Chương 3 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU
3.2 Điều chế sản phẩm trung gian từ Dương cam cúc
3.2.1 Tinh daàu Dửụng cam cuực
3.2.1.2 Xác định hàm lượng, thành phần tinh dầu Dương cam cúc
Tinh dầu thu được từ qui trình trên đem phân tích các thành phần và hàm lượng các chất chiết bằng phương pháp GC/MS qua các năm khảo sát (PL 16).
Theo kết quả ở PL 16 nhận thấy các thành phần chính có trong tinh dầu DCC ở các nước cũng như Việt Nam đều là chamazulen, bisabolol oxid A, B [81].
Kết quả hàm lượng trung bình tinh dầu và các hoạt chất chính
Hàm lượng trung bình tinh dầu của hoa DCC theo phương pháp cất kéo hơi nước là 0,52 ± 0,03 (mục 3.1.2.2, bảng 3.1). Kết quả hàm lượng trung bình các hoạt chất chính trong tinh dầu (bảng 3.14 và PL 17a,b).
Bảng 3.14 Hàm lượng chamazulen và bisabolol oxid A, B trong tinh dầu Dương cam cúc theo phương pháp cất kéo hơi nước
Maãu naêm HL TB chamazulen (%) HL TB bisabolol oxid A, B (%)
2005 1,58 30,5
2006 1,64 31,2
2007 2008 2009
1,71 1,70 1,67
32,7 32,5 31,5 Kết quả xử
lyù thoáng keâ
n = 5 x=1,66%
SD=0,05% CV=3,15%
μ=1,66 ± 0,05%
n = 5 x=31,68%
SD=0,91% CV=2,89%
μ=31,68 ± 0,91%
Hàm lượng trung bình các hoạt chất chính trong tinh dầu DCC (cất kéo hơi nước) là chamazulen khoảng 1,66% và bisabolol oxid A, B khoảng 31,68%.
Tinh dầu chiết xuất bằng phương pháp CO2 siêu tới hạn Thành phần tinh dầu chiết bằng CO2 siêu tới hạn
Tinh dầu được chiết xuất bằng phương pháp CO2 SCF với điều kiện đã tìm
được trong mục 3.2.1.1 trình bày kết quả xác định các thành phần ở PL 18 a,b.
Thành phần các chất chiết được trong tinh dầu DCC bằng phương pháp CO2
SCF cũng tương tự như các tài liệu đã công bố [81]. Các hoạt chất chính có mặt trong tinh dầu DCC Đức chiết bằng CO2 SCF ở các nước cũng như Việt Nam đều là bisabolol oxid A, B, sáp. Tuy nhiên, chamazulen trong tinh dầu DCC trồng ở Việt Nam thay thế cho matricin là một tiền chất của chamazulen hiện diện trong tinh dầu DCC trồng ở một số nước (theo bảng 1.1).
Kết quả định tính tinh dầu chiết bằng CO2 siêu tới hạn
Bằng sắc ký lớp mỏng: SKĐ của tinh dầu chiết bằng CO2 SCF (hình 3.20).
1 2
Hình 3.20 Sắc ký đồ tinh dầu Veỏt 1: Maóu chuaồn goàm guaiazulen, bornyl acetat, borneol
Vết 2: Mẫu thử tinh dầu
Quan sát dưới ánh sáng thường sau khi phun thuốc thử anisaldehyd Heọ dung moõi khai triển
Ethyl acetat- toluen (5:95)
Sắc ký đồ mẫu chuẩn có vết dưới cùng màu xanh viền vàng là borneol, vết ở giữa có màu vàng nâu là bornyl acetat, vết trên cùng có màu đỏ đậm viền xanh bên ngoài là guaiazulen. Sắc ký đồ mẫu thử có khoảng 7 vết, trong đó có một vết đỏ trên cùng là terpen có Rf gần Rf của guaiazulen, hai vết có Rf và màu sắc tương tự bornyl acetat và borneol. Như vậy, SKĐ mẫu thử của tinh dầu DCC chiết bằng CO2 SCF có những vết có màu sắc và Rf tương tự mẫu chuẩn.
Bằng phản ứng hoá học: Cho phản ứng đặc trưng tinh dầu DCC.
Kết quả định lượng tinh dầu chiết bằng CO2 siêu tới hạn
Kết quả hàm lượng trung bình tinh dầu DCC ở qui mô pilot được trình bày ở bảng 3.15 và PL 19.
Bảng 3.15 Kết quả hàm lượng trung bình tinh dầu Dương cam cúc Maãu
naêm
Khối lượng dược liệu (kg)
Theồ tớch tinh daàu (ml)
HLtinh daàu (%)
Kết quả xử lý thoáng keâ
2007 10 78,3 0,87 n= 3 x=0,84% SD=0,02%
2008 10 76,5 0,85 CV=1,80%
2009 10 72,0 0,80 μ=0,84 ± 0,02%
Hàm lượng trung bình tinh dầu DCC ở qui mô pilot là khoảng 0,84%.
Kết quả hàm lượng trung bình hoạt chất trong tinh dầu DCC (phương pháp CO2 SCF) được trình bày ở bảng 3.16 và PL 20a,b
Bảng 3.16 Hàm lượng chamazulen và bisabolol oxid A, B trong tinh dầu Dương cam cúc theo phương pháp CO2 siêu tới hạn
Mẫu năm Hàm lượng TB % chamazulen
Hàm lượng TB % bisabolol oxid A, B 2007
2008 2009
3,38 3,25 3,10
42,5 41,3 39,0 Kết quả xử lý
thoáng keâ
n=3 x=3,2%
SD=0,14%, CV=4,32%
μ=3,2 ± 0,14%
n=3 x=40,9%
SD=1,77%, CV=4,34%
μ=40,9 ± 1,77%
Hàm lượng trung bình của các hoạt chất trong tinh dầu DCC (phương pháp CO2 SCF) có chamazulen khoảng 3,2% và bisabolol oxid A, B khoảng 40,9%.
So sánh tinh dầu chiết xuất bằng hai phương pháp
- Định lượng tinh dầu, các thành phần chính trong tinh dầu chiết bằng hai phương pháp được trình bày trong bảng 3.17, PL 21 và so sánh với các tài liệu các nước công bố [48], [55], [81].
Bảng 3.17 So sánh tinh dầu chiết xuất bằng cất kéo hơi nước và CO2 siêu tới hạn Các chỉ tiêu Phương pháp cất kéo hơi nước Phương pháp CO2 SCF 1. Cảm quan Màu xanh dương đậm, mùi thơm đặc trưng
2. ẹũnh tớnh SKLM
SKĐ mẫu thử có 5 vết, trong đó có 3 vết tương đương mẫu chuẩn
SKĐ mẫu thử có 7 vết, trong đó có 3 vết tương đương mẫu chuẩn Đều có các thành phần chính là chamazulen, bisabolol oxid A, B GC/MS
Không có thành phần sáp Có thành phần sáp
3. Định lượng HL tinh dầu 0,52 ± 0,03% HL tinh dầu 0,84 ± 0,02%
Khi so sánh thành phần, hàm lượng tinh dầu DCC của mẫu nghiên cứu bằng hai phương pháp, các thành phần căn bản là tương tự. Về hàm lượng các hoạt chất chính chiết bằng phương pháp CO2 SCF thu được cao hơn. Vậy chọn phương pháp chiết xuất tinh dầu DCC bằng CO2 SCF là phù hợp.