Nguyên liệu Tiêu chuẩn Đơn vị tính Số lƣợng
Beta cyclodextrin TCNSX gam 1135
1,2-butylen oxid TCNSX ml 702 NaOH TCNSX gam 150 Nƣớc cất TCNSX ml 10.000 HCl 1 M TCNSX ml 2000 Aceton TCNSX ml 20.000 Ethanol 99,5% TCNSX ml 2.000
Sơ đồ quy trình tổng hợp 2-hydroxybutyl-β-cyclodextrin: (phụ lục 23, mục 3) Các bƣớc tiến hành nhƣ sau:
Bước 1. Tổng hợp 2-hydroxybutyl-β-cyclodextrin: cân các chất tham gia phản ứng theo
cơng thức. Hịa tan NaOH trong nƣớc, cho tiếp βCD vào hịa tan (đun nóng nếu cần), điều chỉnh đến nhiệt độ phản ứng. Khuấy hồi lƣu trong 2 giờ, thêm từng lƣợng nhỏ 1,2-butylen oxid trong khoảng 90 phút đến hết, khuấy tiếp theo thời gian đã định. Kết thúc phản ứng.
Bước 2. Tinh chế sản phẩm: dùng HCl 1 M để trung hòa dung dịch phản ứng đến pH
trung tính, cơ loại nƣớc ở 80 oC dƣới áp suất giảm đến thể chất sánh nhƣ siro. Thêm ethanol tuyệt đốivừa đủ để hòa tan, khuấy trong 30 phút, lọc loại NaCl, thêm aceton vào khuấy trong 30 phút ở nhiệt độ 0 - 5 oC, lọc thu hồi aceton. Cất phân đoạn thu hồi aceton để dùng tiếp các lần sau. Cắn hòa trong lƣợng tối thiểu ethanol tuyệt đốivà thêm aceton lặp lại nhiều lần đến khi cắn tạo bột tơi. Sấy khô ở 80 oC dƣới áp suất giảm đến độ ẩm qui định. Kiểm nghiệm sản phẩm.
Bước 3. Đóng gói và dán nhãn: Đóng gói trong túi polyethylen hàn kín, dán nhãn đúng
qui định, bảo quản ở nhiệt độ phòng.
3.3. ĐIỀU CHẾ PHỨC RUTIN-HYDROXYPROPYL-β-CYCLODEXTRIN (R- HPβCD) HPβCD)
3.3.1. Thẩm định qui trình định lƣợng rutin trong phức R-HPβCD
Tính chọn lọc: mẫu thử có phổ hấp thụ tử ngoại và bƣớc sóng hấp thụ cực đại (362,5 ± 1
nm và 375 ± 1 nm) giống mẫu chuẩn.
Mẫu chuẩn và mẫu thử có tỷ số A375/A362,5 nhỏ hơn 0,879.
Dung dịch HPβCD và mẫu kiểm tra khơng có bƣớc sóng hấp thụ cực đại tại 362,5 ± 1 nm và 375 ± 1 nm, độ hấp thụ của dung dịch HPβCD và mẫu kiểm tra tại bƣớc sóng hấp thụ cực đại 362,5 ± 1 nm nằm trong khoảng ± 0,001.
Phƣơng pháp đo phổ UV định lƣợng rutin trong phức R-HPβCD đạt tính chọn lọc, (phụ lục 6, hình PL.6.1).
Khoảng tuyến tính
Bảng 3.27. Tƣơng quan giữa nồng độ và độ hấp thụ phổ UV của dung dịch rutin chuẩn ở
362,5 nm. Nồng độ (µg/ml) 2,5 5 10 15 20 25 30 35 40 Độ hấp thụ (362,5 nm) 0,084 0,162 0,317 0,466 0,625 0,781 0,928 1,087 1,243
Biểu đồ 3.9. Tƣơng quan giữa nồng độ và độ hấp thụ phổ UV của dung dịch rutin chuẩn ở
362,5 nm.
Phƣơng trình tuyến tính: ŷ = 0,0309x + 0,0069 với R2 = 1. Phƣơng trình tƣơng thích với hệ số B và B0 có ý nghĩa.
Độ chính xác