CHƯƠNG II NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP
2.2 CÁC PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.2.7.2 Các đặc tính của enzyme
a/ Khả năng bền nhiệt của enzyme
Dịch enzyme được ủ ở các nhiệt độ 50, 60, 70, 80oC trong bể ổn nhiệt trong thời gian 10, 20, 30 phút. Sau đó xác định hoạt tính phytase.
b/ pH thích hợp cho hoạt động của enzyme
Cơ chất Na- phytate 3mM được pha trong các đệm ở các pH lần lượt từ 3,2; 4; 5; 5,6; 7,2; 8 và 9. Sau đó xác định hoạt tính phytase.
c/ Nhiệt độ thích hợp cho hoạt động của enzyme
Hỗn hợp phản ứng enzyme + cơ chất lần lượt được ủ ở các nhiệt độ 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55 và 60oC, sau đó xác định hoạt tính enzyme phytase.
d/ Ảnh hưởng của các ion kim loại đến hoạt độ của enzyme
Cơ chất Na- phytate 3mM được pha trong các dung dịch chứa các ion kim loại: Ca2+, Cu2+, Zn2+,Mg2+, Mn2+, Na+, Ba2+, EDTA, SDS lần lượt ở các nồng độ 1mM, 2mM và 5mM. Sau đó xác định hoạt tính phytase.
e/ Sự ảnh hưởng của nhiệt độ đến hoạt tính của enzyme trên cơ chất sấy khô Cơ chất sau lên men được sấy ở 50o
C sau 24-48h được đem ra xử lý ở 60, 70, 80, 90oC ở 10, 20 và 30 phút sau đó chiết theo tỷ lệ 1:2 và xác định hoạt tính phytase.
94oC – 1 phút
50oC – 1 phút 30 chu kỳ 72oC - 2 phút
f/ Ảnh hưởng của enyme tiêu hóa đến hoạt độ của enzyme
Các enzyme tiêu hóa trypsin và pepsin được pha trong các đệm pH 8 (đối với trypsin) và pH 3 (đối với pepsin) ở các nồng độ nhất định được dùng để chiết cơ chất sau lên men theo tỷ lệ 1:2 và xác định hoạt tính phytase.