Theo kết quả thu được ở lần chiết 1, dung dịch chiết chứa SDS 1% (một chất hoạt động bề mặt mang tính ion âm) và nước máy có khả năng thu hồi hoạt tính phytase cao nhất, khi chiết lần 2 hoạt tính phytase thu hồi chỉ còn từ 12-50% và trong lần chiết xuất thứ 3 hoạt tính phytase hết hồn tồn. Hoạt tính thu hồi được của nước máy và dịch chiết chứa SDS 1% gần tương đương nhau do đó xét về tính kinh tế có thể sử dụng nước máy trong việc thu hồi enzyme phytase từ dịch lên men xốp của chủng SP1901 (hình 26). Đối với từng vi sinh vật khác nhau lên men trên các loại mơi trường khác nhau thì việc sử dụng các dung dịch đệm khác nhau cũng ảnh hưởng nhiều đến quá trình thu hồi enzyme. Trong nghiên cứu của Rezaei và cộng sự (2011) trên đối tượng là cỏ switchgrass được bổ sung enzyme xylanase thương mại (nguồn gốc nấm sợi) hoặc được lên men xốp bởi chủng Axitothermus cellulolyticus cho thấy đối với mẫu cỏ switchgrass (một loại cỏ bản địa Bắc Mỹ)
được lên men xốp bởi A. cellulolyticus, nước được coi là một đệm chiết xuất ưa
thích để thu hồi xylanase, trong khi đó với mẫu cỏ switchgrass được bổ sung enzyme thương mại nguồn gốc nấm thì đệm natri acetate 50mM là một đệm chiết xuất lý tưởng. Ngồi ra trong q trình chiết xuất enzyme có thể sử dụng lọc tiếp tuyến phản hồi nhằm làm tăng hoạt tính enzyme thu hồi do lọc tiếp tuyến có khả năng loại bỏ các chất ức chế sẵn có trong cơ chất và các hợp chất sinh ra trong quá trình phân hủy cơ chất như các hợp chất phenolic….Trong nghiên cứu của Maria Inês Rezende và cộng sự (2012), khi chiết xuất xylanse bằng 3 loại dung dịch chiết là nước, Tween 80 0,1% trong muối sinh lý và đệm natri acetate 50 mM pH 5 khơng có sự khác biệt nhiều trong hoạt tính enzyme thu được [73].
3.4.2 Tủa enzyme bằng các dung môi khác nhau
a/ Tủa bằng amoniumsulphate
Dịch chiết enzyme từ quá trình lên men xốp trên cơ chất thích hợp ở 40oC sau 3 ngày, được tủa bằng muối amoniumsulphate ở các phân đoạn khác nhau. Kết quả cho thấy khi tủa enzyme bằng các phân đoạn khác nhau với muối (NH4)2SO4, hoạt tính phytase mất hồn tồn ở tất cả các phân đoạn. Do đó khơng thể sử dụng muối (NH4)2SO4 khi tủa phytase trong trường hợp này, tuy nhiên theo nhiều nghiên cứu
của các tác giả khác như Kenruvo và cộng sự (1998) đã tủa phytase bằng (NH4)2SO4 65% và thu hồi được 56% hoạt tính phytase, theo Wang xueying và cộng sự (2003) đều thu hồi được phytase ở các phân đoạn từ 20-80% (NH4)2SO4 [54, 153].
b/ Tủa bằng cồn và acetone
Dịch chiết enzyme từ quá trình lên men xốp trên ở 40oC sau 3 ngày, được tủa bằng cồn và acetone ở các nồng độ khác nhau và kết quả thu được trong hình 27: