bệnh nhân tạo trong phòng thí nghiệm
Colletotrichum gloeosporioides là một loại nấm có phổ ký chủ lớn, gây hại làm ảnh hưởng lớn đến kinh tế và phát triển thuận lợi trong điều kiện nóng ẩm. Tuy nhiên, chúng không hoàn toàn phát sinh phát triển mạnh ở bất cứ điều kiện nào mà cần một ngưỡng gây bệnh phù hợp. Khi tập hợp đủ các yếu tố gây bệnh (ký sinh, ký chủ và điều kiện ngoại cảnh) thì quả sẽ bị bệnh. Do vậy chúng tôi tiến hành lây bệnh nhân tạo để xác định ngưỡng gây bệnh của nấm C. gloeosporioides T2.
Xác định ngưỡng gây bệnh trên xoài sau thu hoạch bằng cách lây bệnh nhân tạo trên quả với các nồng độ bào tử khác nhau.
Qua khảo sát bước đầu cho thấy kết quả sau 96h lây bệnh nhân tạo ở mức bào tử 106 bào tử/ml vết bệnh có tốc độ phát triển mãnh liệt không thể kiểm soát được đường kính. Cũng sau 96h lây bệnh ở mức 102 bào tử/ml khả năng phát triển của vết bệnh chậm và biểu hiện không rõ ràng. Bố trí thí nghiệm với 3 công thức: Công thức (I) lây bệnh ở mức bào tử 103 bào tử/ml, công thức (II) lây bệnh ở mức bào tử 104 bào tử/ml, công thức (III) lây bệnh ở mức bào tử 105 bào tử/ml.
Lây bệnh nhân tạo trên xoài với 10 vết bệnh đều nhau trên mỗi quả, sau khi lây bệnh tiến hành theo dõi, đo đường kính các vết bệnh được lây.
Kết quả xác định tỷ lệ bệnh và sự phát triển của vết bệnh trên xoài ở các nồng độ bào tử khác nhau được thể hiện ở bảng 3.1 và 3.2.
Bảng 3.1. Tỷ lệ bệnh ở các nồng độ bào tử khác nhau trên xoài
Công thức (bào tử/ml) Tỷ lệ bệnh (%) 48h 72h 0 (ĐC) 00 00 103 43 100 104 67 100 105 87 100 Qua bảng 3.1 nhận thấy:
Tương ứng với các nồng độ bào tử lây bệnh khác nhau thì tỷ lệ bệnh hình thành trên xoài cũng khác nhau. Ở công thức đối chứng (ĐC) với nồng độ bào tử được lây là 0 (bào tử/ml), nghĩa là chỉ tiến hành xử lý mẫu bằng nước cất vô trùng. Sau khi kết thúc thời gian khảo sát vết bệnh vẫn không hình thành. Trong khi đó, với các công thức I (103 bào tử/ml), công thức II (104 bào tử/ml), công
thức III (105 bào tử/ml) thì sau 48h các vết bệnh đã hình thành với tỷ lệ tăng dần theo chiều tăng của nồng độ bào tử được lây bệnh, công thức I tỷ lệ bệnh thấp nhất chiếm 43%, tiếp đến là công thức II với tỷ lệ bệnh 67% và công thức III tỷ lệ bệnh xuất hiện cao nhất với 87%. Sau 72 h tất cả các vết bệnh đều hình thành ở các nồng độ bào tử được lây bệnh. Các ngưỡng gây bệnh của nấm
Colletotrichum gloeosporioides T2 trên xoài bằng lây bệnh nhân tạo được thể hiện ở hình 3.5.
0bào tử/ml 103 bào tử/ml 104 bào tử/ml 105 bào tử/ml
Hình 3.5. Các ngưỡng gây bệnh của nấm Colletotrichum gloeosporioides T2
trên xoài bằng lây bệnh nhân tạo sau 96h
Bảng 3.2. Sự phát triển của vết bệnh trên xoài ở các mức bào tử khác nhau
Công thức (bào tử/ml) Đường kính vết bệnh (cm) AUDPC
72h 96h 120h
0 (ĐC) 0,00d 0,00d 0,00d 0,00d
103 0,23c 0,62c 1,13c 31,27c
104 0,42b 0,93b 1,54b 45,68 b
105 0,49a 1,13a 1,84a 55,26a
Ghi chú: Các giá trị trung bình đường kính vết bệnh theo cột có cùng chữ cái in thường là không sai khác ở mức ý nghĩa α = 0,05
Từ bảng 3.2 cho thấy, ở các thời điểm khác nhau (72h, 96h và 120h) đường kính vết bệnh và mức độ phát triển bệnh được xác định theo đường cong tiến triển bệnh AUDPC tăng dần theo nồng độ bào tử gây bệnh. Kết quả xử lý cho thấy giữa các công thức thí nghiệm giá trị trung bình đường kính vết bệnh đều sai khác có ý nghĩa thống kê (α = 0,05). Công thức IV với mức bào tử 105 bào
tử/ml có khả năng gây bệnh trên xoài lớn nhất, đường kính vết bệnh tại thời điểm 120h là 1,84cm lớn hơn ở mức nồng độ 104 bào tử/ml là 1,54cm và 103 bào tử/ml là 1,13cm.
Sau quá trình theo dõi sự phát triển của đường kính vết bệnh ở các công thức với các mức bào tử khác nhau thì khả năng gây bệnh cũng khác nhau, ở mức bào tử 105 là mức có khả năng gây bệnh lớn nhất do có lượng bào tử lớn nhất nên vết bệnh có khả năng phát sinh, phát triển nhiều hơn nhanh hơn, tiếp đến là mức bào tử 104 và mức 103. Nồng độ bào tử 105 bào tử/ml được sử dụng cho các thí nghiệm tiếp theo.