Các chế phẩm enzym ựược sử dụng thực tế ở nhiều dạng khác nhau. Trong một số trường hợp, enzym có thể ựược sử dụng ở dạng thô mà không cần phải tách chiết tinh khiết như ựưa vào bột giặt, thuộc gia ẦMột số khác, người ta lại cần sử dụng các enzym tinh khiết ở nhiều mức ựộ khác nhau nên phải tách chiết, tinh chế. Enzym rất dễ bị mất hoạt tắnh, vì vậy khi tinh chế enzym cần tránh gây biến tắnh protein làm ảnh hưởng ựến hoạt tắnh của enzym nên cần tiến hành nhanh trong ựiều kiện nhiệt ựộ thấp, ựộ pH phù hợpẦViệc thu chế phẩm enzym cần phải qua các bước sau (Lương đức Phẩm, 1998).
2.2.6.1. Thu dịch enzym
đối với trường hợp enzym nằm trong tế bào (phương pháp bề mặt) thì cần phải phá vỡ tế bào bằng cách: nghiền trong máy ựồng hóa, nghiền với thủy tinh, cátẦSau ựó chiết xuất enzym bằng các dung môi khác nhau như nước, dung dịch ựệm, muối trung tắnhẦ ựể thu dịch enzym và loại bã sinh khối.
đối với trường hợp enzym tiết ra môi trường (phương pháp chìm) thì tách sinh khối và các chất cặn bã ra môi trường bằng cách ly tâm hoặc ép lọc với các chất trợ lọcẦ
2.2.6.2. Thu chế phẩm kỹ thuật
Chế phẩm enzym kỹ thuật là chế phẩm enzym chưa tinh chế có thể chứa 1 hoặc 1 vài enzym chủ yếu ngoài ra trong ựó còn có các protein không hoạt ựộng, các chất ổn ựịnhẦ Thường ựược dùng trong công nghiệp và nông nghiệp.
để thu ựược chế phẩm kỹ thuật người ta tiến hành cô ựặc các dịch enzym trong thiết bị có ựộ chân không cao. Sau ựó:
Học viện Nông nghiệp Việt Nam Ờ Luận văn thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp 27
-Hoặc tiếp tục cô ựặc ở nhiệt ựộ cao 40 Ờ 450C bổ sung thêm các chất bảo quản NaCl, glixerolẦ và thu chế phẩm.
-Hoặc bổ sung thêm các chất ổn ựịnh rồi ựem sấy và thu chế phẩm.
-Hoặc cho kết tủa enzym bằng muối trung tắnh hoặc cồn, ly tâm lấy cặn, rồi cho thêm chất ổn ựịnh, ựem sấy khô, nghiền mịn và thu chế phẩm.
2.2.6.3. Thu chế phẩm enzym tinh khiết
Việc thu chế phẩm enzym có thể tiến hành qua nhiều phương pháp. đầu tiên loại các protein không hoạt ựộng khỏi dịch enzym bằng phương pháp làm biến tắnh chọn lọc nhờ tác dụng của pH và nhiệt và tách chúng ra bằng cách ly tâm hoặc lọc bỏ kết tủa. Có thể phương pháp tách phân ựoạn khác nhau nhờ kết tủa bằng dung môi hữu cơ, muối, hấp phụ chọn lọc, trao ựổi ion ựể thu những phần có hoạt tắnh enzym cao nhất. Sau ựó cần làm sạch và sấy khô (chân không ở nhiệt ựộ thấp hoặc sấy thănghoa) các chế phẩm enzym ựể có thể sử dụng lâu dài. Việc thu chế phẩm enzym tinh khiết và nhất là dạng tinh thể thường rất khó khăn và tốn kém nên chỉ dùng trong y học hoặc trong nghiên cứu.