Dùng môi trường có chất cảm ứng CMC 1% trong bình trụ miệng nhỏ 250 ml, cấy vi khuẩn với nồng ựộ 2%, nuôi ở nhiệt ựộ 370C, trong 36 giờ ựem ly tâm 5000 vòng/phút trong 15 phút loại bỏ cặn giữ lạnh ở 40C. Rồi tiến hành tủa enzym với các tác nhân tủa là ethanol và acetone ở tỷ lệ dung dịch enzym thô (VddE) : dung môi (Vdm) là: 1:4. Chế phẩm enzym thu ựược sau khi tủa bởi các dung môi hưuc cơ do ựang còn nước nên rất dễ bị mất hoạt tắnh nên phải ựược sấy khô ở 300C, rồi tiến hành cân ựể xác ựịnh hiệu suất thu nhận. Sau ựó chế phẩm enzym ựược bảo quản lạnh 40C. Kết quả ựược thể hiện ở bảng 4.9.
Bảng 4.11. Thu nhận enzym bằng các dung môi hữu cơ
Tác nhân tủa
Ethanol 960 Acetone
VddE/Vdm Hiệu suất thu nhận
(g/100ml) VddE/Vdm
Hiệu suất thu nhận (g/100ml)
1:4 2.9 1:4 3.0
Tiếp ựến ta tiến hành lấy 0,1g chế phẩm cellulase thu ựược theo từng các dung môi hữu cơ trong 150 ml mước cất. đo hoạt ựộ enzym CMCase bằng phương pháp Ghose TK ta thu ựược kết quả như bảng sau
Bảng 4.12. Kết quả ựo hoạt ựộ CMCase theo các dung môi hữu cơ
Tác nhân tủa Hoạt ựộ CMCase (UI/g) Ethanol 960C 3.412 ổ 0.014
Học viện Nông nghiệp Việt Nam Ờ Luận văn thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp 58
Dựa vào bảng 4.10 ta nhận thấy sử dụng các dung môi hữu cơ là ethanol 960C và acetone ựều cho hiệu suất tủa cao. Tuy nhiên ựối với dung môi tủa ethanol 960C là cao nhất và ựồng thời hoạt ựộ của enzym cũng ựược giữ lại cao nhất.