- Chỉ tiêu theo dõi:
KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THAỎ LUẬN
3.4.4. Ảnh hưởng của nhiệt ựộ trong quá trình ựồng nuôi cấy tới hiệu quả chuyển gen
22,33%. Trong ựó, tỷ lệ biểu hiện tạm thời của gen Gus ở mức thời gian 60phút và 80 phút cao hơn ở 20 phút và 40 phút. Ở mức thời gian 20 phút tỷ lệ biểu hiện tạm thời của gen Gus là thấp nhất chỉ 12,67%, trong khi ở 80 phút tỷ lệ biểu hiện tạm thời của gen Gus ựạt giá trị cao nhất (22,33%). Tuy nhiên, khi kéo dài thời gian ựến 100 phút thì tỷ lệ biểu hiện tạm thời của gen Gus có xu hướng giảm.
Qua kết quả nghiên cứu chúng tôi kết luận thời gian lây nhiễm tối ưu cho hiệu quả chuyển gen là 80 phút.
3.4.4. Ảnh hưởng của nhiệt ựộ trong quá trình ựồng nuôi cấy tới hiệu quả chuyển gen gen
để tối ưu hóa nhiệt ựộ cho quá trình chuyển gen, chúng tôi tiến hành thắ nghiệm ở 4 mức nhiệt ựộ khác nhau trong ựiều kiện mật ựộ tối ưu của Ạtumefaciens ựược tìm thấy trong phần trước (OD600 = 0,5).
Bảng 3.10: Ảnh hưởng của nhiệt ựộ trong quá trình ựồng nuôi cấy tới hiệu quả chuyển gen
CT Nhiệt ựộ (0C) Số mẫu nhuộm Gus Số mẫu có ựốm xanh Tỷ lệ mẫu biểu hiện tạm thời (%) 1 22 300 29 9,67 2 24 300 40 13,33 3 26 300 52 17,33 4 28 300 0 0,00
Kết quả ở Bảng 3.10 cho thấy hiệu quả của quá trình ựồng nuôi cấy bị ảnh hưởng bởi nhiệt ựộ. Trong 4 mức nhiệt ựộ khác nhau, tỷ lệ mẫu biểu hiện tạm thời của gen Gus ở nhiệt ựộ 240C và 260C cao hơn so với ở nhiệt ựộ 220C và 280C. Tỷ lệ mẫu biểu hiện tạm thời của gen Gus ở nhiệt ựộ 260C cao hơn ở 240C. Tuy nhiên khi nâng nhiệt ựộ ở mức 280C thì không có biểu hiện tạm thời của gen Gus (tỷ lệ mẫu biểu hiện tạm thời của gen Gus là 0%). Do ựó, chúng tôi kết luận nhiệt ựộ tối ưu cho quá trình ựồng nuôi cấy là 260C.