Để phân loại được metacercaria, dựa vào đặc điểm hình thái thu riêng những ấu trùng có hình dạng tương tự vào trong các đĩa Petri nhỏ.
Chuyển metacercaria sang lam kính, nhỏ một giọt glycerine + lactic acid (1:1), đậy lamen và quan sát hình thái chi tiết dưới kính hiển vi có độ phóng đại lớn (10 x 40 trở lên).
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn Những dấu hiệu phân loại quan trọng là:
- Dạng ấu trùng và không phải là ấu trùng.
- Các giác bám, kích thước giác và kích cỡ ấu trùng. - Hình dạng và kiểu tuyến bài tiết.
- Cơ quan sinh sản.
(Nguồn: Dự án FIBOZOPA) * Phá nang metacercaria
Thường rất khó xác định đến mức giống của metacercaria trong khi chúng vẫn ở dạng nang. Ép metacercaria giải phóng khỏi nang trứng ra ngoài (excystment), việc này có thể làm tăng khả năng quan sát các đặc điểm hình thái, đặc biệt những đặc điểm được mô tả dưới đây, những đặc điểm quan trọng trong phân loại.
Đôi khi ép rất nhẹ nang metacercaria dưới lam men với nước hoặc nước muối sinh lý có thể làm vỡ được nang của Metacercaria. Một kỹ thuật khác mà có thể làm là làm vỡ nang với đầu kim nhỏ thao tác dưới kính hiển vi.
* Cố định metacercaria
Bào nang sán được làm sạch mô và chất nhờn, chuyển vào lam kính có giọt nước. Xem dưới kính giải phẫu, dùng dùi nhọn cẩn thận tách lớp vỏ ngoài và vỏ trong của bào nang để lấy ấu trùng ra. Cố định, nhuộm ấu trùng và sán trưởng thành giống nhau. Để sán không hoạt động cho sán vào đãi lồng hoặc lam kính có giọt nước hơ nóng đến 60 - 700C. Định hình bằng cách đè ép giữa hai phiếm kính nhỏ cồn 700
vào giữa 2 phiến kính giữ sán ở trạng thái đó trong thời gian 10 - 20 phút tùy vào kích thước và độ dày của sán. Ngoài ra cũng có thể dùng Formol 4% hoặc 10% để cố định. Bảo quản trong cồn hoặc formol.
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
2.6. Xử lý số liệu