CHƢƠNG 2 VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP
2.1. VẬT LIỆU VÀ HÓA CHẤT
2.1.3. Các dung dịch và đệm
Các loại dung dịch và đệm dùng cho thí nghiệm đƣợc pha theo hƣớng dẫn của các bài thí nghiệm chuẩn có thành phần, nồng độ đƣợc tóm tắt trong bảng 2.2.
Bảng 2.2. Dung dịch sử dụng trong nghiên cứu
Dung dịch Thành phần, nồng độ Dung dịch APS 10% ammonium persulfate
Dung dich Bradford gốc 100 ml 95% ethanol, 350 mg coomassie brilliant blue G250, 200 ml 88% phosphoric acid
Dung dịch Bradford working
425 ml H2O, 15 ml 95% ethanol, 30 ml 88% phosphoric acid, 30 ml dung dịch bradford gốc
Dung dịch A Đệm 1,5 M tris HCl, pH 8,8 Dung dịch B Đệm 0,5 M tris HCl, pH 6,8
Dung dịch C 30% acrylamide, 0,8% bis- acrylamide
Dung dịch D 10% SDS, 10 mM EDTA
Dung dịch imidazole 3 M imidazole, 500 mM NaCl, 20 mM sodium phosphate buffer, pH 6,0
Dung dịch I 50 mM tris HCl, 10 mM EDTA, pH 8,0 Dung dịch II 0,2 N NaOH, 1% SDS
Dung dịch III 3 M potassium acetate, pH 5,5
Dung dịch IV 2% triton X100; 1% SDS; 100 mM NaCl; 10 mM tris HCl; 1 mM EDTA
Dung dịch 24:1 24 chloroform : 1 isopropanol (v/v) Dung dịch nhuộm DNA 0,1 ug/ml ethidium bromide
Dung dịch nhuộm PAGE 0,1% (w/v) coomassie brilliant blue; 30% (v/v) methanol; 10% (v/v) acid acetic
Dung dịch tẩy PAGE 30% (v/v) methanol, 10% (v/v) acid acetic
Dung dịch A1 50% methanol; 5% acid acetic; 0,037% formaldehyde Dung dịch A2 50% methanol
Dung dịch A4 0,1% AgNO3
Dung dịch A5 5% Na2CO3+ 0,037 % Formaldehyde Dung dịch A6 5% acid acetic
Đệm điện di Protein 20 mM tris HCl; 192 mM Glycine; 0,1% SDS, pH 8,8 Đệm 5x tra mẫu protein 0,05% brommophenol blue; 50% glycerol; 0,313 M tris
HCl, pH 6,8; 10% SDS; 10% β-mercaptoethanol Đệm TE 10 mM tris HCl, 1 mM EDTA, pH 8,0
Đệm 10x TBE 20 mM EDTA, 900 mM tris borate, pH 8,0
Đệm 6x tra mẫu DNA 0,09% brommophenol blue; 0,09% xylene xyanol (FF), 60% glycerol
Đêm rửa DNA 70% ethanol
Đệm gắn Native Binding Buffer (NBB)
50 mM NaH2PO4, 0,5 M NaCl, 10 mM imidazole, pH 8,0
Đệm rửa Native Wash Buffer (NWB)
50 mM NaH2PO4, 0,5 M NaCl, 20 mM imidazole, pH 8,0
Đệm thôi Native Elution Buffer (NEB)
50 mM NaH2PO4, 0,5 M NaCl, 250 mM imidazole, pH 8,0