Chương 2 PHƯƠNG PHÁP
2.6. Phương pháp phân lập vi tảo biển bằng micropipette
Mục đích của việc phân lập bằng micropipet [21] là hút một tế bào từ mẫu,
đặt tế bào vào một giọt vô trùng mà không làm tổn thương tế bào, lấy lại tế bào và
chuyển nó vào giọt vơ trùng thứ hai. Q trình này được lặp lại cho tới khi tế bào tảo đơn được giải phóng khỏi các vi sinh vật nguyên sinh khác và cho vào môi
trường nuôi cấy thích hợp. Q trình này làm cân bằng giữa hai nhân tố: tế bào bị
tổn thương quá mức do sai sót khi thao tác và phân lập hồn toàn một tế bào đơn. Với những tế bào khỏe thì việc thao tác lặp đi lặp lại có thể không gây tổn thương
đến tế bào, tuy nhiên, đối với những tế bào nhạy cảm tổn thương tế bào là một vấn đề quan trọng. Sự phân lập bằng micropipette thường được hiện với pipette Pasteur
hay kính mao dẫn.
Kính hiển vi là dụng cụ cần thiết cho việc quan sát và phân lập tế bào. Mẫu chứa các lồi đích được đặt trên tiêu bản lõm, các giọt vô trùng được nhỏ lần lượt vào các ô lõm kế tiếp của tiêu bản trước khi quá trình phân lập được tiến hành. Một quả bóp cao su nhỏ mềm linh hoạt được gắn vào đầu trên của pipette, đầu micropipette hút nột lượng nhỏ nước vơ trùng có tác dụng như một dung dịch đệm.
Đặt đầu của micropipette gần với sinh vật đích, bóp nhẹ quả bóp để cho hoạt động
mao dẫn kéo tế bào lên và vào trong đầu micropipette. Sau khi bắt giữ tế bào thành
công, đầu của micropipette được di chuyển khỏi mẫu và được ngâm vào một giọt vô
giọt vơ trùng khác khi quan sát thu hồn toàn được tế bào đơn và sạch thì chuyển vào các lọ penicillin chứa mơi trường ni cấy trong điều kiện thích hợp.