên tử H-8 tại H 1,88 tới C-7 (C 51,5)/ C-9 (C 79,7); giữa nguyên tử H-12 tại H 1,05 tới C-11 (C 29,1)/ C-13 (C 23,5)/ C-7 (C 51,5); giữa H-13 tại H 0,95 tới C-11 (C 29,1)/ C-12 (C 19,4); giữa nguyên tử H-14 tại H 1,22 tới C-1 (C 92,5)/ C-10 (C 81,0)/ C-9 (C 79,7); giữa nguyên tử H-15 tại H 4,89 tới C- 3 (C 34,4)/C-5 (C 59,0); giữa nguyên tử H-18 tại H 3,90 tới C-16 (C 176,5); giữa nguyên tử H-19 tại H 1,20 tới C-17 (C 78,8)/C-18 (C 73,0); giữa nguyên tử H-20 tại H 1,35 tới C-16(C 176,5)/C-17 (C 78,8)/C-18 (C 73,0). Đồng thời các tương tác trực
80
tiếp HSQC H/C cho phép qui kết các giá trị phổ 1H-, 13C- tại các vị trí trong phân tử BB9
là hoàn toàn phù hợp (Bảng 3.1.9).
Từ các dữ kiện đã nêu, cùng với sự phù hợp hoàn toàn về số liệu phổ 13C-NMR và sự tương đương về giá trị độ quay cực so với các số liệu đã được công bố, hợp chất
BB9 được chứng minh là là blumeanen J, một trong số 10 hợp chất sesquiterpeneoid esters đã được Chen và cộng sự phân lập từ chính cây đại bi và được công bố vào năm 2010 [10].
3.1.10. Tổng hợp kết quả xác định cấu trúc các hợp chất từ cây Đại bi – B. balsamifera
Trên cơ sở phân tích dữ liệu phổ cộng hưởng từ hạt nhân một chiều 1H-NMR; 13C-NMR và phổ hai chiều HMBC, HSQC, COSY, NOESY và phổ khối lượng phân giải cao kết hợp so sánh với các số liệu phổ đã được công bố, đã xác định được cấu trúc hóa học của 9 hợp chất phân lập được từ cây đại bi – B. balsamifera. Các hợp chất được xác định gồm một hợp chất phenolnic glycoside mới là balsamiferoside A (BB1), một hợp chất thuộc nhóm chất flavone là hợp chất Isohemiphloin (BB4), ba hợp chất thuộc nhóm chất monoterpene gồm hợp chất mới balsamiferoside B (BB2) và (-)-angelicoidenol 2-
O--D-glucopyranoside (BB5), (1S,2R,4S)-borneol -D-glucopyranoside(BB6) và bốn hợp chất sesquiterpene gồm hợp chất mới balsamiferine K (BB3), và 1,4,7- trihydroxyeudesmane (BB7), 6,15-epoxy-1,4-dihydroxyeudesmane (BB8), blumeanen J (BB9). BB1 (Hợp chất mới) BB2 (Hợp chất mới) BB3 (Hợp chất mới) BB4 BB5 BB6
81
BB7
BB8 BB9
Hình 3.1.11:Cấu trúc hóa học của các hợp chất từ cây Đại bi – B. balsamifera
3.2. Xác định cấu trúc các hợp chất phân lập từ cây ngải cứu A. vulgaris3.2.1. Hợp chất AV1: Vulgarolide A (Hợp chất mới) 3.2.1. Hợp chất AV1: Vulgarolide A (Hợp chất mới)
AV1 AV1A
Hình 3.2.1.a Cấu trúc hóa học của hợp chất AV1 và chất so sánh AV1A
Hợp chất AV1 được phân lập dưới dạng chất dầu không màu. Công thức phân tử của AV1 được xác định là C15H20O5 bởi sự xuất hiện của pic ion giả phân tử [M+H]+ tại
m/z 281,13868 trên phổ khối lượng phân giải cao HR-ESI-MS (tính toán lý thuyết cho cation [C15H21O5]+ là 281,13835). Các phổ NMR của nó đặc trưng cho một sesquiterpene lactone, một lớp chất chính của các loài thuộc chi Artemisia [93].
82
Hình 3.2.1.b Phổ HR-ESI-MS của hợp chất AV1
83
Hình 3.2.1.d Phổ 13C-NMR của AV1
Bảng 3.2.1 Số liệu phổ 1H và 13C của hợp chất AV1 và chất so sánh C *C AV1 C DEPT H (dạng pic, J = Hz) HBMC (H C) 1 151,3 152,5 C - 2 127,1 129,2 CH 5,85 (t, 2,0) 10 3 79,5 81,1 CH 4,18 (dd, 2,0, 1,0) 4 78,6 80,4 C - 5 57,8 59,6 CH 3,20 (dt, 11,5, 1,5) 6 77,0 83,6 CH 4,07 (dd, 11,5, 9,5) 7 46,7 46,6 CH 3,31 (m) 8 72,2 24,5 CH2 1,51 (m) 2,24 (m) 9 43,1 39,1 CH2 1,75 (m) 1,99 (m) 10 78,6 73,1 C - 11 137,5 141,9 C - 12 169,8 172,3 C - 13 122,1 119,2 CH2 5,54 (d, 3,0) 7; 11; 12 6,10 (d, 3,0)
84
14 30,4 31,2 CH3 1,45 (s) 1; 9; 10
15 22,0 22,5 CH3 1,40 (s) 3; 4; 5
OAc 170,7 21,3
*C: độ chuyển dịch 13CNMR của chất so sánh 3,4,10-trihidroxy-8-acetoxyguai-1,11(13)- dien-6,12-olide (AV1A) được đo ở 125 MHz trong CDCl3 [97];
C: độ chuyển dịch 13CNMR của AV1 được đo ở 125MHz trong CD3OD
85
Hình 3.2.1.f Phổ HMBC của AV1
Trên các phổ 1H và 13C NMR của AV1 xuất hiện các tín hiệu đặc trưng của một liên kết đôi bị thế 3 vị trí [C 152,5 (C, C-1) và 129,2 (CH, C-2)/H 5,85 (1H, t, J = 2,0 Hz, H-2)], một liên kết đôi bị thế 2 vị trí ở đầu mạch [C 141,9 (C, C-11) và 119,2 (CH2, C- 13)/H 5,54 và 6,10, H-13, each 1H, d, J = 3,0 Hz], hai nhóm oxi methine [C 81,1 (C-3) và 83,6 (C-6)/H 4,18 (1H, dd, J = 2,0, 1,0 Hz, H-3) và 4,07 (1H, dd, J = 11,5, 9,5 Hz, H- 6)], hai carbon bậc 4 liên kết trực tiếp với oxy [C 80,4 (C-4) và 73,1 (C-10)], một carbon lacton carbonyl [C 172,3 (C-12)] và 2 nhóm methyl vạch đơn [C 31,2 (C-14) và 22,5 (C-15)/H 1,45 (H-14) và 1,40 (H-15), tương ứng mỗi tín hiệu 3H, s]. Các tín hiệu còn lại thuộc về 2 nhóm methine [C 59,6 (C-5) và 46,6 (C-7)/H 3,20 (1H, dt, J = 11,5, 1,5 Hz, H-5) và 3,31 (1H, m, H-7)] và 2 nhóm methylene [C 24,5 (C-8) và 39,1 (C-9)/H 1,51 (1H, m, Ha-8), 2,24 (1H, m, Hb-8), 1,75 (1H, m, Ha-9) và 1,99 (1H, m, Hb-9)].
86
Hình 3.2.1.g Phổ COSY của AV1
87
Hình 3.2.1.i Các tương tác COSY( ), HMBC ( ) và NOESY ( ) chính của AV1
Hình 3.2.1.j Phổ lưỡng sắc tròn (CD) của AV1