KẾT QUẢ BIỆN LUẬN 3.1 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU NỘ I DUNG
3.3.3.1. Trứng đông lạnh tại PTN
Bảng 3.15. Các giai đoạn phát triển của phôi từ nguồn trứng đông lạnh Số trứng đem thụ tinh Tỷ lệ thụ tinh (phôi 2) Tỷ lệ phôi 4-8 Tỷ lệ phôi dâu Tỷ lệ phôi nang 1194 11,67 ± 4,08% (144 phôi) 9,95 ± 3,90% (123) 5,37 ± 2,31% (67) 3,72 ± 1,86% (46 phôi) α < 0,05
Bảng 3.16. Sự chuyển tiếp của phôi lên các giai đoạn chính ở trứng đông lạnh
Tỷ lệ phôi 2 lên phôi
4-8 Tỷ lệ phôi 4-8 lên phôi dâu Tỷ lệ phôi dâu lên phôi nang
79,31 ± 26,19% 50,23 ± 15,60% 63,30 ± 29,69%
α < 0,05
a b
c d
Hình 3.12. Phôi bò. (a) 4-8 tế bào, (b) 16 tế bào, (c) morula và (d) phôi nang. Phôi này thu được từ IVF từ trứng đông lạnh.
Từ kết quả Bảng 3.16 cho thấy tỷ lệ phân chia các giai đoạn của phôi chưa cao như các công trình công bố trên thế giới: Yang BC et al. (46,5%, 2008). Tuy nhiên kết quả đạt được đã khẳng định sự thành công trong quy trình tạo phôi bò trong ống nghiệm từ nguồn trứng đông lạnh đến giai đoạn blastocyst. Đã có 79,31% phôi 2 tế bào phát triển lên giai đoạn 4-8 tế bào. Riêng giai đoạn chuyển tiếp lên phôi dâu thấp hơn, chỉ đạt 50,23%. Điều này cũng phù hợp với lý thuyết là phôi bò thường bị “block” ở giai đoạn chuyển tiếp này. Và đã có 63,30% phôi dâu phát triển lên phôi nang.
3.3.3.2. Trứng mua
Bảng 3.17. Các giai đoạn phát triển của phôi từ nguồn trứng đông lạnh Số trứng đem
thụ tinh
Số trứng đã thụ tinh (phôi 2)
Số phôi 4-8 Số phôi dâu Số phôi nang
171 3 3 0 0
Đối với nguồn trứng mua chỉ có 3 phôi 2 tế bào, các phôi này chỉ phát triển lên đến giai đoạn 4 tế bào rồi dừng lại (vì tỷ lệ quá thấp nên không tiến hành xử lý thống kê). Trong khi đó các công trình trên thế giới về IVF trứng bò đông lạnh của tác giả E. Fuku et al. (1992) cho kết quả 4,9% phôi hai tế bào và của Byoung-Chul Yang et al. (2007) với 20,6% phôi hai tế bào. Đối với Việt Nam, cho đến thời điểm này chưa có công trình nào công bố về kết quả thụ tinh trong
ống nghiệm từ nguồn trứng bò đông lạnh. Kết quả IVF từ nguồn trứng mua còn quá thấp, điều này có thể lý giải như sau:
Bên cạnh những nguyên nhân có thể do chất lượng nguồn mẫu chưa đảm bảo, thao tác hút trứng, tạo vi giọt, chuyển đĩa nuôi vào tủ ấm của người thực hiện… đòi hỏi phải tỉ mỉ nếu không cũng có thể gây tổn thương cho trứng và ảnh hưởng đến kết quả thụ tinh. Một lý do khác cũng góp phần ảnh hưởng đến kết quả thụ tinh là: trong quá trình đông lạnh, trứng được xử lý trong dung dịch chất bảo quản. Chính điều này đã làm tăng nồng độ Ca2+ nội bào, gây ra sự giãn nở
sớm của lớp tế bào hạt bên ngoài, dẫn đến sự biến đổi hệ enzyme của màng trong suốt, và cuối cùng là làm cho trứng không thể gắn với tinh trùng (do màng trong suốt đã bị cứng lại; Larman và et al., 2006). Điều này giải thích cho hiện tượng
trứng sau khi giải đông có biểu hiện bong hết các tế bào cumulus, màng tế bào trứng có sự bám dính của lớp tinh trùng chết. Màng trong suốt có thể đã bị tổn thương trong quá trình đông lạnh nên mất đi cơ chế loại bỏ những tinh trùng không được thụ tinh với trứng bám ở bên ngoài màng tế bào.