CHƯƠNG I TỔNG QUAN
1.2 PHYTASE
1.2.7 Điều khiển sinh tổng hợp phytase
a/ Ảnh hưởng của nồng độ phospho
Hàm lượng phospho vô cơ trong môi trường cũng tham gia vào điều khiển quá trình sinh tổng hợp phytase. Nguồn phospho được sử dụng phổ biến nhất cho quá trình sinh tổng hợp phytase là KH2PO4 và K2HPO4. Ở một số lồi Bacilus, mơi
trường nuôi cấy chứa KH2PO4 (0,05%) và K2HPO4 (0,04%), đối với Bacillus subtilis natri phytate (0,06%) được sử dụng cùng với KH2PO4 (0,1%) trong môi trường ni cấy, cịn ở S. castellii natri phytate 0,06% được sử dụng như một nguồn
phospho. Tuy nhiên ở một số loài nấm men và nấm mốc, sự có mặt của phytate ức chế quá trình sinh tổng hợp phytase. Sản lượng phyatase ở nấm mốc khi sinh trưởng trên môi trường bột ngơ phụ thuộc vào hàm lượng phospho có trong bột ngơ, hàm lượng phospho cao trong bột ngơ làm giảm q trình sinh tổng hợp phytase ở nấm mốc. Theo Zyta và Gogol (2002) sau khi loại bỏ photphate khỏi mơi trường mật đường thì hoạt động đặc hiệu của phytase cao gấp 7,3 lần ở chủng A. niger AbZ4. Ở
Lactobacillus amylovorus quá trình sinh tổng hợp phytase cao nhất ở môi trường bổ
sung 240 mg/l photphate, ở Candida krusei quá trình sinh tổng hợp phytase cao
nhất khi môi trường nuôi cấy bổ sung 5 mg/100ml photphor và khi tăng cứ 5 mg trên 100 ml lại ức chế quá trình sinh tổng hợp này [149].
b/ Ảnh hưởng của hàm lượng phytate
Ảnh hưởng của phytate lên quá trình sinh tổng hợp phytase được nghiên cứu bằng cách thêm 0,2-1% phytate vào môi trường lên men. Theo nghiên cứu của Mittal và cộng sự (2012) đối với chủng Klebsiella sp. DB-3 FJ711774.1 trên môi trường sử dụng cám lúa mỳ và bột vỏ mỳ là cơ chất hoạt độ phytase lần lượt là 1,9 U/ml và 2,48 U/ml, trong khi đó khi môi trường sử dung phytate tinh khiết là cơ chất thì hoạt độ phytase 1,5 U/ml, điều này cho thấy rằng, cám bột mỳ và bột vỏ mỳ là một trong các nguồn cơ chất tốt, rẻ tiền được sử dụng thay thế phytate đắt tiền để sản xuất phytase trong quy mô công nghiệp [81].
c/ Ảnh hưởng của các chất hoạt động bề mặt
Ở chủng A. niger NRRL 3135, khi glucose hay fructose được sử dụng là nguồn cacbon duy nhất thì các cục hệ sợi được hình thành và quá trình sinh tổng hợp phytase thấp. Ở mơi trường có chứa chất hoạt động bề mặt như sodium oleate 0,5% (v/v) quá trình sinh trưởng giảm và sản lượng phytase cao gấp 4-7 lần so với đối chứng. Trong suốt quá trình sinh trưởng của A. carbonarius trên môi trường lên
men pha rắn với cơ chất là bột canola, tốc độ sinh trưởng, sự sinh tổng hợp phytase và quá trình phân giải phytic axit cao hơn so với mẫu đối chứng khi bổ sung các chất hoạt động bề mặt như Na-oleate và Tween-80, tuy nhiên Triton X-100 khơng có ảnh hưởng gì tới quá trình sinh tổng hợp phytase [149].
Tỷ lệ cấy giống đóng một vai trị quan trọng trong quá trình sinh tổng hợp phytase ở lên mên chìm và lên men pha rắn. Tỷ lệ cấy giống quá nhỏ và độ nhớt của môi trường tương đối thấp, chúng có xu hướng hình thành các khối (cục) và quá trình sinh tổng hợp phytase thấp, đây cũng là một đặc điểm thường thấy ở các loài vi sinh vật. Ở các loài Klebsiella sp. khi lên men chìm, tỷ lệ cấy giống 1,5% cho sản lượng phytase cao nhất đối với mọi loại cơ chất [81]. Tỷ lệ cấy giống trên 1,5% làm giảm sản lượng phytase sinh ra là do các yếu tố dinh dưỡng tập trung tăng cường cho quá trình sản xuất sinh khối. Ngồi tỷ lệ cấy giống thì tuổi của giống có liên quan chặt chẽ với q trình sản xuất phytase và sinh khối. Do đó tỷ lệ cấy giống và tuổi giống cần thích hợp cho sự sinh trưởng cũng như quá trình sinh tổng hợp phytase.