phân đầu xƣơng cá Tra
2.2.3.1.Bố trí thí nghiệm xác định các thông số thích hợp cho quá trình thủy
phân ở giai đoạn đầu
1. Bố trí thí nghiệm xác định tỷ lệ enzyme Alcalase thích hợp
Hình 2.4. Sơ đồ bố trí thí nghiệm xác định tỷ lệ enzyme Alcalase thích hợp
Bã lọc
Chọn tỷ lệ enzyme Alcalase thích hợp Thủy phân bằng enzyme Alcalase (N/NL= 1/1,
t=500C, pH tự nhiên, τ =2 giờ) Rã đông Mẫu 1 (0,1%) Mẫu 3 (0,5%) Mẫu 5 (0,9%) Mẫu 2 (0,3%) Rã đông Thủy phân (t= 500C, τ = 4 giờ , N/NL = 1/1, pH tự nhiên) Mẫu 1 (0.1%) Mẫu 2 (0.3%) Mẫu 3 (0.5%) Mẫu 2 (0.3%) Mẫu 4 (0,7%) Nguyên liệu
Thủy phân bằng enzyme Flavourzyme (E/NL=0,3%, t=500C, pH tự nhiên, τ =2 giờ)
Bất hoạt enzyme
Lọc
Xác định hiệu suất thu hồi Nitơ, Naa, NNH3 Dịch thủy phân
Ly tâm Bã ly tâm
Tiến hành thủy phân 5 mẫu đầu xƣơng cá Tra, mỗi mẫu 100g nguyên liệu với tỷ lệ enzyme Alcalase/nguyên liệu là: 0,1%, 0,3%, 0,5%, 0,7% và 0,9%. Thủy phân ở các thông số cố định: tỷ lệ nƣớc/nguyên liệu là 1/1, nhiệt độ thủy phân là 500C, pH tự nhiên của cá, thời gian thủy phân là 2 giờ. Sau khi thủy phân xong, bất hoạt enzyme ở nhiệt độ 900C trong 15 phút. Sau đó để nguội xuống 500C rồi tiếp tục thủy phân với enzyme Flavourzyme, với thông số cố định nhƣ sau: tỷ lệ enzyme/nguyên liệu là 0,3%, nhiệt độ thủy phân 500C, pH tự nhiên, thời gian thủy phân 2 giờ. Sau khi thủy phân xong làm bất hoạt enzyme ở nhiệt độ 900C trong 15 phút. Để nguội rồi đem hỗn hợp ly tâm với tốc độ 5000 vòng/phút trong thời gian 30 phút, sau đó tách riêng 3 phần: dịch thủy phân, lipid và bã ly tâm. Dịch thủy phân đƣợc đem đi xác định hiệu suất thu hồi Nitơ, Nitơ acid amin, Nitơ amoniac. Từ đó chọn tỷ lệ enzyme Alcalase thích hợp.
2. Bố trí thí nghiệm xác định nhiệt độ thủy phân ở giai đoạn đầu thích hợp
nh 2.5. Sơ đồ bố trí thí nghiệm xác định nhiệt độ thủy phân giai đoạn đầu thích hợp
Chọn nhiệt độ thủy phân giai đoạn đầu thích hợp
Bã lọc Thủy phân bằng enzyme Alcalase (N/NL= 1/1, E/Nl
thích hợp, pH tự nhiên, τ =2 giờ) Rã đông Mẫu 1 400C Mẫu 3 500C Mẫu 5 600C Mẫu 2 450C Mẫu 4 550C Nguyên liệu
Thủy phân bằng enzyme Flavourzyme (E/NL=0,3%, t=500C, pH tự nhiên, τ =2 giờ)
Bất boạt enzyme
Lọc
Xác định hiệu suất thu hồi Nitơ, Naa, NNH3 Dịch thủy phân
Ly tâm Bã ly tâm
Tiến hành thủy phân 5 mẫu đầu xƣơng cá Tra, mỗi mẫu 100g nguyên liệu với 5 nhiệt độ thủy phân khác nhau: 400C, 450C, 500C, 550C, 600C. Thủy phân với các thông số cố định: tỷ lệ nƣớc/nguyên liệu là 1/1, tỷ lệ enzyme Alcalase thích hợp đã xác định ở thí nghiệm trƣớc, pH tự nhiên của cá, thời gian thủy phân là 2 giờ. Sau khi thủy phân xong làm bất hoạt enzyme ở nhiệt độ 900C trong 15 phút. Sau đó để nguội xuống 500
C rồi tiếp tục thủy phân với enzyme Flavourzyme, với thông số cố định nhƣ sau: tỷ lệ enzyme/nguyên liệu là 0,3%, nhiệt độ thủy phân 500C, pH tự nhiên, thời gian thủy phân 2 giờ. Sau khi thủy phân xong, bất hoạt enzyme ở nhiệt độ 900C trong 15 phút. Để nguội rồi đem hỗn hợp ly tâm với tốc độ 5000 vòng/phút trong thời gian 30 phút, sau đó tách riêng 3 phần: dịch thủy phân, lipid và bã ly tâm. Dịch thủy phân đƣợc đem đi xác định hiệu suất thu hồi Nitơ, Nitơ acid amin, Nitơ amoniac. Từ đó chọn tỷ lệ nhiệt độ thủy phân giai đoạn đầu thích hợp.
3. Bố trí thí nghiệm xác định thời gian thủy phân giai đoạn đầu thích hợp
Hình 2.6.Sơ đồ bố trí thí nghiệm xác định thời gian thủy phân giai đoạn đầu thích hợp
Mẫu 3 3 giờ
Bã lọc
Chọn thời gian thủy phân giai đoạn đầu thích hợp Thủy phân bằng enzyme Flavourzyme (E/NL=0,3%, (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
t=500C, pH tự nhiên, τ =2 giờ)
Bất hoạt enzyme
Lọc
Xác định hiệu suất thu hồi Nitơ, Naa, NNH3 Dịch thủy phân Ly tâm Bã ly tâm Lipid Mẫu 1 1 giờ Mẫu 6 6 giờ Mẫu 2 2 giờ Mẫu 4 4 giờ Mẫu 5 5 giờ Thủy phân bằng enzyme Alcalase (N/NL= 1/1, E/NL,
nhiệt độ thích hợp, pH tự nhiên, τ =2 giờ) Rã đông
Tiến hành thủy phân 6 mẫu đầu xƣơng cá Tra, mỗi mẫu 100g nguyên liệu với 6 thời gian thủy phân khác nhau: 1 giờ, 2 giờ, 3 giờ, 4 giờ, 5 giờ, 6 giờ. Thủy phân với các thông số cố định: tỷ lệ nƣớc/nguyên liệu là 1/1, tỷ lệ enzyme Alcalase/nguyên liệu và nhiệt độ thủy phân thích hợp đã xác định ở các thí nghiệm trƣớc, pH tự nhiên của cá. Sau khi thủy phân xong, bất hoạt enzyme ở nhiệt độ 900
C trong 15 phút. Sau đó để nguội xuống 500C rồi tiếp tục thủy phân với enzyme Flavourzyme, với thông số cố định nhƣ sau: tỷ lệ enzyme/nguyên liệu là 0,3%, nhiệt độ thủy phân 500
C, pH tự nhiên, thời gian thủy phân 2giờ. Sau khi thủy phân xong làm bất hoạt enzyme ở nhiệt độ 900C trong 15 phút. Để nguội rồi đem hỗn hợp ly tâm với tốc độ 5000 vòng/phút trong thời gian 30 phút, sau đó tách riêng 3 phần: dịch thủy phân, lipid và bã ly tâm. Dịch thủy phân đƣợc đem đi xác định hiệu suất thu hồi Nitơ, Nitơ acid amin, Nitơ amoniac. Từ đó chọn thời gian thủy phân giai đoạn đầu thích hợp.
2.2.3.2.Bố trí thí nghiệm xác định các thông số thích hợp cho quá trình thủy
phân ở giai đoạn sau
1. Bố trí thí nghiệm xác định tỷ lệ enzyme Flvourzyme thích hợp
Hình 2.7. Sơ đồ bố trí thí nghiệm xác định tỷ lệ enzyme Flavourzyme thích hợp
Bã lọc
Chọn tỷ lệ enzyme Flavourzyme thích hợp Thủy phân bằng enzyme Alcalase (N/NL = 1/1, E/NL,
thời gian, nhiệt độ thủy phân thích hợp, pH tự nhiên) Rã đông
Nguyên liệu
Thủy phân bằng enzyme Flavourzyme (t=500C, pH tự nhiên, τ =2 giờ)
Bất hoạt enzyme
Lọc
Xác định Nts, Naa, NNH3, hiệu suất thu hồi Nitơ
Dịch thủy phân Ly tâm Bã ly tâm Lipid Mẫu 1 (0,1%) Mẫu 3 (0,5%) Mẫu 5 (0,9%) Mẫu 2 (0,3%) Rã đông Thủy phân (t= 500C, τ = 4 giờ , N/NL = 1/1, pH tự nhiên) Mẫu 1 (0.1%) Mẫu 2 (0.3%) Mẫu 3 (0.5%) Mẫu 2 (0.3%) Mẫu 4 (0,7%)
Tiến hành thủy phân 5 mẫu đầu xƣơng cá Tra, mỗi mẫu 100g nguyên liệu. Thủy phân với các thông số cố định đối với enzyme Alcalase: tỷ lệ nƣớc/nguyên liệu là 1/1, tỷ lệ enzyme/nguyên liệu, nhiệt độ thủy phân và thời gian thủy phân thích hợp đã xác định đƣợc ở các thí nghiệm trƣớc, pH tự nhiên của cá. Sau khi thủy phân xong làm bất hoạt enzyme ở nhiệt độ 900C trong 15 phút. Sau đó để nguội xuống 500C rồi tiếp tục thủy phân với enzyme Flavourzyme, với tỷ lệ enzyme/nguyên liệu thay đổi lần lƣợt: 0,1%, 0,3%, 0,5%, 0,7% và 0,9%. Các thông số sau cố định: nhiệt độ thủy phân 500C, pH tự nhiên, thời gian thủy phân 2 giờ. Sau khi thủy phân xong làm bất hoạt enzyme ở nhiệt độ 900C trong 15 phút. Để nguội rồi đem hỗn hợp ly tâm với tốc độ 5000 vòng/phút trong thời gian 30 phút, sau đó tách riêng 3 phần: dịch thủy phân, lipid và bã ly tâm. Dịch thủy phân đƣợc đem đi xác định hiệu suất thu hồi Nitơ, Nitơ acid amin, Nitơ amoniac. Từ đó chọn tỷ lệ enzyme Flavourzyme thích hợp.
2. Bố trí thí nghiệm xác định nhiệt độ thủy phân giai đoạn sau thích hợp
Hình 2.8. Sơ đồ bố trí thí nghiệm xác định nhiệt độ thủy phân giai đoạn sau thích hợp
Bã lọc
Chọn nhiệt độ thủy phân giai đoạn sau thích hợp Thủy phân bằng enzyme Alcalase (N/NL = 1/1, E/NL,
thời gian, nhiệt độ thủy phân thích hợp, pH tự nhiên,) Rã đông
Nguyên liệu
Thủy phân bằng enzyme Flavourzyme (E/NL thích hợp, pH tự nhiên, τ =2 giờ)
Bất hoạt enzyme (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Lọc
Xác định Nts, Naa, NNH3, hiệu suất thu hồi Nitơ
Dịch thủy phân Ly tâm Bã ly tâm Lipid Mẫu 1 400C Mẫu 3 500C Mẫu 5 600C Mẫu 2 450C Mẫu 4 550C
Tiến hành thủy phân 5 mẫu đầu xƣơng cá Tra, mỗi mẫu 100g nguyên liệu. Thủy phân với các thông số cố định đối với enzyme Alcalase: tỷ lệ nƣớc/nguyên liệu là 1/1, tỷ lệ enzyme/nguyên liệu, nhiệt độ thủy phân và thời gian thủy phân thích hợp đã xác định đƣợc ở các thí nghiệm trƣớc, ở pH tự nhiên của cá. Sau khi thủy phân xong, bất hoạt enzyme ở nhiệt độ 900C trong 15 phút. Tiếp tục thủy phân với enzyme Flavourzyme, với nhiệt độ thủy phân thay đổi: 400C, 450C, 500C, 550C, 600C. Các thông số sau cố định: tỷ lệ enzyme/nguyên liệu thích hợp đã xác định đƣợc ở thí nghiệm trƣớc, pH tự nhiên, nhiệt độ thủy phân 500
C, thời gian thủy phân 2 giờ. Sau khi thủy phân xong làm bất hoạt enzyme ở nhiệt độ 900C trong 15 phút. Để nguội rồi đem hỗn hợp ly tâm với tốc độ 5000 vòng/phút trong thời gian 30 phút, sau đó tách riêng 3 phần: dịch thủy phân, lipid và bã ly tâm. Dịch thủy phân đƣợc đem đi xác định hiệu suất thu hồi Nitơ, Nitơ acid amin, Nitơ amoniac. Từ đó chọn nhiệt độ thủy phân giai đoạn sau thích hợp.
3. Bố trí thí nghiệm xác định thời gian thủy phân giai đoạn sau thích hợp
Hình 2.9.Sơ đồ bố trí thí nghiệm xác định thời gian thủy phân giai đoạn sau thích hợp Bã ly tâm Mẫu 5 600C Bã lọc Mẫu 1 1 giờ Mẫu 3 3 giờ Mẫu 2 2 giờ Mẫu 4 4 giờ
Chọn thời gian thủy phân giai đoạn sau thích hợp Bất hoạt enzyme
Lọc
Xác định Nts, Naa, NNH3, hiệu suất thu hồi Nitơ
Dịch thủy phân
Ly tâm Bã ly tâm
Lipid
Thủy phân bằng enzyme Alcalase (N/NL = 1/1, E/NL, thời gian, nhiệt độ thủy phân thích hợp, pH tự nhiên)
Rã đông
Thủy phân bằng enzyme Flavourzyme (E/NL thích hợp, pH tự nhiên, τ =2 giờ)
Tiến hành thủy phân 4 mẫu đầu xƣơng cá Tra, mỗi mẫu 100g nguyên liệu. Thủy phân với các thông số cố định đối với enzyme Alcalase: tỷ lệ nƣớc/nguyên liệu là 1/1, tỷ lệ enzyme/nguyên liệu, nhiệt độ thủy phân và thời gian thủy phân thích hợp đã xác định đƣợc ở các thí nghiệm trƣớc, pH tự nhiên của cá. Sau khi thủy phân xong làm bất hoạt enzyme ở nhiệt độ 900C trong 15 phút. Tiếp tục thủy phân với enzyme Flavourzyme, với thời gian thủy phân thay đổi: 1 giờ, 2 giờ, 3 giờ, 4 giờ, 5 giờ, 6 giờ. Các thông số sau cố định: tỷ lệ enzyme/nguyên liệu, nhiệt độ thủy phân thích hợp đã xác định đƣợc ở các thí nghiệm trƣớc, pH tự nhiên. Sau khi thủy phân xong làm bất hoạt enzyme ở nhiệt độ 900C trong 15 phút. Để nguội rồi đem hỗn hợp ly tâm với tốc độ 5000 vòng/phút trong thời gian 30 phút, sau đó tách riêng 3 phần: dịch thủy phân, lipid và bã ly tâm. Dịch thủy phân đƣợc đem đi xác định hiệu suất thu hồi Nitơ, Nitơ acid amin, Nitơ amoniac. Từ đó chọn thời gian thủy phân giai đoạn sau thích hợp.