Chương 2 NGUYÊN LIỆU, THIẾT BỊ VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.1 Nguyên liệu và thiết bị
Nguyên liệu dùng để nghiên cứu là cây mang hoa và hoa khô DCC được thu hái tại Trung tâm trồng và chế biến cây thuốc Đà Lạt vào mùa khô từ tháng 11 đến tháng 4 và mùa mưa từ tháng 5 đến tháng 10 năm sau trong các năm 2004- 2009. Mẫu vật được lưu tại Phòng tiêu bản cây thuốc, Đại học Dược Hà Nội, số hieọu HNIP/16700/09.
- Cây mang hoa dùng làm tiêu bản lưu trữ, mô tả đặc điểm thực vật để thẩm định tên khoa học và nghiên cứu về đặc điểm vi học.
- Hoa được phơi hay sấy khô và xay thành bột để chiết xuất, định tính, định lượng, khảo sát chất lượng tinh dầu theo thời điểm thu hái, sơ chế, bảo quản…
2.1.2 Dung môi và hoá chất Bảng 2.1 Dung môi và hóa chất
Tên hóa chất Tiêu chuẩn Cung cấp
Hoá chất dùng phân tích, tinh chế sản phẩm và SKLM:
Anisaldehyd, acid hydrocloric, acid phosphoric, amoniac, cloroform, methanol, ethyl acetat, hexan, toluen, acid acetic
USP J.T.Baker- Myõ (Trung Quoác).
Dung moõi duứng cho SKLHNC, GC/MS: Acetonitril,
acid phosphoric, methanol, kali dihydro phosphat Merck Dung môi dùng chiết xuất loại PA: Ethanol, ether
etylic, methanol
J.T.Baker- Myõ Dung môi dùng chiết xuất loại kỹ thuật: Carbon dioxid Việt Nam.
Bảng 2.2 Chất chuẩn, sản phẩm đối chiếu
Tên chất chuẩn đối chiếu Tiêu chuẩn Nguồn gốc
Các chất chuẩn đối chiếu: guaiazulen, mã số Vb 6331, 133/1200.
Apigenin-7-glucosid, hàm lượng 100%, khan mã soá 0407OF.
USP
Merck USP Các sản phẩm đối chiếu: Kem Azulen số lô
CC05-A6585 HD 12/2012.
Herbal Cleansing Gel, HD 09/2012.
(Professionels-Pháp) Dr.Spiller Biocosmetic Chất gây viêm là carrageenin và formalin Sigma Aldrich
Bảng 2.3 Tá dược bào chế
Tên tá dược Tiêu chuẩn Nguồn gốc
Olivem 1000 (HD 11/2011)
Olivem 400 (HD 08/2011) USP B&T-YÙ, EAC Vieọt Nam phaân phoái
Crodamol (HD 10/2011)
BP Croda - Anh, Rudolf Lietz Vieọt Nam phaõn phoái
Carpobol 940, propylen glycol, glycerin, tween 80, cetyl alcohol (HD 12/2011), daàu parafin, dinatri EDTA, natri lauryl sulfat,
cocoamidopropyl betain, triethanolamin
USP Singapore
2.1.3 Thiết bị và dụng cụ Bảng 2.4 Dụng cụ
Teõn duùng cuù Nguoàn goỏc
Bình saéc kyù CAMAG Merck
Cột chiết thủy tinh 7 × 40 cm Việt Nam Cột sắc ký thủy tinh 3 × 40 cm Việt Nam Phễu lọc Buchner
Sắc ký lớp mỏng dùng silica gel F254 cellulose trên bản nhôm
tráng sẵn Merck
Sắc ký cột dùng cột thuỷ tinh với chất nhồi cột là silica gel60 F-
254 có kích thước hạt 0,063-0,200 mm Merck Keo thủy tinh giữ chuột với vỉ lưới đỡ để tránh cho chân chuột
tiếp xúc với trấu lót ở đáy keo Việt Nam
Bảng 2.5 Thiết bị
Teân thieát bò Nguoàn goác
Máy đo nhiệt độ- độ ẩm model JB913R Oregon Scientific
Đèn soi tử ngoại với bước sóng 254 và 365 nm Desaga Sarstedt Gruppe (Đức)
Máy sắc ký khí khối phổ (GC/MS) MD800, GC8000 Fisson, Anh Thieỏt bũ chieỏt xuaỏt tinh daàu baống CO2 SCF Vieọt Nam Hệ thống chiết xuất, cô đặc đa năng Trung Quốc
Máy cất cô quay Trung Quốc
Máy sấy phun Trung Quốc
Thiết bị ngấm kiệt bằng inox hình nón cụt ngược Việt Nam
Máy đo điểm chảy Buchi B545
Máy đo phổ tử ngoại Shimadzu 2450 Máy đo phổ hồng ngoại Nicolet Magna-IR 60 Máy đo khối phổ LC/ MS Agilent 6410 Triple Quad Máy sắc ký lỏng hiệu năng cao đầu dò PDA Shimadzu CBM-20M Máy cộng hưởng từ hạt nhân tần số 500 MHz Bruker Avance Máy đo quang phổ UV-VIS Beckman DU6501
Máy cô quay Buchi B545
Thiết bị đồng nhất hóa thuốc mỡ cho phòng thí nghiệm Heidolph Thiết bị đồng nhất hóa thuốc mỡ có gắn bộ phận hút
chân không qui mô sản xuất
IK (Đức) Thiết bị làm mịn thuốc mỡ ERWEKA Máy sấy, cân phân tích AB 265-S
Cân kỹ thuật PB602-S
Cân phân tích A&D model HR 2000 Nhật Cân kỹ thuật Sartorius model P4202S Nhật
Máy đo thể tích chân chuột Plethymometer 2.1.4 Súc vật thử nghiệm
- Chuột nhắt trắng (chủng Swiss albino), giống đực, trưởng thành 22-25 g (Viện vắc xin và sinh phẩm y tế Nha Trang cung cấp).
- Thỏ trắng cái, mắt đỏ, không có thai, khối lượng từ 2- 2,5 kg.
- Chuỷng vi khuaồn Streptococcus haemolyticus ∃, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa do bộ môn Vi-ký sinh, khoa Dược, Đại học Y Dược cung caáp.