- Cân, đo kích thước từng cá thể và ghi lại. Lấy một ít thịt từ các phần khác nhau của cá (như: đầu, mang, cơ, vây và vẩy). Mẫu phụ từ toàn bộ cá được kiểm tra một lần.
- Nghiền mỗi mẫu cơ riêng biệt bằng cối chày sứ. Cá nhỏ có thể được nhóm lại và nghiền cùng với nhau, nghiền 10 - 20 g mẫu các phần khác nhau.
- Sức đề kháng của ấu trùng với nhiệt độ và muối.
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
(8 ml HCl + 6 g Pepsin (1:10.000) trong 1000 ml nước cất (tuỳ theo khối lượng mẫu có thể dùng cốc đong lớn hơn và chứa nhiều dung dịch tiêu cơ hơn, dung dịch tiêu cơ nên ngập quá 1/3 thể tích mẫu).
- Trộn đều và đặt trong tủ ấm 37oC trong 2 - 3 giờ (hoặc lâu hơn cho những phần cứng như vây và vẩy) thỉnh thoảng khuấy đều.
- Thêm 50 ml nước , lắc đều và để lắng. Sau đó lọc qua lưới lọc 1 x 1 mm và rửa với 0.86% muối, rồi để lắng cho đến khi phần cặn lắng xuống để dễ quan sát.
- Loại bỏ phần nổi một cách nhẹ nhàng và giữ lại phần lắng cặn. - Lặp lại 7 đến 8 lần cho đến khi chất lắng trở lên trong.
- Chuyển chất lắng mỗi lần một lượng nhỏ vào trong đĩa Petri chứa 0,85% muối. Xoay nhẹ đĩa Petri bằng tay sao cho các chất lắng tập trung vào giữa. Dùng Pipette loại bỏ phần nhẹ nổi bên trên mặt.
- Quan sát trên và định loại metacercaria trên kính hiển vi với độ phóng đại 10x40.
- Tách riêng metacercaria và đặt trong một đĩa Petri nhỏ.
- Đếm số lượng metacercaria của mỗi loài sán. Bảo quản trong ngăn mát tủ lạnh. Để chắc chắn việc định loại metacercaria nên cảm nhiễm vào động vật thí nghiệm .