Phần 4 Kết quả và thảo luận
4.3. Biến đổi một số chỉ tiêu lâm sàng, vi khuẩn học trong bệnh viêm tử cung
TRONG BỆNH VIÊM TỬ CUNG Ở BÕ SỮA
4.3.1. Kết quả xác định sự thay đổi một số chỉ tiêu lâm sàng khi bò sữa bị viêm tử cung viêm tử cung
Chúng tôi tiến hành theo dõi sự khác nhau về một số chỉ tiêu lâm sàng của bị khoẻ mạnh bình thường và bị bị viêm tử cung (bảng 4.8).
Khi bò bị viêm tử cung, các chỉ tiêu sinh lý lâm sàng có sự thay đổi rõ rệt. Thân nhiệt, tần số mạch đập và tần số hô hấp của bò viêm tử cung đều tăng lên so
với bò bình thường. Cụ thể thân nhiệt tăng 1,690C, tần số mạch đập tăng 24,66 lần/phút và tần số hô hấp tăng 11,79 lần/phút. Sự khác nhau giữa bò bị viêm tử cung và bò khỏe mạnh Thân nhiệt, tần số mạch đập và tần số hô hấp là khác nhau rõ rệt (P<0,05). Theo tác giả Hồ Văn Nam và cs. (1997), tần số mạch đập, tần số hô hấp và thân nhiệt của bò khỏe lần lượt là 30-70 lần/phút, 10-30
lần/phút và 37,5-39,50C. Như vậy kết quả nghiên cứu của chúng tôi phù hợp với
các nghiên cứu của Hồ Văn Nam và cs. (1997). Khi sốt nhiệt độ cao ảnh hưởng đến nốt Keith - Flack trên tim hoặc do các loại độc tố tác dụng lên cơ quan thụ cảm trong tim, làm tim đập nhanh kéo theo tần số mạch cũng tăng nhanh, khi kiểm tra qua trực tràng cho thấy các phản xạ co cơ tử cung của bị bệnh giảm hẳn so với bị bình thường, bị bị viêm tử cung ln có phản ứng đau đớn và có dịch viêm chảy khi tác động vào tử cung.
Bảng 4.7. Kết quả theo dõi sự thay đổi một số chỉ tiêu lâm sàng của bò mắc bệnh viêm tử cung
Chỉ tiêu theo dõi
Bò khoẻ (n = 60) x m X ± Bò bị viêm tử cung (n = 60) x m X ± Chênh lệch giữa bò khỏe và bò bệnh Thân nhiệt (0 C) 38,85b ± 0,32 40,54a ± 0,50 1,69 Tần số mạch (lần/phút) 70,77b ± 2,66 95,43a± 3,14 24,66 Tần số hô hấp (lần/phút) 32,58b ± 4,12 44,37a± 2,86 11,79
Phản ứng co cơ của tử cung Rõ Giảm hẳn -
Phản ứng đau Không đau Đau rõ -
Dịch viêm Khơng có Có dịch chảy ra từ cơ quan sinh dục -
Thu nhận thức ăn Bình thường Giảm hoặc bỏ ăn
Thu nhận nước uống Bình thường Tăng lên
Trong cùng một hàng giá tr trung bình có chữ cái khác nhau là khác nhau có ý nghĩa thống kê (P<0,05)
Nhiều nghiên cứu chỉ ra rằng viêm tử cung làm tăng khoảng thời gian có
chửa trở lại sau khi đẻ (Fourichon et al., 2000). Những bò sữa bị viêm tử cung
thường thu nhận thức ăn kém hơn những bị khơng bị viêm tử cung (Huzzey et
al., 2007) và do đó làm giảm sản lượng sữa (Sheldon et al., 2006). Mức độ suy
giảm sản lượng sữa thường chỉ thấy ở bò đẻ nhiều lứa, biến động từ 2-13 kg/ngày, kéo dài trong khoảng thời gian từ 2-20 tuần (Overton and Fetrow, 2008; Wittrock et al., 2011). Như vậy, kết quả nghiên cứu của chúng tôi tương đối phù hợp với các kết quả nghiên cứu trên.
Hình 4.5. Bị sữa bị bệnh viêm tử cung
Trên thực tế cho thấy: bò bị viêm tử cung thường đi lại uể oải, ăn uống rất kém, dịch viêm chảy ra có màu trắng hoặc màu trắng xám, có lẫn những mảnh tổ chức chết, mùi tanh. Có con dịch chảy ra đục, lợn cợn, màu hồng hoặc nâu đỏ lẫn nhiều mảnh tổ chức hoại tử, bốc mùi tanh, thối khó chịu. Ngồi ra cịn xuất hiện dịch màu nâu rỉ sắt, lẫn nhiều mủ và mảnh tổ chức, có mùi thối khắm khó chịu. Dịch viêm chảy ra nhiều hơn khi con vật nằm xuống hoặc vận động khi chăn thả.
4.3.2. Kết quả xác định sự biến đổi về tổng số vi khuẩn hiếu khí có trong dịch tử cung của bò sữa dịch tử cung của bò sữa
Với mục đích tìm hiểu về tình trạng nhiễm khuẩn trong bệnh viêm nội mạc
tử cung, chúng tôi đã tiến hành lấy mẫu (3 - 5 ml/mẫu) dịch tử cung âm đạo của bị sữa bình thường sau đẻ 12 - 24 giờ và lấy mẫu (3 - 5 ml/mẫu) dịch tử cung âm đạo của bò sữa bị viêm tử cung để xét nghiệm tổng số vi khuẩn trong tử cung bị sữa và tình trạng bội nhiễm của nó khi tử cung bị viêm.
Kết quả xét nghiệm mẫu dịch tử cung ở bò sữa tại huyện Vĩnh Tường (Vĩnh Phúc) gồm 12 mẫu dịch tử cung của bị sữa bình thường sau đẻ 12 - 24 giờ và 4 mẫu tử cung của bò sữa bị viêm; ở huyện Ba Vì (Hà Nội) gồm 16 mẫu dịch tử cung của bị sữa bình thường sau đẻ 12 - 24 giờ và 7 mẫu tử cung của bò sữa bị viêm.
Kết quả xác định sự biến đổi về tổng số vi khuẩn hiếu khí có trong dịch tử cung của bị sữa được thể hiện thơng qua bảng 4.8.
Bảng 4.8. Tổng số vi khuẩn hiếu khí có trong dịch tử cung của bò
Địa điểm
mẫu Loại mẫu
Số lƣợng mẫu
Tổng số (CFU/ml) (X ± SD)
Vĩnh Phúc Dịch tử cung của bị khơng bị viêm 12 (6,23 ± 2,97) x 106
Dịch tử cung của bò bị viêm 4 (7,11 ± 2,71) x 108
Hà Nội Dịch tử cung của bị khơng bị viêm 16 (7,85 ± 2,77) x 10
6
Dịch tử cung của bò bị viêm 7 (8,79 ± 2,89) x 108
Tổng số VK hiếu khi trong dịch tử cung của bị khơng bị viêm (7,04 ±2,95) x 106
Tổng số VK hiếu khí trong dịch tử cung của bị bị viêm (7,95±2,71) x 108
Qua bảng 4.8 cho thấy: Tổng số vi khuẩn hiếu khí có trong dịch viêm tử cung tăng lên gấp 112,93 lần so với trong dịch tử cung của bị sữa khơng bị viêm (7,95±2,71) x 108
so (7,04±2,95) x 106CFU/ml. Tổng số vi khuẩn hiếu khí trong
dịch tử cung của bị bị viêm tử cung và khơng bị viêm tử cung là khác nhau rất rõ rệt (P<0,001).
Theo tác giả Pulfer and Riese (1991), việc các vi khuẩn xuất hiện trong tử cung của bò sau khi đẻ không nhất thiết phải được coi là bất bình thường. Vi khuẩn có thể có mặt trong mơi trường tử cung của bò sau khi đẻ ở trên 95% trường hợp (Sheldon and Dobson, 2004), nhưng điều đó khơng đồng nghĩa với
việc tử cung bị viêm vì thực tế tỉ lệ bị bị viêm tử cung sau đẻ được công bố là nhỏ hơn rất nhiều so với tỉ lệ bị có chứa vi khuẩn trong tử cung sau khi đẻ (Overton and Fetrow, 2008; Dubuc et al., 2010).
Theo Nguyễn Văn Thanh và cs. (2016), khi âm đạo và tử cung bị viêm thì số lượng vi khuẩn trong dịch viêm tăng lên gấp nhiều lần so với trong dịch tử cung sau đẻ ở bị khơng bị viêm, thể hiện q trình nhiễm trùng bội nhiễm. Số lượng của vi khuẩn sẽ giảm nhanh sau khi đẻ và thơng thường thì sau 3-4 tuần sau đẻ, vi khuẩn sẽ được loại bỏ hết khỏi mơi trường tử cung của bị, hoặc chỉ xuất hiện với một số lượng rất thấp. Chỉ khi nào việc loại bỏ vi khuẩn ra khỏi tử cung bị trở ngại, số lượng của chúng tăng lên nhiều lần thì viêm tử cung mới xảy ra.
Điều này phù hợp với kết quả nghiên cứu của chúng tôi khi mà số lượng vi khuẩn trong dịch tử cung bị viêm tăng lên gấp nhiều lần số lượng vi khuẩn có trong dịch tử cung của bị khơng bị viêm.
Ghi chú:
2. Ph n ứng (-): d ch tử cung bị sau đẻ bình thường
4. Ph n ứng(+): d ch tử cung bò sau đẻ mắc viêm tử cung mức độ nh
1, 3. Ph n ứng(++): d ch tử cung bò sau đẻ mắc viêm tử cung mức độ trung bình 5. Ph n ứng(+++): d ch tử cung bò sau đẻ mắc viêm tử cung mức độ nặng
Hình 4.7. Kết quả thử phản ứng WST phát hiện bệnh viêm tử cung 4.3.3. Kết quả xác định sự biến đổi về thành phần vi khuẩn hiếu khí có trong 4.3.3. Kết quả xác định sự biến đổi về thành phần vi khuẩn hiếu khí có trong dịch viêm tử cung của bò sữa
Các mẫu bệnh phẩm được tiến hành phân tích để tìm ra sự có mặt của các loại vi khuẩn trong dịch tử cung, từ đó thấy được sự biến đổi về thành phần của các vi khuẩn trong tử cung của bị bị viêm và khơng bị viêm tử cung. Kết quả được thể hiện ở bảng 4.9.
Bảng 4.9. Tần suất xuất hiện của một số vi khuẩn hiếu khí trong dịch tử cung
VK
Dịch tử cung của bị khơng bị viêm tử cung (n = 50) Dịch tử cung của bò bị viêm tử cung (n = 50) n + Tỷ lệ (%) n + Tỷ lệ (%) E. coli 0 0 0 0 Salmonella 0 0 0 0 Staphylococcus spp 12 24,00 50 100 Streptococcus spp 8 16,00 50 100
Ghi chú: n +: Số lượng mẫu phát hiện vi khuẩn
Kết quả cho thấy, tất cả các mẫu dịch tử cung ở bị khơng bị viêm tử cung và bị bị viêm tử cung đều khơng có E.coli và Salmonella. Đối với dịch tử cung của bị khơng bị viêm, tỷ lệ mẫu phát hiện thấy Staphylococcus và Streptococcus lần lượt là 24,00% và 16,00%. Đối với dịch viêm tử cung, Staphylococcus và Streptococcus
được phát hiện ở 100% mẫu bệnh phẩm.
Một số kết quả nghiên cứu khác cho thấy ngoài hai loại vi khuẩn trên thì
E. coli, Salmonella, Brucella, roi trùng cũng có thể xuất hiện ở trong dịch tử cung
âm đạo của bò sữa (Nguyễn Văn Thanh, 2007). Trong nghiên cứu của nhóm tác giả trên, mẫu bệnh phẩm được lấy từ các bò sữa loại thải, được giết mổ ở các lò mổ. Những bò sữa này thường là những con mắc bệnh, không chửa đẻ, viêm đường sinh dục nặng nên việc có các lồi vi khuẩn khác như E. coli, Salmonella, Brucella, roi
trùng trong đường sinh dục là có cơ sở.
Theo tác giả Pulfer and Riese (1991), ở thời điểm ngay sau khi đẻ, các vi
khuẩn thường có mặt trong dịch tử cung đó là Actinomyces pyogenes,
Streptococcus spp, Staphylococcus spp, Clostridium spp, coliforms và vi khuẩn
Gram âm yếm khí. Trong nghiên cứu này, việc chỉ tìm thấy Streptococcus spp và
Staphylococcus spp mà khơng tìm thấy vi khuẩn Gram âm yếm khí, Clostridium spp có thể là do mẫu dịch tử cung được lấy ở thời điểm 24-48h sau đẻ và nghiên
cứu này chỉ mới tiến hành đối với các vi khuẩn hiếu khí. Việc khơng tìm thấy các vi khuẩn khác có thể do sự khác nhau về mơi trường chăn ni và khí hậu.
Nghiên cứu trên 51 mẫu sinh thiết tử cung bò sữa, Gani et al. (2008) thấy
rằng có đến 62,2% (23/37) mẫu từ bị khó chửa có xuất hiện vi khuẩn, trong khi đó ở bị có hoạt động chửa đẻ bình thường thì tỉ lệ này chỉ là 28,6% (4/14). Đối với mẫu lấy từ bò bệnh, Staphylococcus là vi khuẩn thường gặp nhất với tỉ lệ 37,84% (14/37) số mẫu, kế đến là Bacillus trong 35,14% (13/37) số mẫu, E. coli trong
que trong 24,32% (9/37). Tác giả trên cũng cho biết Pseudomonas và vi khuẩn
Gram âm dạng que chỉ xuất hiện ở những trường hợp bò bị viêm mủ nặng.
Tác giả Dolezel et al. (2010) cho biết, ở trong dịch tử cung sau đẻ của bị khơng có triệu chứng viêm tử cung thì Bacillus spp là vi khuẩn xuất hiện nhiều nhất chiếm 46% kế đến là E. coli chiếm 23% và khơng có Staphylococcus và
Arcanobacterium pyogenes. Tuy nhiên, ở bị sữa có triệu chứng viêm nhẹ thì Arcanobacterium pyogenes xuất hiện ở 44%, khơng tìm thấy E. coli và
Staphylococcus xuất hiện ở 13% mẫu bệnh phẩm. Đặc biệt khi bò bị viêm tử
cung nặng thì có tới 75% mẫu bệnh phẩm xuất hiện Arcanobacterium pyogenes các vi khuẩn Bacillus spp, E. coli, Staphylococcus xuất hiện với tỉ lệ lần lượt là 25,00%, 25,00% và 13,00%. Trong nghiên cứu trên, tác giả kết luận rằng vi khuẩn Arcanobacterium pyogenes là yếu tố quan trọng gây ra bệnh viêm tử cung ở bò sữa.
Nghiên cứu trên bò bị viêm nội mạc tử cung, tác giả Moges et al. (2013)
cho biết 91,66% mẫu bệnh phẩm bị nhiễm một trong các vi khuẩn S. pyogenes,
E. coli hoặc Streptococcus spp. Trong đó tỉ lệ mẫu dịch tử cung có chứa S. pyogenes là 25%, E. coli là 20,8%, Streptococcus spp là 20,8%. S. aureus là
12,5%, Klebsiella spp là 8,3% và C. fetus là 4,2%.
Theo Nguyễn Văn Thanh và cs. (2016), vi khuẩn Staphylococcus spp. và
Streptococcus spp. xuất hiện ở 100% mẫu dịch viêm tử cung bò và trong dịch tử
cung của bị khơng bị viêm, tỷ lệ mẫu phát hiện thấy Staphylococcus spp. và
Streptococcus spp. đều là 20,00%.
Hình 4.8. Hình ảnh phân lập Streptococcus và Staphylococcus trên mơi trƣờng thạch máu
Hình 4.9. Phân lập Salmonella trên mơi trƣờng SS agar
Hình 4.10. Phân lập E.coli trên mơi trƣờng EM agar
4.4. TÍNH MẪN CẢM VỚI KHÁNG SINH CỦA MỘT SỐ VI KHUẨN HIẾU KHÍ ĐƢỢC PHÂN LẬP TỪ DỊCH TỬ CUNG BÕ SỮA
4.4.1. Kết quả xác định tính mẫn cảm của các vi khuẩn phân lập đƣợc từ dịch tử cung bò sữa với một số thuốc kháng sinh thông dụng
Vi khuẩn Staphylococcus và Streptococcus phân lập từ 15 mẫu dịch tử cung của bò bị viêm tử cung được tiến hành làm kháng sinh đồ nhằm đánh giá tính mẫn cảm của của chúng với một số thuốc kháng sinh, kết quả được trình bày tại bảng 4.10.
Trong tổng số 14 loại kháng sinh được lựa chọn để thử tính mẫn cảm của 2
loại vi khuẩn Staphylococcus và Streptococcus thì Norfloxacin là loại kháng sinh
có tính mẫn cảm cao nhất đối với cả 2 loại vi khuẩn: 86,67% (13/15) đối với
Staphylococcus và 93,33% (16/17) đối với Streptococcus. Hai loại vi khuẩn trên
cũng mẫn cảm cao với Amoxicillin, đều ở mức 86,67%. Hai loại kháng sinh Tetracycline và Kanamycin cũng cho tỉ lệ tính mẫn cảm cao (≥80%) đối với 2 loại vi khuẩn này. Nghiên cứu của chúng tôi giống với một số công bố trước đây. Nguyễn Văn Thanh và cs. (2007) nghiên cứu thử nghiệm điều trị bệnh viêm tử cung bò cho biết Norfloxacin là một trong những thuốc có tác dụng tốt trong điều trị bệnh viêm tử cung ở bò (bảng 4.10).
Trong một số nghiên cứu khác, Gani et al. (2008) cũng cho biết các vi
khuẩn trong tử cung của bị sữa khơng bị viêm và bị sữa bị viêm tử cung bao gồm Staphylococcus spp, Bacillus spp, E. coli và Pseudomonas spp mẫn cảm cao
với các kháng sinh Amoxicillin, Oxytetracycline và Ciprofloxacin. Moges et al.
cung mẫn cảm cao với các kháng sinh Sulphamethaxazole, Polymixin, Tetracycline, Gentamycin và Cefoxitin. Trong khi đó vi khuẩn Streptococcus spp mẫn cảm cao với tất cả các kháng sinh được thử đó là Sulphamethaxazole, Polymixin, Ampicillin, Oxacillin, Gentamycin, Cefoxitin và Vancomycin.
Bảng 4.10. Tính mẫn cảm của vi khuẩn Staphylococcus spp và Streptococcus
spp phân lập đƣợc từ dịch viêm tử cung bò sữa với một số thuốc kháng sinh
VK KS Staphylococcus spp Streptococcus spp n + Tỷ lệ (%) n + Tỷ lệ (%) Amoxicillin 13 86,67 13 86,67 Ceftiofur 11 73,33 12 80 Enrofloxacin 7 46,67 5 33,33 Norfloxacin 13 86,67 14 93,33 Doxycycline 4 26,67 3 20 Tetracycline 13 86,67 12 80 Streptomycin 0 0 0 0 Kanamycin 12 80 12 80 Colistin 0 0 0 0 Lincomycin 0 0 0 0 Erythromycin 0 0 1 6,67 Tylosin 0 0 1 0 Floxy 2 13,33 2 13,33 Tiamulin 3 20 0 0
Ghi chú: n +: Số lượng mẫu mẫn c m với kháng sinh
Sự khác nhau về tính mẫn cảm với kháng sinh của vi khuẩn giữa nghiên cứu của chúng tôi với các nghiên cứu trước đây cho thấy sự kháng kháng sinh của vi khuẩn ở các địa điểm nghiên cứu khác nhau có khác nhau. Sự khác nhau này phụ thuộc vào sự biến đổi của vi khuẩn gây bệnh trước việc sử dụng kháng sinh trong phòng và điều trị bệnh cho gia súc. Hơn nữa, điều này cho thấy việc cần thiết phải làm các nghiên cứu về vi khuẩn học và kháng sinh đồ đối với các vi khuẩn trong dịch tử cung sau đẻ trước khi có thể đưa ra các phác đồ điều trị phù hợp.
4.4.2. Kết quả xác định tính mẫn cảm của tập đồn vi khuẩn có trong dịch viêm đƣờng sinh dục bò sữa với một số thuốc kháng sinh viêm đƣờng sinh dục bò sữa với một số thuốc kháng sinh
Chúng tôi đã làm kháng sinh đồ trực tiếp với cả tập đồn vi khuẩn có trong dịch viêm tử cung của bò mắc bệnh để chọn thuốc kháng sinh hiệu quả nhất
trong điều trị bệnh viên tử cung ở bị sữa. Từ đó, làm căn cứ để so sánh hiệu quả điều trị bệnh viêm tử cung ở bò sữa bằng thảo dược và bằng kháng sinh. Kết quả được trình bày ở bảng 4.11.
Từ kết quả xác định được ở bảng 4.11 và dựa vào bảng đánh giá đường