VẬT LIỆU NGHIÊN CỨU

Một phần của tài liệu (LUẬN văn THẠC sĩ) nghiên cứu tạo que thử để phát hiện nhanh một số độc tố ruột của tụ cầu khuẩn trong thực phẩm (Trang 58 - 60)

1.1 .TỤ CẦU KHUẨN

2.2. VẬT LIỆU NGHIÊN CỨU

2.2.1. Hóa chất và sinh phẩm

- Hóa chất: Các hóa chất tinh khiết đƣợc sử dụng trong nghiên cứu có nguồn gốc từ các hãng Sigma, Merk, vv ... bao gồm:

Dung dịch tách chiết DNA:TE (Tris-EDTA), Dung dịch CaCl2 0,1M, ampicillin, agarose, acrylamide, bis-acrylamide, TEMED (Sigma), ethidium bromide10% SDS (Invitrogen) và 10% APS (Sigma), blue Coomassie, dung dịch rửa gel SDS (40% methanol, 10% acetic acid), skim milk (Sigma), Tween 20 (Sigma), TMB (Sigma), Polyethylene glycol (PEG) 0,05%, Tris-HCl (pH = 8.2) (Sigma) huyết thanh bào thai bê (BSA), H2SO4 0,5N, NaCl 0,85%,...và các hóa chất, dung mơi khác đều đạt tiêu chuẩn thí nghiệm.

- Các sinh phẩm: Kit tách chiết DNA từ gel agarose GeneJET (Thermo

Scientific); các enzym giới hạn BamHI và HindIII (Thermo Scientific); T4 DNA ligase (New England Biolabs); Kháng thể đa dòng IgG thỏ kháng SEC ab15920 (Abcam); Cộng hợp kháng thể IgG dê kháng kháng thể thỏ gắn HRP ab 97051(Abcam); Kit His Mag SepharoTMNi (GE Healthcare); Tá dƣợc: FCA (Freund’s Complete Adjuvant) và FIA (Freund’s Incomplete Adjuvant) (Sigma); Thang chuẩn điện di protein (Thermo

Scientific); Thang chuẩn điện di DNA 1 Kb Plus (Biogen) ); cột sắc ký “HiTrapTM IgY Purification HP, 5ml” (GE Healthcare).

- Mồi nhân gen: Cặp mồi sử dụng để tạo các điểm cắt của hai enzym giới hạn

BamHI - F và HindIII - R (chữ đƣợc gạch chân) ở hai đầu đoạn gen mã hố cho

protein SEC1 có trình tự:

Mồi xuôi SEC-F (5'-TTTGGATCCGAGAGCCAACCAGACCCT-3')

và mồi ngƣợc SEC-R (5'- TATAAGCTTTTATCCATTCTTTGTTGTAAGGTGGAC- 3').

- Các dụng cụ, vật tư tiêu hao: Dãy giếng ELISA (Corning); Màng nitrocellulose AE99 (Whatman); Tấm lót plastic vinyl Mylar AD back 79373 (Whatman); Giấy thấm (Whatman); hạt Carbon Black Nano – Strings 0210 (Maiia Diagnostics); Giấy lọc (Whatman) ; ống Falcon (Corning); Màng lọc (Merk), ...

2.2.2. Máy, thiết bị

Các máy, thiết bị đều đang trong thời gian đƣợc kiểm định chuẩn, bao gồm: - Máy chu kỳ nhiệt 96 mẫu (eppendorf, Đức);

- Máy soi chụp ảnh gel (BioRad, Mỹ);

- Bộ điện di DNA Horrizontal mini (CBS Scientific, Mỹ);

- Máy đồng hóa bằng siêu âm Sonics Vibra cell (VCX130, MIDSCI); - Bộ điện di protein (Bio-rad, Mỹ);

- Máy cô đặc mẫu (Thermo Fisher, Mỹ);

- Bộ chuyển protein từ gel sang màng (Mini Trans-Blot Cell, Bio Rad); - Máy quang phổ NanoDrop 2000 (Thermo Fisher, Mỹ);

- Máy in phun Linomat V (CAMAG, Thụy Sĩ); - Máy cắt Cutter 4000 (BioDot, Anh);

- Nồi khử trùng (Harayama, Nhật Bản); - Cân phân tích CPA 324S (Satorius, Đức); - Tủ cấy vô trùng Class II Type A2 (ESCO); - Máy lắc đảo ngƣợc Mini laboroller (Labnet); - Máy lắc ổn nhiệt DTU-2C (Taitec, Nhật Bản); -Máy lắc ổn nhiệt (eppendorf , Mỹ);

- Máy li tâm lạnh Eppendorf Legend X1R (Thermo Fisher, Mỹ); - Máy ly tâm (Eppendorf, CHLB Đức);

- Tủ lạnh (0-4oC) (Toshiba, Nhật);

- Tủ lạnh Biomedical Freezer (Thermo Fisher, Mỹ);

- Máy vortex (Rotolab, OSI); Máy đo pH (HI 8424, HANNA Instruments); - Micropipette các loại Gilson (Pháp) và Biohit (Phần Lan).

Một phần của tài liệu (LUẬN văn THẠC sĩ) nghiên cứu tạo que thử để phát hiện nhanh một số độc tố ruột của tụ cầu khuẩn trong thực phẩm (Trang 58 - 60)

Tải bản đầy đủ (PDF)

(131 trang)