Qua quá trình khảo sát, chúng tôi xây dựng phương pháp tinh chế isoflavonoid từ dịch chiết sắn dây khô với dung môi chiết ethanol như sau:
Với mỗi dung môi chiết, gộp dịch chiết của 3 lần chiết lại. Cô loại hết ethanol sau đó thêm nước cất vào phần dịch còn lại cho đủ 120ml (với 50 bột nguyên liệu khô đưa vào chiết).
Để lắng qua đêm, các tạp chất tan trong ethanol sẽ bị tủa và loại đi trong quá trình lọc sau đó. Lấy mẫu dịch lọc đem định lượng isoflavonoid toàn phần và puerarin.
Kết quả thu được như bảng 3.7.
Bảng 3.7. Kết quả tinh chế dịch chiết sắn dây khô
Dung môi chiết Ethanol
40% Ethanol 60% Ethanol 80% Ethanol 96%
Khối lượng cao tinh chế (g) 4,81 4,28 2,99 1,30
Lượng isoflavonoid còn lại
trong cao tinh chế (mg) 389,20 445,71 285,21 187,39 àm lượng isoflavonoid trong
cao tinh chế (%) 8,09 10,41 9,53 14,359
Lượng puerarin còn lại trong
cao tinh chế (mg) 180,86 240,54 166,5 119,60
àm lượng puerarin trong cao
tinh chế (%) 3,76 5,62 5,57 9,20
hư vậy, sau khi tinh chế, hàm lượng puerarin và isoflavonoid toàn phần trong cao đều tăng lên. Trong số các dung môi khảo sát, cao thu được sau khi tinh
45
chế dịch chiết của dung môi ethanol 60% có hàm lượng đạt 10,410. àm lượng puerarin trong cao đạt khoảng 5,62%. Mặc dù hàm lượng puerarin đạt cao nhất ở cao thu được từ dịch chiết ethanol 96%, tuy nhiên khối lượng cao thu được rất thấp, khả năng chiết isoflavonoid và puerarin từ dược liệu không cao, dung môi dễ cháy và đắt tiền hơn ethanol 60%, khó triển khai trên quy mô lớn. Do vậy chúng tôi chọn ethanol 60% là dung môi chiết isoflavonoid từ sắn dây khô.