Chương 2 : NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.4.1. Phương pháp tách chiết
Nguyên lý: Chiết xuất là phương pháp sử dụng dung môi để lấy các chất tan ra
khỏi các mô thực vật. Sản phẩm thu được của quá trình chiết xuất là một dung dịch của các chất hịa tan trong dung mơi. Các hợp chất chuyển hóa thứ cấp trong thực vật có độ phân cực khác nhau, vì vậy dung mơi dùng cho các q trình chiết được lựa chọn với các đặc điểm là dễ thấm vào dược liệu, hòa tan chọn lọc (hịa tan nhiều hoạt chất, ít tạp chất), dễ dàng bay hơi khi cần cô đặc dịch chiết và có tính trơ về mặt hóa học. Về nguyên tắc, để chiết được các chất phân cực (Flavonoids, alkaloids, glycoside…) thì phải sử dụng các dung môi phân cực. Qua khảo sát một số dung mơi có độ phân cực tăng dần bao gồm n-hexane, ethyl actate, ethanol, methanol, dung môi methanol được chọn làm dung môi chiết do đáp ứng đầy đủ các yêu cầu nêu trên.
Mục đích: Tách chiết, thu các thành phần chính từ nụ hoa hịe khơ bằng phương
pháp ngâm chiết. Với mục đích này, chúng tơi khơng tiến hành nghiền nhỏ nụ hoa hòe để tránh việc thu quá nhiều tạp chất trong quá trình chiết.
Quy trình:
10 g nụ hoa hịe khơ được ngâm chiết trong bình tam giác với 100 ml dung môi methanol, tỉ lệ mẫu/dung môi là 1:10 (đảm bảo khả năng chiết các hợp chất chính) trong 24 giờ, thỉnh thoảng lắc đều để tăng sự khuếch tán.
Lọc thu dịch chiết bằng giấy lọc Whatman và phễu lọc, loại bỏ bã, thu được dịch chiết methanol nụ hoa hịe khơ.
Cất quay dung mơi methanol có trong dịch chiết với hệ thống cô quay chân không Eyela – Nhật Bản, nhiệt độ 70oC, tốc độ quay 400 vòng/phút cho đến khi thu được cao khơ. Làm khơ cao bằng khí N2 lỏng. Lưu trữ cao khơ này trong bình thủy tinh ở 4oC.
Đánh giá kết quả: Tiến hành cân khối lượng cao khô thu được, so sánh với khối
lượng nụ hoa hịe khơ mang đi chiết xuất thu được tỉ lệ cao khô/nguyên liệu.