e. Các yếu tố ảnh hưởng đến hoạt tính xúc tác của papain
3.3 KHẢO SÁT ĐIỀU KIỆN THU NHẬN PAPAIN TỪ NHỰA KHƠ
Nhựa tươi sau khi đã đơng khơ chân khơng, chúng tơi tiến hành sơ chế bằng dung mơi hữu cơ được làm lạnh để loại bỏ các tạp chất. Sản phẩm sau quá trình sơ chế được chạy điện di để phân tích sơ bộ thành phần protein. Kết quả chạy điện di của sản phẩm sau giai đoạn sơ chế được trình bày trong hình 3.1a:
Hình 3.1a. Điện di đồ của nhựa khơ ở trái non sơ chế bằng dung mơi etanol
LUẬN VĂN THẠC SĨ HĨA HỌC CHIÊM LÂM PHÚC DIỄM
1 – thang protein chuẩn
2 – nhựa đu đủ non đơng khơ sơ chế bằng etanol
Nhận xét: quá trình sơ chế bằng dung mơi cịn lẫn khá nhiều protein tạp, do đĩ chúng tơi tiến hành qui trình tinh chế với các phân đoạn khác nhau để tinh sạch protein. Đồng thời, chúng ta cũng dễ dàng nhận thấy rằng trong vạch điện di của nhựa đu đủ non khơng cĩ xuất hiện enzyme papain do đĩ chúng tơi tiến hành lấy nhựa trên trái trưởng thành để thu nhận papain. Điều này hồn tồn phù hợp với các nghiên cứu trước đây về enzyme trong nhựa đu đủ: enzyme papain chỉ hình thành trong giai đoạn trưởng thành của trái.
Tinh chế:
Tiến hành tinh chế papain từ nhựa đơng khơ theo phương pháp đã trình bày trong phần thực nghiệm, từ 90 gam nhựa khơ ban đầu chúng tơi thu được 1g papain. Kết quả điện di được trình bày trong hình 3.1b:
Hình 3.1 b. Điện di đồ của chế phẩm Merk và papain tinh chế từ nhựa đu đủ đơng khơ.
1- Thang protein chuẩn 2- Chế phẩm Merck 3 - papain
LUẬN VĂN THẠC SĨ HĨA HỌC CHIÊM LÂM PHÚC DIỄM