CHƯƠNG 2 : ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.2. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.2.2. Nghiên cứu điều chế HPTR carvedilol bằng phương pháp sấy phun
2.2.2.1. Khảo sát dịch phun chứa polymer và carvedilol
Khảo sát dịch phun chứa polymer và điều chế dịch phun chứa carvedilol - polymer
- Khảo sát dịch phun chứa các polymer: PVP K30, PVP K90, HPMC E6, Copovidon VA 64, Poloxamer 407, được hòa tan trong dung môi ethanol 96% với các tỉ lệ polymer: dung môi lần lượt là: 1:25 – 3:25 – 5:25. Các kết quả đánh giá các dịch phun chứa các tỉ lệ polymer được dùng để xác định loại polymer phù hợp
- Các polymer và tỉ lệ được chọn và carvedilol được hịa tan trong dung mơi ethanol 96% với tỉ lệ hoạt chất : polymer : dung môi lần lượt là: 1:1:25 – 1:3:25 – 1:5:25. Dịch phun được đánh giá theo các chỉ tiêu trong bảng 2.6
Bảng 2.6. Các chỉ tiêu đánh giá dịch phun
Chỉ tiêu Yêu cầu
Dịch phun chứa polymer Dịch phun chứa carvedilol - polymer
Cảm quan Trong suốt Trong suốt
2.2.2.2. Nghiên cứu bào chế cốm chứa HPTR Carvedilol bằng phương pháp sấy phun tạo hạt tầng sôi (cỡ lô 3.000 viên) phun tạo hạt tầng sôi (cỡ lô 3.000 viên)
Với các công thức dịch phun đã chọn ở mục 2.2.2.1, tiến hành sấy phun tạo hạt tầng sôi trên tá dược độn được lựa chọn là lactose monohydrat 200 mesh. Lượng tá dược độn dùng cho mỗi cơng thức là: 351,60 g
Quy trình sấy phun tạo hạt tầng sôi
- Thiết bị: Máy sấy và tạo hạt tầng sôi Solidlab, công suất: 0.30 – 10,00 kg. - Cân nguyên liệu.
- Rây nguyên liệu: Cỡ rây tá dược độn 0.5 mm
- Pha dịch dính: hệ phân tán rắn (đóng vai trị dịch phun).
- Sấy làm nóng tá dược độn: nhiệt độ gió vào 60 – 65 oC, nhiệt độ sản phẩm 38– 40 oC - Sấy phun tạo hạt tầng sơi: phun dịch dính với các thơng số như sau:
+ Lưu lượng gió vào: 40 – 50 m3/h + Nhiệt độ gió vào: 50 – 60 oC + Nhiệt độ cốm: 38 – 45 oC + Áp suất khí phun: 0.1 – 0.2 bar + Áp suất vi khí hậu: 0.05 – 0.1 bar + Chu kỳ giũ túi lọc:1 – 2 giây/ lần
+ Tốc độ bơm nhu động: 10 –14 vòng/phút
- Sấy cốm: Sau khi phun hết dịch, sấy cốm ở nhiệt độ 55 – 65 oC, đến khi đạt độ ẩm: ≤ 1.5%.
- Sửa hạt: Lấy cốm ra sửa hạt qua máy rây rung lưới rây 0.8 mm.
Cốm sau sấy phun được khảo sát các thơng số: phân bố kích thước hạt, góc nghỉ, chỉ số Hausner, chỉ số nén, hàm lượng, thử độ hịa tan và phân tích nhiệt vi sai (DSC)
Các kết quả đánh giá cốm sấy phun tạo hạt tầng sôi chứa HPTR carvedilol được dùng để xác định loại và tỉ lệ polymer phù hợp để điều chế viên nén bao phim carvedilol 6,25mg
Bảng 2.7. Các chỉ tiêu đánh giá cốm sấy phun tạo hạt tầng sôi
Chỉ tiêu Yêu cầu
Thông số vật lý Phân bố kích thước hạt Tỷ lệ cỡ hạt từ 90 –710 µm, (≥ 30%) Góc nghỉ α ≤ 40o Chỉ số nén Carr (%): ≤ 25% Chỉ số Hausner ≤ 1,34 Độ ẩm ≤ 1.5% Hiệu suất ≥ 95% Hàm lượng
Từ 95,0 - 105,0% lượng carvedilol C24H26N2O4 so với hàm lượng ghi trên nhãn. (yêu cầu theo chuyên luận viên nén Carvedilol, USP 2021)
Độ hòa tan
≥ 80% (Q) lượng carvedilol (C24H26N2O4) so với hàm lượng ghi trên nhãn được hòa tan trong 30 phút. (yêu cầu theo chuyên luận viên nén Carvedilol, USP 2021)
2.2.3. Xây dựng cơng thức và quy trình điều chế viên nén bao phim carvedilol 6.25 mg từ cốm chứa HPTR mg từ cốm chứa HPTR
2.2.3.1. Khảo sát tính chất lý hóa, độ hịa tan của viên đối chiếu và xây dựng đặc điểm chất lượng kỳ vọng (QTTP) cho viên nén nghiên cứu điểm chất lượng kỳ vọng (QTTP) cho viên nén nghiên cứu
Khảo sát tính chất lý hóa, độ hịa tan của viên đối chiếu
Tham khảo viên đối chiếu viên nén Dilatrend, hộp chứa 3 vỉ bấm Al/Al x 10 viên, hàm lượng carvedilol 6.25 mg, nhà sản xuất Roche, khảo sát các tính chất cơ lý, khảo sát độ hịa tan viên đối chiếu làm cơ sở để xây dựng tiêu chuẩn công thức viên nghiên cứu
Bảng 2.8. Điều kiện thử độ hòa tan [6].
Thiết bị Máy thử độ hòa tan kiểu cánh khuấy
Tốc độ 50 vòng/phút
Thời gian 30 phút
Nhiệt độ 37 0,5oC
Môi trường 900 ml dung dịch đệm pH 1,45 Định lượng dịch thử hòa tan UV-Vis, bước sóng 285 và 380 nm
Yêu cầu ≥ 80 % (Q) lượng carvedilol (C24H26N2O4) so với hàm lượng ghi trên nhãn được hòa tan trong 30 phút.
Đặc điểm chất lượng kỳ vọng của sản phẩm nghiên cứu (QTTP)
Mục tiêu phát triển dược phẩm của đề tài là nghiên cứu đều chế viên nén bao phim carvedolol 6,25 mg có chất lượng tương đương với sản phẩm gốc trên thị trường, đạt các chỉ tiêu chất lượng như hồ sơ đăng ký, sinh khả dụng cao, độ ổn định cao, đảm bảo an tồn, hiệu quả trong suốt vịng đời sản phẩm, phù hợp với bệnh nhân, thuận tiện cho sử dụng, vận chuyển và bảo quản.
Mục đích nghiên cứu được trình bày như bảng 2.9 và các yêu cầu an tồn, hiệu quả được trình bày ở bảng 2.10
Bảng 2.9. Mục đích nghiên cứu
QTPP Diễn đạt
Dạng bào chế và hàm lượng Viên nén bao phim hàm lượng 6.25 mg Đạt các chỉ tiêu chất lượng đảm bảo an
tồn, hiệu quả trong suốt vịng đời sản phẩm
Hình thức, độ rã, đồng đều khối lượng, định tính, định lượng, độ hịa tan Độ bền cơ học Đảm bảo cho vận chuyển, bảo quản. Hình thức Thuận tiện cho sử dụng, vận chuyển,
bảo quản, đẹp, dễ tiếp thị
Bảng 2.10. Các yêu cầu an tồn, hiệu quả
QTPP Đặt tính/ u cầu
Liều 6,25 mg
Phù hợp với bệnh nhân Dễ uống, hình thức đẹp, dễ tiếp thị
Hiệu quả Sinh khả dụng cao
Độ ổn định Hạn sử dụng ≥ 3 năm.
2.2.3.2. Xây dựng thuộc tính chất lượng cho sản phẩm trung gian và thành phẩm (CQAs) (CQAs)
Dự kiến tiêu chuẩn cơ sở cho viên nén bao phim Carvedilol 6,25mg bao gồm các chỉ tiêu được trình bày trong Bảng 2.11
Bảng 2.11. Tiêu chuẩn cơ sở cho sản phẩm trung gian và thành phẩm Giai Giai
đoạn Tiêu chuẩn Yêu cầu
Phương pháp kiểm tra Trộn hoàn tất Cảm quan Cốm màu trắng đến trắng ngà,
khô tơi, đồng nhất. Quan sát Phân bố kích
thước hạt
Tỷ lệ cỡ hạt từ 90 –710 µm (≥ 30%)
Máy đo kích thước hạt Góc nghỉ α ≤ 40o Dụng cụ đo góc nghỉ Chỉ số nén Carr ≤ 25% Máy đo tỷ trọng cốm Chỉ số Hausner ≤ 1,34 Máy đo tỷ trọng cốm Độ ẩm ≤ 1.5% Cân sấy ẩm hồng ngoại Độ phân tán hàm lượng hoạt chất
Hàm lượng carvedilol phải nằm trong khoảng 95,0 – 105,0% và RSD < 5%,
Phương pháp HPLC
Định lượng Từ 95,0 % - 105,0 % so với hàm
lượng ghi trên nhãn. Phương pháp HPLC
Dập viên Cảm quan Viên nén hình trịn, màu trắng đến trắng ngà, hai mặt khum trơn Quan sát Độ cứng 50 – 100 N Máy đo dộ cứng
Thời gian rã ≤ 15 phút Máy thử độ rã
Độ mài mòn ≤ 1,0 % Máy thừ độ mài
mòn
KLTB ± 7,5% Cân phân tích
ĐĐKL ± 7,5% Cân phân tích
Giai
đoạn Tiêu chuẩn Yêu cầu
Phương pháp kiểm tra
Định lượng
Từ 90,0 % - 110,0 % so với hàm lượng ghi trên nhãn. Tính trên khối lượng trung bình viên nhân
Phương pháp HPLC
Độ hịa tan
≥ 80 % (Q) lượng carvedilol so với hàm lượng ghi trên nhãn được hòa tan trong 30 phút.
Phương pháp UV - Vis
Bao phim
Cảm quan Viên nén hình trịn, màu vàng,
hai mặt khum trơn Quan sát Thời gian rã ≤ 30 phút Máy thử độ rã
KLTB ± 7,5% Cân phân tích
Định lượng
Từ 90,0 % - 110,0 % so với hàm lượng ghi trên nhãn. Tính trên khối lượng trung bình viên nhân
Phương pháp HPLC
Độ hòa tan
≥ 80 % (Q) lượng carvedilol so với hàm lượng ghi trên nhãn được hòa tan trong 30 phút.
Phương pháp UV - Vis
Thành phẩm
Cảm quan Viên nén hình trịn, màu vàng,
hai mặt khum trơn Quan sát Thời gian rã ≤ 30 phút Máy thử độ rã
KLTB ± 7,5% Cân phân tích
ĐĐKL ± 7,5% Cân phân tích
Định lượng
Từ 90,0 % - 110,0 % so với hàm lượng ghi trên nhãn. Tính trên khối lượng trung bình viên nhân
Phương pháp HPLC
Độ hòa tan
≥ 80 % (Q) lượng carvedilol so với hàm lượng ghi trên nhãn được hòa tan trong 30 phút.
Phương pháp UV - Vis
2.2.3.3. Khảo sát các công thức viên nén bao phim carvedilol 6,25mg từ cốm chứa HPTR chứa HPTR
- Công thức cốm sấy phun chứa HPTR được chọn ở mục 2.2.2.2 sẽ được dùng để xây dựng công thức viên nén bao phim carvedilol bằng phương pháp dập thẳng, thành phần tá dược độn dùng để điều chỉnh khối lượng viên là tá dược lactose monohydrate 100 mesh (dạng dập thẳng), điều chỉnh để đảm bảo khối lượng viên nhân 160,00 mg, tá dược rã là crospovidon CL với các tỉ lệ khảo sát tương ứng là 1%, 3%, 5%, tá dược trơn bóng magnesi stearate là 1% và sillica, colloidal anhydrous cố định là 0,5% so với khối lượng viên nhân.
- Sau khi kiểm tra các tính chất vật lý và hóa học, viên nén nghiên cứu được bao một lớp màng bao phim cảm quan với dịch bao là Opadry AMB yellow pha trong dung môi cồn - nước như bảng 2.12 với tỉ lệ tăng trọng 3%.
- Thành phần công thức cho cỡ lô khảo sát các tỉ lệ Crospovidon CL là 500 viên được trình bày như bảng 2.12
Bảng 2.12. Các công thức cốm dập viên chứa HPTR Carvedilol
Thành phần viên nhân Hàm lượng 1 viên Khối lượng lô 500 viên
Cốm chứa HPTR (*) - - Crospovidon CL 1%, 3%, 5%, tương ứng 1,60 mg, 4,80 mg, 8,00 mg 1%, 3%, 5%, tương ứng 0.80 g, 2,40 g, 4,00 g Magnesium stearate 1,60 mg 0,80 g
Sillica, colloidal anhydrous 0,8 mg 0,40 g
Lactose monohydrate 100 mesh vđ 160 mg vđ 80,00 g
Tổng KL viên nhân/ lô 160,00 mg 80,00g
Thành phần bao phim
Opadry AMB yellow 4,80mg 14,40g
Ethanol 96% 10,00mg 30,00g
Nước tinh khiết 23,00mg 69,00g
Tổng KL viên bao phim/ lô 164,80mg 501,60g
(*): Dựa theo công thức cốm được chọn ở mục 2.2.2.2, tương ứng hàm lượng cho 1 viên 6,25 mg hoạt chất và 1 lô 500 viên.
Quy trình sản xuất được thể hiện cụ thể như sau:
- Cân nguyên liệu.
- Rây nguyên liệu: lactose Lactose monohydrate 100 mesh, Crospovidone CL qua rây 0,50 mm, Magnesi stearate, Sillica, colloidal anhydrous qua rây 0,25 mm. (1)
- Trộn hoàn tất: Cho cốm chứa HPTR vào (1) trộn đều → cốm hoàn tất. - Dập viên: Dập viên bằng máy dập viên xoay tròn 4 chày.
+ Chày cối: hình trịn, hai mặt khum trơn.
+ Khối lượng viên lý thuyết: 160,00 mg/ viên ± 7,5%. + Tốc độ: 15–20 vòng/phút
+ Độ cứng: 50 –100 N.
Khảo sát các tính chất vật lý và hóa học của viên nén: độ cứng, độ mài mòn, thời gian rã. định lượng, độ hòa tan.
Viên nén sau khi đạt các chỉ tiêu nghiên cứu sẽ tiến hành bao phim với dịch bao opadry AMB yellow với tỉ lệ tăng trọng 3%, được hịa tan trong dung mơi nước RO và Ethanol 96% với tỉ lệ 7:3
- Bao phim: Máy bao phim TCS–1/5/10/20
+ Làm ấm viên: cho viên vào nồi bao, cài đặt nhiệt gió vào 55–60 oC, tốc độ lồng bao 1–2 vòng/phút, làm ấm đến khi nhiệt độ viên nhân đạt 40–45oC
+ Phun dịch bao với các thơng số được kiểm sốt trong q trình như sau:
Bảng 2.13. Thơng số kiểm sốt trong q trình phun dịch bao phim Thơng số kiểm sốt trong q trình u cầu Thơng số kiểm sốt trong q trình Yêu cầu
Nhiệt độ gió vào 65–70 oC
Nhiệt độ viên nhân 45–55oC
Tốc độ quạt hút 1800 –2200 vòng/phút Tốc độ quạt thổi 1000–1200 vịng /phút Áp suất khí phun dịch 2.5–3.5 bar
Tốc độ bơm dịch 4–8 vòng/phút
Tốc độ lồng bao 3–10 vòng/phút
Thời gian phun Phun đến khi hết dịch
+ Sấy khô viên: sau khi phun hết dịch, sấy khô viên ở nhiệt độ 60 –70 oC trong 10 –15 phút, tốc độ lồng bao 2–3 vòng/phút
+ Làm mát viên: tốc độ lồng bao 1–2 vịng/phút, tắt nhiệt, thổi gió đến khi nhiệt độ gió ra ≤ 30 oC thì ngừng máy lấy viên ra.
2.2.3.4. Sơ bộ đánh giá độ ổn định
Viên bao phim sau khi kiểm tra đạt các chỉ tiêu nghiên cứu sẽ được ép vỉ Al/PVC, vỉ 10 viên và được lưu ở điều kiện điều kiện lão hóa cấp tốc (40 ± 20C/ 75 ± 5%). Sau 1-3 tháng, kiểm nghiệm sản phẩm nghiên cứu với các chỉ tiêu: cảm quan, định lượng, độ hòa tan.
2.2.4. Xây dựng cơng thức và quy trình điều chế viên nén bao phim carvedilol 6.25 mg cho cỡ lô (30.000 viên) và đánh giá chất lượng viên thành phẩm
Tiến hành nâng cấp cỡ lô với công thức viên đã được lựa chọn ở mục 2.2.3.3 thực hiện trên 3 lô 30.000 viên, trên thiết bị máy sấy và tạo hạt tầng sôi Solidlab, công suất: 0.30 - 10,00 kg.
Thành phần cơng thức cho cỡ lơ 30.000 viên được trình bày trong bảng Bảng 2.14
Bảng 2.14. Thành phần công thức cỡ lô 30.000 viên Thành phần viên nhân Hàm lượng Thành phần viên nhân Hàm lượng
(mg/viên)
Khối lượng lô 30.000 viên (g)
Carvedilol 6,25 187,50
Polymer (*) - -
Lactose monohydrate 200 mesh 117,00 3510,00
Crospovidon CL (**) - -
Lactose monohydrate 100 mesh (***) vđ vđ
Magnesium stearate 1,60 0.80
Sillica, colloidal anhydrous 0,80 0,40
Ethanol 96% (****) 156,25 4688,00
Tổng KL viên nhân/ lô 160,00 80,00
Thành phần bao phim
Obadry Yellow 4,80 144,00
Nước tinh khiết (****) 10,00 300,00
Ethanol 96% (****) 23,00 690,00
Tổng KL viên bao phim/lô 164,80 224,00
(*): Polymer dựa trên công thức đã được lựa chọn ở mục 2.2.3.3 tương ứng với hàm lượng trong 1 viên và khối lượng trong 1 lô 30.000 viên
(***): Lượng Lactose monohydrate 100 mesh được điều chỉnh để khối lượng viên không thay đổi
(****): Mất trong quá trình bào chế
Quy trình sản xuất được thể hiện theo lưu đồ sản xuất như sau:
Cân, rây: Lactose monohydrate
200 mesh: rây 0.5mm
Sấy phun
Máy Solidlab
Lưu lượng gió vào:50 - 90 oC, Nhiệt gió vào:50 - 55 oC, Nhiệt cốm:38 - 45 oC, Áp suất khí phun: 0.2 - 0.5 bar, Áp suất vi khí hậu: 0.1- 0.3 bar, Tốc độ bơm dịch: 10 -20 vòng/phút
Sửa hạt
Máy rây rung
lưới rây: 0.8mm Trộn hồn tất Máy PDLP-5 Tốc độ 12 vịng/phút, Thời gian: 10; 05 phút Dập viên
Máy dập viên Kamper-4
Độ cứng: 50 – 100 N, Thời gian rã: ≤ 15 phút, Mài mòn: ≤ 1%, Bề dày: 3,50 – 4,50 mm. KLTB : 160,00 mg ± 7,5 Dịch phun: Carvedilol, PVP K30, Ethanol 96% Kiểm tra độ ẩm cốm (105 oC): ≤ 1.5 % Kiểm nghiệm sản phẩm trung gian. Đo chỉ tiêu cốm Kiểm nghiệm sản phẩm trung gian.
Đánh giá chất lượng thành phẩm
- Đánh giá nâng cấp cỡ lô theo tiêu chuẩn xây dựng ở Bảng 2.11.
Bao phim
Máy bao phim TCS-1/5/10/20
Tốc độ lồng bao: 5 – 8 vòng/phút, Tốc độ bơm dịch: 4 – 8 vòng/phút, Tốc độ quạt hút: 1800 -2200 vòng/phút, Tốc độ quạt thổi: 800 - 1200 vòng/phút , Nhiệt viên: 45 – 50 oC: Nhiệt gió vào/: 60 -70 oC
Ép vỉ Máy ép vỉ CP-250 Đóng thành phẩm Lưu độ ổn định Kiểm nghiệm sản phẩm chờ đóng gói Kiểm nghiệm bán thành phẩm Kiểm nghiệm thành phẩm
CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU
3.1. THẨM ĐỊNH QUY TRÌNH ĐỊNH LƯỢNG CARVEDILOL
3.1.1. Thẩm định quy trình định lượng carvedilol trong thử nghiệm độ hòa tan bằng phương pháp UV-Vis bằng phương pháp UV-Vis Tính đặc hiệu Bảng 3.1. Kết quả đo độ hấp thụ UV Lượng cân (mg) Độ hấp thụ (phút) 285 nm 380 nm Hiệu số Dung dịch chuẩn 7,00 0,2197 0,0054 0,2143 Dung dịch thử Bột viên: 164,60 0,2057 0,0052 0,2005 Dung dịch placebo 158,60 0,0055 0,0003 0,0052 Placebo / thử (%) 0,03
- Độ hấp thụ hiệu chỉnh của dung dịch placebo không quá 2,0% so với độ hấp thụ hiệu chỉnh của dung dịch thử
- Kết luận: Phương pháp kiểm nghiệm đạt yêu cầu về tính đặc hiệu.
Tính tương thích hệ thống
- Kết quả: Lượng cân Carvedilol chuẩn: 7,20 mg
Bảng 3.2. Kết quả đo độ hấp thụ UV Độ Độ hấp thụ Đo lần 1 Đo lần 2 Đo lần 3 Đo lần 4 Đo lần