Phương pháp chiết lỏng – lỏng

Một phần của tài liệu (LUẬN văn THẠC sĩ) nghiên cứu khả năng ức chế hình thành β amyloid gây bệnh alzheimer bởi một số hoạt chất từ hoa hòe (sophora japonica l ) (Trang 36 - 37)

Chương 2 : NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

2.4.4. Phương pháp chiết lỏng – lỏng

Nguyên tắc: Chiết lỏng-lỏng, còn được gọi là tách pha, là một quá trình tách bao

gồm việc chuyển chất tan từ một dung môi này sang dung môi khác, hai dung mơi khơng hịa tan hoặc hịa tan một phần với nhau. Thơng thường, một trong các dung môi là dung mơi phân cực và dung mơi cịn lại là dung môi không phân cực.

Trong các quá trình chiết tách, chiết lỏng-lỏng bao gồm bước pha trộn (tiếp xúc), bước tách pha trong một dụng cụ chiết như phễu chiết, bình chiết. Trong bước pha trộn, cần lắc mạnh và đều để tạo điều kiện thuận lợi cho việc chuyển giao chất chiết từ dung môi này sang dung môi khác. Chiết lỏng lỏng là một phương pháp hiệu quả để tách hoặc loại bỏ các hợp chất không mong muốn ra khỏi hỗn hợp trong các phân cứu và phân tích hóa học. Phương pháp này được sử dụng rộng rãi vì sự đơn giản và tiện lợi của nó [10].

Mục đích: Dựa vào khả năng tan khác nhau của các chất trong các dung và sự

phân lớp của các dung môi, thu các phân đoạn chất và chất kết tủa khi tiến hành chiết lỏng lỏng.

Quy trình:

 10 g nụ hoa hịe khơ được ngâm chiết trong 100 ml methanol trong 24 giờ. Thu được 100 ml dịch chiết methanol.

 Chuyển 100 ml dịch chiết methanol sang phễu chiết quả lê, thêm 100 ml n- hexane, lắc đều, sau khi dung dịch trong phễu phân lớp, tiến hành tách phần dịch phía dưới và phía trên của phễu.

 Với phần dịch phía dưới, cơ quay với hệ thống cô quay chân không Eyela – Nhật Bản ở 70oC, tốc độ 450 vòng/phút đến khi thu được 10 ml dịch chiết đặc.  Thêm 100 ml Ethyl acetate vào bình chứa 10 ml dịch chiết đặc, thấy xuất hiện

kết tủa.

 Dùng giấy lọc thu lấy kết tủa, rửa tủa nhiều lần bằng ethyl acetate, sử dụng hệ thống khí N2 lỏng để làm khơ tủa.

Đánh giá kết quả: Hòa tan 1 lượng nhỏ kết tủa thu được bằng methanol, kiểm

tra bằng sắc ký lớp mỏng, so sánh với chất chuẩn Quercetin và Rutin.

Một phần của tài liệu (LUẬN văn THẠC sĩ) nghiên cứu khả năng ức chế hình thành β amyloid gây bệnh alzheimer bởi một số hoạt chất từ hoa hòe (sophora japonica l ) (Trang 36 - 37)

Tải bản đầy đủ (PDF)

(70 trang)