- Loài Chaetoceros sp.
3.1.3.1. Lưu giữ Chaetoceros gracilis và Tetraselmis chuii trên môi trường lỏng và ống thạch nghiêng
lỏng và ống thạch nghiêng
Chúng tôi tiến hành lưu giữ 2 loài VTB quang tự dưỡng nêu trên ở môi trường
lỏng, ống thạch nghiêng. Trên môi trường lỏngở cấp độ ống nghiệm, chúng đều được lưu giữ thành công và được cấy chuyển theo chu kỳ 1-2 tháng/lần (hình 3.10). Tuy
nhiên, phương pháp này bộc lộ một số điểm hạn chế là: do phải cấy chuyển thường
xuyên nên khả năng mẫu bị nhiễm khuẩn, nhiễm các loài tảo khác là rất lớn, ngoài ra tốn diện tích lưu giữ, tốn môi trường nuôi, thời gian và công sức khi cấy chuyển. Kết
quả về tốc độ sinh trưởng đặc trưng (µ, /ngày) của các loài C. gracilis và T. chuiiđuợc lưu giữ trên môi trường lỏng sau 60 ngày lưu giữ ở nhiệt độ phòng được trình bày ở
bảng 3.3. Kết quả ở bảng 3.3 đã chỉ ra cho thấy, tốc độ sinh trưởng đặc trưng của các
loài C. gracilis và T. chuii khi lưu giữ trong ống nghiệm đạt cao nhất trong khoảng
thời gian từ 45 ngày sau khi cấy chuyển và giảm dần sau 60 ngày, cụ thể tốc độ sinh trưởng của C. gracilisvà T. chuiiđạt 0,020 và 0,027, tương ứng sau 45 ngày nuôi cấy. Do vậy, theo kết quả này với chu kỳ từ 45 ngày, chúng tôi sẽ tiến hành cấy chuyển để lưu giữ giống trên môi trường lỏng ở cấp độ ống nghiệm và bình tam giác đảm bảo
giống luôn được hoạt hóa trên môi trường mới và duy trì được tốc độ sinh trưởng đặc trưng cho từng loài.
Bảng 3.3. Tốc độ sinh trưởng đặc trưng (µ/ngày) của các loài C. gracilis và
T. chuii sau 60 ngày lưu giữ trên môi trường lỏng
Tên loài Tốc độ sinh trưởng đặc trưng (µ/ngày)
15 ngày 30 ngày 45 ngày 60 ngày
C. gracilis 0,012 0,015 0,020 0,010
T. chuii 0,013 0,023 0,027 0,011
Ngoài ra, để đảm bảo việc lưu giữ giống ổn định trong một khoảng thời gian dài, chúng tôi đã tiến hành lưu giữ giống 2 loài VTB quang tự dưỡng C. gracilis và T. chuii trên môi trường thạch (1% agar). Sau 2 tháng cấy chuyển trên môi trường thạch, chúng tôi đã quan sát được khuẩn lạc riêng rẽ của 2 loài nói trên (hình 3.11). Sau đó,
tần suất cấy chuyển trên thạch là 3 tháng/lần. Tuy nhiên, việc lưu giữ trên môi trường
thạch trong điều kiện thường đối với các loài tảo này còn gặp khó khăn như: thời gian
mọc khuẩn lạc dài (sau 2- 3 tháng cấy mới thấy xuất hiện) và cũng rất dễ bị nhiễm bởi
nấm và vi khuẩn.
Hình 3.11. Khuẩn lạc của Chaetoceros gracilis và Tetraselmis chuii mọc trên
môi trường thạch
Chaetoceros gracilis Tetraselmis chuii