Chương 3 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.12 KHẢO SÁT PHẢN ỨNG THỦY PHÂN BÁNH DẦU ĐẬU PHỘNG
3.12.4. Khảo sát phản ứng thủy phân ở hàm lƣợng xúc tác là 1.00% so
Hàm lượng xúc tác cuối cùng mà chúng tôi tiến hành khảo sát là 1.00%, phản ứng cũng được thực hiện ở 3 giá trị pH khác nhau là 6, 7, 8. Tương ứng với mỗi giá trị pH, tiến hành khảo sát 3 giá trị nhiệt độ là 60OC, 70OC, 80OC. Sau mỗi 2 giờ phản ứng, cân 0.1g dung dịch phản ứng định mức thành 100ml bằng nước sôi để ngừng phản ứng thủy phân. Rút 0.4ml dung dịch phản ứng đã pha loãng để xác định hàm lượng protein hòa tan theo phương pháp Lowry.
Tại pH 6.0, hiệu suất phản ứng ở các nhiệt độ khác nhau được trình bày trong bảng 3.42 – 3.44
Bảng 3.42. Hiệu suất phản ứng ở pH 6.0, 60OC và hàm lƣợng xúc tác là 1.00%
LUẬN VĂN THẠC SĨ HểA HỌC CHIấM LÂM PHÚC DIỄM Thời gian
thủy phân (giờ)
Mật độ quang 750nm (AU)
Lượng protein (mg/g)
Hiệu suất thủy phân (%)
2 0.2491 356.43 39.23%
4 0.2498 357.43 39.37%
6 0.2569 367.57 40.77%
8 0.2597 371.57 41.32%
10 0.2848 407.43 46.26%
12 0.2874 411.14 46.77%
14 0.3005 429.86 49.35%
16 0.3233 462.43 53.84%
18 0.3458 494.57 58.27%
20 0.3512 502.29 59.33%
22 0.3515 502.71 59.39%
24 0.3657 523.00 62.19%
Bảng 3.43. Hiệu suất phản ứng ở pH 6.0, 70OC và hàm lƣợng xúc tác là 1.00%
Thời gian thủy phân
(giờ)
Mật độ quang 750nm (AU)
Lượng protein (mg/g)
Hiệu suất thủy phân (%)
2 0.3023 432.43 49.71%
4 0.3091 442.14 51.05%
6 0.3220 460.57 53.59%
8 0.3252 465.14 54.22%
10 0.3302 472.29 55.20%
12 0.3307 473.00 55.30%
14 0.3379 483.29 56.72%
16 0.3397 485.86 57.07%
18 0.3315 474.14 55.46%
20 0.3380 483.43 56.74%
22 0.4008 573.14 69.10%
24 0.4125 589.86 71.40%
LUẬN VĂN THẠC SĨ HểA HỌC CHIấM LÂM PHÚC DIỄM Bảng 3.44. Hiệu suất phản ứng ở pH 6.0, 80OC và hàm lƣợng xúc tác là 1.00%
Thời gian thủy phân
(giờ)
Mật độ quang 750nm (AU)
Lượng protein (mg/g)
Hiệu suất thủy phân (%)
2 0.1963 281.00 28.84%
4 0.2011 287.86 29.78%
6 0.2124 304.00 32.01%
8 0.2262 323.71 34.72%
10 0.2484 355.43 39.09%
12 0.2467 353.00 38.76%
14 0.2612 373.71 41.61%
16 0.2821 403.57 45.73%
18 0.2822 403.71 45.75%
20 0.3476 497.14 58.63%
22 0.3502 500.86 59.14%
24 0.3511 502.14 59.31%
Nhận xét: với hàm lượng xúc tác 1.00%, hiệu suất phản ứng đã có sự chuyển biến khỏ rừ. Hiệu suất cao nhất thu được ở pH 6.0 là 71.40% tăng 34.73% so với hàm lượng xúc tác 0.25%.
Sự phụ thuộc của hiệu suất vào thời gian phản ứng (pH 8.0, Nồng độ xúc tác 1.00%)
10.00 20.00 30.00 40.00 50.00 60.00 70.00 80.00 90.00
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 Thời gian phản ứng (giờ)
Hiệu suất phản ứng (%)
60oC 70oC 80oC
Hình 3.20. Sự phụ thuộc của hiệu suất vào thời gian phản ứng ở pH 6.0 và hàm lƣợng xúc tác là 1.00%.
LUẬN VĂN THẠC SĨ HểA HỌC CHIấM LÂM PHÚC DIỄM Tại pH 7.0, hiệu suất phản ứng ở các nhiệt độ khác nhau được trình bày trong bảng 3.45 – 3.47 (phụ lục 21 – 23)
Bảng 3.45. Hiệu suất phản ứng ở pH 7.0, 60OC và hàm lƣợng xúc tác là 1.00%
Thời gian thủy phân
(giờ)
Mật độ quang 750nm (AU)
Lượng protein (mg/g)
Hiệu suất thủy phân (%)
2 0.2918 417.36 47.63%
4 0.2999 429.00 49.23%
6 0.3229 461.91 53.77%
8 0.3256 465.70 54.29%
10 0.3324 475.39 55.63%
12 0.3355 479.80 56.24%
14 0.3395 485.56 57.03%
16 0.3522 503.76 59.54%
18 0.3687 527.26 62.78%
20 0.3766 538.53 64.33%
22 0.3879 554.76 66.57%
24 0.3923 560.96 67.42%
Bảng 3.46. Hiệu suất phản ứng ở pH 7.0, 70OC và hàm lƣợng xúc tác là 1.00%
Thời gian thủy phân
(giờ)
Mật độ quang 750nm (AU)
Lượng protein (mg/g)
Hiệu suất thủy phân (%)
2 0.2901 415.04 47.31%
4 0.2974 425.43 48.74%
6 0.3023 432.37 49.70%
8 0.3091 442.19 51.05%
10 0.3220 460.63 53.59%
12 0.3252 465.14 54.22%
14 0.3302 472.33 55.21%
16 0.3307 472.93 55.29%
18 0.3315 474.13 55.45%
20 0.3379 483.33 56.72%
22 0.3397 485.91 57.08%
24 0.4589 656.14 80.54%
LUẬN VĂN THẠC SĨ HểA HỌC CHIấM LÂM PHÚC DIỄM Bảng 3.47. Hiệu suất phản ứng ở pH 7.0, 80OC và hàm lƣợng xúc tác là 1.00%
Thời gian thủy phân
(giờ)
Mật độ quang 750nm (AU)
Lượng protein (mg/g)
Hiệu suất thủy phân (%)
2 0.1589 227.53 21.47%
4 0.1732 247.94 24.28%
6 0.1813 259.51 25.88%
8 0.1820 260.54 26.02%
10 0.1992 285.13 29.41%
12 0.2039 291.81 30.33%
14 0.2079 297.56 31.12%
16 0.2093 299.60 31.40%
18 0.2242 320.90 34.34%
20 0.2381 340.70 37.06%
22 0.2453 351.00 38.48%
24 0.2642 378.00 42.21%
Nhận xét: so với pH 6.0 hiệu suất cao nhất ở điều kiện 70OC chỉ đạt 71.40%
thì ở pH 7.0 hiệu suất phản ứng đã tăng lên khá nhiều và đạt giá trị là 80.54%. Đây cũng chính là hiệu suất cao nhất thu được khi thực hiện phản ứng thủy phân protein trong bánh dầu đậu phộng đã loại béo với xúc tác là enzyme papain có trong nhựa đu đủ đông khô. Từ đồ thị hình 3.20 chúng ta thấy rằng ở nhiệt độ 80OC, hiệu suất phản ứng thấp hơn hẳn so với hai nhiệt độ còn lại.
Sự phụ thuộc của hiệu suất vào thời gian phản ứng (pH 7.0, Nồng độ xúc tác 1.00%)
10.00 20.00 30.00 40.00 50.00 60.00 70.00 80.00 90.00
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 Thời gian phản ứng (giờ)
Hiệu suất phản ứng (%)
60oC 70oC 80oC
Hình 3.21. Sự phụ thuộc của hiệu suất vào thời gian phản ứng ở pH 7.0 và hàm lƣợng xúc tác là 1.00%.
LUẬN VĂN THẠC SĨ HểA HỌC CHIấM LÂM PHÚC DIỄM Tại pH 7.0, hiệu suất phản ứng ở các nhiệt độ khác nhau được trình bày trong bảng 3.48 – 3.50.
Bảng 3.48. Hiệu suất phản ứng ở pH 8.0, 60OC và hàm lƣợng xúc tác là 1.00%
Thời gian thủy phân
(giờ)
Mật độ quang 750nm (AU)
Lượng protein (mg/g)
Hiệu suất thủy phân (%)
2 0.1590 227.71 21.49%
4 0.1732 247.94 24.28%
6 0.1813 259.63 25.89%
8 0.1822 260.86 26.06%
10 0.1929 276.14 28.17%
12 0.2041 292.14 30.37%
14 0.2087 298.71 31.28%
16 0.2099 300.43 31.51%
18 0.2240 320.57 34.29%
20 0.2380 340.57 37.05%
22 0.2453 351.00 38.48%
24 0.2789 399.00 45.10%
Bảng 3.49. Hiệu suất phản ứng ở pH 8.0, 70OC và hàm lƣợng xúc tác là 1.00%
Thời gian thủy phân
(giờ)
Mật độ quang 750nm (AU)
Lượng protein (mg/g)
Hiệu suất thủy phân (%)
2 0.3045 435.57 50.14%
4 0.3091 442.14 51.05%
6 0.3226 461.43 53.70%
8 0.3229 461.86 53.76%
10 0.3309 473.29 55.34%
12 0.3312 473.71 55.40%
14 0.3365 481.29 56.44%
16 0.3397 485.86 57.07%
18 0.3329 476.14 55.73%
20 0.3380 483.43 56.74%
22 0.3569 510.43 60.46%
24 0.4009 573.29 69.12%
LUẬN VĂN THẠC SĨ HểA HỌC CHIấM LÂM PHÚC DIỄM Bảng 3.50. Hiệu suất phản ứng ở pH 8.0, 80OC và hàm lƣợng xúc tác là 1.00%
Thời gian thủy phân
(giờ)
Mật độ quang 750nm (AU)
Lượng protein (mg/g)
Hiệu suất thủy phân (%)
2 0.1963 281.00 28.84%
4 0.2032 290.86 30.20%
6 0.2146 307.14 32.44%
8 0.2258 323.14 34.65%
10 0.2476 354.29 38.94%
12 0.2498 357.43 39.37%
14 0.2574 368.29 40.87%
16 0.2645 378.43 42.26%
18 0.2800 400.57 45.32%
20 0.3494 499.71 58.98%
22 0.3523 503.86 59.55%
24 0.3577 511.57 60.61%
Sự phụ thuộc của hiệu suất vào thời gian phản ứng (pH 8.0, nồng độ xúc tác 1.00%)
10.00 20.00 30.00 40.00 50.00 60.00 70.00 80.00 90.00
2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 Thời gian phản ứng
Hiệu suất phản ứng
60oC 70oC 80oC
Hình 3.22. Sự phụ thuộc của hiệu suất vào thời gian phản ứng ở pH 8.0 và hàm lƣợng xúc tác là 1.00%.
LUẬN VĂN THẠC SĨ HểA HỌC CHIấM LÂM PHÚC DIỄM Qua các điều kiện khảo sát, chúng tôi nhận thấy rằng phản ứng thủy phân với hàm lượng xúc tác là 1.00% có hiệu suất cao nhất ở pH 7.0 và nhiệt độ là 70OC.
Nhiệt độ 70oC
pH 6.0 7.0 8.0
Hiệu suất (%) 71.4 80.54 69.12
Ngoài ra chúng tôi đã tiến hành chạy điện di trên gel polyacrylamid với 3 hàm lượng xúc tác khác nhau 0.25%, 0.75% và 1.00% ở những điều kiện thực hiện phản ứng tối ưu đối với từng xúc tác. Kết quả thu được như hình 3.23
Hình 3.23 Kết quả điện di của dung dịch sau phản ứng ở các hàm lƣợng xúc tác khác nhau.
Chú thích:
1 – Thang protein chuẩn
2 – Dung dịch sau phản ứng với hàm lượng xúc tác 0.25%
3 - Dung dịch sau phản ứng với hàm lượng xúc tác 0.50%
4 - Dung dịch sau phản ứng với hàm lượng xúc tác 1.00%
LUẬN VĂN THẠC SĨ HểA HỌC CHIấM LÂM PHÚC DIỄM